Iniziare la procedura chirurgica sul topo adeguatamente anestetizzato iniettando buprenorfina cloridrato per via sottocutanea per ridurre il dolore. Applicare un unguento oftalmico sugli occhi per prevenire la secchezza. Posiziona il mouse in una posizione dorsale e fissa gli arti in una posizione di allungamento con dei nastri.
Disinfettare la pelle della schiena utilizzando tamponi alternati di iodio e alcool, almeno tre volte ciascuno. Successivamente, usando le forbici chirurgiche, incidi un'incisione da 0,5 a un centimetro sul lato posteriore sinistro dell'animale. Usa con attenzione una pinza per separare i tessuti muscolari e adiposi fino a quando la parete toracica e il movimento polmonare sono visibili.
Utilizzando una pipetta, trasferire uno steroide multicellulare selezionato, o MCS, da una micropiastra in una capsula di Petri di vetro contenente PBS ghiacciato. Collegare un ago calibro 20 a una siringa di vetro da 100 microlitri e pre-raffreddarli con ghiaccio. Quindi aspirare 20 microlitri di una miscela pre-raffreddata di PBS e Matrigel.
Utilizzare la siringa per aspirare rapidamente un MCS dalla capsula di Petri in un volume minimo di miscela PBS-Matrigel, mantenendo lo sferoide nella parte metallica dell'ago. Inserire delicatamente l'ago verticalmente tra due costole a una profondità di circa tre millimetri e iniettare lentamente tutti i 20 microlitri della miscela contenente l'MCS aspirato. Quindi rimuovere con cautela l'ago.
Applicare un triplo unguento antibiotico sulla ferita. Sigillare l'incisione con clip chirurgiche da rimuovere dopo due settimane. Posiziona l'animale su un termoforo a infrarossi e coprilo con salviette da laboratorio per mantenere la temperatura corporea.
Monitorare l'animale per almeno 30-60 minuti fino a quando non si sveglia e si muove correttamente. Utilizzando un sistema di imaging per piccoli animali su un canale di 700 nanometri, misurare il segnale fluorescente IRFP dallo xenotrapianto tumorale del topo anestetizzato ogni tre o quattro giorni. Misurare la fluorescenza in quattro posizioni, sinistra, destra, dorsale e ventrale.
L'intensità netta della fluorescenza sia dal lato sinistro che da quello ventrale ha mostrato una tendenza simile alla progressione del tumore, con la fluorescenza dal lato ventrale che cresceva leggermente più lentamente della fluorescenza dal lato sinistro.
