Per iniziare, posizionare i solventi diluiti al 60% per l'estrazione assistita da microonde sulla piattaforma di lavoro. Pesare 0,67 grammi di caffè silver skin e mescolare con 20 millilitri di solvente di estrazione in un rapporto uno è a 30 in un contenitore di reazione. Aggiungere un'ancoretta magnetica al recipiente per garantire una distribuzione uniforme del calore e del solvente all'interno del campione.
Chiudere saldamente il recipiente con uno strumento speciale e posizionarlo nella camera di estrazione assistita da microonde. Per impostare il metodo, fare clic sull'icona della casella degli strumenti nella barra superiore del monitor e selezionare il rotore SK eT nella sezione accessori. Quindi fare clic sull'agitazione e digitare 20% per impostare la velocità di agitazione.
Fare clic sul settore della serratura della porta e impostarlo per attivarlo a temperature superiori a 80 gradi Celsius. Quindi fare clic sull'icona della tabella nella barra in alto e impostare il gradiente di temperatura T1 su una durata di estrazione di 10 minuti. Potenza del microonde a 1800 watt e temperatura a 120 gradi Celsius.
Per attivare l'agitazione, fare clic sul pulsante di agitazione e attendere che appaia la luce verde. Impostare la velocità della ventola del ventilatore al livello tre. Per mantenere il tempo di estrazione, selezionare la temperatura di estrazione desiderata T2 impostando la durata dell'estrazione a 15 minuti, la potenza delle microonde a 1800 watt e la temperatura a 120 gradi Celsius.
Ora, fai clic sul pulsante di raffreddamento nell'angolo in basso a sinistra dello schermo e seleziona il tempo di raffreddamento di 10 minuti. Fai clic sull'icona Salva nell'angolo in alto a destra dello schermo. Inizia il processo di estrazione scegliendo il numero di recipienti utilizzati.
Dopo l'estrazione, centrifugare l'estrazione a 9072 g per 15 minuti a quattro gradi Celsius. Raccogliere il surnatante con una pipetta di vetro da 10 millilitri e conservarlo a meno 20 gradi Celsius. Diluire dieci volte gli estratti di pelle d'argento del caffè con acqua distillata in una piastra a 96 pozzetti.
Mescolare 10 microlitri del campione diluito con 20 microlitri di reagente folin-ciocalteu non diluito e lasciarli reagire per tre minuti. Quindi, aggiungere 100 microlitri di soluzione di carbonato di sodio al 7,5% alla miscela in ciascun pozzetto di una piastra a 96 pozzetti. Preparare diverse concentrazioni per l'intervallo di concentrazione standard dell'acido gallico diluendo con acqua distillata.
Mescolarli con 20 microlitri di reagente folin-ciocalteu e lasciarli reagire per tre minuti. Quindi, aggiungere 100 microlitri di soluzione di carbonato di sodio al 7,5% alla miscela in ciascun pozzetto di una piastra a 96 pozzetti. Incubare la reazione per 30 minuti al buio a temperatura ambiente.
Su un lettore di micropiastre, misurare l'assorbanza della miscela di reazione a 765 nanometri. Tracciare la curva di calibrazione standard utilizzando le concentrazioni dello standard e l'assorbanza a 765 nanometri. Esprimere i risultati in milligrammi di acido gallico equivalente per grammo di campione.
L'estrazione acquosa di 1, 2 esandiolo ha prodotto il contenuto fenolico totale più alto e l'estrazione con acqua ha prodotto il più basso. L'estrazione acquosa di 1, 2 esandiolo ha prodotto il più alto contenuto totale di flavonoidi e l'estrazione acquosa di isopentildiolo ha prodotto il più basso. L'estrazione acquosa con glicole esilenico ha mostrato il valore più alto del saggio DPPH e l'estrazione con etanolo acquoso ha mostrato il più basso.
L'estrazione acquosa con glicole pentilenico ha portato al valore del saggio ABTS più alto e l'estrazione con acqua ha ottenuto il valore più basso. L'estrazione acquosa di glicole esilenico ha mostrato il valore FRAP più alto e l'estrazione con acqua ha mostrato il più basso.
