Dopo aver anestetizzato il topo, posizionarlo in posizione supina su una superficie chirurgica riscaldata. Applicare un unguento per gli occhi ed eseguire pizzicamenti sui cuscinetti delle dita dei piedi per assicurarsi che l'animale sia adeguatamente anestetizzato. Sollevare la pelle dell'addome.
Con un paio di forbici, praticare un'incisione longitudinale sulla linea mediana dall'ombelico al processo xifoideo e caudalmente verso la base dell'addome. Fai un'incisione simile nel peritoneo senza perforare o danneggiare l'intestino, il diaframma o il fegato. Quindi, praticare un'incisione trasversale a tutta lunghezza su entrambi i lati dell'ombelico per espandere il campo chirurgico.
Quindi utilizzare una garza pulita imbevuta di PBS caldo per spostare l'intestino crasso e tenue verso destra ed esporre l'IVC sottostante. Con un batuffolo di cotone, manipolare delicatamente i segmenti intestinali all'interno del campo chirurgico per individuare la vena porta alla radice del mesentere. Quindi utilizzare un microscopio da dissezione per passare con cura una sutura di prolene 7-0 dietro la vena porta vicino all'ilo epatico.
Quindi, inserire un ago da 28 pollici di una siringa da insulina eparinizzata da un centimetro cubo nell'IVC. Raccogliere da 0,2 a 0,3 millilitri di campione di sangue. Lasciare l'ago all'interno dell'IVC per evitare il sanguinamento che si verificherebbe con la rimozione.
Ora, lega delicatamente la legatura del prolene 7-0 attorno alla vena porta. Inserire l'ago da 28 pollici di un'altra siringa da insulina eparinizzata nella vena porta. Aspirare per raccogliere lentamente fino a 0,5 millilitri di sangue dalla vena porta.
Una volta completata la raccolta del sangue, rimuovere gli aghi dall'IVC e dalla vena porta. Trasferire i campioni di sangue dalle siringhe a provette eparinizzate da 1,5 millilitri. Posizionare i tubi sul ghiaccio per la lavorazione futura.
