Per iniziare, posiziona un sacchetto sigillato contenente perline fissate di lectina essiccata congelata su un banco a temperatura ambiente. Posizionare un panno antistatico sulla scrivania e quindi posizionare l'eliminatore di elettricità statica portatile rivolto verso l'area di lavoro. Utilizzando una pinzetta antistatica, inserire le perline in una punta vuota in modo che due perline distanziatrici siano posizionate tra le perline fissate alla lectina.
Usa le tronchesi per stringere delicatamente la parte superiore della punta e chiudere l'apertura. Raddrizzare manualmente la punta se è piegata. Quindi conservarlo in un sacchetto sigillato con un essiccante a quattro gradi Celsius fino al momento del bisogno.
Aggiungere circa 10 microlitri della soluzione proteica dell'analita in una provetta contenente 10 microgrammi di reagente di biotinilazione essiccato. Agitare il composto per amalgamare bene. Quindi centrifugare a 1000 G per cinque secondi a temperatura ambiente.
Incubare le provette per un'ora a temperatura ambiente al riparo dalla luce. Ora aggiungi 90 microlitri di tampone di sondaggio ai campioni per diluirlo dieci volte prima di incubare. Aprire lo sportello anteriore del dispositivo di misurazione automatica della reazione.
Trasferire i serbatoi del liquido, i puntali preparati e gli analiti nelle posizioni designate nel dispositivo. Accendere l'interruttore di alimentazione dell'unità principale di un dispositivo di misurazione automatica della reazione. Toccare il pulsante Avvia diagnosi visualizzato sullo schermo.
Premere Assay nella schermata iniziale per selezionare il protocollo. Ora seleziona l'opzione BAssaySTD del metodo di analisi e premi Avanti. Immettere i nomi dei campioni e premere Avanti.
Quindi inserisci i nomi dei suggerimenti e premi nuovamente Avanti. Confermare le note a destra, quindi premere Avvio per iniziare la misurazione. Confermare lo schermo, passare alla modalità di esecuzione e attendere fino a quando non viene evidenziata la freccia Finalizza.
Al termine della misurazione, lo schermo passerà alla modalità risultato. Inserire una chiavetta USB nella porta sul lato dell'unità principale. Premere Esporta nella modalità risultato per salvare i dati come file CSV per un'ulteriore analisi dei dati e grafici individuali in Excel.
È stata osservata una netta differenza nel modello di legame delle lectine rispetto ai 12 zuccheri poliacrilammidici. I prodotti proteici purificati che sono stati sottoposti alla misurazione della punta hanno mostrato un aumento della reattività di alcune lectine ai saccaridi.
