Per iniziare, posiziona il mouse anestetizzato su un assorbente o un pannolino. Pizzica il dito del mouse per confermare i riflessi cessati. Utilizzando del nastro chirurgico, fissare tutti gli arti con la cavità toracica rivolta verso l'alto.
Usando una pinzetta e le forbici, apri con cura la cavità toracica per esporre il cuore. Inserire un ago smussato calibro 23 nel ventricolo sinistro del cuore per la perfusione. Quindi mescolare cinque millilitri di soluzione di composto di gomma siliconica, con cinque millilitri di diluente in un tubo da 50 millilitri.
Utilizzando un ago smussato calibro 23 collegato a un tubo, iniettare 10 millilitri del composto miscelato nel cuore. Il giorno successivo, utilizzando una pinzetta fine, rimuovere delicatamente il cranio del topo e posizionare il cervello estratto in paraformaldeide al 4% a temperatura ambiente. Dopo un'incubazione di 24 ore, lavare il cervello tre volte in PBS e conservarlo nel 30% di saccarosio a quattro gradi Celsius.
I pittogrammi del cervello illustravano l'allargamento dell'arteria basale e l'aumento della tortuosità attorno al cerchio di Willis dopo l'iniezione di elastasi rispetto al gruppo di controllo PBS. Rispetto al gruppo di controllo trattato con PBS, è stata osservata una significativa dilatazione dei vasi sanguigni a seguito di una singola iniezione di elastasi nella cisterna magna di topi di tre mesi, che si è mantenuta per tre mesi.
