Gli autori desiderano ringraziare premi salariali, borse di studio, attrezzature e fondi operativi da Fonds de la recherche en santé Québec (FRSQ), Istituti canadesi di ricerca sulla salute (CIHR), le scienze naturali e ingegneria Research Council del Canada (NSERC), e la Concordia University Research Chairs Program (CRUC), così come l&#39;attenti commenti su questo manoscritto del Dr. Jane Stewart.

1. Di ricovero per animali <ol><li> Cage: Per registrare il funzionamento ruote attività di un roditore individuale, ogni gabbia dovrebbe ospitare un roditore singolo e rodaggio ruota. Poiché le ruote in esecuzione può essere considerata una forma di arricchimento, tutti i roditori di ogni studio dovrebbe avere accesso simile a una ruota in esecuzione. </li><li> Modifiche letterecci: movimentazione degli animali così come cambiamenti nelle gabbie o biancheria da letto possono avere non fotica effetti sui ritmi circadiani 21-23, così, gabbie con rete-pavimenti sono l&#39;ideale perché ridurre al minimo il contatto con l&#39;animale. Nonostante la disponibilità di tale vassoio di sistema, modifiche biancheria da letto deve essere evitato durante le fasi critiche di un esperimento. Le alternative includono uso di letti di più lunga durata, che consentirebbe ulteriori modifiche gabbia infrequenti, o gabbie cambiamento su una pseudo-casuale pianificazione. </li><li> Scatole di isolamento: Le gabbie devono essere conservati in scatole di isolamento che sono suono attenuato, luce-controlled, e ben ventilato. A seconda della dimensione e della configurazione delle caselle di isolamento, il numero di gabbie ogni scatola sarà tipicamente compreso tra 1-8. In cui è alloggiata gabbie più in una scatola di isolamento singola, si deve essere consapevoli del fatto che vari odori e suoni provenienti da altri animali può avere effetti confondenti sul comportamento circadiano dei singoli animali. Per evitare questi problemi, si dovrebbe tentare di ospitare una gabbia per scatola isolamento. </li><li> Ventilazione: flusso d&#39;aria adeguato è indispensabile per fare le caselle di un ambiente casa confortevole per i roditori. Il ventilatore in ogni scatola dovrebbe essere incappucciato, in modo da evitare che la luce fuori area di raggiungere l&#39;interno. Inoltre, i fan in genere rimuovere l&#39;aria dalla scatola e soffiare nella stanza. Piccole aperture a tenuta di luce permettono all&#39;aria di entrare nelle caselle di isolamento da più punti, e contribuire a evitare brezze scomode. Al fine di verificare che vi sia adeguata ventilazione, la temperatura all&#39;interno della scatola di isolamento (quandochiuso per diverse ore, con le luci accese) deve essere praticamente identica alla temperatura della stanza in cui è ospitato. </li><li> Illuminazione: l&#39;intensità della luce ambientale dovrebbe essere la stessa in tutte le gabbie. Organizzare una sola luce in una posizione simile di sopra di ogni gabbia, e utilizzare sempre la stessa marca / tipo di lampadina. Utilizzare l&#39;illuminazione di intensità moderata (100-300 lux) a livello gabbia. Evitare livelli di illuminazione troppo elevati, che sono più in grado di produrre cambiamenti diretti sul comportamento attribuibili alla luce piuttosto che il sistema circadiano, di per sé (ad esempio di mascheramento). </li><li> Oscurità / Dim accende di rosso: Se è necessario gestire o trattare gli animali al buio (ad esempio al buio costante o notturno), occhiali per la visione notturna deve essere usato. In alternativa, poiché il sistema circadiano è relativamente insensibile al rosso-lunghezze d&#39;onda, scarsa illuminazione rosso può essere utilizzato. La luce rossa si utilizza specifico dovrebbero essere testati per assicurare che non alter rodaggio ruota attività (ad esempio, mascheramento) o regolare l&#39;orologio circadiano (ad esempio, produrre un cambiamento di fase). </li></ol> 2. Raccolta dati (Vedi Figura 1 - Configurazione hardware Vitalview) <ol><li> Esecuzione di ruote: il diametro ed ergonomia della ruota running modificare la quantità di utilizzo 24. Quindi, utilizzare le ruote più piccole e più leggere per i topi, e più grandi ruote più pesanti per i ratti. Durante il lavaggio e ri-installare le ruote, in modo che le ruote siano in grado di girare senza ostacoli, non &quot;oscillare&quot;, e che la registrazione micro-switch sono attivati ​​da ogni giro della ruota. </li><li> Micro-switch: ogni rivoluzione della ruota portante dovrebbe attivare un magnetico o meccanico micro-switch. Informazioni dal micro-interruttore è trasmesso attraverso un singolo canale e registrate da un computer che può bin i dati nel tempo (ad esempio ogni 2, 5, 6, o 10 min). </li><li> Hardware: Il nostro running ruote registrazioni sono realizzate con Vitalview, una piattaforma hardware e software sviluppato da Mini Mitter ( <a href="http://www.minimitter.com/vitalview_software.cfm" target="_blank">http://www.minimitter.com/vitalview_software.cfm</a> ). Tuttavia, ci sono altre piattaforme di registrazione come ClockLab, sviluppato da Actimetrics ( <a href="http://www.actimetrics.com/ClockLab/" target="_blank">http://www.actimetrics.com/ClockLab/</a> ). Entrambe le piattaforme riunire dati da molte fonti a canale singolo (ad esempio, un unico microinterruttore azionato da una ruota sola esecuzione) in un file singolo computer. Dati da singoli canali possono quindi essere tracciata e analizzata separatamente in un secondo momento. </li></ol> 3. Le registrazioni dei dati <ol><li> File: Le piattaforme software di cui sopra può essere utilizzato per separare singoli canali in modo che i singoli file vengono creati per ogni rodaggio ruota record. Tali dati vengono visualizzati al meglio e rappresentati graficamente con appositamente designeprogrammi d come ActiView (Minimitter, Bend, OR), Circadia o Clocklab (Actimetrics, Wilmette, IL), che possono produrre periodograms e actograms. Tuttavia, a canale singolo file possono anche essere aperti e analizzati utilizzando programmi di calcolo generali, come Excel (Microsoft, Redmond, WA). </li><li> Il calcolo del tempo circadiano (CT): CT 12 è, per definizione, l&#39;insorgenza di rodaggio ruota attività nei roditori notturni. In parallelo con il giorno 24 hr, per convenzione, un giorno circadiano è suddiviso in 24 hr circadiano. Di conseguenza, se il circadiano free-running periodo è 24 h 30 min misurato dall&#39;orologio muro, CT 0 si verificherà circa 12 h 15 min dopo CT12. </li></ol>

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	<li>Pittendrigh, C. S., Daan, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Functional+Analysis+of+Circadian+Pacemakers+in+Nocturnal+Rodents.+V.+Pacemaker+Structure:+A+Clock+for+All+Seasons.">A Functional Analysis of Circadian Pacemakers in Nocturnal Rodents. V. Pacemaker Structure: A Clock for All Seasons.</a> J. Comp. Physiol. 106, 333-355 (1976).</li><li>Pittendrigh, C. S., Daan, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Functional+Analysis+of+Circadian+Pacemakers+in+Nocturnal+Rodents.+IV.+Entrainment:+Pacemaker+as+Clock.">A Functional Analysis of Circadian Pacemakers in Nocturnal Rodents. IV. Entrainment: Pacemaker as Clock.</a> J. Comp. Physiol. 106, 291-331 (1976).</li><li>Pittendrigh, C. 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S., Yamazaki, S., Menaker, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Is+the+food-entrainable+circadian+oscillator+in+the+digestive+system?.">Is the food-entrainable circadian oscillator in the digestive system?.</a> Genes Brain Behav. 2, 32-39 (2003).</li><li>Hara, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Restricted+feeding+entrains+liver+clock+without+participation+of+the+suprachiasmatic+nucleus.">Restricted feeding entrains liver clock without participation of the suprachiasmatic nucleus.</a> Genes Cells. 6, 269-278 (2001).</li><li>Damiola, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Restricted+feeding+uncouples+circadian+oscillators+in+peripheral+tissues+from+the+central+pacemaker+in+the+suprachiasmatic+nucleus.">Restricted feeding uncouples circadian oscillators in peripheral tissues from the central pacemaker in the suprachiasmatic nucleus.</a> Genes Dev. 14, 2950-2961 (2000).</li><li>Mrosovsky, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phase+response+curves+for+social+entrainment.">Phase response curves for social entrainment.</a> J. 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Neurosci. 20, 9326-9332 (2000).</li><li>Banjanin, S., Mrosovsky, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preferences+of+mice,+Mus+musculus,+for+different+types+of+running+wheel.">Preferences of mice, Mus musculus, for different types of running wheel.</a> Lab Anim. 34, 313-318 (2000).</li><li>Verwey, M., Lam, G. Y., Amir, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circadian+rhythms+of+PERIOD1+expression+in+the+dorsomedial+hypothalamic+nucleus+in+the+absence+of+entrained+food-anticipatory+activity+rhythms+in+rats.">Circadian rhythms of PERIOD1 expression in the dorsomedial hypothalamic nucleus in the absence of entrained food-anticipatory activity rhythms in rats.</a> Eur. J. Neurosci. 29, 2217-2222 (2009).</li><li>Gooley, J. J., Schomer, A., Saper, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+dorsomedial+hypothalamic+nucleus+is+critical+for+the+expression+of+food-entrainable+circadian+rhythms.">The dorsomedial hypothalamic nucleus is critical for the expression of food-entrainable circadian rhythms.</a> Nat. Neurosci. 9, 398-407 (2006).</li></ol>

Nessun conflitto di interessi dichiarati.

Monitoraggio ritmi di attività giornalieri con ruote di scorrimento è il metodo più comunemente usato e affidabile per valutare l&#39;uscita del master clock circadiano nei roditori notturni. Wheel-running attività, tuttavia, è solo uno dei molti aspetti del comportamento e fisiologia che può essere monitorato in continuo. Sebbene la maggior parte di rodaggio ruota attività si verifica durante la notte, oltre il 30% del totale veglia si verifica durante il giorno 25,26. Altri endpoint possono essere ut...

<table border="1"&gt;<tbody&gt;<tr&gt;<td<strong&gt; Nome del reagente</strong</td&gt;<td<strong&gt; Azienda</strong</td&gt;<td<strong&gt; Numero di catalogo</strong</td&gt;<td<strong&gt; Commenti (opzionale)</strong</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; Vitalview Card &amp; Software</td&gt;<td&gt; Mini Mitter</td&gt;<td&gt; # 855-0030-00</td&gt;<td&gt; (Bend, OR, Stati Uniti d&#39;America)</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; DP24 Porto dati</td&gt;<td&gt; Mini Mitter</td&gt;<td&gt; # 840-0024-00</td&gt;<td&gt; (Bend, OR, Stati Uniti d&#39;America)</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; QA4-Module</td&gt;<td&gt; Mini Mitter</td&gt;<td&gt; # 130-0050-00</td&gt;<td&gt; (Bend, OR, Stati Uniti d&#39;America)</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; Interruttore magnetico</td&gt;<td&gt; Mini Mitter</td&gt;<td&gt; # 130-0015-00</td&gt;<td&gt; (Bend, OR, Stati Uniti d&#39;America)</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; Montaggio C-50 Cavo</td&gt;<td&gt; Mini Mitter</td&gt;<td&gt; # 060-0045-10</td&gt;<td&gt; (Bend, OR, Stati Uniti d&#39;America)</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; Rat esecuzione ruota</td&gt;<td&gt; Mini Mitter</td&gt;<td&gt; # 640-0700-00</td&gt;<td&gt; (Bend, OR, Stati Uniti d&#39;America)</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; Cage e vassoio di supporto</td&gt;<td&gt; Mini Mitter</td&gt;<td&gt; # 640-0400-00</td&gt;<td&gt; (Bend, OR, Stati Uniti d&#39;America)</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; Utilizzabile tagliare gabbia</td&gt;<td&gt; Mini Mitter</td&gt;<td&gt; # 664-2154-00</td&gt;<td&gt; (Bend, OR, Stati Uniti d&#39;America)</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; Pavimento Griglia per gabbia</td&gt;<td&gt; Mini Mitter</td&gt;<td&gt; # 676-2154-00</td&gt;<td&gt; (Bend, OR, Stati Uniti d&#39;America)</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; Rifiuti vassoio</td&gt;<td&gt; Mini Mitter</td&gt;<td&gt; # 684-2154-00</td&gt;<td&gt; (Bend, OR, Stati Uniti d&#39;America)</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; Corpo lampada</td&gt;<td&gt; Microlites scientifico</td&gt;<td&gt; # R-101</td&gt;<td&gt; (Toronto, ON, Canada)</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; 4W Lampade fluorescenti</td&gt;<td&gt; Microlites scientifico</td&gt;<td&gt; # F4T5/CW</td&gt;<td&gt; (Toronto, ON, Canada)</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; Isolamento camere</td&gt;<td&gt; Custom built</td&gt;<td</td&gt;<td&gt; 28 &quot;H x 20&quot; W x 28 &quot;D ½&quot; Black melammina.</td&gt;</tr&gt;</tbody&gt;</table

recording and analysis of circadian rhythms in running-wheel activity in rodents

Quando i roditori hanno libero accesso a una ruota in esecuzione nella loro gabbia di stabulazione, l&#39;uso volontario di questa ruota dipende dal momento della giornata 1-5. Roditori notturni, tra cui topi, criceti e topi, sono attivi durante la notte e relativamente inattiva durante il giorno. Molte altre misure comportamentali e fisiologici mostrano anche ritmi quotidiani, ma nei roditori, esegue ruote attività serve come misura particolarmente affidabile e conveniente dell&#39;uscita del orologio circadiano, il nucleo soprachiasmatico (SCN) dell&#39;ipotalamo. In generale, attraverso un processo chiamato trascinamento, il modello quotidiano di esecuzione ruote attività sarà naturalmente allinearsi con l&#39;ambiente ciclo luce-buio (LD ciclo, ad esempio, 12 hr-luce: 12 hr-scuro). Tuttavia i ritmi circadiani sono endogenamente generato modelli di comportamento che presentano un periodo di 24 ore ~, e persistono nel buio costante. Pertanto, in assenza di un ciclo di LD, la registrazione e l&#39;analisi di rodaggio ruota attività puòessere utilizzato per determinare il personale ora del giorno. Poiché questi ritmi sono diretti dall&#39;orologio circadiano del personale ora del giorno viene definito come il tempo circadiano (CT). Al contrario, quando un ciclo di LD è presente, l&#39;ora del giorno, che è determinata dal ciclo ambientale LD è chiamato tempo zeitgeber (ZT). Anche se i ritmi circadiani in rodaggio ruota attività sono in genere collegati all&#39;orologio SCN 6-8, oscillatori circadiani in molte altre regioni del cervello e del corpo 9-14 potrebbe essere coinvolta nella regolazione dei ritmi di attività giornalieri. Per esempio, ritmi quotidiani negli alimenti-anticipatorio attività non richiedono l&#39;SCN 15,16 e invece, sono correlati con i cambiamenti nell&#39;attività di extra-SCN oscillatori 17-20. Così, eseguendo ruote registrazioni di attività può fornire importanti informazioni comportamentali non solo l&#39;uscita del clock SCN master, ma anche l&#39;attività di extra-SCN oscillatori. Di seguito DESCRIBE dell&#39;attrezzatura e dei metodi utilizzati per registrare, analizzare e visualizzare ritmi circadiani attività locomotoria nei roditori da laboratorio.

<ol><li> I programmi per computer: programmi informatici specializzati sono in genere utilizzati per la generazione di actograms e il calcolo del periodo circadiano. Questi programmi includono, ma non sono limitati a, ActiView (Minimitter, Bend, OR) e Circadia. </li><li> Actograms: Actograms fornire una rappresentazione grafica dei modelli quotidiani di rodaggio ruota attività. Ci sono singoli tracciati (asse x = 24 ore) e fare doppio tracciati (asse x = 48 ore) actograms. Entrambi i metodi di giorno trama in ...

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Recording and Analysis of Circadian Rhythms in Running-wheel Activity in Rodents

Ritmi circadiani in volontario ruote in esecuzione di attività nei mammiferi sono strettamente accoppiati alle oscillazioni molecolari di un master clock nel cervello. Come tali, questi ritmi quotidiani di comportamento può essere usato per studiare l&#39;influenza dei fattori genetici, farmacologici e ambientali sul funzionamento di questo orologio circadiano.

Registrazione e analisi dei ritmi circadiani in Running-ruota Attività nei roditori

When rodents have free access to a running wheel in their home cage, voluntary use of this wheel will depend on the time of day1-5. Nocturnal rodents, ...

recording-analysis-circadian-rhythms-running-wheel-activity

Research

JoVE Journal

Neuroscience

21.1K Views.  McGill University. Ritmi circadiani in volontario ruote in esecuzione di attività nei mammiferi sono strettamente accoppiati alle oscillazioni molecolari di un master clock nel cervello. Come tali, questi ritmi quotidiani di comportamento può essere usato per studiare l'influenza dei fattori genetici, farmacologici e ambientali sul funzionamento di questo orologio circadiano.