Verifica PCR del parassita transgenico con modifica desiderata del locus cdpk1 per chiarire i meccanismi di resistenza alla chinasi di Plasmodium falciparum

Per iniziare, trattare i parassiti trasformati del Plasmodium falciparum con i farmaci desiderati. Dopo due o tre giorni di crescita dei parassiti, centrifugare 500 microlitri di coltura in una provetta da microcentrifuga a 2.400 G per cinque minuti. Per lisare i globuli rossi, incubare un millilitro di parassiti risospesi con 10 microlitri di saponina al 10% a quattro gradi Celsius per cinque minuti.

Dopo aver centrifugato le cellule, scartare il surnatante per ottenere il pellet del parassita. Lavare il pellet antiparassitario con un millilitro di PBS e risospendere il pellet in 50 microlitri di acqua priva di DNAsi e RNAsi. Riscaldare il pellet risospeso a 95 gradi Celsius per cinque minuti e centrifugare a 16, 200 G per 10 minuti a quattro gradi Celsius.

Trasferire il surnatante contenente il DNA del parassita in una nuova provetta.