two-photon-based-photoactivation-in-live-zebrafish-embryos

Two-Photon-Based Photoactivation in Live Zebrafish Embryos

Photoactivation of target compounds in a living organism has proven a valuable approach to investigate various biological processes such as embryonic ...

Weizmann Institute of Science

&#x6211;&#x4EEC;&#x63A2;&#x8BA8;&#x4E86;&#x9C81;&#x68D2;&#x795E;&#x7ECF;&#x677F;&#x9635;&#x5217;&#x4FE1;&#x53F7;&#xFF0C;&#x5982; Wnt&#xFF0C;&#x5206;&#x5316;&#x548C;&#x914D;&#x7F6E;&#x5728;&#x5355;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x95F4;&#x8111;&#x4E2D;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4E9A;&#x578B;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x5947;&#x602A;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x6444;&#x52A8;&#x7684; Wnt &#x4FE1;&#x53F7;&#x6CA1;&#x6709;&#x6574;&#x4F53;&#x6548;&#x679C;&#x4E0A;&#x7684; diencephalic &#x7684;&#x547D;&#x8FD0;&#xFF0C;&#x89C4;&#x8303;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6709;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x5730;&#x53D7;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x591A;&#x5DF4;&#x80FA; (DA) &#x80FD;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x6570;&#x76EE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x5728;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E00;&#x4E2A;&#x57FA;&#x4E8E;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5149;&#x5B50;&#x7684; uncaging &#x65B9;&#x6CD5;&#x5728;&#x795E;&#x7ECF;&#x677F; diencephalic &#x7D20;&#x8D28; DA &#x7956;&#x533A;&#x5E76;&#x663E;&#x793A;&#x6765;&#x81EA;&#x6B64;&#x7956;&#x533A;&#x975E; DA &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x6570;&#x76EE;&#x5E76;&#x4E0D;&#x6539;&#x53D8;&#x7531; Wnt &#x8870;&#x51CF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528; birthdating &#x5206;&#x6790;&#xFF0C;&#x786E;&#x5B9A;&#x6700;&#x540E;&#x4E00;&#x4E2A; DA &#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x5B89;&#x6392;&#x548C;&#x53D1;&#x73B0; DA &#x7EC6;&#x80DE;&#x6570;&#x4EE5;&#x4E0B; Wnt &#x6291;&#x5236;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x5E76;&#x4E0D;&#x662F;&#x9000;&#x51FA;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x6761;&#x4EF6;&#x6291;&#x5236; Wnt &#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x8BC1;&#x660E; Wnt &#x671F;&#x95F4;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x4E3B;&#x795E;&#x7ECF;&#x7684;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x7684;&#x7A97;&#x53E3;&#x9650;&#x5236;&#x4E86; DA &#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6570;&#x91CF;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E; Wnt8b &#x662F;&#x8C03;&#x5236;&#x5668;&#x7684;&#x884C;&#x4E3A;&#x901A;&#x8FC7; Fz8a &#x7684; DA &#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6570; (Fzd8a) &#x53D7;&#x4F53;&#x548C;&#x5176;&#x4E0B;&#x6E38;&#x6548;&#x5E94; Lef1&#xFF0C;&#x5E76;&#x8981;&#x6C42;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7684; Fezl (Fezf2) &#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x4E3A;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x663E;&#x793A;&#x4E0D;&#x540C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4EBA;&#x53E3;&#x5BF9; Wnt &#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x5FAE;&#x5206;&#x53CD;&#x5E94;&#x4E0D;&#x662F;&#x7B80;&#x5355;&#x7684;&#x89E3;&#x91CA;&#xFF0C;&#x5176;&#x76F8;&#x5BF9;&#x7684;&#x4F53;&#x4F4D;&#x3002;&#x8BE5;&#x7814;&#x7A76;&#x8FD8;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#xFF0C;&#x6BD4;&#x9884;&#x671F;&#x7684;&#x8981;&#x65E9;&#x5F97;&#x591A;&#xFF0C;diencephalic DA &#x4EBA;&#x53E3;&#x89C4;&#x6A21;&#x8C03;&#x5236;&#x5185;&#x795E;&#x7ECF;&#x677F;&#x4F34;&#x4ECB;&#x5BFC; Wnt &#x533A;&#x57DF;&#x9635;&#x5217;&#x64CD;&#x4F5C;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x3002;

&#x591A;&#x5DF4;&#x80FA;&#x80FD;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7C07;&#x7684;&#x5927;&#x5C0F;&#x662F;&#x5728;&#x65E9;&#x524D;&#x8111;&#x9635;&#x5217;&#x65F6;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x3002;

We have explored the effects of robust neural plate patterning signals, such as canonical Wnt, on the differentiation and configuration of neuronal subtypes in the zebrafish diencephalon at single-cell resolution. Surprisingly, perturbation of Wnt signaling did not have an overall effect on the specification of diencephalic fates, but selectively affected the number of dopaminergic (DA) neurons. We identified the DA progenitor zone in the diencephalic anlage of the neural plate using a two-photon-based uncaging method and showed that the number of non-DA neurons derived from this progenitor zone is not altered by Wnt attenuation. Using birthdating analysis, we determined the timing of the last cell division of DA progenitors and revealed that the change in DA cell number following Wnt inhibition is not due to changes in cell cycle exit kinetics. Conditional inhibition of Wnt and of cell proliferation demonstrated that Wnt restricts the number of DA progenitors during a window of plasticity, which occurs at primary neurogenesis. Finally, we demonstrated that Wnt8b is a modulator of DA cell number that acts through the Fz8a (Fzd8a) receptor and its downstream effector Lef1, and which requires the activity of the Fezl (Fezf2) transcription factor for this process. Our data show that the differential response of distinct neuronal populations to the Wnt signal is not a simple interpretation of their relative anteroposterior position. This study also shows, for the first time, that diencephalic DA population size is modulated inside the neural plate much earlier than expected, concomitant with Wnt-mediated regional patterning events.

Dopaminergic neuronal cluster size is determined during early forebrain patterning.

Nous avons explor&#xE9; les effets de robustes neuronaux signaux de structuration des plaques, comme voie de signalisation Wnt canonique, sur la diff&#xE9;renciation et la configuration des sous-types de neurones dans le dienc&#xE9;phale poisson-z&#xE8;bre &#xE0; une seule cellule de r&#xE9;solution. &#xC9;tonnamment, la perturbation de la signalisation Wnt n&#x26;#39;a pas eu d&#x26;#39;effet global sur la sp&#xE9;cification des destins dienc&#xE9;phaliques, mais de mani&#xE8;re s&#xE9;lective le nombre de touch&#xE9;s dopaminergiques (DA) des neurones. Nous avons identifi&#xE9; la zone anc&#xEA;tre de DA dans l&#x26;#39;&#xE9;bauche dienc&#xE9;phalique de la plaque neurale en utilisant une m&#xE9;thode uncaging &#xE0; deux photons &#xE0; base et a montr&#xE9; que le nombre de non-DA neurones d&#xE9;riv&#xE9;s de cette zone g&#xE9;niteur n&#x26;#39;est pas alt&#xE9;r&#xE9;e par l&#x26;#39;att&#xE9;nuation Wnt. En utilisant l&#x26;#39;analyse birthdating, nous avons d&#xE9;termin&#xE9; le calendrier de la division cellulaire des prog&#xE9;niteurs derni&#xE8;re DA et a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que le changement du nombre de cellules DA suite &#xE0; l&#x26;#39;inhibition Wnt n&#x26;#39;est pas due &#xE0; des changements dans la cin&#xE9;tique du cycle cellulaire de sortie. L&#x26;#39;inhibition conditionnelle de Wnt et de la prolif&#xE9;ration cellulaire a d&#xE9;montr&#xE9; que Wnt limite le nombre de prog&#xE9;niteurs DA pendant une fen&#xEA;tre de la plasticit&#xE9;, qui se produit &#xE0; la neurogen&#xE8;se primaire. Enfin, nous avons d&#xE9;montr&#xE9; que Wnt8b est un modulateur du nombre de cellules DA qui agit par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire du Fz8a (Fzd8a) r&#xE9;cepteur et son aval LEF1 effecteur, et qui n&#xE9;cessite l&#x26;#39;activit&#xE9; du facteur de transcription Fezl (Fezf2) pour ce processus. Nos donn&#xE9;es montrent que la r&#xE9;ponse diff&#xE9;rentielle des diff&#xE9;rentes populations neuronales au signal Wnt n&#x26;#39;est pas une simple interpr&#xE9;tation de leur position ant&#xE9;ro-post&#xE9;rieure relative. Cette &#xE9;tude montre &#xE9;galement, pour la premi&#xE8;re fois, que la taille de la population dienc&#xE9;phalique DA est modul&#xE9; &#xE0; l&#x26;#39;int&#xE9;rieur de la plaque neurale beaucoup plus t&#xF4;t que pr&#xE9;vu, concomitante avec Wnt-m&#xE9;di&#xE9;es par les &#xE9;v&#xE9;nements de structuration r&#xE9;gionales.

Dopaminergique taille de cluster neuronale est d&#xE9;termin&#xE9; au cours de Mod&#xE9;lisation du cerveau ant&#xE9;rieur pr&#xE9;coce

Wir haben die Auswirkungen der robuste neurale Platte Musterung Signale, z. B. kanonischer Wnt, auf die Differenzierung und die Konfiguration von neuronalen Untertypen in der Zebrafisch-Zwischenhirn bei einzelligen Aufl&ouml;sung untersucht. &Uuml;berraschenderweise St&ouml;rung Wnt signalisieren haben keine ausgleichende Wirkung auf die Spezifikation der Dienzephalisches Schicksale, aber gezielt beeinflusst die Anzahl der (DA) dopaminergen Neuronen. Wir DA Stammvater Zone in der Dienzephalisches Anlage der Neural-Platte mit einer zwei-Photonen-basierte uncaging Methode erkannt und zeigte, dass die Zahl der nicht-DA Neuronen abgeleitet aus dieser Zone Vorl&auml;uferzellen von Wnt D&auml;mpfung nicht ge&auml;ndert werden kann. Birthdating Analyse verwenden, wir bestimmt den Zeitpunkt der letzten Zellteilung DA Vorreiter und zeigte, dass die Ver&auml;nderung DA Zelle Nummer folgenden Wnt Hemmung nicht aufgrund von &Auml;nderungen an der Ausfahrt Zellzykluskinetik. Bedingte Hemmung des Wnt und der Zellproliferation gezeigt, dass Wnt die Anzahl der DA Vorl&auml;uferzellen w&auml;hrend ein Fenster der Plastizit&auml;t, beschr&auml;nkt, die am prim&auml;ren Neurogenese auftritt. Schlie&szlig;lich wir bewiesen, dass Wnt8b ein Modulator der DA-Zellen-Zahl ist, die durch die Fz8a wirkt (Fzd8a) Rezeptor und seine nachgeschaltete Effektor Lef1 und denen die Aktivit&auml;t der Transkription Fezl (Fezf2) erfordert Faktor f&uuml;r diesen Prozess. Unsere Daten zeigen, dass die differenzielle Reaktion der unterschiedlichen neuronalen Populationen zum Wnt Signal keine einfache Erkl&auml;rung f&uuml;r ihre relative anteroposterioren-Position. Diese Studie zeigt auch, zum ersten Mal, das Dienzephalisches DA Bev&ouml;lkerungsgr&ouml;&szlig;e viel fr&uuml;her als erwartet, innerhalb der Neural-Platte moduliert ist damit einhergehende mit regionalen Musterung Wnt-vermittelten Veranstaltungen.

Dopaminergen neuronale Clustergr&ouml;&szlig;e wird w&auml;hrend der fr&uuml;hen Stirnhirn Musterung festgelegt.

Abbiamo esplorato gli effetti della robusta piastra neurale creazione di serie di segnali, come ad esempio Wnt canonico, la differenziazione e la configurazione dei sottotipi neuronali nel diencefalo zebrafish a cella singola risoluzione. Sorprendentemente, perturbazione di segnalazione Wnt non ha avuto un effetto complessivo sulla specifica dei destini Diencefalica, ma colpite selettivamente il numero di Neuroni dopaminergici (DA). Abbiamo individuato la zona di progenitore DA nel anlage Diencefalica della piastra neurale utilizzando un metodo uncaging basati su due-fotone e ha mostrato che il numero di neuroni non-DA derivati da questa zona progenitore non &egrave; alterato da Wnt attenuazione. Utilizzando l&#39;analisi birthdating, abbiamo determinato i tempi della divisione cellulare ultimo DA progenitori e ha rivelato che il cambiamento nella inibizione seguente Wnt DA cellulare numero non &egrave; a causa di cambiamenti nel ciclo cellulare uscita cinetica. Inibizione condizionale di Wnt e della proliferazione cellulare hanno dimostrato che Wnt limita il numero di progenitori DA durante una finestra di plasticit&agrave;, che si verifica nella neurogenesi primaria. Infine, abbiamo dimostrato che la Wnt8b &egrave; un modulatore del numero di cellule DA che agisce attraverso il Fz8a di fattore recettore (Fzd8a) e suoi effettori a valle Lef1, e che richiede l&#39;attivit&agrave; della trascrizione Fezl (Fezf2) per questo processo. I nostri dati mostrano che la risposta differenziale delle distinte popolazioni neuronali del segnale Wnt non &egrave; una semplice interpretazione della loro posizione relativa anteroposteriore. Questo studio mostra anche, per la prima volta, che la dimensione della popolazione DA Diencefalica &egrave; modulata all&#39;interno della piastra neurale molto prima del previsto, concomitante con eventi patterning regionale Wnt-mediata.

Dimensione dei cluster di un neurone dopaminergico &egrave; determinato durante primi patterning proencefalo.

&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x5358;&#x4E00;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x89E3;&#x50CF;&#x5EA6;&#x3067;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x9593;&#x8133;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A3;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x4E0A;&#x3067;&#x3001;&#x6A19;&#x6E96;&#x7684;&#x306A;Wnt&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x5805;&#x7262;&#x306A;&#x795E;&#x7D4C;&#x677F;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9A5A;&#x304F;&#x3079;&#x304D;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;Wnt&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306E;&#x6442;&#x52D5;&#x306F;&#x3001;&#x9593;&#x8133;&#x904B;&#x547D;&#x306E;&#x4ED5;&#x69D8;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x5168;&#x4F53;&#x7684;&#x306A;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x30C9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30DF;&#x30F3;&#xFF08;DA&#xFF09;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x6570;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;2&#x3064;&#x200B;&#x200B;&#x306E;&#x5149;&#x5B50;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30A2;&#x30F3;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x6CD5;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x795E;&#x7D4C;&#x677F;&#x306E;&#x9593;&#x8133;&#x539F;&#x57FA;&#x306E;DA&#x524D;&#x99C6;&#x30BE;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x524D;&#x99C6;&#x30BE;&#x30FC;&#x30F3;&#x304B;&#x3089;&#x6D3E;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x975E;DA&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x6570;&#x306F;&#x3001;Wnt&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306E;&#x6E1B;&#x8870;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5909;&#x66F4;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; birthdating&#x5206;&#x6790;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x3001;DA&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x306E;&#x6700;&#x5F8C;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x3001;Wnt&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x963B;&#x5BB3;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x306E;DA&#x7D30;&#x80DE;&#x6570;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x304C;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x306E;&#x7D42;&#x4E86;&#x52D5;&#x614B;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002; Wnt&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306E;&#x6761;&#x4EF6;&#x306F;&#x3001;Wnt&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x795E;&#x7D4C;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x306E;&#x7A93;&#x306E;&#x9593;&#x306B;DA&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6570;&#x3092;&#x5236;&#x9650;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;Wnt8b&#x304C;Fz8a&#xFF08;Fzd8a&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x4E0B;&#x6D41;&#x306E;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;LEF1&#x3001;&#x3069;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;Fezl&#xFF08;Fezf2&#xFF09;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;DA&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x6570;&#x306E;&#x5909;&#x8ABF;&#x5668;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;Wnt&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x96C6;&#x56E3;&#x306E;&#x5DEE;&#x52D5;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306F;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x76F8;&#x5BFE;&#x7684;&#x306A;&#x524D;&#x5F8C;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x306E;&#x5358;&#x7D14;&#x306A;&#x89E3;&#x91C8;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x521D;&#x3081;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x9593;&#x8133;DA&#x306E;&#x4EBA;&#x53E3;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x306F;&#x3001;&#x306F;&#x308B;&#x304B;&#x306B;&#x4E88;&#x60F3;&#x3088;&#x308A;&#x65E9;&#x304F;Wnt&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x5A92;&#x4ECB;&#x5730;&#x57DF;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x306E;&#x4F75;&#x7528;&#x795E;&#x7D4C;&#x677F;&#x306E;&#x5185;&#x90E8;&#x5909;&#x8ABF;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30C9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30DF;&#x30F3;&#x4F5C;&#x52D5;&#x6027;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x306F;&#x3001;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x524D;&#x8133;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x4E2D;&#x306B;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;

&#xC6B0;&#xB9AC; &#xAC19;&#xC740; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC140; &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; zebrafish diencephalon &#xC2E0;&#xACBD; &#xD558;&#xC704;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131;&#xACFC; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xC5D0; &#xC815;&#xC2DD; Wnt &#xC2E0;&#xD638; &#xD328;&#xD134;&#xD654; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD310;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xD0D0;&#xD5D8;. &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, Wnt &#xC2E0;&#xD638; &#xC12D; &#xB3D9; diencephalic &#xC6B4;&#xBA85; &#xC0AC;&#xC591;&#xC5D0; &#xC804;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; (&#xB2E4;) dopaminergic &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC218;&#xB97C; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB450; &#xAD11;&#xC790; &#xAE30;&#xBC18; uncaging &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD310;&#xC758; diencephalic &#xC704;&#xCE58;&#xC5D0; &#xB2E4; &#xC870;&#xC0C1; &#xC601;&#xC5ED; &#xD655;&#xC778; &#xD558; &#xACE0;&#xC774; &#xC870;&#xC0C1; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C;-DA &#xB274;&#xB7F0; &#xC218; Wnt &#xAC10;&#xC1C4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. Birthdating &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB2E4; progenitors&#xC758; &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC758; &#xD0C0;&#xC774;&#xBC0D;&#xC744; &#xACB0;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E4; &#xC140; &#xBC88;&#xD638; &#xB2E4;&#xC74C; Wnt &#xC5B5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xBCC0;&#xD654; &#xD558;&#xC9C0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xCD9C;&#xAD6C; &#xC18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654; &#xB54C;&#xBB38; &#xC774;&#xB77C;&#xACE0; &#xBC1D;&#xD614;&#xB2E4;. &#xC870;&#xAC74;&#xBD80; &#xC800;&#xD574; Wnt &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC758; &#xC2DC;&#xC5F0; Wnt &#xC18C;&#xC131; &#xC8FC; &#xC131;&#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294;&#xC758; &#xCC3D; &#xB2E4; progenitors&#xC758; &#xC218;&#xB97C; &#xC81C;&#xD55C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; wnt8b&#xB97C; fz8a&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC5ED;&#xD560; &#xB2E4; &#xC140; &#xC218; &#xBCC0;&#xC870;&#xAE30;&#xB294; &#xC2DC;&#xC5F0; (Fzd8a) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC640;&#xC758; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xC774;&#xD399;&#xD130; Lef1, Fezl (Fezf2) &#xC804;&#xC0AC;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC694;&#xAD6C; &#xD558;&#xB294;&#xC774; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC694;&#xC18C;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130; Wnt &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC778;&#xAD6C;&#xC758; &#xCC28;&#xB3D9; &#xC751;&#xB2F5;&#xC740; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC778; anteroposterior &#xC704;&#xCE58;&#xC758; &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; &#xD574;&#xC11D; &#xD558;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xB610;&#xD55C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;, diencephalic DA &#xC778;&#xAD6C; &#xD06C;&#xAE30;&#xB294; &#xC608;&#xC0C1; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD6E8;&#xC52C; &#xC77C;&#xCC0D; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD310; &#xB0B4;&#xC758; &#xBCC0;&#xC870;&#xB294; &#xCC98;&#xC74C;&#xC73C;&#xB85C; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xD328;&#xD134;&#xD654; Wnt &#xC911;&#xC7AC; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC218; &#xBC18;&#xD558;&#xB294;.

Dopaminergic &#xC2E0;&#xACBD; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; &#xD06C;&#xAE30;&#xB294; &#xCD08;&#xAE30; &#xAC1C; &#xD328;&#xD134;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xACB0;&#xC815; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Hemos explorado los efectos de las fuertes se&#xF1;ales de los nervios de la placa de modelado, como la v&#xED;a can&#xF3;nica de Wnt, en la diferenciaci&#xF3;n y la configuraci&#xF3;n de los subtipos neuronales en el dienc&#xE9;falo pez cebra en una sola c&#xE9;lula de resoluci&#xF3;n. Sorprendentemente, la perturbaci&#xF3;n de la se&#xF1;alizaci&#xF3;n Wnt no tienen un efecto general sobre la especificaci&#xF3;n de destinos diencef&#xE1;licas, pero de forma selectiva el n&#xFA;mero de afectados dopamin&#xE9;rgicas (DA), las neuronas. Se identific&#xF3; la zona progenitora DA en el esbozo diencef&#xE1;lico de la placa neural mediante un m&#xE9;todo uncaging de dos fotones con sede y mostr&#xF3; que el n&#xFA;mero de no-DA neuronas derivadas de c&#xE9;lulas progenitoras esta zona no se ve alterada por la atenuaci&#xF3;n de Wnt. Utilizando el an&#xE1;lisis de birthdating, se determin&#xF3; el tiempo de la &#xFA;ltima divisi&#xF3;n celular de los progenitores DA y revel&#xF3; que el cambio en el n&#xFA;mero de c&#xE9;lulas DA consecuencia de la inhibici&#xF3;n de Wnt no se debe a cambios en la cin&#xE9;tica de las c&#xE9;lulas de salida del ciclo. La inhibici&#xF3;n condicionada de Wnt y de la proliferaci&#xF3;n celular demostrado que Wnt restringe el n&#xFA;mero de c&#xE9;lulas progenitoras de DA durante una ventana de la plasticidad, que se produce en la neurog&#xE9;nesis primaria. Por &#xFA;ltimo, hemos demostrado que Wnt8b es un modulador del n&#xFA;mero de c&#xE9;lulas DA que act&#xFA;a a trav&#xE9;s de la Fz8a (Fzd8a) del receptor y su efector Lef1, y que requiere la actividad del factor de transcripci&#xF3;n Fezl (Fezf2) para este proceso. Nuestros datos muestran que la respuesta diferencial de las distintas poblaciones neuronales a la se&#xF1;al Wnt no es una simple interpretaci&#xF3;n de su posici&#xF3;n anteroposterior relativa. Este estudio tambi&#xE9;n muestra, por primera vez, que el tama&#xF1;o de la DA diencef&#xE1;lico de la poblaci&#xF3;n es modulada en el interior de la placa neural mucho antes de lo esperado, concomitante con la Wnt-mediada por los acontecimientos de modelado regional.

Tama&#xF1;o de Cluster dopamin&#xE9;rgica neuronal se determina durante Patrones cerebro anterior Temprana

&#x95F4;&#x8111;&#x5145;&#x5F53;&#x611F;&#x5B98;&#x3001; &#x4E2D;&#x90E8;&#xFF0C;&#x548C;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x4E92;&#x52A8;&#x7F51;&#x7AD9;&#xFF0C;&#x662F;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x5927;&#x8111;&#x4E2D;&#x6700;&#x7CBE;&#x81F4;&#x7684;&#x5EFA;&#x7B51;&#x4E4B;&#x4E00;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x66F4;&#x597D;&#x5730;&#x4E86;&#x89E3;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x80B2;&#x53CA;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x95F4;&#x8111;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5236;&#x8BA2;&#x6539;&#x8FDB;&#x7684;&#x8C03;&#x4EA1;&#x7684; (uncaging)-&#x57FA;&#x4E8E;&#x6CBF;&#x88AD;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x7B56;&#x7565;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x786E;&#x5B9A;&#x67D0;&#x4E2A;&#x7ED9;&#x5B9A;&#x7684; diencephalic &#x7956;&#x57DF;&#x7684;&#x786E;&#x5207;&#x4F4D;&#x7F6E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x884C;&#x9A7E;&#x9A76;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D; (GFP) &#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x8FBE; proneural &#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;Neurogenin1 &#xFF08;Neurog1&#xFF09;&#xFF0C;&#x5B83;&#x88AB;&#x7528;&#x4F5C;&#x53EF;&#x89C1;&#x795E;&#x7ECF;&#x677F;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x91CC;&#x7A0B;&#x7891;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x7CBE;&#x786E;&#x8D34;&#x6807;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x795E;&#x7ECF;&#x677F;&#x51C6;&#x95F4;&#x8111;&#x4E2D;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7684;&#x7EC4;&#x3002;&#x4EE5;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B9;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6807;&#x6709;&#x591A;&#x4E2A;&#x91CD;&#x53E0;&#x533A;&#x57DF;&#x7684;&#x95F4;&#x8111;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x786E;&#x4FDD;&#x51C6;&#x786E;&#x6027;&#x548C;&#x53EF;&#x91CD;&#x590D;&#x6027;&#x7684;&#x6211;&#x4EEC;&#x6CBF;&#x88AD;&#x8DDF;&#x8E2A;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x8003;&#x8651;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x677F;&#x7684;&#x52A8;&#x6001;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x76EE;&#x524D;&#x8F83;&#x9AD8;&#x7684;&#x7A7A;&#x95F4;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#xFF0C;&#x6BD4;&#x5148;&#x524D;&#x6240;&#x8FF0;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x95F4;&#x8111;&#x547D;&#x8FD0;&#x5730;&#x56FE;&#x3002;

&#x9AD8;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x95F4;&#x8111;&#x547D;&#x8FD0;&#x5730;&#x56FE;&#x3002;

The diencephalon acts as an interactive site between the sensory, central, and endocrine systems and is one of the most elaborate structures in the vertebrate brain. To better understand the embryonic development and morphogenesis of the diencephalon, we developed an improved photoactivation (uncaging)-based lineage tracing strategy. To determine the exact position of a given diencephalic progenitor domain, we used a transgenic line driving green fluorescent protein (GFP) in cells expressing the proneural protein, Neurogenin1 (Neurog1), which was used as a visible neural plate landmark. This approach facilitated precise labeling of defined groups of cells in the prospective diencephalon of the zebrafish neural plate. In this manner, we labeled multiple overlapping areas of the diencephalon, thereby ensuring both accuracy and reproducibility of our lineage tracing regardless of the dynamic changes of the developing neural plate. We present a fate map of the zebrafish diencephalon at a higher spatial resolution than previously described.

High resolution fate map of the zebrafish diencephalon.

Le dienc&#xE9;phale agit comme un site interactif entre les syst&#xE8;mes sensoriels, centrale, et le syst&#xE8;me endocrinien et est l&#x26;#39;une des structures les plus &#xE9;labor&#xE9;es dans le cerveau des vert&#xE9;br&#xE9;s. Pour mieux comprendre le d&#xE9;veloppement embryonnaire et la morphogen&#xE8;se du dienc&#xE9;phale, nous avons d&#xE9;velopp&#xE9; une photoactivation am&#xE9;lior&#xE9;e (uncaging)-bas&#xE9;e lign&#xE9;e tra&#xE7;age strat&#xE9;gie. Pour d&#xE9;terminer la position exacte d&#x26;#39;un domaine prog&#xE9;niteur dienc&#xE9;phalique donn&#xE9;, nous avons utilis&#xE9; une lign&#xE9;e transg&#xE9;nique de conduire la prot&#xE9;ine fluorescente verte (GFP) dans les cellules exprimant la prot&#xE9;ine proneural, Neurogenin1 (Neurog1), qui a &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9; comme un point de rep&#xE8;re visible de la plaque neurale. Cette m&#xE9;thode facilit&#xE9;e &#xE9;tiquetage pr&#xE9;cise de groupes d&#xE9;finis de cellules dans le dienc&#xE9;phale potentiel de la plaque de poisson-z&#xE8;bre neuronal. De cette mani&#xE8;re, nous avons appel&#xE9; plusieurs zones de chevauchement de la dienc&#xE9;phale, assurant ainsi l&#x26;#39;exactitude et la reproductibilit&#xE9; de notre lign&#xE9;e de tra&#xE7;age quelles que soient les changements dynamiques de la plaque neurale en d&#xE9;veloppement. Nous pr&#xE9;sentons une carte sort du dienc&#xE9;phale le poisson-z&#xE8;bre &#xE0; une r&#xE9;solution spatiale plus &#xE9;lev&#xE9;e que pr&#xE9;c&#xE9;demment d&#xE9;crit.

Haute R&#xE9;solution Plan destin du dienc&#xE9;phale poisson z&#xE8;bre

Das Zwischenhirn fungiert als interaktive Seite zwischen die sensorische, zentrale und endokrine Systeme und z&auml;hlt zu den aufwendigsten Strukturen im Gehirn Wirbeltiere. Zum besseren Verst&auml;ndnis der embryonalen Entwicklung und Morphogenese von dem Zwischenhirn entwickelten wir ein verbessertes Photoaktivierung (uncaging)-&Uuml;bertragungslinie Ablaufverfolgung Strategie basiert. Um die genaue Position einer bestimmten Dienzephalisches Stammvater-Dom&auml;ne zu ermitteln, haben wir eine transgene Linie fahren gr&uuml;nes fluoreszierendes Protein (GFP) in Zellen, die zum Ausdruck bringen des Proneural-Proteins, Neurogenin1 verwendet (Neurog1), die als Wahrzeichen sichtbar neurale Platte verwendet wurde. Dieser Ansatz erleichtert die genaue Kennzeichnung von definierten Gruppen von Zellen in der prospektiven Zwischenhirn der Zebrafisch-Neural-Platte. Auf diese Weise beschriftet wir mehrere &uuml;berlappende Bereiche im Zwischenhirn, wodurch sowohl die Genauigkeit als auch die Reproduzierbarkeit der unsere Linie-Ablaufverfolgung unabh&auml;ngig von den dynamischen &Auml;nderungen der entwickelnden Neural-Platte. Wir pr&auml;sentieren eine Schicksal-Karte von der Zebrafisch-Zwischenhirn mit einer h&ouml;heren r&auml;umlichen Aufl&ouml;sung als zuvor beschrieben.

Hochaufl&ouml;sende Schicksal Karte von Zebrafisch-Zwischenhirn.

Diencefalo &egrave; una delle strutture pi&ugrave; elaborate nel cervello vertebrato e agisce come un sito interattivo tra i sistemi sensoriali, centrali e sistema endocrini. Per comprendere meglio lo sviluppo embrionale e la morfogenesi del diencefalo, abbiamo sviluppato un photoactivation migliorata (uncaging)-basato su strategia di tracciatura di lignaggio. Per determinare la posizione esatta di un dominio dato progenitore Diencefalica, abbiamo utilizzato una linea transgenica guida proteina fluorescente verde (GFP) in cellule che esprimono la proteina proneural, Neurogenin1 (Neurog1), che &egrave; stato usato come punto di riferimento visibile piastra neurale. Questo approccio facilitato etichettatura precisa di gruppi definiti di cellule nel diencefalo prospettico della piastra neurale zebrafish. In questo modo, abbiamo etichettato pi&ugrave; aree sovrapposte del diencefalo, garantendo precisione e la riproducibilit&agrave; della nostra analisi di lineage indipendentemente i cambiamenti dinamici della piastra neurale in via di sviluppo. Vi presentiamo una mappa del destino del diencefalo zebrafish con una risoluzione spaziale superiore quanto descritto in precedenza.

Mappa di destino ad alta risoluzione del diencefalo zebrafish.

&#x9593;&#x8133;&#x306F;&#x3001;&#x611F;&#x899A;&#x4E2D;&#x67A2;&#x3001;&#x53CA;&#x3073;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7CFB;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306A;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x3001;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x8133;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x6700;&#x3082;&#x7CBE;&#x5DE7;&#x306A;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x4E00;&#x3064;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x512A;&#x308C;&#x305F;&#x9593;&#x8133;&#x306E;&#x80DA;&#x767A;&#x751F;&#x3068;&#x5F62;&#x614B;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x6539;&#x5584;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5149;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#xFF08;&#x30A2;&#x30F3;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#xFF09;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B9;&#x3059;&#x308B;&#x7CFB;&#x7D71;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E0E;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x9593;&#x8133;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x76EE;&#x306B;&#x898B;&#x3048;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x677F;&#x306E;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C9;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AF;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30D7;&#x30ED;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30E9;&#x30EB;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3001;Neurogenin1&#xFF08;Neurog1&#xFF09;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;GFP&#xFF09;&#x3092;&#x99C6;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306F;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x677F;&#x306E;&#x524D;&#x5411;&#x304D;&#x9593;&#x8133;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x8840;&#x7D71;&#x306B;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x958B;&#x767A;&#x795E;&#x7D4C;&#x677F;&#x306E;&#x52D5;&#x7684;&#x306A;&#x5909;&#x5316;&#x306E;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x3068;&#x518D;&#x73FE;&#x6027;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x78BA;&#x4FDD;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x9593;&#x8133;&#x306E;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC;&#x30E9;&#x30C3;&#x30D7;&#x9818;&#x57DF;&#x3092;&#x6A19;&#x8B58;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x524D;&#x8FF0;&#x3057;&#x305F;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x9AD8;&#x3044;&#x7A7A;&#x9593;&#x5206;&#x89E3;&#x80FD;&#x3067;&#x306E;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x9593;&#x8133;&#x306E;&#x904B;&#x547D;&#x306E;&#x5730;&#x56F3;&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x9593;&#x8133;&#x306E;&#x9AD8;&#x89E3;&#x50CF;&#x5EA6;&#x30D5;&#x30A7;&#x30A4;&#x30C8;&#x30DE;&#x30C3;&#x30D7;

Diencephalon &#xAC10;&#xAC01;, &#xC911;&#xC559;, &#xB0B4; &#xBD84; &#xBE44; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xAC04;&#xC758; &#xB300;&#xD654;&#xD615; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xB418;&#xBA70; &#xCC99;&#xCD94; &#xB1CC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC00;&#xC7A5; &#xC815;&#xAD50;&#xD55C; &#xAD6C;&#xC870; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC30;&#xC544; &#xBC1C;&#xB2EC;&#xACFC; diencephalon morphogenesis &#xB354; &#xB098;&#xC740; &#xC774;&#xD574;&#xB97C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; photoactivation (uncaging) &#xAC1C;&#xBC1C;-&#xD608;&#xD1B5; &#xCD94;&#xC801; &#xC804;&#xB7B5;&#xC744; &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC8FC;&#xC5B4;&#xC9C4;&#xB41C; diencephalic &#xC870;&#xC0C1; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xC704;&#xCE58;&#xB97C; &#xD655;&#xC778; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Neurogenin1 proneural &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC140;&#xC5D0; &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (GFP) &#xC6B4;&#xC804; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xB77C;&#xC778;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; (Neurog1)&#xC744; &#xBCF4;&#xC774;&#xB294; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD310; &#xB79C;&#xB4DC;&#xB9C8;&#xD06C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC774;&#xB807;&#xAC8C; &#xC140; zebrafish &#xC2E0;&#xACBD; &#xD310;&#xC758; &#xC608;&#xBE44; diencephalon&#xC5D0; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC758; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xB77C;&#xBCA8; &#xC6A9;&#xC774; &#xD558; &#xAC8C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC815;&#xD655;&#xC131;&#xACFC; &#xC7AC;&#xD604;&#xC131;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD310;&#xC758; &#xC5ED;&#xB3D9;&#xC801;&#xC778; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0; &#xAD00;&#xACC4; &#xC5C6;&#xC774; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xD608;&#xD1B5; &#xCD94;&#xC801; &#xB418;&#xB3C4;&#xB85D; diencephalon&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xACB9;&#xCE58;&#xB294; &#xC601;&#xC5ED; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC55E;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC124;&#xBA85;&#xD55C; &#xAC83; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xB192;&#xC740; &#xACF5;&#xAC04; &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; zebrafish diencephalon&#xC758; &#xC6B4;&#xBA85; &#xC9C0;&#xB3C4; &#xC81C;&#xC2DC;.

&#xACE0;&#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; zebrafish diencephalon&#xC758; &#xC6B4;&#xBA85; &#xC9C0;&#xB3C4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El dienc&#xE9;falo act&#xFA;a como un sitio interactivo entre los sistemas sensoriales, central y endocrino, y es una de las estructuras m&#xE1;s elaboradas en el cerebro de los vertebrados. Para comprender mejor el desarrollo embrionario y morfog&#xE9;nesis del dienc&#xE9;falo, hemos desarrollado una mejora de fotoactivaci&#xF3;n (uncaging)-basada linaje de rastreo de la estrategia. Para determinar la posici&#xF3;n exacta de un dominio determinado progenitor diencef&#xE1;lico, se utiliz&#xF3; una l&#xED;nea transg&#xE9;nica de conducir la prote&#xED;na verde fluorescente (GFP) en c&#xE9;lulas que expresan la prote&#xED;na proneural, Neurogenin1 (Neurog1), que fue utilizado como un punto de referencia visible la placa neural. Este enfoque facilita el etiquetado preciso de los grupos definidos de c&#xE9;lulas en el dienc&#xE9;falo prospectivo de la placa neural del pez cebra. De esta manera, hemos marcado varias &#xE1;reas de solapamiento del dienc&#xE9;falo, asegurando as&#xED; la precisi&#xF3;n y la reproducibilidad de nuestro linaje de seguimiento, independientemente de los cambios din&#xE1;micos de la placa neural en desarrollo. Se presenta un mapa del destino del dienc&#xE9;falo pez cebra con una mayor resoluci&#xF3;n espacial que se ha descrito anteriormente.

Niva Russek-Blum

Molecular Cell Biology

Weizmann Institute of Science

Two-Photon-Based Photoactivation in Live Zebrafish Embryos

Niva Russek-Blum

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Molecular Cell Biology

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