Procedere alla raccolta del cervello dalla testa del feto precedentemente isolata al microscopio da dissezione. Usando una pinza curva, tieni il muso e usa una pinza numero cinque per staccare con cura la pelle dalla calotta cranica, tenendola attaccata al muso per facilitarne la presa. Tenendo premuto a circa 75 gradi rispetto al cervello, far scorrere la pinza lungo la linea mediana fino alla membrana chiara delle parti del cranio in via di sviluppo su ciascun lato.
Sposta la pinza parallelamente al cranio, inseriscila sotto la calotta cranica e pizzica e stacca da un lato. Dopo aver rimosso un lato, afferrare il lato rimanente con la pinza e sbucciare dall'altro lato. Usando un micro cucchiaio, estrai delicatamente il cervello dal cranio.
Trasferisci il cervello in un piatto fresco da 60 millimetri contenente PBS freddo. Usando la pinza curva, tieni il cervello all'incrocio tra il rombencefalo e il proencefalo con la mano non dominante. Con la mano dominante, tieni il bisturi con la lama parallela alla superficie del cervello.
Quindi premere con decisione nella regione corticale mediana. Tenendo ancora il rombencefalo, fai una seconda incisione davanti al romboencefalo per separarlo dal proencefalo. Nella sezione centrale, cerca un piccolo spazio lineare sulla superficie ventrale, che è il terzo ventricolo.
Usando la pinza numero cinque, pizzicare con cura il rivestimento su entrambi i lati della superficie ventricolare, quindi trasferirlo in una provetta da microcentrifuga fresca e pulita da 1,5 millilitri. Posizionare rapidamente la provetta in un contenitore criosicuro di azoto liquido.
