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Fabrication of Micro-tissues using Modules of Collagen Gel Containing Cells

This protocol describes the fabrication of a type of micro-tissues called modules.  The module approach generates uniform, scalable and vascularized ...

University of Toronto

&#x6211;&#x4EEC;&#x5148;&#x524D;&#x786E;&#x5B9A; X &#x8FDE;&#x9501;&#x51CB;&#x4EA1;&#x6291;&#x5236;&#x86CB;&#x767D; (Xiap) &#x662F;&#x4EBA;&#x5375;&#x5DE2;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x987A;&#x94C2; &#xFF08;&#x987A;&#x94C2;&#xFF09; &#x8010;&#x836F;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x51B3;&#x5B9A;&#x56E0;&#x7D20;&#x548C; Xiap&#xFF0C;&#x4E0B;&#x8C03;&#x7684;&#x589E;&#x654F;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E0B;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; p53 &#x7EC6;&#x80DE;&#x5BF9;&#x987A;&#x94C2;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;Xiap &#x4E3B;&#x52A8;&#x8109;&#x78F7;&#x8102;&#x9170;&#x808C;&#x9187;-3&#39;-&#x6FC0;&#x9176;/Akt &#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x78F7;&#x9178;&#x5316; Akt &#x8D8A;&#x6765;&#x8D8A;&#x591A;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;Xiap&#x3001; Akt &#x548C; p53 &#x5728;&#x5316;&#x7597;&#x8010;&#x836F;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x786E;&#x5207;&#x5173;&#x7CFB;&#x662F;&#x672A;&#x77E5;&#x7684;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; Xiap &#x548C; Akt &#x53EF;&#x5355;&#x72EC;&#x8C03;&#x8282;&#x987A;&#x94C2;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x4F46; Xiap &#x9700;&#x8981; Akt&#xFF0C;&#x4E3A;&#x5176;&#x5168;&#x90E8;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x663E;&#x6027;&#x8D1F; Akt &#x7684;&#x589E;&#x654F;&#x4F5C;&#x7528;&#x5375;&#x5DE2;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x987A;&#x94C2; (10 &#x5FAE; M) &#x7684;&#x6548;&#x679C;&#xFF0C;&#x662F;&#x8868;&#x793A;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684; p53 &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x4E0D;&#x5B58;&#x5728;&#x6216;&#x6CBB;&#x7597; p53 &#x6291;&#x5236;&#x5242; pifithrin-&alpha;-&#x6C22;&#x6EB4;&#x9178; (30 &#x5FAE; M) &#x4F46;&#x7531;&#x5916;&#x6E90;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; p53 &#x6062;&#x590D;&#x3002;&#x987A;&#x94C2;&#x589E;&#x52A0; p53&#x3001; &#x51CF;&#x5C11; Xiap &#x5185;&#x5BB9;&#x548C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1; OV2008 &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&#x8010;&#x7684;&#x5BF9;&#x5E94; (C13 *)&#x3002;&#x4E0D;&#x8FC7;&#xFF0C;&#x663E;&#x6027;&#x8D1F; Akt &#x6062;&#x590D;&#x6240;&#x6709;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7279;&#x6027;&#x5BF9;&#x5355;&#x5143;&#x683C; C13 *&#x3002;&#x4E00;&#x79EF;&#x6781; Akt2 &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x963B;&#x6B62;&#x987A;&#x94C2;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x4E0B;&#x8C03; Xiap &#x548C; A2780s &#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;Xiap &#x4E0B;&#x8C03;&#x53EF;&#x80FD;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x9006;&#x8F6C; Akt2 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x5316;&#x7597;&#x8010;&#x836F;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; Xiap&#x3001; Akt2&#x3001; &#x548C; p53 &#x7684;&#x5375;&#x5DE2;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5316;&#x7597;&#x8010;&#x836F;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x8C03;&#x89E3;&#x5458;&#xFF0C;&#x800C; Akt2 &#x53EF;&#x80FD; Xiap &#x548C; p53 &#x5185;&#x5BB9;&#x91CD;&#x8981;&#x8C03;&#x8282;&#x5668;&#x540E;&#x987A;&#x94C2;&#x7684;&#x6311;&#x6218;&#x3002;Xiap &#x548C;/&#x6216; Akt &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;/&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x514B;&#x670D;&#x5728;&#x8868;&#x8FBE;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x6216;&#x91CD;&#x7EC4;&#x540E;&#x7684;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; p53 &#x7684;&#x5375;&#x5DE2;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5316;&#x7597;&#x8010;&#x836F;&#x7684;&#x6709;&#x6548;&#x624B;&#x6BB5;&#x3002;

p53 &#x662F; X &#x8FDE;&#x9501;&#x6291;&#x5236;&#x5375;&#x5DE2;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x86CB;&#x767D; Akt &#x4ECB;&#x5BFC;&#x6539;&#x53D8;&#x7684;&#x51B3;&#x5B9A;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;

We established previously that X-linked inhibitor of apoptosis protein (Xiap) is a determinant of cisplatin (CDDP) resistance in human ovarian cancer cells and that down-regulation of Xiap sensitizes cells to CDDP in the presence of wild-type p53. Furthermore, Xiap up-regulates the phosphatidylinositol 3'-kinase/Akt pathway by increasing Akt phosphorylation. However, the precise relationships among Xiap, Akt, and p53 in chemoresistance are unknown. Here we show that both Xiap and Akt can modulate CDDP sensitivity individually but that Xiap requires Akt for its full function. Furthermore, dominant-negative Akt sensitizes ovarian cancer cells to CDDP (10 micro M), an effect that is absent in cells expressing mutant p53 or treated with the p53 inhibitor pifithrin-alpha-hydrobromide (30 micro M) but restored by exogenous wild-type p53. CDDP increased p53, decreased Xiap content, and induced apoptosis in OV2008 cells but not in the resistant counterpart (C13*). However, dominant-negative Akt restored all of these characteristics to C13* cells. Expression of a constitutively active Akt2 prevented CDDP-mediated down-regulation of Xiap and apoptosis in A2780s cells. Akt2-mediated chemoresistance could not be reversed by Xiap down-regulation. These results suggest that whereas Xiap, Akt2, and p53 are important mediators of chemoresistance in ovarian cancer cells, Akt2 may be an important regulator of both Xiap and p53 contents after CDDP challenge. Inhibition of Xiap and/or Akt expression/function may be an effective means of overcoming chemoresistance in ovarian cancer cells expressing either endogenous or reconstituted wild-type p53.

p53 is a determinant of X-linked inhibitor of apoptosis protein/Akt-mediated chemoresistance in human ovarian cancer cells.

Nous avons &eacute;tabli pr&eacute;c&eacute;demment que li&eacute; &agrave; le X inhibiteur de la prot&eacute;ine de l&#39;apoptose (Xiap) est un facteur d&eacute;terminant de la r&eacute;sistance de cisplatine (CDDP) dans les cellules de cancer de l&#39;ovaire humain et cette r&eacute;gulation de Xiap sensibilise les cellules &agrave; CDDP en pr&eacute;sence de la p53 de type sauvage. En outre, Xiap up-r&eacute;glemente la phosphatidylinositol 3&#39;-kinase/Akt voie par phosphorylation d&#39;Akt croissante. Cependant, les relations pr&eacute;cises entre Xiap, Akt et p53 dans la chimior&eacute;sistance sont inconnues. Ici, nous montrons que Xiap et Akt peuvent moduler la sensibilit&eacute; CDDP individuellement mais que Xiap n&eacute;cessite Akt pour son fonctionnement complet. En outre, dominant n&eacute;gatif Akt sensibilise les cellules de cancer de l&#39;ovaire au CDDP (micro 10 M), un effet qui est absent chez les cellules exprimant les mutants de p53 ou trait&eacute;s par la p53 inhibiteur pifithrin-alpha-bromhydrate (30 micro M) mais restaur&eacute;e par exog&egrave;ne p53 de type sauvage. CDDP a augment&eacute; de p53, r&eacute;duit le contenu de Xiap et induit l&#39;apoptose dans les cellules OV2008, mais pas dans l&#39;&eacute;quivalent r&eacute;sistant (C13 **). Toutefois, dominant n&eacute;gatif Akt restaur&eacute; toutes ces caract&eacute;ristiques &agrave; C13 les cellules. Expression d&#39;un Akt2 constitutivement actif a emp&ecirc;ch&eacute; CDDP down-r&eacute;gulation de Xiap et l&#39;apoptose dans les cellules A2780s. Chimior&eacute;sistance AKT2 m&eacute;diation ne pourrait &ecirc;tre annul&eacute;e par Xiap r&eacute;gulation &agrave; la baisse. Ces r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que Xiap, Akt2 et p53 sont des m&eacute;diateurs importants de chimior&eacute;sistance dans les cellules de cancer de l&#39;ovaire, Akt2 peut &ecirc;tre un important r&eacute;gulateur du contenu Xiap et p53 apr&egrave;s provocation par le CDDP. L&#39;inhibition de l&#39;expression/fonction Xiap et/ou Akt peut &ecirc;tre un moyen efficace de surmonter la chimior&eacute;sistance dans les cellules de cancer de l&#39;ovaire exprimant soit endog&egrave;ne ou reconstitu&eacute; p53 de type sauvage.

p53 est un facteur li&eacute; &agrave; le X inhibiteur de la chimior&eacute;sistance prot&eacute;ine/Akt-m&eacute;diation de l&#39;apoptose dans les cellules de cancer de l&#39;ovaire humain.

p53 ist ein Faktor f&#xFC;r X-chromosomale Inhibitor der Apoptose-Protein / Akt-vermittelten Chemoresistenz in humanen Ovarialkarzinom-Zellen.

Abbiamo stabilito precedentemente che X-linked inibitore della proteina di apoptosis (Xiap) &egrave; un fattore determinante della resistenza di cisplatino (CDDP) in cellule di carcinoma ovarico umano e quello down-regulation di Xiap sensibilizza le cellule di CDDP in presenza di p53 wild-type. Inoltre, Xiap up-regola il fosfatidilinositolo 3-chinasi/Akt pathway di aumento della fosforilazione di Akt. Tuttavia, le relazioni precise tra Xiap, Akt e p53 in chemoresistance sono sconosciute. Qui vi mostriamo che sia Xiap e Akt pu&ograve; modulare sensibilit&agrave; CDDP individualmente ma che Xiap richiede Akt per la sua funzione completa. Inoltre, dominante-negativo Akt sensibilizza le cellule di cancro ovarico al CDDP (micro 10 M), un effetto che &egrave; assente nelle cellule che esprimono p53 mutante o trattati con la p53 inibitore pifithrin-alfa-hydrobromide (30 micro M) ma restaurata da esogeno selvaggio-tipo p53. CDDP p53 &egrave; aumentato, diminuito contenuto di Xiap e induce apoptosi nelle cellule OV2008, ma non nella controparte resistente (C13 *). Tuttavia, Akt dominante-negativo restaurato con tutte queste caratteristiche C13 * cellule. Espressione di un Akt2 costitutivamente attive impedito CDDP-mediated down-regulation di Xiap e apoptosi nelle cellule A2780s. Akt2-mediata chemoresistance potrebbe non essere invertito Xiap down-regulation. Questi risultati suggeriscono che mentre Xiap, Akt2 e p53 sono importanti mediatori di chemoresistance in cellule di carcinoma ovarico, Akt2 pu&ograve; essere un regolatore importante del contenuto sia Xiap e p53 dopo la sfida CDDP. Inibizione dell&#39;espressione/funzione Xiap e/o Akt pu&ograve; essere un mezzo efficace per superare chemoresistance in cellule di carcinoma ovarico che esprimono p53 wild-type o endogeno o ricostituito.

p53 &egrave; un fattore determinante dell&#39;inibitore X-linked di apoptosi proteina/Akt-mediata chemoresistance in cellule di carcinoma ovarico umano.

&#x4EE5;&#x524D; X &#x9023;&#x9396;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x6291;&#x5236;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; (Xiap) &#x3067;&#x3072;&#x3068;&#x5375;&#x5DE3;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B7;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C1;&#x30F3; (CDDP) &#x62B5;&#x6297;&#x6027;&#x306E;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x8981;&#x56E0;&#x3068;&#x305D;&#x306E; Xiap &#x306E;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; CDDP &#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B; p53 &#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x8A2D;&#x7ACB;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;Xiap &#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;-&#x3001;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30C1;&#x30B8;&#x30EB;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x898F;&#x5236; 3&#39;-&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316; Akt &#x5897;&#x52A0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;/Akt &#x7D4C;&#x8DEF;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;Xiap &#x3068; Akt, &#x304A;&#x3088;&#x3073; chemoresistance &#x3092;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; p53 &#x306E;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067; Xiap &#x3068; Akt CDDP &#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x3092;&#x500B;&#x5225;&#x306B;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3001;Xiap Akt &#x305D;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x30C9;&#x30DF;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C8; &#x30CD;&#x30AC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6; Akt &#x5375;&#x5DE3;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE; CDDP &#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B; (10 &#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;) &#x3067;&#x3059;&#x52B9;&#x679C;&#x6B20;&#x5E2D;&#x5909;&#x7570; p53 &#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x3001;p53 &#x963B;&#x5BB3;&#x5264; pifithrin-&alpha;-&#x81ED;&#x5316;&#x3068; (30 &#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;&#xFF09; &#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x304C;&#x5916;&#x56E0;&#x6027;&#x306E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; p53 &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5FA9;&#x5143;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;CDDP &#x306F;&#x3001;p53 &#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3001;Xiap &#x542B;&#x6709;&#x91CF;&#x306E;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x62B5;&#x6297;&#x529B;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x76F8;&#x624B; &#xFF08;C13 &#x203B;&#xFF09; &#x3067;&#x306F; OV2008 &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x30C9;&#x30DF;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C8; &#x30CD;&#x30AC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6; Akt &#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x30BB;&#x30EB; C13 &#x203B; &#x5FA9;&#x5143;&#x3002;Akt2 &#x306E;&#x6052;&#x5E38;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F; CDDP &#x5A92;&#x4ECB;&#x4E0B;&#x65B9;&#x8ABF;&#x6574; Xiap &#x3068; A2780s &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x9632;&#x6B62;&#x3002;Akt2 &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F; chemoresistance &#x3092;&#x7570;&#x306A;&#x308A; Xiap &#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x898F;&#x5236;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x9006;&#x306B;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;Xiap&#x3001;Akt2&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; p53 &#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A8;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x5375;&#x5DE3;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6297;&#x764C;&#x5264;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3001;Akt2 &#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5236;&#x5FA1;&#x56E0;&#x5B50; Xiap &#x304A;&#x3088;&#x3073; p53 &#x306E;&#x5185;&#x5BB9;&#x306E; CDDP &#x30C1;&#x30E3;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B8;&#x5F8C;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Xiap/Akt &#x5F0F;/&#x95A2;&#x6570;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x518D;&#x69CB;&#x6210;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; p53 &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x5375;&#x5DE3;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6297;&#x764C;&#x5264;&#x3092;&#x514B;&#x670D;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;&#x624B;&#x6BB5;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

p53 &#x306F;&#x3001;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;/Akt &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x6297;&#x764C;&#x5264;&#x3072;&#x3068;&#x5375;&#x5DE3;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306E; X &#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306E;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x8981;&#x56E0;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; apoptosis &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (Xiap) &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; X &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xC778;&#xAC04; &#xB09C;&#xC18C; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; cisplatin (CDDP) &#xC800;&#xD56D;&#xC758; &#xACB0;&#xC815; &#xC774;&#xBA70; &#xADF8; &#xB2E4;&#xC6B4; &#xADDC;&#xC81C; Xiap sensitizes &#xC140; CDDP &#xC57C;&#xC0DD; &#xD615; p53&#xC758; &#xC874;&#xC7AC; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC124;&#xB9BD;. &#xB610;&#xD55C;, Xiap &#xCD5C;&#xB300;-&#xC870;&#xC808; phosphatidylinositol 3&#39;-&#xC544;/Akt &#xACBD;&#xB85C; &#xC99D;&#xAC00; Akt &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xD558; &#xC5EC;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; Xiap, Akt, chemoresistance&#xC5D0;&#xC11C; p53 &#xAC04;&#xC758; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xAD00;&#xACC4;&#xB294; &#xC54C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Xiap&#xC640; Akt &#xC218; &#xBCC0;&#xC870; CDDP &#xAC10;&#xB3C4; &#xAC1C;&#xBCC4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; Xiap &#xC790;&#xC0AC;&#xC758; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; Akt&#xB97C; &#xD544;&#xC694;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC9C0;&#xBC30; &#xC74C;&#xC218;&#xAC00; Akt CDDP &#xB09C;&#xC18C; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC; sensitizes (10 &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; M) &#xD6A8;&#xACFC; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; p53 &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xACB0; &#xC11D; &#xB610;&#xB294; p53 &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; pifithrin-&#xC54C;&#xD30C;-hydrobromide (30 &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; M)&#xB85C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; exogenous &#xC57C;&#xC0DD; &#xD615; p53&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBCF5;&#xC6D0;. CDDP p53 &#xC99D;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0; &#xAC10;&#xC18C; Xiap &#xB0B4;&#xC6A9;&#xC744; OV2008 &#xC140;&#xB9CC; &#xAC15;&#xD55C; &#xB300;&#xC751; (C13 *) apoptosis&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; Akt C13 * &#xC140;&#xC5D0; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xBCF5;&#xC6D0;. Constitutively &#xD65C;&#xC131; Akt2 &#xC2DD; Xiap&#xC640; A2780s &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; apoptosis&#xC758; &#xB2E4;&#xC6B4; &#xADDC;&#xC81C; CDDP &#xC911;&#xC7AC; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Akt2 &#xC911;&#xC7AC; chemoresistance Xiap &#xB2E4;&#xC6B4; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158;&#xC73C;&#xB85C; &#xB418;&#xB3CC;&#xB9B4; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; Xiap, Akt2, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; p53 chemoresistance &#xB09C;&#xC18C; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC911;&#xC7AC;&#xC790; &#xBC18;&#xBA74; Akt2 &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; Xiap&#xC640; p53 &#xB0B4;&#xC6A9;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130; CDDP &#xB3C4;&#xC804; &#xD6C4; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Xiap &#xBC0F; Akt &#xC2DD;/&#xD568;&#xC218;&#xC758; &#xC800;&#xD574; chemoresistance &#xB09C;&#xC18C; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD; &#xB610;&#xB294; &#xC7AC;&#xAD6C;&#xC131; &#xC57C;&#xC0DD; &#xD615; p53 &#xD45C;&#xD604;&#xC5D0; &#xADF9;&#xBCF5; &#xD558;&#xB294; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; &#xBC29;&#xBC95;&#xC774; &#xC788;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

p53 &#xC778;&#xAC04; &#xB09C;&#xC18C; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;/Akt &#xC911;&#xC7AC; chemoresistance apoptosis&#xC758; X &#xC5F0;&#xACB0; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC758; &#xD589;&#xB82C;&#xC2DD; &#xC774;&#xB2E4;.

Anteriormente establecimos que x-ligada inhibidor de apoptosis prote&iacute;na (Xiap) es un factor determinante de la resistencia de cisplatino (CDDP) en c&eacute;lulas humanas de c&aacute;ncer de ovario y eso abajo-regulaci&oacute;n de Xiap sensibiliza las c&eacute;lulas a CDDP en presencia de p53 de tipo salvaje. Adem&aacute;s, Xiap arriba-regula el fosfatidilinositol 3&#39;-cinasa/Akt camino por fosforilaci&oacute;n de Akt creciente. Sin embargo, la relaci&oacute;n precisa entre Xiap, Akt y p53 en quimiorresistencia es desconocida. Aqu&iacute; mostramos que tanto Xiap y Akt pueden modular la sensibilidad CDDP individualmente pero que Xiap requiere Akt para su funci&oacute;n completa. Adem&aacute;s, dominante-negativo Akt sensibiliza las c&eacute;lulas de c&aacute;ncer de ovario a CDDP (micro 10 M), un efecto que es ausente en las c&eacute;lulas que expresan la p53 mutante o tratadas con la p53 inhibidor pifithrin-alfa-bromhidrato (30 micro M) pero restaurada por ex&oacute;genos p53 de tipo salvaje. CDDP aument&oacute; p53, disminuy&oacute; el contenido Xiap e indujo apoptosis en c&eacute;lulas de OV2008 pero no en la contraparte resistente (C13 *). Sin embargo, dominante-negativo Akt restaurado todas estas caracter&iacute;sticas a C13 * c&eacute;lulas. Expresi&oacute;n de un Akt2 constitutivamente activa impidi&oacute; CDDP mediada por abajo-regulaci&oacute;n de Xiap y apoptosis en c&eacute;lulas de A2780s. Quimiorresistencia Akt2-mediada no podr&iacute;a revertirse por Xiap abajo-regulaci&oacute;n. Estos resultados sugieren que mientras que Xiap, Akt2 y p53 son importantes mediadores de la quimiorresistencia en c&eacute;lulas de c&aacute;ncer de ovario, Akt2 puede ser un importante regulador de contenidos tanto Xiap y p53 despu&eacute;s desaf&iacute;o CDDP. Inhibici&oacute;n de la expresi&oacute;n/funci&oacute;n Xiap y/o Akt puede ser un medio eficaz de superar la quimiorresistencia en c&eacute;lulas de c&aacute;ncer de ovario que expresaban end&oacute;geno o reconstituido p53 de tipo salvaje.

p53 es un determinante de inhibidor X-ligado de la quimiorresistencia de prote&iacute;na/Akt-mediada de apoptosis en c&eacute;lulas humanas de c&aacute;ncer de ovario.

&#x4EBA;&#x8110;&#x9759;&#x8109;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x8110;) &#x88AB;&#x76F4;&#x64AD;&#x5305;&#x542B;&#x5D4C;&#x5165;&#x5F0F;&#x8110;&#x9759;&#x8109;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE; &#xFF08;UVSMC&#xFF09; &#x7684;&#x5B50;&#x6BEB;&#x7C73;&#x5927;&#x5C0F;&#x80F6;&#x539F;&#x6C7D;&#x7F38;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5706;&#x67F1;&#x7684;&quot;&#x6A21;&#x5757;&quot;&#x7684;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#x8981;&#x7528;&#x4F5C;&#x5E26;&#x8840;&#x7BA1;&#x8482;&#x7684;&#x6784;&#x9020;&#xFF0C;&#x8110;&#x886C;&#x6E20;&#x9053;&#x5374;&#x7531;&#x968F;&#x673A;&#x5305;&#x88C5;&#x7684;&#x539F;&#x4F4D;&#x6A21;&#x5757;&#x6216;&#x66F4;&#x5927;&#x7684;&#x5BB9;&#x5668;&#x5185;&#x3002;&#x5D4C;&#x5165; UVSMC &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x542B; 10 %fbs &#x4E86;&#x4E0D;&#x5229;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x968F;&#x540E;&#x76F4;&#x64AD;&#x8110;&#x4EA4;&#x754C;&#x5904;&#x5F62;&#x6001; &#xFF1B;&#x8110;/UVSMC &#x5757;&#x505A;&#x8110;&#x4ECB;&#x8D28;&#x4E2D; &#xFF08;2 %fbs &#x52A0; 0.03 &#x6BEB;&#x514B;/&#x6BEB;&#x5347;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x7684;&#x8865;&#x5145;&#xFF09; &#x800C;&#x8110;&#x4EC5;&#x80F6;&#x539F;&#x6A21;&#x5757;&#x4E0A;&#x7684;&#x79CD;&#x5B50;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x5D4C;&#x5165; UVSMC &#x5D4C;&#x5165;&#x6539;&#x8FDB;&#x7684; EC &#x4EA4;&#x754C;&#x5904;&#x5F62;&#x6001;&#x4E4B;&#x524D;&#x7684;&#x65E0;&#x8840;&#x6E05;&#x57F9;&#x517B;&#x57FA;&#x4E2D;&#x57F9;&#x517B;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65E0;&#x8840;&#x6E05;&#x57F9;&#x517B;&#xFF0C;&#x8FD8;&#x963B;&#x6B62;&#x80F6;&#x539F;&#x6A21;&#x5757; UVSMC &#x5F15;&#x8D77;&#x6536;&#x7F29;&#x3002;&#x53E6;&#x4E00;&#x65B9;&#x9762;&#xFF0C;&#x5D4C;&#x5165;&#x65E0;&#x8840;&#x6E05;&#x57F9;&#x517B;&#x7684; UVSMC &#x4FC3;&#x8FDB;&#x8110;&#x6269;&#x6563;&#xFF0C;&#x76F8;&#x6BD4;&#x90A3;&#x4E9B;&#x5D4C;&#x6709; 10%&#x8840;&#x6E05;&#x7684;&#x6A21;&#x5757;&#x6CA1;&#x6709;&#x5206;&#x6CCC;&#x7EC6;&#x80DE; UVSMC&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x4EE4;&#x4EBA;&#x60CA;&#x8BB6;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x8BE5;&#x5D4C;&#x5165;&#x7684; UVSMC &#x578B;&#x79CD;&#x5B50;&#x8110;&#x8868;&#x578B;&#xFF0C;&#x53D1;&#x6325;&#x7740;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x53CD;&#x5E94;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8C03;&#x5236;&#x7684; UVSMC &#x57F9;&#x517B;&#x57FA;&#x8840;&#x6E05;&#x6D53;&#x5EA6;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528; UVSMC &#x6765;&#x8C03;&#x5236;&#x7684;&#x8110;&#x8840;&#x6813;&#x6027;&#x8FDB;&#x884C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x7ED3;&#x679C;&#x7684;&#x63A2;&#x7D22;&#x6709;&#x5F85;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x5B9A;&#x5411;&#x5230;&#x4E86;&#x89E3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x673A;&#x7406;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;

&#x6A21;&#x5757;&#x5316;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x6784;&#x9020;&#x542B;&#x6709;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

Human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) were seeded on sub-mm sized collagen cylinders containing embedded umbilical vein smooth muscle cells (UVSMC). These cylindrical "modules" are intended to be used as a vascularized construct, in which HUVEC lined channels are created by the random packing of the modules in situ or within a larger container. Embedding UVSMC cultured in medium containing 10% FBS had an adverse effect on subsequently seeded HUVEC junction morphology; HUVEC/UVSMC co-culturing was done in HUVEC medium (2% FBS with the addition of 0.03 mg/mL endothelial cell growth supplement) as compared to HUVEC seeded on collagen-only modules. In contrast, embedding UVSMC cultured in serum-free medium prior to embedding improved EC junction morphology. Such serum-free culturing, also prevented the UVSMC induced contraction of the collagen modules. On the other hand, embedding serum-free cultured UVSMC promoted HUVEC proliferation and NO secretion compared to those modules embedded with 10% serum cultured UVSMC. These results suggest, not surprisingly, that embedded UVSMC phenotype plays an important role in the seeded HUVEC phenotype, and that the response can be modulated by the UVSMC culture medium serum concentration. These studies were undertaken with a view to using the UVSMC to modulate the thrombogenicity of the HUVEC. Exploration of this outcome awaits further studies directed to understanding the mechanism of the cellular interactions.

A modular tissue engineering construct containing smooth muscle cells and endothelial cells.

Les cellules endoth&#xE9;liales de veine ombilicale (HUVEC) ont &#xE9;t&#xE9; ensemenc&#xE9;es sur la sous-cylindres mm de collag&#xE8;ne de taille contenant embarqu&#xE9;s ombilical des cellules musculaires lisses des veines (UVSMC). Ces cylindriques &#x26;quot;modules&#x26;quot; sont destin&#xE9;s &#xE0; &#xEA;tre utilis&#xE9;s en tant que construction vascularis&#xE9;e, dans lequel les canaux HUVEC align&#xE9;s sont cr&#xE9;&#xE9;s par le garnissage en vrac des modules in situ ou au sein d&#x26;#39;un r&#xE9;cipient plus grand. Int&#xE9;gration UVSMC cultiv&#xE9;es dans un milieu contenant 10% de FBS a eu un effet n&#xE9;gatif sur la suite morphologie graines de jonction HUVEC; HUVEC / UVSMC co-culture a &#xE9;t&#xE9; faite dans le milieu HUVEC (2% FBS avec l&#x26;#39;ajout de 0,03 mg / mL suppl&#xE9;ment croissance des cellules endoth&#xE9;liales) par rapport &#xE0; HUVEC ensemenc&#xE9;es sur du collag&#xE8;ne seuls les modules. Par contre, UVSMC enrobage en culture dans un milieu sans s&#xE9;rum avant l&#x26;#39;enrobage am&#xE9;lior&#xE9;e morphologie de jonction CE. Une telle culture sans s&#xE9;rum, a &#xE9;galement emp&#xEA;ch&#xE9; la contraction induite UVSMC des modules de collag&#xE8;ne. D&#x26;#39;autre part, l&#x26;#39;incorporation sans s&#xE9;rum UVSMC culture promu HUVEC prolif&#xE9;ration et la s&#xE9;cr&#xE9;tion de NO par rapport &#xE0; ces modules embarqu&#xE9;s avec 10% UVSMC culture du s&#xE9;rum. Ces r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent, sans surprise, que le ph&#xE9;notype UVSMC int&#xE9;gr&#xE9; joue un r&#xF4;le important dans le ph&#xE9;notype graines HUVEC, et que la r&#xE9;ponse peut &#xEA;tre modul&#xE9;e par la concentration du milieu de culture UVSMC s&#xE9;rum. Ces &#xE9;tudes ont &#xE9;t&#xE9; entreprises en vue d&#x26;#39;utiliser le UVSMC de moduler la thrombog&#xE9;nicit&#xE9; du HUVEC. Exploration de ce r&#xE9;sultat attend de nouvelles &#xE9;tudes dirig&#xE9;es vers la compr&#xE9;hension du m&#xE9;canisme des interactions cellulaires.

Un g&#xE9;nie tissulaire modulaire Construire contenant des cellules musculaires lisses et les cellules endoth&#xE9;liales

Menschliche Nabelschnur Venen Endothelzellen (HUVEC) wurden auf Sub-mm Gr&ouml;&szlig;e Kollagen Zylindern mit eingebetteten Nabel-Vene glatten Muskelzellen (UVSMC) ausges&auml;t. Diese zylindrischen &quot;Module&quot; sollen als ein gef&auml;&szlig;reichen Konstrukt verwendet werden in der HUVEC ges&auml;umten Kan&auml;le durch die zuf&auml;llige Verpackung der Module vor Ort oder in einem gr&ouml;&szlig;eren Container erstellt werden. Einbettung der UVSMC in Medium mit 10 %, die FBS nachteilige Auswirkungen hatte anschlie&szlig;end auf kultivierten ausges&auml;t HUVEC Kreuzung Morphologie; HUVEC/UVSMC co-culturing geschah in HUVEC Medium (2 % FBS mit dem Zusatz von 0,03 mg/mL endothelial Zelle Wachstum Beilage) verglichen mit HUVEC ausges&auml;t auf nur-Kollagen-Modulen. Im Gegensatz dazu einbetten UVSMC kultivierten in serumfreien Medium vor dem Einbetten verbesserte EG Kreuzung Morphologie. Solche serumfreie Kultivierung, auch verhindert die UVSMC induzierte Kontraktion der Kollagen-Module. Auf der anderen Seite einbetten serumfreie kultivierten UVSMC HUVEC Verbreitung gef&ouml;rdert und keine Sekretion im Vergleich zu diesen Modulen eingebettet mit 10 % Serum kultivierten UVSMC. Diese Ergebnisse legen nahe, nicht &uuml;berraschend, dass eingebettete UVSMC-Ph&auml;notyp spielt eine wichtige Rolle in der ges&auml;ten HUVEC Ph&auml;notyp und, die die Antwort kann durch die Serum-Konzentration in UVSMC Kulturmedium moduliert werden. Diese Studien wurden durchgef&uuml;hrt, um die UVSMC um zu modulieren die Thrombogenit&auml;t der HUVEC. Erforschung der dieses Ergebnis erwartet weitere Studien zum besseren Verst&auml;ndnis des Mechanismus der zellul&auml;ren Interaktionen gerichtet.

Eine modulare Tissue-engineering Konstrukt mit glatten Muskelzellen und Endothelzellen.

Le cellule endoteliali di vena ombelicale umano (HUVEC) sono state seminate su cilindri di collagene sub-mm dimensioni contenenti cellule muscolari lisce embedded vena ombelicale (UVSMC). Questi moduli cilindrici&quot;&quot; sono destinati ad essere utilizzati come un costrutto vascolarizzato, in cui vengono creati canali HUVEC foderato da imballaggio casuale dei moduli in situ o all&#39;interno di un contenitore pi&ugrave; grande. Incorporamento UVSMC colta in mezzo contenente 10% FBS ha avuto un effetto negativo su successivamente seminato morfologia di giunzione HUVEC; HUVEC/UVSMC co-culturing &egrave; stato fatto in mezzo HUVEC (supplemento 2% FBS con l&#39;aggiunta di crescita delle cellule endoteliali 0,03 mg/mL) rispetto al HUVEC seminato su moduli solo collagene. Al contrario, l&#39;incorporamento UVSMC colta in mezzo senza siero prima dell&#39;incorporamento morfologia di giunzione migliorata CE. Tale siero senza coltura, anche impedito la UVSMC indotta contrazione dei moduli collagene. D&#39;altra parte, incorporamento serum-free colta UVSMC promosso proliferazione HUVEC e nessuna secrezione rispetto a quei moduli embedded con 10% siero colta UVSMC. Questi risultati suggeriscono, non sorprendentemente, quello incorporato fenotipo UVSMC gioca un ruolo importante nel fenotipo HUVEC teste di serie, e che la risposta pu&ograve; essere modulata dalla concentrazione del siero UVSMC terreno di coltura. Questi studi sono stati intrapresi allo scopo di utilizzare la UVSMC per modulare la trombogenicit&agrave; delle HUVEC. Esplorazione di questo risultato attende ulteriori studi diretti a capire il meccanismo delle interazioni cellulari.

Un tessuto modulare ingegneria costrutto che contiene cellule muscolari lisce e cellule endoteliali.

&#x30D2;&#x30C8;&#x81CD;&#x5E2F;&#x9759;&#x8108;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;HUVEC&#xFF09;&#x304C;&#x57CB;&#x3081;&#x8FBC;&#x307E;&#x308C;&#x305F;&#x81CD;&#x9759;&#x8108;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;UVSMC&#xFF09;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30B5;&#x30D6;&#x30DF;&#x30EA;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x306E;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x30B7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30C0;&#x30FC;&#x306B;&#x64AD;&#x7A2E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5186;&#x7B52;&#x5F62;&#x306E; &#x26;quot;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EB;&#x26;quot;&#x306F;HUVEC&#x4E26;&#x3093;&#x3067;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306F;in situ&#x3067;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x3088;&#x308A;&#x5927;&#x304D;&#x3044;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30CA;&#x5185;&#x306E;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;&#x5145;&#x586B;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4F5C;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3001;&#x8840;&#x7BA1;&#x69CB;&#x9020;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x76EE;&#x7684;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; HUVEC / UVSMC&#x5171;&#x57F9;&#x990A;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x3001;HUVEC&#x57F9;&#x5730;&#xFF08;0.03 mg / mL&#x306E;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x30B5;&#x30D7;&#x30EA;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x52A0;&#x3048;&#x305F;2&#xFF05;FBS&#xFF09;&#x3067;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x305F;&#x3002;FBS&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x30B7;&#x30FC;&#x30C9;HUVEC&#x63A5;&#x5408;&#x5F62;&#x614B;&#x306B;&#x60AA;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53CA;&#x307C;&#x3057;10&#xFF05;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x57F9;&#x5730;&#x3067;&#x57F9;&#x990A;&#x3057;&#x305F;&#x57CB;&#x3081;&#x8FBC;&#x307F;UVSMC HUVEC&#x306F;&#x3001;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x306E;&#x307F;&#x306E;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EB;&#x4E0A;&#x306B;&#x64AD;&#x7A2E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x57CB;&#x3081;&#x8FBC;&#x307F;UVSMC&#x306F;&#x6539;&#x5584;EC&#x63A5;&#x5408;&#x5F62;&#x614B;&#x3092;&#x57CB;&#x3081;&#x8FBC;&#x3080;&#x524D;&#x306B;&#x7121;&#x8840;&#x6E05;&#x57F9;&#x5730;&#x3067;&#x57F9;&#x990A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x7121;&#x8840;&#x6E05;&#x57F9;&#x990A;&#x3082;&#x3001;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;UVSMC&#x53CE;&#x7E2E;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x65B9;&#x3001;10&#xFF05;&#x8840;&#x6E05;&#x57F9;&#x990A;UVSMC&#x304C;&#x57CB;&#x3081;&#x8FBC;&#x307E;&#x308C;&#x305F;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3001;HUVEC&#x5897;&#x6B96;&#x304A;&#x3088;&#x3073;NO&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x3001;&#x7121;&#x8840;&#x6E05;&#x57F9;&#x990A;UVSMC&#x3092;&#x57CB;&#x3081;&#x8FBC;&#x3080;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x57CB;&#x3081;&#x8FBC;&#x307E;&#x308C;&#x305F;UVSMC&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x304C;&#x30B7;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;HUVEC&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x5FDC;&#x7B54;&#x304C;UVSMC&#x57F9;&#x5730;&#x8840;&#x6E05;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x5909;&#x8ABF;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3001;&#x9A5A;&#x304F;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x304C;&#x3001;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;HUVEC&#x306E;&#x8840;&#x6813;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;UVSMC&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x89B3;&#x70B9;&#x304B;&#x3089;&#x5B9F;&#x65BD;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x63A2;&#x67FB;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x5411;&#x3051;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306A;&#x308B;&#x7814;&#x7A76;&#x3092;&#x304A;&#x5F85;&#x3061;&#x3057;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30E9;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B8;&#x30CB;&#x30A2;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x69CB;&#x7BC9;

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD0EF; &#xC904; &#xC815; &#xB9E5; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; (HUVEC)&#xB294; &#xC784;&#xBCA0;&#xB514;&#xB4DC; &#xD0EF; &#xC904; &#xC815; &#xB9E5; &#xD3C9;&#xD65C; &#xADFC; &#xC138;&#xD3EC; (UVSMC)&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xD558;&#xC704;-m m &#xD06C;&#xAE30;&#xC758; &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90; &#xC2E4;&#xB9B0;&#xB354;&#xC5D0; &#xC2DC;&#xB4DC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC6D0;&#xD1B5;&#xD615; &quot;&#xBAA8;&#xB4C8;&quot; &#xD604;&#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBAA8;&#xB4C8;&#xC758; &#xB610;&#xB294; &#xB354; &#xD070; &#xCEE8;&#xD14C;&#xC774;&#xB108; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC784;&#xC758;&#xC758; &#xD3EC;&#xC7A5; &#xD558; &#xC5EC; &#xC904;&#xC9C0;&#xC5B4; HUVEC &#xCC44;&#xB110;&#xC774; &#xB9CC;&#xB4E4;&#xC5B4;&#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4; vascularized &#xAD6C;&#xBB38;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. UVSMC 10 %fbs &#xD588;&#xB2E4; &#xB098;&#xC911;&#xC5D0; &#xC88B;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC911;&#xAC04;&#xC5D0; &#xAD50;&#xC591;&#xB41C; &#xD3EC;&#xD568; &#xC2DC;&#xB4DC; HUVEC &#xC811;&#xD569; &#xD615;&#xD0DC;; HUVEC/UVSMC co-culturing HUVEC &#xB9E4;&#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD589; &#xD574;&#xC84C;&#xB2E4; (2% FBS 0.03 mg/mL &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC7A5; &#xCD94;&#xAC00; &#xBCF4;&#xCDA9;) &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90; &#xC804;&#xC6A9; &#xBAA8;&#xB4C8;&#xC5D0; &#xC2DC;&#xB4DC; HUVEC&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574;. &#xBC18;&#xBA74;, &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; EC &#xC811;&#xD569; &#xD615;&#xD0DC;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xAE30; &#xC804;&#xC5D0; &#xD608; &#xCCAD; &#xBB34;&#xB8CC; &#xB9E4;&#xCCB4; &#xAD50;&#xC591;&#xB41C; UVSMC &#xD3EC;&#xD568;. &#xD608; &#xCCAD; &#xBB34;&#xB8CC; &#xACBD;&#xC791; &#xAC19;&#xC740; &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90; &#xBAA8;&#xB4C8;&#xC758; UVSMC &#xC720;&#xB3C4; &#xC218;&#xCD95;&#xC744; &#xB610;&#xD55C; &#xB9C9; &#xC558;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xB978; &#xD55C;&#xD3B8;&#xC73C;&#xB85C;, HUVEC &#xD655;&#xC0B0; &#xCD94;&#xC9C4; &#xAD50;&#xC591;&#xB41C; UVSMC &#xD608; &#xCCAD; &#xBB34;&#xB8CC;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xACE0; &#xC544;&#xBB34; &#xBD84; &#xBE44; 10% &#xD608; &#xCCAD;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xBAA8;&#xB4C8;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xAD50;&#xC591; UVSMC. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xB2F9;&#xC5F0;&#xD55C; &#xC77C;&#xB85C;, &#xADF8; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; UVSMC &#xD615; &#xC2DC;&#xB4DC; HUVEC &#xD45C;&#xD604; &#xD615;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4; &#xACE0; &#xC751;&#xB2F5; UVSMC &#xBB38;&#xD654; &#xB9E4;&#xCCB4; &#xD608; &#xCCAD; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC758;&#xD574; &#xBCC0;&#xC870; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; HUVEC&#xC758; thrombogenicity&#xB97C; &#xBCC0;&#xC870; &#xD558;&#xB294; UVSMC&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBCFC; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xCC29;&#xC218; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xACB0;&#xACFC;&#xC758; &#xD0D0;&#xC0AC; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC9C0;&#xC2DC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xB354; &#xAE30;&#xB2E4;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBD80;&#xB4DC;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xADFC;&#xC721; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xAD6C;&#xC870; &#xACF5;&#xD559; &#xBAA8;&#xB4C8; &#xC870;&#xC9C1;.

Las c&#xE9;lulas endoteliales de vena umbilical (HUVEC) se sembraron en el sub-mm cilindros de col&#xE1;geno que contienen tama&#xF1;o incrustados vena umbilical c&#xE9;lulas de m&#xFA;sculo liso (UVSMC). Estos cil&#xED;ndricos &#x26;quot;m&#xF3;dulos&#x26;quot; est&#xE1; destinado a ser utilizado como un constructo vascularizado, en el que los canales de HUVEC alineados son creados por la empaquetadura aleatoria de los m&#xF3;dulos in situ o dentro de un recipiente m&#xE1;s grande. Incrustaci&#xF3;n UVSMC cultivaron en medio que conten&#xED;a FBS al 10% ten&#xED;a un efecto adverso sobre la morfolog&#xED;a posteriormente uni&#xF3;n sembrado HUVEC; HUVEC / UVSMC co-cultivo se realiz&#xF3; en medio HUVEC (2% de FBS con la adici&#xF3;n de 0,03 mg / ml suplemento crecimiento para c&#xE9;lulas endoteliales) en comparaci&#xF3;n a HUVEC sembradas en col&#xE1;geno de s&#xF3;lo m&#xF3;dulos. En contraste, la incrustaci&#xF3;n UVSMC cultivaron en medio libre de suero antes de la incrustaci&#xF3;n de morfolog&#xED;a mejorada uni&#xF3;n CE. Este suero libre de cultivo, tambi&#xE9;n impidi&#xF3; que la contracci&#xF3;n inducida UVSMC de los m&#xF3;dulos de col&#xE1;geno. Por otro lado, la incrustaci&#xF3;n libre de suero UVSMC cultivadas promovido HUVEC proliferaci&#xF3;n y la secreci&#xF3;n de NO en comparaci&#xF3;n con los m&#xF3;dulos integrados con suero UVSMC 10% cultivadas. Estos resultados sugieren, no es sorprendente, que el fenotipo incrustado UVSMC juega un papel importante en el fenotipo sembrado HUVEC, y que la respuesta puede ser modulada por la concentraci&#xF3;n de medio de cultivo suero UVSMC. Estos estudios se llevaron a cabo con vistas a utilizar el UVSMC para modular la trombogenicidad de la HUVEC. La exploraci&#xF3;n de este resultado aguarda futuros estudios dirigidos a comprender el mecanismo de las interacciones celulares.

Una ingenier&#xED;a de tejidos modular construcci&#xF3;n que contiene c&#xE9;lulas de m&#xFA;sculo liso y c&#xE9;lulas endoteliales

&#x542B;&#x6709;&#x80F6;&#x539F;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x4EA4;&#x8054;&#xFF0C;&#x884D;&#x751F;&#x54C1;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x5F88;&#x77ED; oligo(lactic acid) &#x6BB5;&#x901A;&#x8FC7; poloxamine &#x4E0E; L-&#x4E19;&#x4EA4;&#x916F;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x548C;&#x4EE5;&#x540E;&#x6DFB;&#x52A0;&#x7684;&#x4E0D;&#x9971;&#x548C;&#x952E;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x6240;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684; remodelable poloxamine &#x4FEE;&#x6539; poloxamine &#x4E0E;&#x7532;&#x57FA;&#x4E19;&#x70EF;&#x9170;&#x6C2F;&#x3002;&#x5149;&#x76D8;&#x9000;&#x5316;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E; lactoyl &#x514D;&#x8D39;&#x6837;&#x54C1;&#x7684;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x76F8;&#x6BD4;&#x66F4;&#x5FEB;&#x51CF;&#x80A5;&#x3002;&#x5236;&#x4F5C;&#x4E86;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5305;&#x542B;&#x6A21;&#x5757; (HepG2 &#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x8110;&#x9759;&#x8109;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE; (UVSMC) &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x7C7B;&#x578B;&#xFF09;&#x3002;&#x751F;&#x6D3B;/&#x6B7B;&#x6D77;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x4EA4;&#x8054;&#x540E;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x9AD8;&#x751F;&#x5B58;&#x6C34;&#x5E73;&#x4E3A; HepG2 &#x548C; UVSMC &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x5728;&#x96BE;&#x964D;&#x89E3;&#x6A21;&#x5757;&#x6CA1;&#x6709;&#x968F;&#x7740;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x63A8;&#x79FB;&#x6539;&#x53D8;&#x5F62;&#x72B6;&#xFF0C;lactoyl poloxamine &#x77E9;&#x9635;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x9762;&#x7C97;&#x7CD9;&#x5EA6;&#x8868;&#x660E;&#x9010;&#x6B65;&#x6536;&#x7F29;&#x548C;&#x5927;&#x5C0F;&#x51CF;&#x5C11;&#x548C;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8C03;&#x67E5;&#x7ED3;&#x679C;&#x7B26;&#x5408;&#x9884;&#x671F;&#x7684; lactoyl &#x5BFC;&#x6570;&#x7684;&#x964D;&#x89E3;&#x3002;UVSMC &#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB; (CRL 2481&#xFF09; &#x5D4C;&#x5165;&#x5728; LA-poloxamine/&#x80F6;&#x539F;&#x86CB;&#x767D;&#x7279;&#x8272;&#x7684;&#x7EC6;&#x957F;&#x7684;&#x5F62;&#x72B6;&#x663E;&#x793A;&#x5728;&#x7B2C; 9 &#x5929;&#x3002;UVSMC &#x539F;&#x7535;&#x6C60;&#x8868;&#x73B0;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x5728;&#x80F6;&#x539F;&#x51DD;&#x80F6;&#x4E2D;&#x770B;&#x5230;&#xFF1A; &#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5F62;&#x6210;&#x5B64;&#x7ACB;&#x7684;&#x56E2;&#x7C07;&#x901A;&#x8FC7;&#x9010;&#x6E10;&#x5931;&#x53BB;&#x6D3B;&#x529B;&#x7684;&#x77E9;&#x9635;&#x3002;&#x5BF9;&#x7EC4;&#x57F9;&#x805A;&#x82EF;&#x4E59;&#x70EF;&#x76F8;&#x540C;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x805A;&#x5408;&#xFF0C;&#x5E76;&#x6CA1;&#x6709;&#x8FBE;&#x5230;&#x6C47;&#x5408;&#x3002;&#x5E26;&#x6709;&#x5D4C;&#x5165;&#x5F0F; CRL 2481 UVSMC &#x6A21;&#x5757;&#x5BFC;&#x81F4;&#x66F4;&#x597D;&#x7684;&#x521D;&#x59CB;&#x7C98;&#x9644;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x66F4;&#x9AD8;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x7684;&#x8868;&#x9762;&#x8986;&#x76D6;&#x6BD4;&#x770B;&#x5230;&#x4E0E;&#x65E0; UVSMC &#x7684;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;&#x4E0E;&#x5D4C;&#x5165;&#x4E3B; UVSMC&#xFF0C;&#x770B;&#x5230;&#x4E00;&#x4E9B; EC &#x9644;&#x4EF6;&#x548C;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x7F1D;&#x9699;&#x3002;&#x8BE5;&#x6A21;&#x5F0F;&#x4E0D;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5F97;&#x5F88;&#x597D;&#x3002;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x6539;&#x8FDB; (&#x548C;&#x8868;&#x5F81;&#xFF09;&#xFF0C;lactoyl poloxamine &#x5BFC;&#x6570;&#x65F6;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x7528;&#x4E3A;&#x6A21;&#x5757;&#x5316;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x652F;&#x67B6;&#x6750;&#x6599;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x91CD;&#x6784;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x8003;&#x8651;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;

&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5305;&#x542B;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x6A21;&#x5757;&#x7684; Lactoyl-poloxamine/&#x80F6;&#x539F;&#x57FA;&#x8D28;&#x3002;

Collagen-containing crosslinked, remodelable poloxamine derivatives were produced by introducing very short oligo(lactic acid) segments through the reaction of poloxamine with L-lactide and the later addition of unsaturated bonds by the reaction of modified poloxamine with methacryloyl chloride. Degradation studies on discs indicated a faster weight loss in comparison to the stability of lactoyl-free samples. Cell-containing modules (both HepG2 cells and two different umbilical vein smooth muscle cell (UVSMC) cell-types) were produced. Live/Dead assay showed high survival levels for both HepG2 and UVSMC cell types after crosslinking. While nondegradable modules did not change shape over time, lactoyl-poloxamine matrices showed a gradual shrinkage and size decrease and an increase in the roughness of the surface. These findings were consistent with the expected degradability of the lactoyl derivative. A UVSMC cell line (CRL-2481) embedded in a LA-poloxamine/collagen matrix showed the characteristic elongated shape at day 9. UVSMC primary cells behaved in a manner similar to that seen in collagen gels: these cells formed isolated clusters through the matrix that gradually lost viability. On tissue culture polystyrene the same cells aggregated and did not reach confluence. Modules with embedded CRL-2481 UVSMC led to a better initial adhesion of endothelial cells and a higher extent of surface coverage than seen with the UVSMC-free system. With embedded primary UVSMC, some EC attachment and formation of gap junctions was seen. The pattern was not well organized. With further improvement (and characterization), the lactoyl poloxamine derivative is potentially useful as a scaffold for modular tissue engineering, when tissue remodeling is an important consideration.

Lactoyl-poloxamine/collagen matrix for cell-containing tissue engineering modules.

Collag&#xE8;ne r&#xE9;ticul&#xE9; contenant, d&#xE9;riv&#xE9;s poloxamine remodelable ont &#xE9;t&#xE9; produits par introduction de tr&#xE8;s courtes oligo (acide lactique) des segments &#xE0; travers la r&#xE9;action des poloxamine avec la L-lactide et l&#x26;#39;addition ult&#xE9;rieure de liaisons non satur&#xE9;es par la r&#xE9;action de la poloxamine modifi&#xE9; avec du chlorure de m&#xE9;thacryloyle. Les &#xE9;tudes de d&#xE9;gradation sur disques a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; une perte de poids plus rapide en comparaison &#xE0; la stabilit&#xE9; de lactoyl-&#xE9;chantillons gratuits. Contenant des cellules (les deux modules cellules HepG2 et deux autre veine ombilicale des cellules musculaires lisses (UVSMC) types de cellules) ont &#xE9;t&#xE9; produites. Live / Dead test ont montr&#xE9; des niveaux &#xE9;lev&#xE9;s de survie pour les deux types de cellules HepG2 et UVSMC apr&#xE8;s r&#xE9;ticulation. Tandis que les modules non d&#xE9;gradables ne pas changer de forme au cours du temps, lactoyl-poloxamine matrices affichent une diminution progressive de r&#xE9;tr&#xE9;cissement et de la taille et une augmentation de la rugosit&#xE9; de la surface. Ces r&#xE9;sultats &#xE9;taient coh&#xE9;rents avec la d&#xE9;gradabilit&#xE9; attendu de la d&#xE9;riv&#xE9;e lactoyl. Une lign&#xE9;e cellulaire UVSMC (CRL-2481) incorpor&#xE9; dans une matrice LA-poloxamine/collagen montr&#xE9; la forme caract&#xE9;ristique de forme allong&#xE9;e au jour 9. UVSMC cellules primaires s&#x26;#39;est comport&#xE9; d&#x26;#39;une mani&#xE8;re similaire &#xE0; celle observ&#xE9;e dans des gels de collag&#xE8;ne: ces cellules ont form&#xE9; des groupes isol&#xE9;s dans la matrice qui a progressivement perdu leur viabilit&#xE9;. Le polystyr&#xE8;ne culture de tissus les m&#xEA;mes cellules agr&#xE9;g&#xE9;es et ne sont pas parvenus confluent. Modules avec incorpor&#xE9; CRL-2481 UVSMC conduit &#xE0; une meilleure adh&#xE9;rence initiale des cellules endoth&#xE9;liales et une plus grande &#xE9;tendue de la couverture de la surface &#xE0; ceux observ&#xE9;s avec le syst&#xE8;me UVSMC-libre. Avec UVSMC primaire int&#xE9;gr&#xE9;, un certain attachement CE et la formation de jonctions a &#xE9;t&#xE9; vu. Le mod&#xE8;le n&#x26;#39;a pas &#xE9;t&#xE9; bien organis&#xE9;. Avec de nouvelles am&#xE9;liorations (et la caract&#xE9;risation), le d&#xE9;riv&#xE9; poloxamine lactoyl est potentiellement utile comme un &#xE9;chafaudage modulaire pour l&#x26;#39;ing&#xE9;nierie tissulaire, quand le remodelage tissulaire est un facteur important.

Matrice Lactoyl-poloxamine/collagen pour les cellules contenant des modules g&#xE9;nie tissulaire

Kollagen-haltigen vernetzt, remodelable Poloxamine produzierte Derivate wurden durch die Einf&uuml;hrung von sehr kurzen Oligo(lactic acid) Segmente durch die Reaktion von Poloxamine mit L-Lactid und die sp&auml;tere Einf&uuml;gung der unges&auml;ttigten Bindungen durch Reaktion von ge&auml;ndert Poloxamine mit Methacryloyl Chlorid. Abbau Untersuchungen auf Scheiben ergeben einen schnelleren Gewichtsverlust im Vergleich zu der Stabilit&auml;t von Lactoyl-kostenlose Proben. Zelle-haltigen Module (HepG2-Zellen und zwei verschiedenen Nabelschnur Vene Glattmuskel-Zelle (UVSMC)-Zelltypen) wurden produziert. Live/Dead Assay zeigte hohe &uuml;berleben Ebenen f&uuml;r HepG2 und UVSMC Zelltypen nach Vernetzung. W&auml;hrend nondegradable Module nicht Form im Laufe der Zeit Lactoyl-Poloxamine Matrizen zeigten einer allm&auml;hlichen Schrumpfung und Dateigr&ouml;&szlig;e verringern und ein Anstieg der Rauheit der Oberfl&auml;che &auml;nderten. Diese Erkenntnisse waren die erwarteten Abbaubarkeit des Derivats Lactoyl entsprechen. Eine UVSMC-Zelllinie (CRL-2481) eingebettet in einer LA-Poloxamine/Kollagen-Matrix zeigte die charakteristische l&auml;ngliche Form an Tag 9. UVSMC-Prim&auml;rzellen verhielt sich &auml;hnlich wie man Sie aus Kollagen-Gel: diese Zellen gebildet isoliert Cluster durch die Matrix, die Lebensf&auml;higkeit allm&auml;hlich verloren. Gewebekultur Polystyrol denselben Zellen aggregiert und Zusammenfluss nicht erreicht. Module mit eingebetteter CRL-2481 UVSMC f&uuml;hrte zu eine bessere anf&auml;ngliche Adh&auml;sion von Endothelzellen und einem h&ouml;heren Grad der Oberfl&auml;che Abdeckung als mit dem UVSMC-freie System gesehen. Mit eingebetteten prim&auml;re UVSMC einige EG-Anlage und die Bildung von Gap Junctions gesehen. Das Muster war nicht gut organisiert. Mit Verbesserungen (und Charakterisierung) ist die Lactoyl Poloxamine Ableitung Wildarten als ein Ger&uuml;st f&uuml;r modulare Tissue-Engineering, beim Umbau des Gewebes eine wichtige &Uuml;berlegung ist.

Lactoyl-Poloxamine/Kollagen-Matrix f&uuml;r Zelle-haltigen Gewebe-engineering-Module.

Contenenti collagene reticolato, remodelable poloxamine derivati sono stati prodotti con l&#39;introduzione di oligo(lactic acid) molto brevi segmenti attraverso la reazione di poloxamine con L-lactide e la successiva aggiunta di legami insaturi dalla reazione di modificato poloxamine con cloruro di methacryloyl. Studi di degradazione su dischi indicato una perdita di peso pi&ugrave; veloce rispetto alla stabilit&agrave; dei campioni gratuiti lactoyl. Sono state prodotte delle cellule contenenti moduli (sia le cellule HepG2 e ombelicale due diversi tipi di cellule muscolari lisce delle cellule (UVSMC) la vena). Live/Dead test hanno mostrato livelli di sopravvivenza elevata per i tipi di cellule HepG2 sia UVSMC dopo la reticolazione. Mentre moduli imputrescibile non hanno cambiato forma nel corso del tempo, lactoyl-poloxamine matrici ha mostrato un ritiro graduale e diminuzione di dimensione e un aumento della rugosit&agrave; della superficie. Questi risultati sono coerenti con la degradabilit&agrave; prevista del derivato lactoyl. Una linea cellulare UVSMC (CRL-2481) incorporati in una matrice di collagene/LA-poloxamine ha mostrata la caratteristica forma allungata al giorno 9. UVSMC celle primarie si &egrave; comportato in un modo simile a quello visto in gel di collagene: queste cellule formano grappoli isolati attraverso la matrice che gradualmente perso vitalit&agrave;. Sulla coltura del tessuto polistirolo le stesse cellule aggregate e non raggiunse la confluenza. Moduli con embedded CRL-2481 UVSMC ha portato a una migliore aderenza iniziale delle cellule endoteliali e un limite superiore di copertura superficiale quanto visto con il sistema UVSMC-free. Con incorporato UVSMC primaria, &egrave; stato visto alcuni CE attaccamento e formazione di giunzioni di gap. Il modello non &egrave; stato ben organizzato. Con ulteriore miglioramento (e caratterizzazione), il lactoyl poloxamine derivato &egrave; potenzialmente utile come un&#39;impalcatura per ingegneria tissutale modulare, quando il rimodellamento del tessuto &egrave; una considerazione importante.

Matrice di collagene/Lactoyl-poloxamine per cella contenente moduli ingegneria dei tessuti.

&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x542B;&#x6709;&#x67B6;&#x6A4B;remodelable poloxamine&#x8A98;&#x5C0E;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;L-&#x30E9;&#x30AF;&#x30C1;&#x30C9;&#x3068;&#x5869;&#x5316;&#x30E1;&#x30BF;&#x30AF;&#x30EA;&#x30ED;&#x30A4;&#x30EB;&#x3068;&#x5909;&#x66F4;&#x3055;&#x308C;&#x305F;polo&#x200B;&#x200B;xamine&#x306E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x4E0D;&#x98FD;&#x548C;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x5F8C;&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x305F;polo&#x200B;&#x200B;xamine&#x306E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x77ED;&#x3044;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x4E73;&#x9178;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x5C0E;&#x5165;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x88FD;&#x9020;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x30C7;&#x30A3;&#x30B9;&#x30AF;&#x306E;&#x52A3;&#x5316;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;lactoyl-&#x7121;&#x6599;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x901F;&#x3044;&#x6E1B;&#x91CF;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x542B;&#x6709;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EB;&#xFF08;HepG2&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;2&#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x81CD;&#x9759;&#x8108;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;UVSMC&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#xFF09;&#x3092;&#x88FD;&#x9020;&#x3057;&#x305F;&#x3002; LIVE / DEAD&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;&#x67B6;&#x6A4B;&#x5F8C;HepG2&#x304A;&#x3088;&#x3073;UVSMC&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306B;&#x9AD8;&#x3044;&#x751F;&#x5B58;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x975E;&#x5206;&#x89E3;&#x6027;&#x306E;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x6642;&#x9593;&#x3092;&#x304B;&#x3051;&#x3066;&#x5F62;&#x72B6;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;lactoyl-poloxamine&#x884C;&#x5217;&#x306F;&#x5F90;&#x3005;&#x306B;&#x53CE;&#x7E2E;&#x3068;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3068;&#x8868;&#x9762;&#x306E;&#x7C97;&#x3055;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306F;&#x3001;lactoyl&#x8A98;&#x5C0E;&#x4F53;&#x306E;&#x4E88;&#x60F3;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5206;&#x89E3;&#x6027;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002; LA-poloxamine/collagen&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x4E2D;&#x306B;&#x57CB;&#x3081;&#x8FBC;&#x307E;&#x308C;&#x305F;UVSMC&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#xFF08;CRL-2481&#xFF09;&#x306F;9&#x65E5;&#x76EE;&#x3067;&#x7279;&#x5FB4;&#x7684;&#x306A;&#x7D30;&#x9577;&#x3044;&#x5F62;&#x72B6;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; UVSMC&#x521D;&#x4EE3;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x30B2;&#x30EB;&#x306B;&#x898B;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x632F;&#x308B;&#x821E;&#x3046;&#xFF1A;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x5F90;&#x3005;&#x306B;&#x751F;&#x5B58;&#x6027;&#x3092;&#x5931;&#x3063;&#x305F;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D44;&#x7E54;&#x57F9;&#x990A;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B9;&#x30C1;&#x30EC;&#x30F3;&#x4E0A;&#x306E;&#x540C;&#x3058;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x96C6;&#x7D04;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x5408;&#x6D41;&#x70B9;&#x306B;&#x9054;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x57CB;&#x3081;&#x8FBC;&#x307E;&#x308C;&#x305F;CRL-2481 UVSMC&#x306E;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;UVSMC&#x30D5;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x898B;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x3001;&#x8868;&#x9762;&#x88AB;&#x8986;&#x7387;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x306E;&#x512A;&#x308C;&#x305F;&#x521D;&#x671F;&#x63A5;&#x7740;&#x529B;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x57CB;&#x3081;&#x8FBC;&#x307E;&#x308C;&#x305F;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;UVSMC&#x3067;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;EC&#x306E;&#x6DFB;&#x4ED8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3068;&#x30AE;&#x30E3;&#x30C3;&#x30D7;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x304C;&#x898B;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x3088;&#x304F;&#x6574;&#x7406;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x66F4;&#x306A;&#x308B;&#x6539;&#x5584;&#xFF08;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7279;&#x6027;&#xFF09;&#x3068;&#x3001;lactoyl poloxamine&#x8A98;&#x5C0E;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x30EA;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x304C;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8003;&#x616E;&#x4E8B;&#x9805;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30E9;&#x30FC;&#x7D44;&#x7E54;&#x5DE5;&#x5B66;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8DB3;&#x5834;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6709;&#x7528;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3002;

&#x7D30;&#x80DE;&#x542B;&#x6709;&#x7D44;&#x7E54;&#x5DE5;&#x5B66;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;Lactoyl-poloxamine/collagen&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;

&#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90;&#xC774; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; crosslinked, &#xD30C;&#xC0DD; &#xC0C1;&#xD488;&#xC758; &#xBC18;&#xC751;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; L lactide&#xC640; poloxamine&#xC758; &#xBC18;&#xC751;&#xACFC; &#xBD88;&#xD3EC;&#xD654; &#xCC44;&#xAD8C;&#xC758; &#xCD5C;&#xC2E0; &#xCD94;&#xAC00; &#xD1B5;&#xD574; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC9E7;&#xC740; oligo(lactic acid) &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xB97C; &#xB3C4;&#xC785; &#xD558; &#xC5EC; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; remodelable poloxamine poloxamine methacryloyl &#xC5FC;&#xD654;&#xB85C; &#xC218;&#xC815;. &#xB514;&#xC2A4;&#xD06C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC800;&#xD558; &#xC5F0;&#xAD6C; lactoyl &#xBB34;&#xB8CC; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC758; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xBE60;&#xB978; &#xCCB4;&#xC911; &#xAC10;&#xC18C;&#xB97C; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xC140;&#xC774; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xBAA8;&#xB4C8; (HepG2 &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xBC30;&#xAF3D; &#xC815; &#xB9E5; &#xD3C9;&#xD65C; &#xADFC; &#xC138;&#xD3EC; (UVSMC) &#xC140; &#xD0C0;&#xC785;) &#xC0DD;&#xC0B0; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;/&#xC8FD;&#xC740; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xAC00;&#xAD50; &#xD6C4; HepG2 &#xBC0F; UVSMC &#xC140; &#xD615;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC218;&#xC900; &#xB192;&#xC740; &#xC0DD;&#xC874; &#xD588;&#xB2E4;. Nondegradable &#xBAA8;&#xB4C8; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC774; &#xC9C0;&#xB0A8;&#xC5D0; &#xC170;&#xC774;&#xD504;&#xB97C; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740;, &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; lactoyl poloxamine &#xD589;&#xB82C; &#xD45C;&#xBA74; &#xAC70;&#xCE60;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC810;&#xC9C4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC218;&#xCD95; &#xBC0F; &#xD06C;&#xAE30; &#xAC10;&#xC18C;&#xC640; &#xC99D;&#xAC00; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; lactoyl &#xD30C;&#xC0DD; &#xC0C1;&#xD488;&#xC758; &#xC608;&#xC0C1;&#xB41C; &#xBD84;&#xD574;&#xC131;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xD588;&#xB2E4;. UVSMC &#xC140; &#xB77C;&#xC778; (CRL-2481) &#xD558;&#xB8E8; 9&#xC5D0;&#xC11C; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC801;&#xC778; &#xAE38;&#xCB49;&#xD55C; &#xBAA8;&#xC591;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xB77C;-poloxamine/&#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C;. UVSMC 1 &#xCC28; &#xC140; &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90; &#xC824;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF8; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xD589;&#xB3D9;: &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC140; &#xC810;&#xCC28; &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xC783;&#xC740; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xACA9;&#xB9AC; &#xB41C; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; &#xD615;&#xC131;. &#xC870;&#xC9C1; &#xBB38;&#xD654; &#xD3F4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xD2F0; &#xB80C;&#xC5D0; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xC140; &#xC9D1;&#xACC4;&#xC640; &#xD569;&#xB958;&#xB97C; &#xB3C4;&#xB2EC; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. UVSMC &#xBB34;&#xB8CC; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF8; &#xAC83; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; CRL-2481 UVSMC &#xBAA8;&#xB4C8; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB354; &#xB098;&#xC740; &#xCD08;&#xAE30; &#xC811;&#xCC29; &#xB825; &#xBC0F; &#xD45C;&#xBA74; &#xAC80;&#xC0AC;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xC815;&#xB3C4;&#xB97C; &#xC774;&#xB04C;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xAE30;&#xBCF8; UVSMC&#xC640; &#xC77C;&#xBD80; EC &#xCCA8;&#xBD80; &#xBC0F; &#xAC2D; &#xC811;&#xD569;&#xBD80;&#xC758; &#xD615;&#xC131; &#xBAA8;&#xC2B5; &#xC774;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xD328;&#xD134; &#xC798; &#xC870;&#xC9C1; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xCD94;&#xAC00; &#xAC1C;&#xC120; (&#xBC0F; &#xD2B9;&#xC131;&#xD654;) lactoyl poloxamine &#xD30C;&#xC0DD; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC720;&#xC6A9; &#xBAA8;&#xB4C8;&#xD615; &#xC870;&#xC9C1; &#xACF5;&#xD559;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBE44; &#xACC4; &#xC870;&#xC9C1; &#xB9AC; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1; &#xB54C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xACE0;&#xB824; &#xC0AC;&#xD56D;&#xC774;.

Lactoyl-poloxamine/&#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xC870;&#xC9C1; &#xACF5;&#xD559; &#xBAA8;&#xB4C8; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC140;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C;.

El col&#xE1;geno que contiene reticulado, derivados remodelable poloxamina se produjeron mediante la introducci&#xF3;n de muy cortos oligo (&#xE1;cido l&#xE1;ctico) a trav&#xE9;s de los segmentos de la reacci&#xF3;n de poloxamina con L-lactida y la adici&#xF3;n posterior de enlaces insaturados mediante la reacci&#xF3;n de poloxamina modificada con cloruro de metacriloilo. Los estudios de degradaci&#xF3;n en los discos se indica una p&#xE9;rdida de peso m&#xE1;s r&#xE1;pido en comparaci&#xF3;n con la estabilidad de lactoil libres de muestras. C&#xE9;lulas que contienen los m&#xF3;dulos (dos c&#xE9;lulas HepG2 y dos celulares de diferentes vena umbilical del m&#xFA;sculo liso (UVSMC) los tipos de c&#xE9;lulas) fueron producidos. Live / Dead ensayo mostr&#xF3; altos niveles de supervivencia de ambos tipos de c&#xE9;lulas HepG2 y UVSMC despu&#xE9;s de la reticulaci&#xF3;n. Mientras que los m&#xF3;dulos no degradables no cambian de forma con el tiempo, lactoil-poloxamina matrices mostr&#xF3; una disminuci&#xF3;n gradual de la contracci&#xF3;n y tama&#xF1;o y un aumento en la rugosidad de la superficie. Estos resultados fueron consistentes con la degradabilidad de espera de la derivada lactoil. Una l&#xED;nea celular UVSMC (CRL-2481) embebido en una matriz LA-poloxamine/collagen mostr&#xF3; la forma alargada caracter&#xED;stica en el d&#xED;a 9. UVSMC c&#xE9;lulas primarias se comport&#xF3; de manera similar a la observada en geles de col&#xE1;geno: estas c&#xE9;lulas formaron grupos aislados a trav&#xE9;s de la matriz que pierde gradualmente la viabilidad. En poliestireno de cultivo de tejidos de las mismas c&#xE9;lulas agregadas y no alcanzan la confluencia. Los m&#xF3;dulos con incrustado CRL-2481 UVSMC llevado a una mejor adhesi&#xF3;n inicial de las c&#xE9;lulas endoteliales y un grado m&#xE1;s alto de cobertura de superficie que ver con el sistema de UVSMC libre. Con UVSMC incorporado primaria, cierto apego CE y la formaci&#xF3;n de uniones fue visto. El patr&#xF3;n no estaba bien organizada. Con nuevas mejoras (y caracterizaci&#xF3;n), la derivada poloxamina lactoil es potencialmente &#xFA;til como un andamio para la ingenier&#xED;a de tejidos modular, cuando la remodelaci&#xF3;n de tejidos es una consideraci&#xF3;n importante.

Lactoyl-poloxamine/collagen Matriz para la c&#xE9;lula que contienen m&#xF3;dulos de Ingenier&#xED;a de Tejidos

&#x529F;&#x80FD;&#x6027;&#x5FC3;&#x810F;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7F16;&#x5236;&#x65F6;&#x91C7;&#x7528;&#x6A21;&#x5757;&#x5316;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4E0E;&#x521B;&#x5EFA;&#x5E26;&#x8840;&#x7BA1;&#x8482;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;&#x5927;&#x9F20;&#x4E3B;&#x52A8;&#x8109;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (RAEC) &#x88AB;&#x690D;&#x5165;&#x5230;&#x4E9A;&#x6BEB;&#x7C73;&#x6CE2;&#x5927;&#x5C0F;&#x7684;&#x6A21;&#x5757;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x4E00;&#x6240;&#x4F5C;&#x725B;&#x80F6;&#x539F;&#x8865;&#x5145; Matrigel &trade; (25 %v / v) &#x5D4C;&#x5165;&#x4E0E;&#x5FC3;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x5398;&#x7C73;)-&#x5BCC;&#x65B0;&#x751F;&#x5927;&#x9F20;&#x5FC3;&#x810F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x7EC4;&#x88C5;&#x6210;&#x6536;&#x7F29;&#xFF0C;&#x5927;&#x5B54;&#xFF0C;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x8868;&#x7684;&#x6784;&#x9020;&#x3002;&#x6A21;&#x5757; (RAEC) &#x800C;&#x4F53;&#x5916; 10%&#x725B;&#x8840;&#x6E05; (BS) &#x662F;&#x66F4;&#x52A0;&#x6536;&#x7F29;&#xFF0C;&#x66F4;&#x52A0;&#x9002;&#x5E94;&#x5916;&#x754C;&#x523A;&#x6FC0; &#xFF08;&#x52B1;&#x78C1;&#x95E8;&#x69DB;&#x4F4E;&#x3001; &#x9AD8;&#x7684;&#x6700;&#x5927;&#x7684;&#x6355;&#x83B7;&#x7387;&#x548C;&#x66F4;&#x5927; en &#x8138;&#x5206;&#x6570;&#x9762;&#x79EF;&#x53D8;&#x5316;&#xFF09; &#x6BD4;&#x4F53;&#x5916; 10%&#x80CE;&#x513F; BS &#x7684;&#x6A21;&#x5757;&#x3002;Matrigel &#x77E9;&#x9635;&#x4E2D;&#x7684;&#x7EB3;&#x5165; 25%&#x51CF;&#x5C11;&#x52B1;&#x78C1;&#x9608;&#x503C;&#x548C;&#x589E;&#x52A0;&#x9762;&#x79EF;&#x53D8;&#x5316;&#x5206;&#x6570;&#x76F8;&#x5BF9;&#x80F6;&#x539F;&#x552F;&#x4E00;&#x6A21;&#x5757; &#xFF08;RAEC&#xFF09; &#x800C;&#x4E8E;&#x3002;&#x5171;&#x57F9;&#x517B;&#x4E2D;&#x7B49;&#xFF0C;&#x5305;&#x542B; 10 %bs&#xFF0C;&#x4F4E; Mg2 + (0.814 &#x6BEB;&#x7C73;)&#xFF0C;&#x548C;&#x6B63;&#x5E38;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6; (5.5 &#x6BEB;&#x7C73;)&#xFF0C;&#x7528;&#x6765;&#x7EF4;&#x62A4; RAEC &#x4EA4;&#x754C;&#x5904;&#x5F62;&#x6001; &#xFF08;&#x9ECF;&#x86CB;&#x767D;) &#x548C;&#x6536;&#x7F29;&#x529B;&#x5398;&#x7C73;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x5398;&#x7C73;&#x7684;&#x54CD;&#x5E94;&#x6027;&#x51CF;&#x6BD2;&#x4E0E; RAEC &#x6A21;&#x5757;&#x4E0A;&#x3002;&#x5927;&#x5B54;&#xFF0C;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x8868;&#x6A21;&#x5757;&#x6784;&#x9020;&#x4E86;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x90E8;&#x5206;&#x4E00;&#x5C42;&#x6D77;&#x85FB;&#x9178;&#x94A0;&#x51DD;&#x80F6;&#x4E2D;&#x7684;&#x6A21;&#x5757;&#x76F4;&#x5230;&#x5929; 8&#x3001; &#x6709;&#x65E0; RAEC &#x7EC4;&#x88C5;&#x3002;RAEC/CM &#x6A21;&#x5757;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x8868;&#x6709;&#x7535;&#x53CD;&#x5E94; &#xFF1B;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x50CF;&#x4E0E; RAEC &#x6A21;&#x5757;&#x6B64;&#x54CD;&#x5E94;&#x80FD;&#x529B;&#x662F;&#x76F8;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x53EA;&#x6709;&#x5398;&#x7C73;&#x8868;&#x524A;&#x5F31;&#x4E86;&#x3002;Coexpressing &#x5FC3;&#x808C;&#x808C;&#x9499;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x808C;&#x8089;&#x675F;&#x6211;&#x548C;&#x8FDE;&#x63A5;&#x86CB;&#x767D; 43 &#x662F;&#x663E;&#x800C;&#x6613;&#x89C1;&#x7684;&#x5916;&#x56F4;&#x6A21;&#x5757;&#x548C;&#x5B9E;&#x73B0;&#x7684;&#x6A21;&#x5757;&#x95F4;&#x8DEF;&#x53E3;&#x9644;&#x8FD1;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5E73;&#x53F0;&#x7684;&#x5EFA;&#x8BBE;&#x5E26;&#x8840;&#x7BA1;&#x8482;&#x7684;&#x5FC3;&#x810F;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x6A21;&#x5757;&#x5316;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x6F5C;&#x529B;&#x3002;

&#x5FC3;&#x808C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x6A21;&#x5757;&#x5316;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

Functional cardiac tissue was prepared using a modular tissue engineering approach with the goal of creating vascularized tissue. Rat aortic endothelial cells (RAEC) were seeded onto submillimeter-sized modules made of type I bovine collagen supplemented with Matrigelâ„¢ (25% v/v) embedded with cardiomyocyte (CM)-enriched neonatal rat heart cells and assembled into a contractile, macroporous, sheet-like construct. Modules (without RAEC) cultured in 10% bovine serum (BS) were more contractile and responsive to external stimulus (lower excitation threshold, higher maximum capture rate, and greater en face fractional area changes) than modules cultured in 10% fetal BS. Incorporating 25% Matrigel in the matrix reduced the excitation threshold and increased the fractional area change relative to collagen only modules (without RAEC). A coculture medium, containing 10% BS, low Mg2+ (0.814mM), and normal glucose (5.5mM), was used to maintain RAEC junction morphology (VE-cadherin) and CM contractility, although the responsiveness of CM was attenuated with RAEC on the modules. Macroporous, sheet-like module constructs were assembled by partially immobilizing a layer of modules in alginate gel until day 8, with or without RAEC. RAEC/CM module sheets were electrically responsive; however, like modules with RAEC this responsiveness was attenuated relative to CM-only sheets. Muscle bundles coexpressing cardiac troponin I and connexin-43 were evident near the perimeter of modules and at intermodule junctions. These results suggest the potential of the modular approach as a platform for building vascularized cardiac tissue.

A modular approach to cardiac tissue engineering.

Fonctionnelle du tissu cardiaque a &#xE9;t&#xE9; pr&#xE9;par&#xE9; en utilisant une approche modulaire des tissus d&#x26;#39;ing&#xE9;nierie dans le but de cr&#xE9;er des tissus vascularis&#xE9;s. Cellules endoth&#xE9;liales aortiques de rat (RAEC) ont &#xE9;t&#xE9; ensemenc&#xE9;es sur submillim&#xE9;trique-modules de taille en collag&#xE8;ne de type I bovin compl&#xE9;t&#xE9;e par Matrigel &#x2122; (25% v / v) int&#xE9;gr&#xE9; avec des cardiomyocytes (CM)-enrichies n&#xE9;onatales cellules cardiaques de rat et assembl&#xE9;s en une contraction, macroporeux , en forme de feuille construire. Modules (sans RAEC) cultiv&#xE9;es dans 10% de s&#xE9;rum bovin (BS) &#xE9;taient plus contractile et r&#xE9;pond aux stimuli externes (seuil inf&#xE9;rieur d&#x26;#39;excitation, plus le taux de capture maximum, et une plus grande surface de la face en changements fractionnaires) que les modules cultiv&#xE9;es dans 10% du f&#x153;tus BS. Incorporer Matrigel 25% dans la matrice r&#xE9;duite et le seuil d&#x26;#39;excitation accrue du changement zone fractionn&#xE9;e par rapport aux modules de collag&#xE8;ne seulement (sans RAEC). Un milieu de coculture, contenant 10% de BS, faible Mg2 + (0.814mM), et le glucose normale (5,5 mm), a &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9; pour maintenir la morphologie de jonction RAEC (VE-cadh&#xE9;rine) et de la contractilit&#xE9; CM, m&#xEA;me si la r&#xE9;activit&#xE9; de CM a &#xE9;t&#xE9; att&#xE9;nu&#xE9;e avec RAEC sur les modules. Macroporeuses en forme de feuille de module constructions ont &#xE9;t&#xE9; partiellement assembl&#xE9;s par immobiliser une couche de modules dans un gel d&#x26;#39;alginate jusqu&#x26;#39;&#xE0; ce jour 8, avec ou sans RAEC. Feuilles de module RAEC / CM &#xE9;taient &#xE9;lectriquement sensible, mais, comme les modules avec RAEC cette r&#xE9;activit&#xE9; a &#xE9;t&#xE9; att&#xE9;nu&#xE9;es par rapport &#xE0; CM-que des feuilles. Faisceaux musculaires coexprimant troponine cardiaque I et la connexine-43 &#xE9;taient &#xE9;videntes &#xE0; proximit&#xE9; du p&#xE9;rim&#xE8;tre de modules et au niveau des jonctions intermodule. Ces r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent le potentiel de l&#x26;#39;approche modulaire de plate-forme pour la construction vascularis&#xE9; cardiaque tissus.

Une approche modulaire de l&#x26;#39;ing&#xE9;nierie du tissu cardiaque

Funktionale Herzgewebe wurde durch eine modulare Tissue-engineering-Ansatz mit dem Ziel der Schaffung von gef&auml;&szlig;reichen Gewebes vorbereitet. Ratte Aorten Endothelzellen (RAEC) wurden auf Submillimeter-Gr&ouml;&szlig;e-Module hergestellt aus Typ I bovine ausges&auml;t Kollagen mit Matrigel &trade; erg&auml;nzt (25 % V/V) mit Cardiomyocyte (CM) eingebettet-bereichert neonatalen Ratte Herzzellen und montiert in einer kontraktilen makropor&ouml;se, Blatt-wie zu konstruieren. Module (ohne RAEC) kultiviert in 10 % Rinderserum (BS) waren die kontraktilen und reagieren auf &auml;u&szlig;eren Reiz (Selbstbeteiligung Erregung, h&ouml;here maximale Aufnahmerate und gr&ouml;&szlig;ere &Auml;nderungen in de Gesicht gebrochene Bereich) als Module in 10 % fetalen BS kultiviert. 25 % Matrigel in der Matrix die Erregung-Schwelle reduziert und erh&ouml;ht die gebrochene Fl&auml;chen&auml;nderung relativ Kollagen nur Module (ohne RAEC). Ein Coculture Medium, mit 10 % BS, niedrige Mg2 + (0.814 mM), und normale Glukose (5,5 mM), wurde verwendet, um RAEC Kreuzung Morphologie (VE-Cadherin) und CM Kontraktilit&auml;t, pflegen, obwohl die Reaktionsf&auml;higkeit von CM auf den Modulen mit RAEC abgeschw&auml;cht wurde. Makropor&ouml;se, Blatt-wie Modul Konstrukte wurden durch teilweise eine Schicht der Module im Alginat-Gel bis Tag 8, mit oder ohne RAEC l&auml;hmende montiert. RAEC/CM-Modul-Bl&auml;tter wurden elektrisch reagieren; wie Module mit RAEC wurde diese Reaktionsf&auml;higkeit jedoch relativ CM nur Bl&auml;tter abgeschw&auml;cht. Muskel-B&uuml;ndel Koexpression Herztroponin waren ich und Connexin-43 zeigt sich in der N&auml;he des Umkreises von Modulen und an Verbindungspunktmechanismus Kreuzungen. Diese Resultate schlagen das Potenzial der modulare Ansatz als eine Plattform zum Erstellen von gef&auml;&szlig;reichen Herzgewebe.

Ein modularer Ansatz Herzgewebe-Engineering.

Tessuto cardiaco funzionale &egrave; stata preparata usando un tessuto modulare ingegneria approccio con l&#39;obiettivo di creare tessuto vascolarizzato. Cellule endoteliali dell&#39;aorta (RAEC) del ratto sono state seminate su moduli dimensioni submillimeter composto tipo I bovini collagene supplementata con Matrigel &trade; (25% v/v) incorporato con cardiomyocyte (CM)-arricchito di cellule cardiache neonatali del ratto e assemblati in un contrattile, macroporoso, foglio-come costruisce. Moduli (senza RAEC) coltivati nel 10% di siero bovino (BS) erano pi&ugrave; contrattili e sensible a reagire allo stimolo esterno (bassa soglia di eccitazione, tasso di cattura massima superiore e maggiore en viso zona frazionale modifiche) rispetto a moduli coltivati in 10% BS fetale. Incorporando 25% Matrigel nella matrice ridotta la soglia di eccitazione e aumentato il cambiamento di zona frazionale rispetto al solo moduli di collagene (senza RAEC). Un mezzo coculture, contenente 10% BS, basso Mg2 + (0.814 mM), e glucosio normale (5.5 mM), &egrave; stato utilizzato per mantenere RAEC giunzione morfologia (VE-caderina) e contrattilit&agrave; CM, anche se la reattivit&agrave; di CM &egrave; stata attenuata con RAEC sui moduli. Macroporoso, foglio-come modulo costrutti sono stati assemblati da immobilizzare parzialmente uno strato di moduli in gel di alginato fino al giorno 8, con o senza RAEC. RAEC/CM modulo lenzuola erano elettricamente sensibile; Tuttavia, come i moduli con RAEC questa reattivit&agrave; &egrave; stato attenuato rispetto alla sola CM fogli. Fasci muscolari coexpressing troponina cardiaca I e connessina 43 erano evidenti vicino al perimetro dei moduli e nelle giunzioni evidenziate. Questi risultati suggeriscono il potenziale dell&#39;approccio modulare come una piattaforma per la creazione di tessuto cardiaco vascolarizzato.

Un approccio modulare all&#39;ingegneria del tessuto cardiaco.

&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306A;&#x5FC3;&#x81D3;&#x7D44;&#x7E54;&#x306F;&#x3001;&#x8840;&#x7BA1;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3092;&#x76EE;&#x6A19;&#x3068;&#x3057;&#x305F;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30E9;&#x30FC;&#x7D44;&#x7E54;&#x5DE5;&#x5B66;&#x7684;&#x624B;&#x6CD5;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x8ABF;&#x88FD;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x5927;&#x52D5;&#x8108;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;RAEC&#xFF09;&#x3092;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30B2;&#x30EB;&#x2122;&#xFF08;25&#xFF05;v / v&#xFF09;&#x306E;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;CM&#xFF09;&#x6FC3;&#x7E2E;&#x65B0;&#x751F;&#x5150;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x5FC3;&#x81D3;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x57CB;&#x3081;&#x8FBC;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x53CE;&#x7E2E;&#x3001;&#x591A;&#x5B54;&#x8CEA;&#x306B;&#x7D44;&#x307F;&#x7ACB;&#x3066;&#x3092;&#x6DFB;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;I&#x578B;&#x30A6;&#x30B7;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x3067;&#x4F5C;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x30B5;&#x30D6;&#x30DF;&#x30EA;&#x6CE2;&#x5927;&#x578B;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x4E0A;&#x306B;&#x64AD;&#x7A2E;&#x3057;&#x305F;&#x3001;&#x30B7;&#x30FC;&#x30C8;&#x72B6;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A6;&#x30B7;&#x8840;&#x6E05;&#xFF08;BS&#xFF09;10&#xFF05;&#x3067;&#x57F9;&#x990A;&#x3057;&#x305F;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EB;&#xFF08;RAEC&#x306A;&#x3057;&#xFF09;10&#xFF05;&#x30A6;&#x30B7;&#x80CE;&#x5150;BS&#x3067;&#x57F9;&#x990A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EB;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x53CE;&#x7E2E;&#x3057;&#x3001;&#x5916;&#x90E8;&#x523A;&#x6FC0;&#xFF08;&#x9854;&#x5C0F;&#x6570;&#x30A8;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;EN&#x4F4E;&#x3044;&#x52B1;&#x8D77;&#x95BE;&#x5024;&#x3001;&#x9AD8;&#x3044;&#x6700;&#x5927;&#x6355;&#x6349;&#x7387;&#x304C;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x5927;&#x304D;&#x3044;&#xFF09;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x884C;&#x5217;&#x306E;&#x53D6;&#x308A;&#x5165;&#x308C;25&#xFF05;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30B2;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x52B1;&#x8D77;&#x3057;&#x304D;&#x3044;&#x5024;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x3001;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x306E;&#x307F;&#x306E;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EB;&#xFF08;RAEC&#x305B;&#x305A;&#xFF09;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x76F8;&#x5BFE;&#x5C0F;&#x6570;&#x306E;&#x9762;&#x7A4D;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x5171;&#x5B58;&#x57F9;&#x5730;&#x3001;CM&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x6027;&#x306B;RAEC&#x3067;&#x6E1B;&#x8870;&#x3057;&#x305F;&#x3082;&#x306E;&#x306E;&#x3001;BS&#x3001;&#x4F4E;Mg2 +&#x306E;&#xFF08;0.814mM&#xFF09;&#x3068;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#xFF08;5.5&#xFF09;&#x306F;&#x3001;RAEC&#x63A5;&#x5408;&#x5F62;&#x614B;&#xFF08;VE-&#x30AB;&#x30C9;&#x30D8;&#x30EA;&#x30F3;&#xFF09;&#x3068;CM&#x306E;&#x53CE;&#x7E2E;&#x6027;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;10&#xFF05;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EB;&#x3002;&#x591A;&#x5B54;&#x8CEA;&#x3001;&#x30B7;&#x30FC;&#x30C8;&#x72B6;&#x306E;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EB;&#x69CB;&#x9020;&#x306F;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;RAEC&#x306E;&#x6709;&#x7121;&#x306B;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;8&#x65E5;&#x76EE;&#x307E;&#x3067;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AE;&#x30F3;&#x9178;&#x30B2;&#x30EB;&#x5185;&#x306E;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x5C64;&#x3092;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x3057;&#x3066;&#x7D44;&#x307F;&#x7ACB;&#x3066;&#x305F;&#x3002; RAEC / CM&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EB;&#x30B7;&#x30FC;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x96FB;&#x6C17;&#x7684;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x3001;RAEC&#x306E;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306F;&#x3001;CM&#x5C02;&#x7528;&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30C8;&#x306B;&#x6E1B;&#x8870;&#x76F8;&#x5BFE;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x7B4B;&#x675F;&#x5171;&#x767A;&#x73FE;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x30C8;&#x30ED;&#x30DD;&#x30CB;&#x30F3;I&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B3;&#x30CD;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3;43&#x306F;&#x3001;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x5883;&#x754C;&#x306B;&#x8FD1;&#x304F;&#x3001;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EB;&#x9593;&#x306E;&#x63A5;&#x5408;&#x90E8;&#x3067;&#x9855;&#x8457;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x8840;&#x7BA1;&#x5FC3;&#x81D3;&#x7D44;&#x7E54;&#x3092;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30E9;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x5FC3;&#x81D3;&#x7D44;&#x7E54;&#x5DE5;&#x5B66;&#x3078;&#x306E;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30E9;&#x30FC;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;

&#xAE30;&#xB2A5; &#xC2EC;&#xC7A5; &#xC870;&#xC9C1; &#xBAA8;&#xB4C8;&#xD615; &#xC870;&#xC9C1; &#xACF5;&#xD559; vascularized &#xC870;&#xC9C1; &#xB9CC;&#xB4E4;&#xAE30;&#xC758; &#xBAA9;&#xD45C;&#xC640; &#xC811;&#xADFC;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC900;&#xBE44;&#xB97C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC950; &#xB300;&#xB3D9;&#xB9E5; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; (RAEC) &#xB9CC;&#xB4E0; &#xD615;&#xC2DD;&#xC758; &#xB09C; &#xC18C; submillimeter &#xD06C;&#xAE30;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4C8;&#xC5D0; &#xC2DC;&#xB4DC; &#xD588;&#xB2E4; &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90; &#xBCF4;&#xCDA9; Matrigel &trade; cardiomyocyte (CM)&#xC640; &#xB0B4;&#xC7A5; (25 %v / v)-&#xC2E0;&#xC0DD;&#xC544; &#xC950; &#xC2EC;&#xC7A5; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xB18D;&#xCD95; &#xD558; &#xACE0;, &#xC218;&#xCD95; &#xC131; &#xC870;&#xB9BD; macroporous, &#xC2DC;&#xD2B8; &#xAC19;&#xC740; &#xAD6C;&#xC131;. 10% &#xC18C; &#xD608; &#xCCAD; (&#xD559;&#xC0AC;)&#xC5D0; &#xBC30;&#xC591; (RAEC) &#xC5C6;&#xC774; &#xBAA8;&#xB4C8; &#xB354; &#xC218;&#xCD95; &#xD558; &#xACE0; (&#xC5EC;&#xAE30; &#xD558;&#xD55C;&#xAC12;, &#xB192;&#xC740; &#xCD5C;&#xB300; &#xCEA1;&#xCC98; &#xC18D;&#xB3C4; &#xD070; &#xC5C9; &#xC5BC;&#xAD74; &#xC18C;&#xC218; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xBCC0;&#xACBD;) &#xBAA8;&#xB4C8;&#xC5D0;&#xC11C; 10% &#xD0DC;&#xC544; &#xD559;&#xC0AC; &#xAD50;&#xC591; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC678;&#xBD80; &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xBC18;&#xC751; &#xD588;&#xB2E4;. 25% &#xD1B5;&#xD569; &#xD589;&#xB82C;&#xC5D0;&#xC11C; Matrigel &#xC5EC;&#xAE30; &#xC784;&#xACC4;&#xAC12;&#xC744; &#xAC10;&#xC18C; &#xD558; &#xACE0; &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90; &#xC720;&#xC77C;&#xD55C; &#xBAA8;&#xB4C8; (RAEC) &#xC5C6;&#xC774; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC778; &#xC18C;&#xC218; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xBCC0;&#xACBD; &#xC99D;&#xAC00;. 10% &#xD559;&#xC0AC;, &#xB0AE;&#xC740; Mg2 +&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; coculture &#xB9E4;&#xCCB4; (0.814 m m), CM&#xC758; &#xC751;&#xB2F5; &#xBAA8;&#xB4C8;&#xC5D0; RAEC&#xC640; &#xAC10;&#xC1E0;&#xB294; &#xBE44;&#xB85D; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; (5.5 m m), RAEC &#xC811;&#xD569; &#xD615;&#xD0DC; (VE cadherin) &#xBC0F; CM &#xC218;&#xCD95;, &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Macroporous, &#xC2DC;&#xD2B8; &#xAC19;&#xC740; &#xBAA8;&#xB4C8; &#xAD6C;&#xC870;&#xB294; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558;&#xB8E8; 8, RAEC&#xC758; &#xC720;&#xBB34;&#xAE4C;&#xC9C0; alginate &#xAC94;&#xC5D0; &#xBAA8;&#xB4C8;&#xC758; &#xACC4;&#xCE35;&#xC744; immobilizing&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC870;&#xB9BD; &#xD588;&#xB2E4;. RAEC/CM &#xBAA8;&#xB4C8; &#xC2DC;&#xD2B8; &#xC804;&#xAE30;&#xC801; &#xBC18;&#xC751;; &#xD588;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xBAA8;&#xB4C8; RAEC&#xC640; &#xAC19;&#xC740;&#xC774; &#xC751;&#xB2F5; CM &#xC804;&#xC6A9; &#xC2DC;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC778; &#xAC10;&#xC1E0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xADFC;&#xC721; &#xB2E4;&#xBC1C; &#xC2EC;&#xC7A5; troponin coexpressing &#xB098; &#xACE0; connexin 43 &#xBAA8;&#xB4C8; &#xBC0F; &#xBAA8;&#xB4C8; &#xAD50;&#xCC28;&#xC810;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACBD;&#xACC4; &#xADFC;&#xCC98; &#xBD84;&#xBA85; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; vascularized &#xC2EC;&#xC7A5; &#xC870;&#xC9C1;&#xC744; &#xAD6C;&#xCD95; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;&#xC73C;&#xB85C; &#xBAA8;&#xB4C8;&#xC2DD; &#xC811;&#xADFC;&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744; &#xAD8C;&#xD574; &#xB4DC;&#xB9BD;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC2EC;&#xC7A5; &#xC870;&#xC9C1; &#xACF5;&#xD559;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBAA8;&#xB4C8;&#xC2DD; &#xC811;&#xADFC;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Tejido card&#xED;aco funcional se prepar&#xF3; usando un enfoque tejido ingenier&#xED;a modular con el objetivo de crear tejido vascularizado. Las c&#xE9;lulas endoteliales de aorta de rata (RAEC) fueron sembradas en submilim&#xE9;tricas de tama&#xF1;o m&#xF3;dulos hechos de col&#xE1;geno de tipo I bovino suplementado con Matrigel &#x2122; (25% v / v) incorporado con cardiomiocitos (CM)-enriquecidos neonatales c&#xE9;lulas del coraz&#xF3;n de rata y montados en un macroporosa contr&#xE1;ctil, , tipo l&#xE1;mina construir. M&#xF3;dulos (sin RAEC) cultivadas en 10% de suero bovino (BS) fueron m&#xE1;s contr&#xE1;ctil y sensible a los est&#xED;mulos externos (menor umbral de excitaci&#xF3;n, mayor tasa m&#xE1;xima de captura, y la mayor en cara cambia &#xE1;rea fraccional) que los m&#xF3;dulos cultivadas en un 10% BS fetal. La incorporaci&#xF3;n de 25% en la matriz Matrigel reducido el umbral de excitaci&#xF3;n y el aumento de la variaci&#xF3;n de la superficie fraccionada relativa a los m&#xF3;dulos de col&#xE1;geno solamente (sin RAEC). Un medio de cocultivo, que contiene 10% BS, baja Mg 2 + (0.814mM), y la normal a la glucosa (5,5 mm), se utiliza para mantener la morfolog&#xED;a de la uni&#xF3;n RAEC (VE-cadherina) y la contractilidad CM, aunque la capacidad de respuesta de CM se atenu&#xF3; con el RAEC los m&#xF3;dulos. Macroporosas, las hojas como m&#xF3;dulo construcciones fueron parcialmente ensamblados por inmovilizar una capa de m&#xF3;dulos en gel de alginato hasta 8 d&#xED;as, con o sin RAEC. RAEC / CM hojas de m&#xF3;dulos eran el&#xE9;ctricamente sensible, sin embargo, al igual que los m&#xF3;dulos con RAEC esta capacidad de respuesta fue atenuada en relaci&#xF3;n a la CM-s&#xF3;lo hojas. Haces musculares coexpressing troponina I y la conexina 43, se hicieron evidentes cerca del per&#xED;metro de los m&#xF3;dulos y en los cruces interm&#xF3;dulo. Estos resultados sugieren el potencial del enfoque modular como una plataforma para la construcci&#xF3;n de vascularizaci&#xF3;n del tejido cardiaco.

Brendan M. Leung

Institute of Biomaterials and Biomedical Engineering

University of Toronto

Fabrication of Micro-tissues using Modules of Collagen Gel Containing Cells

Brendan M. Leung

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Institute of Biomaterials and Biomedical Engineering

University of Toronto

Fabrication of Micro-tissues using Modules of Collagen Gel Containing Cells

Institute of Biomaterials and Biomedical Engineering