Dopo l'eutanasia del topo utilizzando la lussazione cervicale per l'enucleazione e l'elaborazione del bulbo oculare, segnare il bordo della cornea sul lato dorsale del bulbo oculare utilizzando un pennarello blu per garantire l'orientamento durante la dissezione. Usando le forbici, rimuovere i tessuti muscolari residui attaccati al bulbo oculare. Quindi trasferire il bulbo oculare enucleato in una provetta da microcentrifuga a fondo tondo da due millilitri riempita di PBS.
Ora, posiziona il bulbo oculare in un altro tubo da due millilitri contenente il 4% di paraformaldeide appena preparato per il fissaggio a quattro gradi Celsius per 10 minuti. Sotto un microscopio da dissezione, usa una pinza sottile per praticare una piccola incisione sulla cornea. Riposizionare il bulbo oculare nel fissativo e incubare a quattro gradi Celsius per tre ore per preservare la morfologia dei tessuti.
Per rimuovere la cornea e il cristallino, utilizzando le forbici chirurgiche sottili praticare una piccola incisione di circa un millimetro attorno al limbus corneale, il confine tra la cornea e la sclera. Tagliare con cura la circonferenza della cornea, asportandola completamente per esporre le strutture sottostanti. Successivamente, usando una pinza sottile, afferra delicatamente e solleva con cura la lente dai tessuti circostanti per evitare di danneggiare la retina.
Per l'incisione sclerale, praticare una fessura precisa nella sclera con forbici oftalmiche fini per facilitare la successiva dissezione. Successivamente, per la separazione della retina, inserire una pinza dentata nell'incisione tra la sclera e la retina. Afferrare delicatamente il bordo della sclera, evitando una forza eccessiva per evitare di strappare il tessuto.
Ingrandire gradualmente l'incisione spostando la pinza lungo il confine tra la sclera e la retina. Usa la parte dentale della pinza per separare con cura la sclera dalla retina senza danneggiarla. Ora, usando le forbici affilate, dividi la retina in quattro lembi di dimensioni più o meno uguali.
Aprire delicatamente la retina sezionata con uno spazzolino a setole morbide e rimuovere meticolosamente i detriti dalla sua superficie.
