Questa semplice ed efficace tecnica del modello di separazione muscolo-gap combina i modi del metodo di mini-invasione è la migliore fissazione interna nel nostro modello di contrazione articolare del ginocchio del topo. Il vantaggio principale di questa tecnica è che il suo processo è riproducibile e l'alternativa minimamente invasiva all'indurre la contrattura dell'articolazione del ginocchio negli animali. A dimostrare la procedura saranno Shihai Jiang e Fei Zhang, studenti laureati del mio laboratorio.
Dopo aver confermato una mancanza di risposta al dito del piede, radere la parte inferiore del corpo del ratto anestetizzato, compresi i due arti posteriori. Disinfettare la pelle esposta con tintura di iodio povidone due volte e 75% di etanolo tre volte. Applicare un unguento agli occhi dell'animale e posizionare lateralmente il topo sotto un drappo chirurgico con un arto posteriore e un'anca esposti.
Disinfettare l'area chirurgica con ulteriore iodio di povidone. All'estremità distale del trocanizzatore maggiore del femore, tracciare una linea lungo la proiezione della superficie corporea dello spazio muscolare tra il vastus lateralis e il bicipite femoris per segnare la direzione dell'incisione cutanea. Successivamente, fare un'incisione di 1,5 centimetri nell'epidermide lungo la linea.
Utilizzare le forcelle tissutali per sezionare senza mezzi termini lo spazio muscolare tra il vastus lateralis e il bicipite femoris fino a quando non viene esposto circa un centimetro dell'albero femorale. Utilizzare un riavvolgitore per facilitare una separazione continua del divario muscolare. Fai un'incisione di un centimetro nell'epidermide lungo la proiezione della superficie corporea dello spazio muscolare tra la tibialis anteriore e il fibularis longus sugli arti inferiori distali.
Sezionare senza mezzi termini lo spazio muscolare fino a quando non viene esposto circa un centimetro della tibia. Utilizzare il riavvolgitore e levigare le forcelle per separare i tessuti molli. Tenendo un trapano perpendicolare all'osso, praticare un foro di diametro di un millimetro nell'albero femorale a 1.500 rotazioni al minuto circa otto millimetri sotto il bordo inferiore del trocanizzatore maggiore.
Premere rapidamente la ferita per fermare il sanguinamento e praticare un foro di 0,9 millimetri di diametro nella tibia circa quattro millimetri sotto il bordo della fusione tibiofibulare. Utilizzare un morsetto emostatico dritto di tipo zanzara per formare un decorso submuscolare dal buco della tibia al buco del femore, passando sotto il gastrocnemio nell'estremità della tibia e sopra il gluteo medius sotto il bicipite femoris nell'estremità del femore. Quindi utilizzare una vite in acciaio m1.4 per otto millimetri per fissare un'estremità di una piastra di plastica nel femore prossimale.
Utilizzare una vite in acciaio m1.2 per sei millimetri per fissare un'altra estremità della piastra di plastica nella tibia distatale. Una volta che la piastra è stata fissata, utilizzare 4-0 suture assorbibili per chiudere la miofascia, la fascia profonda e il tessuto sottocutaneo. Chiudere la pelle con suture di seta.
L'imaging a raggi X rivela un corretto posizionamento delle viti in acciaio nel femore o nella tibia. L'analisi tridimensionale della ricostruzione dopo la scansione della tomografia microcalcolata ad alta risoluzione dimostra il posizionamento laterale delle viti di circa otto millimetri sotto il bordo inferiore del trocanizzatore maggiore al femore prossimale e circa quattro millimetri sotto il bordo della fusione tibiofibulare alla tibia distatale. I deficit artrogeni nell'intervallo di movimento aumentano durante l'immobilizzazione in modo dipendente dal tempo.
Come dimostrato dai più elevati deficit artrogeni medi misurati per l'articolazione del ginocchio immobilizzata rispetto all'articolazione del ginocchio di controllo a 56 giorni di immobilizzazione. Il primo giorno dell'immobilizzazione, non si osserva alcuna adesione mediante colorazione elastica della capsula articolare del ginocchio posteriore-superiore nello spazio articolare tra la capsula articolare posteriore-superiore nel femore nell'articolazione del ginocchio laterale immobilizzata o contralaterale. Entro 28 giorni dall'immobilizzazione, tuttavia, i depositi di tessuto fibroadiposo e l'adesione si sviluppano nello spazio articolare del ginocchio immobilizzato.
Dopo 56 giorni di immobilizzazione, i tessuti fibrosi vengono parzialmente sostituiti dalla deposizione mentre questo tipo di adesione non si osserva nell'articolazione del ginocchio contralaterale. Questo metodo è modificato da quello utilizzato dal professor Trudel e dai colleghi dell'Università di Ottawa. È fondamentale identificare e separare le lacune muscolari durante l'intervento chirurgico.
Seguendo diverse tecniche di immobilizzazione possono essere eseguiti altri processi sperimentali come la coltura della capsula articolare del ginocchio per studiare i meccanismi molecolari sottostanti.
