Coltura in vitro di Plasmodium falciparum e sincronizzazione del sorbitolo per la trasfezione per svelare i meccanismi compensatori utilizzando CDPK1

Per iniziare, coltivare il ceppo NF54 di Plasmodium falciparum in ematocrito al 2% di globuli rossi umani O+ in un terreno RPMI completo integrato. Per la sincronizzazione del sorbitolo, pellettare i parassiti asincroni in un tubo conico da 50 millilitri a 2.300 G per tre minuti a temperatura ambiente. Dopo aver scartato il surnatante, incubare i globuli rossi parassitati con nove volumi di sorbitolo al 5% per 10 minuti a 37 gradi Celsius.

Dopo l'incubazione, pellettare i globuli rossi come dimostrato in precedenza e scartare il sorbitolo. Lavare i parassiti trattati con sorbitolo con RPMI incompleto e terreni RPMI senza AlbuMAX e bicarbonato di sodio. Successivamente incubarli in RPMI completo per ottenere i parassiti dello stadio ad anello.