Per iniziare, trasferire il topo anestetizzato preparato nell'area chirurgica e isolare il sito chirurgico con un telo adesivo. In anestesia profonda, utilizzare una lama di bisturi per praticare un'incisione ventrale della linea mediana nella pelle. Quindi, usa le forbici per separare la pelle dallo strato muscolare.
Con l'aiuto di una lama di bisturi, praticare un'incisione più piccola nello strato muscolare. Una volta visualizzate le viscere, utilizzare una pinza smussata per localizzare il cieco ed esteriorizzarlo. Quindi legare il cieco con una sutura riassorbibile in poliglactina sterile 5/0.
Utilizzando un ago calibro 27, perforare il secum fino in fondo consentendo la fuoriuscita del contenuto fecale. Spremere delicatamente il secum per esternalizzare il contenuto fecale con cautela. Successivamente, riposizionare il secum nella cavità addominale e chiudere lo strato muscolare con una sutura sterile riassorbibile 5/0.
Quindi utilizzare una sutura in nylon 5/0 non assorbibile per chiudere la pelle. Successivamente, fornire soluzione fisiologica sterile tramite iniezione sottocutanea nella parte posteriore dell'animale. Dopo quattro giorni di recupero dalla CLP, o intervento chirurgico fittizio, utilizzare del nastro di schiuma per fissare la coda del topo anestetizzata a una corta catena metallica.
Quindi attacca la catena di metallo a un gancio collegato a una traversa lungo il centro della gabbia. Attacca una seconda piccola barra che può muoversi lungo la traversa per consentire all'animale una maggiore capacità di movimento. Quindi regolare l'altezza degli arti sospesi per evitare che le zampe entrino in contatto con i pellet di chow.
Assicurarsi che gli animali possano muoversi attraverso gli arti anteriori utilizzando la griglia metallica sul pavimento della gabbia. Gli animali CLP hanno dimostrato un aumento delle popolazioni di cellule immunitarie nel loro lavaggio peritoneale rispetto agli animali fittizi. CLP e HLS portano a circa l'11,8% della perdita di massa corporea.
Una marcata diminuzione della massa del soleo è stata osservata quando l'HLS è stato sovrapposto al CLP, indicando che le fibre più piccole costituiscono la maggior parte della sezione muscolare. Rispetto agli animali di controllo, il CLP-HLS ha causato una compromissione significativa sia della forza assoluta che di quella di picco del soleo.