Per iniziare, metti il tessuto polmonare del topo in paraformaldeide al 4%, che è 10 volte il volume del tessuto. Dopo tre ore di fissazione, separare i cinque lobi polmonari e incorporare separatamente i lobi cranico, medio e accessorio del polmone destro, orientandoli nella direzione della connessione verticale lobo-bronco. Quindi tagliare il lobo caudale del polmone destro in due pezzi a quattro millimetri da sinistra a destra nella direzione perpendicolare alla connessione polmone-lobo-bronco, e incorporare le fette in un blocco di cera, con la superficie tagliata rivolta verso l'alto.
Per eseguire tre tagli nel lobo polmonare sinistro, tagliare trasversalmente sopra la giunzione bronchiale principale, due millimetri sotto la parte superiore. Eseguire il secondo taglio trasversalmente sopra la giunzione bronchiale principale, cinque millimetri sotto la parte superiore. Fai il terzo taglio all'estremità del lobo, otto millimetri sotto la parte superiore.
Dopo aver scartato il pezzo di tessuto più in alto, racchiudere i tre pezzi rimanenti in un blocco di cera, con la superficie tagliata rivolta verso l'alto. Dopo la rifissazione, sciacquare il blocco di tessuto sotto l'acqua corrente per 15 minuti. Immergere in sequenza il tessuto nelle concentrazioni crescenti di etanolo, seguite da xilene e cera morbida.
Riempire uno stampo con una quantità adeguata di paraffina liquida e, utilizzando una pinza, posizionare il tessuto nel telaio di inclusione al centro. Posizionare lo stampo e il fazzoletto nell'area di congelamento della macchina per l'inclusione. Quando la paraffina inizia a sbiancare leggermente, posizionare rapidamente il telaio di inclusione scoperto sopra lo stampo ed eseguire la seconda iniezione di cera, sigillando i fori nella parte inferiore del telaio di inclusione.
Quindi trasferire l'intero stampo sul tavolo di congelamento. Dopo aver fissato il blocco di cera sull'affettatrice, tagliare il blocco per rivelare una superficie di taglio liscia e piatta. Ruotare la manovella della ruota del microtomo per tagliare fette con uno spessore di quattro micrometri.
Posizionare delicatamente le sezioni rimosse sulla superficie dell'acqua in sequenza. Una volta che le sezioni sono completamente estese, separare i pezzi rotti in corrispondenza delle giunzioni tra ciascuna sezione. Inclinare uno scivolo di vetro sotto la sezione e, al contatto, sollevare lentamente e uniformemente lo scivolo dalla superficie dell'acqua con un movimento verticale.
