Per iniziare, clamp il tubo da 3 x 8 pollici proprio prima della porta aortica per fermare il flusso di perfusato. Posizionare il cuore di maiale preparato con la parete posteriore rivolta verso l'operatore e inclinare la camera dell'organo a circa 20 gradi. Quindi, posizionare la cannula aortica a un angolo di 90 gradi rispetto alla porta aortica e sbloccare lentamente la linea aortica.
Dearizzare la cannula aortica lasciando che il perfusato fluisca gradualmente al suo interno. Ora, diminuisci lentamente l'angolo della cannula aortica fino a quando non si allinea con la porta aortica, quindi collegala completamente alla linea aortica. Una volta completamente collegato, massaggiare delicatamente il cuore a intermittenza per evitare la distensione dovuta al riempimento del ventricolo sinistro.
Durante questo periodo, sfiatare il ventricolo sinistro attraverso l'atrio sinistro aperto. Avviare l'acquisizione dei dati e avviare il gocciolamento di adenosina a 333 microlitri al minuto. Quindi, collegare i cavi di stimolazione alla scatola di stimolazione e impostarla a 60 battiti al minuto per la stimolazione di riserva.
Se è presente fibrillazione, defibrillare il cuore utilizzando 30 piastre JUULs. Una volta che è presente un ritmo organizzato, interrompere lo sfiato manuale e posizionare gli elettrocateteri ECG direttamente sul cuore utilizzando aghi a uncino. Collegare la cannula ad angolo retto alla porta atriale della camera dell'organo.
Una volta collegato, bloccare la cannula e rilasciare il morsetto Hoffman nella linea tra l'ossigenatore e il serbatoio di carico per consentire al fluido di entrare nel serbatoio di caricamento. Quindi, riempire il serbatoio di carico fino a quando la pressione raggiunge i 15-20 millimetri di mercurio. Aumentare la potenza della pompa per mantenere sia la pressione aortica che quella atriale.
Quindi, inserire metà della punta metallica ad angolo retto nell'atrio sinistro con la punta rivolta verso l'appendice per promuovere la competenza della valvola mitrale. Inserire il sensore di pressione all'interno del ventricolo sinistro per registrare la pressione ventricolare sinistra. Successivamente, rilasciare il morsetto sulla cannula per consentire il riempimento dell'atrio sinistro.
Una volta de-aerato, utilizzare le suture precedentemente posizionate e le trappole del laccio emostatico per chiudere completamente l'apertura dell'atrio sinistro. Regolare la cannula e le trappole secondo necessità per ridurre al minimo le perdite di liquido. Dopo aver fissato la cannula nell'atrio sinistro, bloccare la linea dall'ossigenatore alla sacca del windkessel per arrestare completamente la perfusione retrograda all'aorta.
Infine, spostare il gocciolamento di adenosina dalla linea che porta alla sacca della nave a vento alla linea tra il serbatoio di carico e la porta atriale. La resistenza vascolare, il tasso di assorbimento di ossigeno, l'accumulo di lattato, il consumo di glucosio e l'accumulo di potassio non hanno mostrato differenze statistiche durante il periodo di perfusione. Allo stesso modo, non è stata osservata alcuna differenza nel peso guadagnato dagli innesti.
Tuttavia, la frequenza cardiaca degli innesti falliti è diminuita costantemente dopo due ore di carico con l'area sotto la curva che non ha mostrato differenze statisticamente significative fino a tre ore di perfusione. Inoltre, le metriche dipendenti dal carico suggerivano una perdita della funzione cardiaca già a 30 minuti dall'inizio del tempo di carico, con la misura della contrattilità che era la prima metrica a indicare una perdita di funzione. Come la frequenza cardiaca, la pressione del polso ventricolare sinistro diminuiva costantemente dopo due ore di perfusione sotto carico con differenze statisticamente significative tra gli innesti, la pressione del polso e il rilassamento osservati dopo 1,5 ore di perfusione.
