in-vitro-trna-methylation-assay-with-entamoeba-histolytica-dna-trna

<em>In vitro</em> tRNA Methylation Assay with the <em>Entamoeba histolytica</em> DNA and tRNA Methyltransferase Dnmt2 (Ehmeth) Enzyme

Protozoan parasites are among the most devastating infectious agents of humans responsible for a variety of diseases including amebiasis, which is one of ...

Technion - Israel Institute of Technology

&#x80DE;&#x5627;&#x5576;-5 &#x7532;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176; Dnmt2 &#x5BB6;&#x65CF;&#x7684; DNA &#x548C; tRNA &#x7532;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6DF1;&#x5165;&#x4E86;&#x89E3; Dnmt2 &#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x610F;&#x4E49;&#x4E0E;&#x4F5C;&#x7528;&#x6781;&#x5927;&#x5730;&#x963B;&#x788D;&#x4E86;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x5173;&#x4E8E;&#x5176;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x77E5;&#x8BC6;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x62A5;&#x544A;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x901A;&#x8FC7;&#x786E;&#x5B9A;&#x70EF;&#x9187;&#x5316;&#x9176;&#x4F5C;&#x4E3A; Dnmt2 &#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x9175;&#x6BCD;&#x53CC;&#x6742;&#x4EA4;&#x5C4F;&#x5E55;&#x901A;&#x8FC7;&#x89E3;&#x51B3;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x4E3B;&#x9898;&#x3002;&#x70EF;&#x9187;&#x5316;&#x9176;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x5DF2;&#x77E5;&#x50AC;&#x5316; 2-&#x78F7;&#x9178;&#x7518;&#x6CB9;&#x9178; (2-PG) &#x8F6C;&#x6362;&#x4E3A;&#x78F7;&#x9178;&#x70EF; &#xFF08;PEP&#xFF09;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x5B83;&#x5177;&#x6709; cytoplasmatic &#x548C;&#x6838;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x5728;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x963F;&#x7C73;&#x5DF4;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#xFF0C;&#x70EF;&#x9187;&#x5316;&#x9176;&#x4F5C;&#x4E3A; Dnmt2 &#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x3002;&#x8FD9;&#x610F;&#x5916;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x6D3B;&#x6027;&#x88AB;&#x4E0D;&#x60A6; 2 pg&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x8BE5;&#x7CD6;&#x4EE3;&#x8C22;&#x63A7;&#x5236;&#x975E;&#x7CD6;&#x9175;&#x89E3;&#x70EF;&#x9187;&#x5316;&#x9176;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x9965;&#x997F;&#x9A71;&#x52A8;&#x5668;&#x70EF;&#x9187;&#x5316;&#x9176;&#x5185;&#x7684;&#x6838;&#x5FC3;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x53CD;&#x8FC7;&#x6765;&#x53C8;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7684;&#x989D;&#x5916;&#x70EF;&#x9187;&#x5316;&#x9176; E.histolytica DNMT2 &#x540C;&#x6E90; (Ehmeth) &#x590D;&#x6742;&#xFF0C;&#x5F62;&#x6210;&#x548C;&#x5927;&#x5E45;&#x5EA6;&#x964D;&#x4F4E; tRNA(Asp) &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x7684;&#x79EF;&#x7D2F;&#x3002;E.histolytica &#x8868;&#x793A;&#x6838;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x4FE1;&#x53F7; (NLS)-&#x7535;&#x7194;-&#x70EF;&#x9187;&#x5316;&#x9176;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E5F;&#x8868;&#x660E;&#x4F5C;&#x4E3A; Dnmt2 &#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x70EF;&#x9187;&#x5316;&#x9176;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x70EF;&#x9187;&#x5316;&#x9176;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x7B2C;&#x4E00;&#x4E2A; Dnmt2 &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x5E76;&#x7A81;&#x51FA;&#x663E;&#x793A;&#x610F;&#x5916;&#x7684;&#x7CD6;&#x9175;&#x89E3;&#x9176;&#x5728; Dnmt2 &#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x4E00;&#x4E2A;&#x65B0;&#x7684;&#x6838;&#x51FD;&#x6570;&#x963F;&#x7C73;&#x5DF4;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5185;&#x963F;&#x7C73;&#x5DF4;&#x7CD6;&#x9175;&#x89E3;&#x9176;&#x70EF;&#x9187;&#x5316;&#x9176;&#xFF1A; &#x4EE3;&#x8C22;&#x8C03;&#x8282;&#x80DE;&#x5627;&#x5576; 5 &#x7532;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176; 2 (Dnmt2) &#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;

Cytosine-5 methyltransferases of the Dnmt2 family function as DNA and tRNA methyltransferases. Insight into the role and biological significance of Dnmt2 is greatly hampered by a lack of knowledge about its protein interactions. In this report, we address the subject of protein interaction by identifying enolase through a yeast two-hybrid screen as a Dnmt2-binding protein. Enolase, which is known to catalyze the conversion of 2-phosphoglycerate (2-PG) to phosphoenolpyruvate (PEP), was shown to have both a cytoplasmatic and a nuclear localization in the parasite Entamoeba histolytica. We discovered that enolase acts as a Dnmt2 inhibitor. This unexpected inhibitory activity was antagonized by 2-PG, which suggests that glucose metabolism controls the non-glycolytic function of enolase. Interestingly, glucose starvation drives enolase to accumulate within the nucleus, which in turn leads to the formation of additional enolase-E.histolytica DNMT2 homolog (Ehmeth) complex, and to a significant reduction of the tRNA(Asp) methylation in the parasite. The crucial role of enolase as a Dnmt2 inhibitor was also demonstrated in E.histolytica expressing a nuclear localization signal (NLS)-fused-enolase. These results establish enolase as the first Dnmt2 interacting protein, and highlight an unexpected role of a glycolytic enzyme in the modulation of Dnmt2 activity.

A new nuclear function of the Entamoeba histolytica glycolytic enzyme enolase: the metabolic regulation of cytosine-5 methyltransferase 2 (Dnmt2) activity.

Cytosine-5 m&#xE9;thyltransf&#xE9;rases de la fonction de la famille comme Dnmt2 ADN m&#xE9;thyltransf&#xE9;rases et ARNt. Regard sur le r&#xF4;le et la signification biologique des Dnmt2 est fortement entrav&#xE9;e par un manque de connaissance de ses interactions prot&#xE9;ine-prot&#xE9;ine. Dans ce rapport, nous abordons le sujet de l&#x26;#39;interaction des prot&#xE9;ines par l&#x26;#39;identification &#xE0; travers un &#xE9;nolase deux hybrides de levure &#xE9;cran comme une prot&#xE9;ine de liaison Dnmt2. Enolase, qui est connu pour catalyser la conversion du 2-phosphoglyc&#xE9;rate (2-PG) pour le phospho&#xE9;nolpyruvate (PEP), a &#xE9;t&#xE9; montr&#xE9; &#xE0; la fois une cytoplasmique et une localisation nucl&#xE9;aire dans le histolytica d&#x26;#39;Entamoeba parasite. Nous avons d&#xE9;couvert que les actes &#xE9;nolase comme un inhibiteur de Dnmt2. Cette activit&#xE9; inhibitrice inattendue a &#xE9;t&#xE9; contrari&#xE9; par le 2-PG, ce qui sugg&#xE8;re que le m&#xE9;tabolisme du glucose de contr&#xF4;ler la fonction non-glycolytique de l&#x26;#39;&#xE9;nolase. Fait int&#xE9;ressant, la privation de glucose conduit &#xE9;nolase &#xE0; s&#x26;#39;accumuler dans le noyau, qui &#xE0; son tour conduit &#xE0; la formation de plus &#xE9;nolase-E.histolytica homologue DNMT2 (Ehmeth) complexe, et &#xE0; une r&#xE9;duction significative de l&#x26;#39;ARNt (Asp) de m&#xE9;thylation dans le parasite. Le r&#xF4;le crucial de l&#x26;#39;&#xE9;nolase comme un inhibiteur de Dnmt2 a &#xE9;galement &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;montr&#xE9; dans E.histolytica exprimer un signal de localisation nucl&#xE9;aire (NLS)-fusion-&#xE9;nolase. Ces r&#xE9;sultats &#xE9;tablissent l&#x26;#39;&#xE9;nolase comme le premier Dnmt2 prot&#xE9;ine interagissant, et mettre en &#xE9;vidence un r&#xF4;le inattendu d&#x26;#39;une enzyme de la glycolyse dans la modulation de l&#x26;#39;activit&#xE9; Dnmt2.

Une nouvelle fonction nucl&#xE9;aire de l&#x26;#39;&#xE9;nolase Entamoeba histolytica enzyme de la glycolyse: la r&#xE9;gulation m&#xE9;tabolique de la cytosine-5 2 Methyltransferase (Dnmt2) Activit&#xE9;

Cytosin-5-Methyltransferasen aus der Familie der Dnmt2 fungieren als DNA und tRNA-Methyltransferasen. Einblick in die Rolle und die biologische Bedeutung des Dnmt2 wird durch einen Mangel an Wissen &uuml;ber seine Proteininteraktionen stark behindert. In diesem Bericht wenden wir uns zum Thema Protein-Interaktion durch die Identifizierung Enolase durch einen Hefe-zwei-Hybrid-Bildschirm als Dnmt2-verbindliches Protein. Enolase, die bekannt ist, um die Umwandlung von 2-Phosphoglycerat (2-seitig) zu Phosphoenolpyruvat (PEP) zu katalysieren, zeigte sich eine nukleare Lokalisierung und eine cytoplasmatic in der Parasit Entamoeba Histolytica haben. Wir entdeckten, dass die Enolase als ein Dnmt2-Inhibitor fungiert. Diese unerwartete hemmende Aktivit&auml;t wurde durch 2-seitig, gegen sich aufgebracht, was darauf hindeutet, dass die Glukosestoffwechsel die nicht-Glykolytische Enolase-Funktion steuert. Interessanterweise Glukose Hunger treibt Enolase innerhalb des Zellkerns, zu sammeln, was wiederum die Bildung von zus&auml;tzlichen Enolase-E.histolytica homologes DNMT2 (Ehmeth) Komplex und zu einer deutlichen Verringerung der tRNA(Asp)-Methylierung in der Parasit. Die entscheidende Rolle der Enolase als ein Dnmt2-Hemmer wurde auch im E.histolytica Ausdruck einer nuklearen Lokalisierung Signal (NLS) - verschmolzen - Enolase nachgewiesen. Diese Ergebnisse Enolase als die erste Dnmt2 zusammenwirkendes Protein einzurichten, und markieren eine unerwartete Rolle eine Glykolytische Enzym der Modulation des Dnmt2 Aktivit&auml;t.

Eine neue nukleare Funktion von der Entamoeba Histolytica Glykolytische Enzym Enolase: die metabolische Regulierung von Cytosin-5 Methyltransferase 2 (Dnmt2) Aktivit&auml;t.

Citosina-5 methyltransferases della famiglia Dnmt2 funzione come methyltransferases del DNA e tRNA. Comprensione del ruolo e significato biologico di Dnmt2 notevolmente &egrave; ostacolata dalla mancanza di conoscenza circa le interazioni della proteina. In questa relazione, affrontiamo il tema dell&#39;interazione proteina identificando Enolasi attraverso uno schermo di due-ibrido del lievito come una proteina Dnmt2. Enolasi, che sono noto per catalizzare la conversione del 2-fosfoglicerato (2-PG) a fosfoenolpiruvato (PEP), ha dimostrato di avere un citoplasmatiche e una localizzazione nucleare nel parassita Entamoeba histolytica. Abbiamo scoperto che Enolasi agisce come un inibitore Dnmt2. Questa inaspettata attivit&agrave; inibitoria &egrave; stata antagonizzata da 2-PG, che suggerisce che metabolismo del glucosio controlla la funzione non glicolitica Enolasi. &Egrave; interessante notare che, fame di glucosio unit&agrave; Enolasi ad accumularsi all&#39;interno del nucleo, che a sua volta porta alla formazione di ulteriori Enolasi-E.histolytica DNMT2 omologo (Ehmeth) complesso e a una riduzione significativa della metilazione tRNA(Asp) in parassita. Il ruolo cruciale di enolasi come un inibitore Dnmt2 &egrave; stato dimostrato anche in E.histolytica esprimendo un Enolasi segnale (NLS) - fuso - localizzazione nucleare. Questi risultati stabiliscono Enolasi come la prima proteina d&#39;interazione Dnmt2 ed evidenziano un ruolo inatteso di un enzima glicolitico nella modulazione dell&#39;attivit&agrave; Dnmt2.

Una nuova funzione nucleare dell&#39;Enolasi Entamoeba histolytica enzima glicolitico: la regolazione metabolica di methyltransferase della citosina-5 2 (Dnmt2) attivit&agrave;.

DNA&#x3068;tRNA&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;Dnmt2&#x5BB6;&#x65CF;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x30B7;&#x30C8;&#x30B7;&#x30F3;-5&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3002; Dnmt2&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3068;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x610F;&#x7FA9;&#x3078;&#x306E;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x304C;&#x5927;&#x304D;&#x304F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x77E5;&#x8B58;&#x306E;&#x6B20;&#x5982;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x59A8;&#x3052;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x672C;&#x7A3F;&#x3067;&#x306F;&#x3001;Dnmt2&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x9175;&#x6BCD;two-hybrid&#x753B;&#x9762;&#x3092;&#x901A;&#x3057;&#x3066;&#x30A8;&#x30CE;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x4E3B;&#x984C;&#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30A8;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x30D4;&#x30EB;&#x30D3;&#x30F3;&#x9178;&#xFF08;PEP&#x200B;&#x200B;&#xFF09;&#x306B;2  - &#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30B0;&#x30EA;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#xFF08;2-PG&#xFF09;&#x306E;&#x5909;&#x63DB;&#x3092;&#x89E6;&#x5A92;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30A8;&#x30CE;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x8D64;&#x75E2;&#x30A2;&#x30E1;&#x30FC;&#x30D0;&#x306E;&#x6838;&#x5C40;&#x5728;&#x5316;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30A8;&#x30CE;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;Dnmt2&#x30A4;&#x30F3;&#x30D2;&#x30D3;&#x30BF;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x4E88;&#x60F3;&#x5916;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x6D3B;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306F;&#x30A8;&#x30CE;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x975E;&#x89E3;&#x7CD6;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;2-PG&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x62EE;&#x6297;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x98E2;&#x9913;&#x306F;&#x3001;&#x9806;&#x756A;&#x306B;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306E;&#x30A8;&#x30CE;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;-E.histolytica DNMT2&#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0;&#xFF08;Ehmeth&#xFF09;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x6838;&#x5185;&#x306B;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3059;&#x308B;&#x30A8;&#x30CE;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x99C6;&#x52D5;&#x3057;&#x3001;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x306E;tRNA&#xFF08;Asp&#xFF09;&#x306E;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x306E;&#x5927;&#x5E45;&#x306A;&#x524A;&#x6E1B;&#x306B;&#x3002; Dnmt2&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x30A8;&#x30CE;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x306F;&#x3001;&#x6838;&#x5C40;&#x5728;&#x5316;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#xFF08;NLS&#xFF09;&#x878D;&#x5408;-&#x30A8;&#x30CE;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;E.histolytica&#x3067;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x521D;&#x306E;Dnmt2&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30A8;&#x30CE;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x3001;Dnmt2&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x89E3;&#x7CD6;&#x7CFB;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x4E88;&#x60F3;&#x5916;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8D64;&#x75E2;&#x30A2;&#x30E1;&#x30FC;&#x30D0;&#x89E3;&#x7CD6;&#x7CFB;&#x9175;&#x7D20;&#x30A8;&#x30CE;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x6838;&#x6A5F;&#x80FD;&#xFF1A;&#x30B7;&#x30C8;&#x30B7;&#x30F3;-5&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;2&#xFF08;Dnmt2&#xFF09;&#x6D3B;&#x6027;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x8ABF;&#x7BC0;

&#xC2DC;-5 methyltransferases Dnmt2 &#xAC00;&#xC871;&#xC758; DNA&#xC640; tRNA methyltransferases&#xB85C; &#xB3D9;&#xC791;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5ED;&#xD560; &#xBC0F; dnmt2&#xC758; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC801; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC740; &#xD06C;&#xAC8C;&#xC758; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC9C0;&#xC2DD;&#xC758; &#xBD80;&#xC871;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC29;&#xD574; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Dnmt2 &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC73C;&#xB85C; &#xD6A8; &#xBAA8; 2 &#xC7A1;&#xC885; &#xD654;&#xBA74;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; enolase &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558; &#xC5EC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xC8FC;&#xC81C; &#xC8FC;&#xC18C;. 2-Phosphoglycerate (2 &#xD398;&#xC774;&#xC9C0;) phosphoenolpyruvate (PEP) &#xBCC0;&#xD658; &#xCD09;&#xB9E4;&#xC5D0; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC;, enolase&#xB294; cytoplasmatic&#xC640; &#xD575; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; Entamoeba histolytica&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xADF8; enolase Dnmt2 &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC608;&#xAE30;&#xCE58; &#xC54A;&#xC740; &#xAE08;&#xC9C0; &#xD65C;&#xB3D9; 2 &#xD398;&#xC774;&#xC9C0;, enolase&#xC758; &#xBE44; glycolytic &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xB300;&#xC0AC;&#xB294; &#xC81C;&#xC548;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC18;&#xAC10; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xD765;&#xBBF8;&#xB86D;&#xAC8C;&#xB3C4;, &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xAE30;&#xC544; &#xCC28;&#xB840;&#xB85C; &#xCD94;&#xAC00; enolase-E.histolytica DNMT2 &#xCCB4; (Ehmeth) &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD558; &#xACE0;, &#xD615;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;&#xC5D0; tRNA(Asp) &#xBA54; &#xD2F8;&#xC758; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xAC10;&#xC18C;&#xB97C; &#xB9AC;&#xB4DC; &#xD575; &#xB0B4; &#xCD95;&#xC801; enolase &#xB4DC;&#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;. Dnmt2 &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xB85C; enolase&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560; &#xB610;&#xD55C; &#xD575; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xC2E0;&#xD638; (NLS)-&#xC735;&#xD569;-enolase&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; E.histolytica&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; Dnmt2 &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC73C;&#xB85C; enolase&#xB97C; &#xC124;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; Dnmt2 &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xBCC0;&#xC870;&#xC5D0; glycolytic &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xC608;&#xC0C1;&#xCE58; &#xBABB;&#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xAC15;&#xC870;.

Entamoeba histolytica glycolytic &#xD6A8;&#xC18C; enolase&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD575; &#xAE30;&#xB2A5;: &#xC2DC; 5 methyltransferase 2 (Dnmt2)&#xC758; &#xB300;&#xC0AC; &#xADDC;&#xC81C; &#xD65C;&#xB3D9;.

Citosina-5 metiltransferasas de la funci&#xF3;n de la familia Dnmt2 como metiltransferasas de ADN y ARNt. La comprensi&#xF3;n de la funci&#xF3;n y el significado biol&#xF3;gico de Dnmt2 se ve dificultado por la falta de conocimiento sobre las interacciones de sus prote&#xED;nas. En este informe, que aborda el tema de la interacci&#xF3;n de prote&#xED;nas mediante la identificaci&#xF3;n de enolasa a trav&#xE9;s de una levadura de dos h&#xED;bridos de pantalla como una prote&#xED;na de uni&#xF3;n a Dnmt2. Enolasa, que es conocido para catalizar la conversi&#xF3;n de 2-fosfoglicerato (2-PG) a fosfoenolpiruvato (PEP), ha demostrado tener tanto una citoplasm&#xE1;tica y una localizaci&#xF3;n nuclear en el par&#xE1;sito Entamoeba histolytica. Hemos descubierto que los actos enolasa como un inhibidor de Dnmt2. Esta actividad inhibitoria inesperado fue antagonizado por 2-PG, lo que sugiere que el metabolismo de la glucosa controla la funci&#xF3;n no glicol&#xED;tico enolasa. Interesantemente, la inanici&#xF3;n glucosa impulsa enolasa a acumularse dentro del n&#xFA;cleo, que a su vez conduce a la formaci&#xF3;n de adicional enolasa-E.histolytica hom&#xF3;logo DNMT2 (Ehmeth) compleja, y una reducci&#xF3;n significativa del ARNt (Asp) metilaci&#xF3;n en el par&#xE1;sito. El papel crucial de la enolasa como un inhibidor de Dnmt2 tambi&#xE9;n se demostr&#xF3; en E.histolytica expresar una se&#xF1;al de localizaci&#xF3;n nuclear (NLS) fusionado enolasa. Estos resultados establecen enolasa como la primera Dnmt2 prote&#xED;na interactuando, y poner de relieve un papel inesperado de una enzima glicol&#xED;tica en la modulaci&#xF3;n de la actividad Dnmt2.

Una nueva funci&#xF3;n nuclear de la enolasa Entamoeba histolytica enzima glicol&#xED;tica: la regulaci&#xF3;n metab&#xF3;lica de Citosina-5 metiltransferasa 2 (Dnmt2) Actividad

&#x963F;&#x7C73;&#x5DF4;&#x75C5;&#x662F;&#x4E25;&#x91CD;&#x7684;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x75BE;&#x75C5;&#xFF0C;&#x7531;&#x5355;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#xFF0C;&#x963F;&#x7C73;&#x5DF4;&#x5F15;&#x8D77;&#x7684;&#x3002;&#x6B64;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x4E3B;&#x8981;&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#xFF0C;&#x53D1;&#x73B0;&#x548C;&#x547D;&#x540D;&#x7684;&#x7531;&#x4E8E;&#x5176;&#x80FD;&#x591F;&#x6467;&#x6BC1;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x3002;&#x89C4;&#x7BA1;&#x6B64;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x7684;&#x81F4;&#x75C5;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x8FD8;&#x4E0D;&#x592A;&#x6E05;&#x695A;&#x3002;&#x8FD1;&#x5E74;&#x6765;&#xFF0C;&#x51FA;&#x73B0;&#x4E86;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x7684;&#x81F4;&#x75C5;&#x529B;&#x7684;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x8C03;&#x63A7;&#x8D8A;&#x6765;&#x8D8A;&#x611F;&#x5174;&#x8DA3;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x6587;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x76EE;&#x524D;&#x6240;&#x77E5;&#x7684; DNA &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x3001; &#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x4FEE;&#x9970;&#x548C; RNA &#x76F8;&#x5173;&#x6C89;&#x9ED8; E.&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5185;&#x963F;&#x7C73;&#x5DF4;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x6982;&#x8FF0;&#x3002;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x7684;&#x67D0;&#x4E9B;&#x529F;&#x80FD;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x65B0;&#x7684; antiamoebic &#x6CBB;&#x7597;&#x5206;&#x5B50;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x7684;&#x552F;&#x4E00;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x73B0;&#x5B9E;&#x610F;&#x4E49;&#x3002;

&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x5B66;&#x5728;&#x5355;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x963F;&#x7C73;&#x5DF4;&#x3002;

Amoebiasis is a serious infectious disease that is caused by the unicellular parasite, Entamoeba histolytica. This parasite is mainly found in developing countries, and are named owing to its ability to destroy tissues. The molecular mechanisms that regulate the virulence of this parasite are not well understood. In recent years, an increasing interest in the epigenetic regulation of the parasite's virulence has emerged. In this article, an overview of our current knowledge about the role of DNA methylation, histone modifications and RNA-associated silencing in the biology of E. histolytica is provided. The relevance of some features of the parasite's unique epigenetic machinery to the development of new antiamoebic therapeutic molecules is discussed.

Epigenetics in the unicellular parasite Entamoeba histolytica.

L&#x26;#39;amibiase est une maladie infectieuse grave qui est caus&#xE9;e par le parasite unicellulaire, Entamoeba histolytica. Ce parasite se trouve principalement dans les pays en d&#xE9;veloppement, et sont nomm&#xE9;s en raison de sa capacit&#xE9; &#xE0; d&#xE9;truire les tissus. Les m&#xE9;canismes mol&#xE9;culaires qui r&#xE9;gulent la virulence de ce parasite ne sont pas bien comprises. Ces derni&#xE8;res ann&#xE9;es, un int&#xE9;r&#xEA;t croissant dans la r&#xE9;gulation &#xE9;pig&#xE9;n&#xE9;tique de la virulence du parasite a &#xE9;merg&#xE9;. Dans cet article, un aper&#xE7;u de nos connaissances actuelles sur le r&#xF4;le de la m&#xE9;thylation de l&#x26;#39;ADN, modifications des histones et de l&#x26;#39;ARN-associ&#xE9; silencieux dans la biologie de E. histolytica est fourni. La pertinence de certaines fonctionnalit&#xE9;s de l&#x26;#39;unique, parasite machines &#xE9;pig&#xE9;n&#xE9;tique au d&#xE9;veloppement de nouvelles mol&#xE9;cules th&#xE9;rapeutiques antiamibiens est discut&#xE9;e.

L&#x26;#39;&#xE9;pig&#xE9;n&#xE9;tique dans le unicellulaires Histolytica Parasite Entamoeba

Am&ouml;biasis ist eine schwere Infektionskrankheit, die durch den einzelligen Parasiten, Entamoeba Histolytica verursacht wird. Dieser Parasit findet sich vor allem in Entwicklungsl&auml;ndern und werden benannt wegen seiner F&auml;higkeit, Gewebe zu zerst&ouml;ren. Die molekularen Mechanismen, die die Virulenz dieser Parasiten zu regulieren sind nicht gut verstanden. In den letzten Jahren entstand ein zunehmendes Interesse an der epigenetische Regulierung der Virulenz des Parasiten. In diesem Artikel wird eine &Uuml;bersicht &uuml;ber unsere aktuellen Wissen &uuml;ber die Rolle der DNA-Methylierung und Histon &Auml;nderungen und RNA-assoziierten in die Biologie von E. Histolytica Unterdr&uuml;ckender bereitgestellt. Die Relevanz der einige Funktionen der Parasit einzigartige epigenetische Maschinen zur Entwicklung neuer antiamoebic therapeutische Molek&uuml;le wird diskutiert.

Epigenetics in den einzelligen Parasit Entamoeba Histolytica.

Amebiasi sono una malattia infettiva grave causata dal parassita unicellulare, Entamoeba histolytica. Questo parassita si trova principalmente nei paesi in via di sviluppo e sono denominati a causa della sua capacit&agrave; di distruggere i tessuti. I meccanismi molecolari che regolano la virulenza di questo parassita non sono ben compresi. Negli ultimi anni, &egrave; emerso un crescente interesse nella regolazione epigenetica della virulenza del parassita. In questo articolo viene fornita una panoramica delle nostre attuali conoscenze circa il ruolo della metilazione del DNA, le modifiche dell&#39;istone e associate al RNA silencing nella biologia di E. histolytica. La rilevanza di alcune caratteristiche delle uniche macchine epigenetico del parassita per lo sviluppo di nuove molecole terapeutiche antiamoebic &egrave; discusso.

Epigenetics nel parassita unicellulare Entamoeba histolytica.

&#x30A2;&#x30E1;&#x30FC;&#x30D0;&#x75C7;&#x306F;&#x3001;&#x5358;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x3001;&#x8D64;&#x75E2;&#x30A2;&#x30E1;&#x30FC;&#x30D0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x91CD;&#x7BE4;&#x306A;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x306F;&#x3001;&#x4E3B;&#x306B;&#x9014;&#x4E0A;&#x56FD;&#x3067;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x7D44;&#x7E54;&#x3092;&#x7834;&#x58CA;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x306E;&#x304A;&#x304B;&#x3052;&#x3067;&#x540D;&#x524D;&#x304C;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x3088;&#x304F;&#x7406;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x8FD1;&#x5E74;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306E;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;&#x95A2;&#x5FC3;&#x304C;&#x9AD8;&#x307E;&#x3063;&#x3066;&#x6D6E;&#x4E0A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x8A18;&#x4E8B;&#x3067;&#x306F;&#x3001;DNA&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x3001;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;&#x4FEE;&#x98FE;&#x3084;&#x8D64;&#x75E2;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;RNA&#x95A2;&#x9023;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306E;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x77E5;&#x8B58;&#x306E;&#x6982;&#x8981;&#x304C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;antiamoebic&#x6CBB;&#x7642;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x306E;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x6A5F;&#x68B0;&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x59A5;&#x5F53;&#x6027;&#x304C;&#x8B70;&#x8AD6;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5358;&#x7D30;&#x80DE;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x8D64;&#x75E2;&#x30A2;&#x30E1;&#x30FC;&#x30D0;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30AF;&#x30B9;

Amoebiasis&#xB294; Entamoeba histolytica &#xB2E8; &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xC2EC;&#xAC01;&#xD55C; &#xC804;&#xC5FC; &#xC131; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC774; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB3C4;&#xC0C1;&#xAD6D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC8FC;&#xB85C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418; &#xACE0; &#xC870;&#xC9C1;&#xC744; &#xD30C;&#xAD34; &#xD558;&#xB294; &#xB2A5;&#xB825; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC774;&#xB984;&#xC774; &#xC9C0;&#xC815; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;&#xC758; &#xB3C5;&#xC131;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC798; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xC9C0;. &#xCD5C;&#xADFC; &#xBA87; &#xB144; &#xB3D9;&#xC548;, &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;&#xC758; &#xB3C5;&#xC131;&#xC758; epigenetic &#xADDC;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAD00;&#xC2EC; &#xC99D;&#xAC00; &#xB5A0;&#xC624;&#xB974;&#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC774; &#xAE30;&#xC0AC; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xD604;&#xC7AC; &#xC9C0;&#xC2DD; DNA &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654;, &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; &#xC218;&#xC815; &#xBC0F; E. histolytica &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC785;&#xC744; RNA &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC1C;&#xC694;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; antiamoebic &#xCE58;&#xB8CC; &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;&#xC758; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; epigenetic &#xAE30;&#xACC4;&#xC758; &#xC77C;&#xBD80; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC758; &#xAD00;&#xB828;&#xC131;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB2E8; &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; Entamoeba histolytica&#xC5D0; Epigenetics&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Amebiasis es una enfermedad infecciosa grave que es causada por el par&#xE1;sito unicelular, Entamoeba histolytica. Este par&#xE1;sito se encuentra principalmente en los pa&#xED;ses en desarrollo, y se nombran por su capacidad para destruir los tejidos. Los mecanismos moleculares que regulan la virulencia de este par&#xE1;sito no se conocen bien. En los &#xFA;ltimos a&#xF1;os, un creciente inter&#xE9;s en la regulaci&#xF3;n epigen&#xE9;tica de la virulencia del par&#xE1;sito se ha convertido. En este art&#xED;culo, una visi&#xF3;n general de nuestros conocimientos actuales sobre el papel de la metilaci&#xF3;n del ADN, modificaciones de las histonas y el ARN asociada a silenciar en la biolog&#xED;a de la E. histolytica se proporciona. La relevancia de algunas de las caracter&#xED;sticas de la maquinaria epigen&#xE9;tica &#xFA;nica del par&#xE1;sito para el desarrollo de nuevas mol&#xE9;culas terap&#xE9;uticas antiamebiano se discute.

La epigen&#xE9;tica en el unicelulares par&#xE1;sito Entamoeba histolytica

&#x963F;&#x7C73;&#x5DF4;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5185;&#x963F;&#x7C73;&#x5DF4;&#x70EF;&#x9187;&#x5316;&#x9176; (EhENO) &#x53EF;&#x9006; interconverts 2-&#x78F7;&#x9178;&#x7518;&#x6CB9;&#x9178; (2-PGA) &#x548C; phosphoenolpyruvic &#x9178; (PEP)&#x3002;Homodimeric EhENO &#x7684;&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#x90FD;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x4E86;&#x4E00;&#x9879;&#x51B3;&#x8BAE;&#x7684; 1.9 &#x6210;&#x3002;&#x5728;&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784; EhENO &#x4ECB;&#x7ECD;&#x4E86;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x4E2A; active site &#x4E2D;&#x6253;&#x5F00;&#x6784;&#x8C61;&#x4E0E;&#x5176;&#x4ED6;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7F51;&#x7AD9;&#x4E2D;&#x5C01;&#x95ED;&#x6784;&#x8C61;&#x4E0D;&#x5BF9;&#x79F0;&#x4E8C;&#x805A;&#x4F53;&#x3002;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7AD9;&#x70B9;&#x5305;&#x542B;&#x4E00;&#x4E2A; copurified &#x7684; 2-PGA &#x5206;&#x5B50;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x5DF2;&#x5173;&#x95ED;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7F51;&#x7AD9;&#x4E2D;&#x7684; 2-PGA &#x5206;&#x5B50;&#x6781;&#x4E3A;&#x76F8;&#x4F3C;&#xFF0C;&#x5DF2;&#x77E5;&#x4ECE;&#x5176;&#x4ED6;&#x70EF;-2-PGA &#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x6784;&#x8C61;&#xFF0C;&#x6253;&#x5F00;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7F51;&#x7AD9;&#x4E2D;&#x7684;&#x5F62;&#x6001;&#x662F;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x8F6C;&#x5411; 2-PGA &#x662F;&#x5927;&#x7EA6; 1.6 &#x2460; &#x4ECE;&#x91D1;&#x5C5E;&#x79BB;&#x5B50;&#x6211;&#xFF0C;&#x6700;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x4EE3;&#x8868; a precatalytic &#x60C5;&#x51B5;&#x3002;

&#x963F;&#x7C73;&#x5DF4;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5185;&#x963F;&#x7C73;&#x5DF4;&#x70EF;&#x9187;&#x5316;&#x9176;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

Entamoeba histolytica enolase (EhENO) reversibly interconverts 2-phosphoglyceric acid (2-PGA) and phosphoenolpyruvic acid (PEP). The crystal structure of the homodimeric EhENO is presented at a resolution of 1.9â€…Ã…. In the crystal structure EhENO presents as an asymmetric dimer with one active site in the open conformation and the other active site in the closed conformation. Interestingly, both active sites contain a copurified 2-PGA molecule. While the 2-PGA molecule in the closed active site closely resembles the conformation known from other enolase-2-PGA complexes, the conformation in the open active site is different. Here, 2-PGA is shifted approximately 1.6â€…Ã… away from metal ion I, most likely representing a precatalytic situation.

Structure analysis of Entamoeba histolytica enolase.

Entamoeba histolytica &#xE9;nolase (EhENO) interconverts r&#xE9;versible 2-phosphoglyc&#xE9;rique l&#x26;#39;acide (2-PGA) et l&#x26;#39;acide phospho&#xE9;nolpyruvique (PEP). La structure cristalline de la EhENO homodim&#xE8;re est pr&#xE9;sent&#xE9; &#xE0; une r&#xE9;solution de 1,9 &#xC5;. Dans la structure cristalline pr&#xE9;sente comme une EhENO dim&#xE8;re asym&#xE9;trique avec un site actif dans la conformation ouverte et l&#x26;#39;autre site actif dans la conformation ferm&#xE9;e. Fait int&#xE9;ressant, les deux sites actifs contiennent une copurified 2-PGA mol&#xE9;cule. Alors que la mol&#xE9;cule 2-PGA dans le site actif ferm&#xE9; ressemble &#xE9;troitement &#xE0; la conformation connu pour d&#x26;#39;autres &#xE9;nolase-2-PGA complexes, la conformation du site actif ouvert est diff&#xE9;rent. Ici, 2-PGA est d&#xE9;cal&#xE9; d&#x26;#39;environ 1,6 &#xC5; loin de ions m&#xE9;talliques I, le plus probable repr&#xE9;sentant une situation precatalytic.

Analyse de la structure d&#x26;#39;Entamoeba histolytica Enolase

Entamoeba Histolytica Enolase (EhENO) interconverts reversibel, 2-Phosphoglyceric (2-PGA) und Phosphoenolpyruvic S&auml;ure (PEP). Die Kristallstruktur von Homodimeric EhENO ist dargestellt bei einer Aufl&ouml;sung von 1,9 &Aring;. In der Kristallstruktur pr&auml;sentiert EhENO als ein asymmetrisches Dimer mit einem Active site in die offene Konformation und der anderen aktiven-Site in der geschlossenen Konformation. Interessanterweise enthalten beide aktiven Zentren ein copurified 2-PGA-Molek&uuml;l. W&auml;hrend das 2-PGA-Molek&uuml;l in der geschlossenen aktiven Site die Beschaffenheit von anderen Enolase-2-PGA-komplexen bekannt gleicht, unterscheidet sich die Konformation in die aktiv-Website &ouml;ffnen. Hier 2-PGA verschoben ist ca. 1,6 &Aring; vom Metallion ich, am ehesten repr&auml;sentiert a precatalytic Lage.

Strukturanalyse von Entamoeba Histolytica Enolase.

Enolasi di Entamoeba histolytica (EhENO) interconverts reversibilmente 2-fosfoglicerato (PGA-2) e acido phosphoenolpyruvic (PEP). La struttura cristallina dell&#39;ereditaria EhENO &egrave; presentata con una risoluzione di 1,9 &Aring;. Nella struttura di cristallo EhENO si presenta come un dimero asimmetrico con una active site nella conformazione aperta e altri sito attivo nella conformazione chiusa. &Egrave; interessante notare, entrambi siti attivi contengono una molecola copurified 2-PGA. Mentre la molecola 2-PGA nel sito attivo chiuso ricorda da vicino la conformazione conosciuta da altri complessi Enolasi-2-PGA, la conformazione del sito attivo aperto &egrave; diversa. Qui, 2-PGA &egrave; spostato circa 1.6 &Aring; lontano da ione metallico che, molto probabilmente rappresentano una situazione precatalytic.

Analisi della struttura di enolasi di Entamoeba histolytica.

&#x8D64;&#x75E2;&#x30A2;&#x30E1;&#x30FC;&#x30D0;&#x306E;&#x30A8;&#x30CE;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;EhENO&#xFF09;&#x304C;&#x53EF;&#x9006;&#x7684;&#x306B;2  - &#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30B0;&#x30EA;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#xFF08;2-PGA&#xFF09;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30A8;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x30D4;&#x30EB;&#x30D3;&#x30F3;&#x9178;&#xFF08;PEP&#x200B;&#x200B;&#xFF09;&#x3092;interconverts&#x3002;&#x30DB;&#x30E2;&#x4E8C;&#x91CF;&#x4F53;EhENO&#x306E;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;1.9&#x212B;&#x306E;&#x5206;&#x89E3;&#x80FD;&#x3067;&#x63D0;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;&#x306B;EhENO&#x306F;1&#x3064;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D7;&#x30F3;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x90E8;&#x4F4D;&#x3068;&#x9589;&#x3058;&#x305F;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x4ED6;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x975E;&#x5BFE;&#x79F0;&#x4E8C;&#x91CF;&#x4F53;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x73FE;&#x308C;&#x308B;&#x3002;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306F;&#x3001;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x7CBE;&#x88FD;2  -  PGA&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9589;&#x3058;&#x305F;&#x6D3B;&#x6027;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;2-PGA&#x5206;&#x5B50;&#x304C;&#x5BC6;&#x63A5;&#x306B;&#x4ED6;&#x306E;&#x30A8;&#x30CE;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;-2-PGA&#x932F;&#x4F53;&#x304B;&#x3089;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D7;&#x30F3;&#x6D3B;&#x6027;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;2-PGA&#x306F;&#x3001;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;precatalytic&#x72B6;&#x6CC1;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x91D1;&#x5C5E;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;I&#x304B;&#x3089;&#x3001;&#x200B;&#x200B;&#x7D04;1.6&#xC5;&#x306E;&#x8DDD;&#x96E2;&#x306B;&#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8D64;&#x75E2;&#x30A2;&#x30E1;&#x30FC;&#x30D0;&#x306E;&#x30A8;&#x30CE;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x89E3;&#x6790;

Entamoeba histolytica enolase (EhENO) &#xC5ED; 2-phosphoglyceric &#xC0B0; (2-PGA) &#xBC0F; phosphoenolpyruvic &#xC0B0; (PEP) interconverts. Homodimeric Eheno&#xC758; &#xACB0;&#xC815; &#xAD6C;&#xC870;&#xB294; 1.9 &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; &#xC81C;&#xC2DC; &Aring;. &#xACB0;&#xC815; &#xAD6C;&#xC870;&#xC5D0;&#xC11C; EhENO &#xC624;&#xD508; &#xB098; &#xB780; &#xD55C; active site&#xC640; &#xB2E4;&#xB978; &#xD65C;&#xC131; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xD3D0;&#xC1C4; &#xB098; &#xB780;&#xC5D0; &#xBE44;&#xB300;&#xCE6D; dimer&#xB85C; &#xC120;&#xBB3C; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xD765;&#xBBF8;&#xB86D;&#xAC8C;&#xB3C4;, &#xBAA8;&#xB450; &#xD65C;&#xC131; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; copurified 2 PGA &#xBD84;&#xC790; &#xD3EC;&#xD568;. &#xB2EB;&#xD78C;&#xB41C; &#xC561;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; 2 PGA &#xBD84;&#xC790;&#xC5D0; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xB2E4;&#xB978; enolase-2-PGA &#xB2E8;&#xC9C0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; &#xB098; &#xB780; &#xB3D9;&#xC548; &#xC561;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xC5F4;&#xAE30;&#xC5D0; &#xB098; &#xB780;&#xC740; &#xB2E4;&#xB985;&#xB2C8;&#xB2E4;. 2-PGA &#xC774;&#xB3D9; &#xC5EC;&#xAE30;, &#xAE08;&#xC18D; &#xC774;&#xC628; &#xB5A8;&#xC5B4;&#xC838; &#xC57D; 1.6 &Aring; &#xB0B4;&#xAC00; &#xAC00;&#xC7A5; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; a precatalytic &#xC0C1;&#xD669;.

Entamoeba histolytica enolase&#xC758; &#xAD6C;&#xC870; &#xBD84;&#xC11D;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Entamoeba histolytica enolasa (EhENO) reversible interconvierte 2-fosfoglic&#xE9;rico &#xE1;cido (2-PGA) y &#xE1;cido fosfoenolpir&#xFA;vico (PEP). La estructura cristalina de la EhENO homodim&#xE9;rica se presenta a una resoluci&#xF3;n de 1,9 &#xC5;. En la estructura cristalina EhENO presenta como un d&#xED;mero asim&#xE9;trico con un sitio activo en la conformaci&#xF3;n abierta y el otro sitio activo en la conformaci&#xF3;n cerrada. Curiosamente, ambos sitios activos contienen un copurified 2-PGA mol&#xE9;cula. Mientras que la mol&#xE9;cula de 2-PGA en el sitio activo cerrado se asemeja mucho a la conformaci&#xF3;n conocido de otros enolasa-2-PGA complejos, la conformaci&#xF3;n en el sitio activo abierto es diferente. Aqu&#xED;, 2-PGA se desplaza aproximadamente 1,6 &#xC5; lejos de iones met&#xE1;licos que, muy probablemente representa una situaci&#xF3;n precatalytic.

An&#xE1;lisis de la estructura de la Entamoeba histolytica enolasa

&#x5355;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#xFF0C;&#x963F;&#x7C73;&#x5DF4;&#xFF0C;&#x88AB;&#x53D7;&#x5230;&#x8BB8;&#x591A;&#x4E0D;&#x5229;&#x6761;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x5982;&#x8425;&#x517B;&#x532E;&#x4E4F;&#xFF0C;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684;&#x4E3B;&#x673A;&#x5728;&#x5176;&#x751F;&#x547D;&#x5468;&#x671F;&#x9636;&#x6BB5;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x662F;&#x5426;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x6BD2;&#x529B;&#x53EF;&#x80FD;&#x53D7;&#x9965;&#x997F;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6; (GS)&#x3002;&#x4E4B;&#x540E; GS &#x5F3A;&#x70C8;&#x589E;&#x5F3A;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x548C;&#x5176;&#x80FD;&#x529B;&#x8981;&#x6740;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x81EA;&#x6EB6;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6D04;&#x6E38;&#x884C;&#x4E3A;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x6DF1;&#x5165;&#x4E86;&#x89E3;&#x57FA;&#x7840;&#x63D0;&#x9AD8;&#x5BF9;&#x6BD2;&#x529B;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684; GS &#x7684;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x5B9A;&#x91CF;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#x5206;&#x6790;&#x5206;&#x6790;&#x63A7;&#x5236;&#x53CA;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x997F;&#x7684;&#x6ECB;&#x517B;&#x4F53;&#xFF0C;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x4E0A;&#x6E38;&#x8C03;&#x8282;&#x5143;&#x4EF6; 3 &#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D; (URE3-BP&#xFF09;&#xFF0C;&#x8C03;&#x8282; E.histolytica &#x6BD2;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x548C;&#x5BCC;&#x542B;&#x8D56;&#x6C28;&#x9178;&#x7684;&#x86CB;&#x767D; 1 (KRiP1) &#x662F;&#x8BF1;&#x53D1;&#x809D;&#x8113;&#x80BF;&#x53D1;&#x5C55;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x662F;&#x7531; GS &#x589E;&#x9AD8;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x5206;&#x6790;&#x4E86; E.&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5185;&#x963F;&#x7C73;&#x5DF4;&#x819C;&#x5206;&#x6570;&#xFF0C;&#x5E76;&#x6CE8;&#x610F;&#x5230; Gal/&#x591A;&#x51DD;&#x96C6;&#x7D20;&#x5149;&#x4E9A;&#x57FA; LgL1 GS &#x4E0A;&#x8C03;&#x3002;&#x5947;&#x602A;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;amoebapore A (Ap A) &#x548C;&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; A5 &#xFF08;CP-A5&#xFF09;&#xFF0C;&#x4E24;&#x4E2A;&#x91CD;&#x8981; E.&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5185;&#x963F;&#x7C73;&#x5DF4;&#x81F4;&#x75C5;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;&#x88AB;&#x5F3A;&#x70C8;&#x4E0B;&#x8C03;&#x7684; GS&#x3002;&#x867D;&#x7136; GS &#x4E0A; E.&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5185;&#x963F;&#x7C73;&#x5DF4;&#x6BD2;&#x529B;&#x523A;&#x6FC0;&#x6548;&#x5E94;&#x4E5F;&#x80FD;&#x5B88;&#x6052;&#x682A;&#x6C89;&#x9ED8;&#x7684; Ap A &#x548C; CP-A5&#xFF0C;&#x5B83;&#x662F;&#x4E22;&#x5931;&#x5728; LgL1 &#x548C; KRiP1 &#x4E0B;&#x8C03;&#x682A;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x5F3A;&#x8C03; GS E.histolytica &#x6BD2;&#x529B;&#x7684;&#x8C03;&#x5236;&#x548C;&#x5BF9;&#x8FD9;&#x79CD;&#x73B0;&#x8C61;&#x7684; KRiP1 &#x548C; Lgl1 &#x53C2;&#x4E0E;&#x7684;&#x610F;&#x5916;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x9965;&#x997F;&#x63D0;&#x9AD8;&#x4E86;&#x963F;&#x7C73;&#x5DF4;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5185;&#x963F;&#x7C73;&#x5DF4;&#x81F4;&#x75C5;&#x529B;&#x3002;

The unicellular parasite, Entamoeba histolytica, is exposed to numerous adverse conditions, such as nutrient deprivation, during its life cycle stages in the human host. In the present study, we examined whether the parasite virulence could be influenced by glucose starvation (GS). The migratory behaviour of the parasite and its capability to kill mammalian cells and to lyse erythrocytes is strongly enhanced following GS. In order to gain insights into the mechanism underlying the GS boosting effects on virulence, we analyzed differences in protein expression levels in control and glucose-starved trophozoites, by quantitative proteomic analysis. We observed that upstream regulatory element 3-binding protein (URE3-BP), a transcription factor that modulates E.histolytica virulence, and the lysine-rich protein 1 (KRiP1) which is induced during liver abscess development, are upregulated by GS. We also analyzed E. histolytica membrane fractions and noticed that the Gal/GalNAc lectin light subunit LgL1 is up-regulated by GS. Surprisingly, amoebapore A (Ap-A) and cysteine proteinase A5 (CP-A5), two important E. histolytica virulence factors, were strongly down-regulated by GS. While the boosting effect of GS on E. histolytica virulence was conserved in strains silenced for Ap-A and CP-A5, it was lost in LgL1 and in KRiP1 down-regulated strains. These data emphasize the unexpected role of GS in the modulation of E.histolytica virulence and the involvement of KRiP1 and Lgl1 in this phenomenon.

Glucose starvation boosts Entamoeba histolytica virulence.

Le parasite unicellulaire, Entamoeba histolytica, est expos&#xE9;e &#xE0; de nombreuses conditions d&#xE9;favorables, comme une carence en nutriments, au cours de ses stades du cycle de vie chez l&#x26;#39;h&#xF4;te humain. Dans la pr&#xE9;sente &#xE9;tude, nous avons examin&#xE9; si la virulence du parasite pourrait &#xEA;tre influenc&#xE9;e par la privation de glucose (GS). Le comportement migratoire du parasite et sa capacit&#xE9; &#xE0; tuer les cellules de mammif&#xE8;res et de lyser les &#xE9;rythrocytes est fortement accrue &#xE0; la suite GS. Afin de mieux comprendre dans le m&#xE9;canisme qui sous-tend la GS renforcer les effets sur la virulence, nous avons analys&#xE9; les diff&#xE9;rences de niveaux d&#x26;#39;expression de prot&#xE9;ines dans le contr&#xF4;le et la glucose-affam&#xE9;s trophozo&#xEF;tes, par analyse prot&#xE9;omique quantitative. Nous avons observ&#xE9; que l&#x26;#39;&#xE9;l&#xE9;ment en amont de r&#xE9;glementation 3-binding protein (URE3-BP), un facteur de transcription qui module la virulence E.histolytica, et la prot&#xE9;ine riche en lysine 1 (KRiP1) qui est induite au cours du d&#xE9;veloppement d&#x26;#39;abc&#xE8;s du foie, sont r&#xE9;gul&#xE9;s &#xE0; la hausse par GS. Nous avons &#xE9;galement analys&#xE9; les fractions membranaires E. histolytica et a remarqu&#xE9; que le Gal / GalNAc lectine sous-unit&#xE9; de lumi&#xE8;re LgL1 est r&#xE9;gul&#xE9;e &#xE0; la hausse par GS. &#xC9;tonnamment, amoebapore A (Ap-A) et de la cyst&#xE9;ine prot&#xE9;inase A5 (CP-A5), deux importants facteurs de virulence E. histolytica, &#xE9;taient fortement r&#xE9;gul&#xE9;e &#xE0; la baisse par GS. Bien que l&#x26;#39;effet stimulant de la GS sur E. histolytica de virulence a &#xE9;t&#xE9; conserv&#xE9; dans des souches de silencieux pour les Ap-A et CP-A5, il a &#xE9;t&#xE9; perdu dans LgL1 et KRiP1 r&#xE9;gul&#xE9; &#xE0; la baisse des souches. Ces donn&#xE9;es soulignent le r&#xF4;le inattendu de GS dans la modulation de la virulence E.histolytica et l&#x26;#39;implication des KRiP1 et Lgl1 dans ce ph&#xE9;nom&#xE8;ne.

La privation de glucose stimule Entamoeba histolytica virulence

Der einzellige Parasiten, Entamoeba Histolytica, ist zahlreichen widrigen Bedingungen, wie N&auml;hrstoff Mangel, in seinen Phasen des Lebenszyklus im menschlichen Wirt ausgesetzt. Studieren Sie in der Gegenwart, wir gepr&uuml;ft, ob die Virulenz des Parasiten durch Glukose Hunger (GS) beeinflusst werden k&ouml;nnte. Das Zugverhalten der Parasit und seine F&auml;higkeit, S&auml;ugetier-Zellen zu t&ouml;ten und Erythrozyten aufzul&ouml;sen wird nach GS stark verbessert. Um tiefere Einblicke in den Mechanismus zugrunde liegen die GS, die Steigerung der Auswirkungen auf die Virulenz, analysiert wir Unterschiede im Ausdruck bei Kontrolle und Glukose-verhungert Trophozoiten, Protein von Proteomic quantitative Analyse. Wir beobachteten, dass upstream regulatorischen Element 3-verbindliches Protein (URE3-BP), einen Transkriptionsfaktor, der die E.histolytica Virulenz, Verz&ouml;gerung und das Lysin-Reich-Protein 1 (KRiP1), das w&auml;hrend der Entwicklung der Leber Abszess, induziert wird herraufreguliert von GS. Wir auch E. Histolytica Membrane Br&uuml;che analysiert und festgestellt, dass die Gal/GalNAc Lektin Licht-Untereinheit LgL1 oben-geregelt durch GS. &Uuml;berraschend, Ap-A Amoebapore und Cystein Proteinase A5 (CP-A5), zwei wichtige E. Histolytica Virulenzfaktoren, waren stark von GS unten geregelt. W&auml;hrend bei den St&auml;mmen zum Schweigen gebracht, f&uuml;r die Steigerung Wirkung der GS auf E. Histolytica Virulenz konserviert wurde Ap-A und CP-A5, wurde es in LgL1 und KRiP1 unten-geregelt-St&auml;mme. Diese Daten unterstreichen die unerwartete Rolle der GS in der Modulation von E.histolytica Virulenz und die Einbeziehung von KRiP1 und Lgl1 in diesem Ph&auml;nomen.

Glukose Hunger steigert Entamoeba Histolytica Virulenz.

Il parassita unicellulare, Entamoeba histolytica, &egrave; esposta a numerose condizioni avverse, come privazione nutriente, durante le fasi del ciclo di vita nell&#39;ospite umano. Nel presente studio, abbiamo esaminato se la virulenza del parassita potrebbe essere influenzata da fame di glucosio (GS). Il comportamento migratorio del parassita e la sua capacit&agrave; di uccidere le cellule di mammiferi e di lisare gli eritrociti &egrave; fortemente migliorato in seguito GS. Al fine di acquisire conoscenze nel meccanismo sottostante il GS effetti sulla virulenza, abbiamo analizzato le differenze nei livelli di espressione della proteina nel controllo e glucosio-fame trofozoiti, da Analisi proteomic quantitativa. Abbiamo osservato che l&#39;elemento normativo a Monte 3-binding protein (URE3-BP), un fattore di trascrizione che modula la virulenza di E.histolytica, e il ricco di lisina proteina 1 (KRiP1) che &egrave; indotta durante lo sviluppo di ascesso epatico, sono sovraregolati da GS. Abbiamo anche analizzato le frazioni di membrana di E. histolytica e ho notato che la subunit&agrave; leggera LgL1 lectina Gal/GalNAc &egrave; up-regolata da GS. Sorprendentemente, amoebapore (Ap-A) e proteinasi cisteina A5 (CP-A5), due fattori di virulenza importante E. histolytica, erano fortemente gi&ugrave;-regolato da GS. Mentre l&#39;effetto d&#39;amplificazione di GS sulla virulenza E. histolytica &egrave; stato conservato in ceppi silenziati per Ap-A e CP-A5, &egrave; stato perso in LgL1 e in KRiP1 gi&ugrave;-regolato ceppi. Questi dati evidenziano il ruolo imprevisto della GS nella modulazione del E.histolytica virulenza e il coinvolgimento di KRiP1 e Lgl1 in questo fenomeno.

Fame di glucosio aumenta la virulenza di Entamoeba histolytica.

&#x5358;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x3001;&#x8D64;&#x75E2;&#x30A2;&#x30E1;&#x30FC;&#x30D0;&#x306F;&#x30D2;&#x30C8;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D5;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x6804;&#x990A;&#x6B20;&#x4E4F;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x4E0D;&#x5229;&#x306A;&#x6761;&#x4EF6;&#x306B;&#x3055;&#x3089;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306F;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x98E2;&#x9913;&#xFF08;GS&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x54FA;&#x4E73;&#x52D5;&#x7269;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x6BBA;&#x3059;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x3092;&#x6EB6;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x306E;&#x56DE;&#x904A;&#x884C;&#x52D5;&#x3092;&#x5F37;&#x304F;GS&#x4EE5;&#x4E0B;&#x306E;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x3078;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;GS&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3078;&#x306E;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x3092;&#x5F97;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30FC;&#x30E0;&#x89E3;&#x6790;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x5236;&#x5FA1;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x98E2;&#x9913;&#x6804;&#x990A;&#x578B;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x767A;&#x73FE;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x4E0A;&#x6D41;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x30A8;&#x30EC;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3001;3&#x7D50;&#x5408;&#x200B;&#x200B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;URE3-BP&#xFF09;&#x3001;E.histolytica&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001;&#x809D;&#x81BF;&#x760D;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x306B;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;&#x304C;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;1&#xFF08;KRiP1&#xFF09;&#x3001;GS&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x8D64;&#x75E2;&#x819C;&#x753B;&#x5206;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x3001;&#x30AE;&#x30E3;&#x30EB;/ GalNAc&#x306E;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x5149;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;LgL1&#x304C;GS&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x6C17;&#x3065;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x9A5A;&#x304F;&#x3079;&#x304D;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;amoebapore A&#xFF08;AP-&#xFF09;&#x3068;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;A5&#xFF08;CP-A5&#xFF09;&#x3001;2&#x3064;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8D64;&#x75E2;&#x30A2;&#x30E1;&#x30FC;&#x30D0;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x56E0;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x5F37;&#x304F;GS&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x8D64;&#x75E2;&#x30A2;&#x30E1;&#x30FC;&#x30D0;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;GS&#x306E;&#x6607;&#x5727;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;AP-A&#x3068;CP-A5&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6C88;&#x9ED9;&#x682A;&#x3067;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;LgL1&#x3084;KRiP1&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x305F;&#x7CFB;&#x7D71;&#x3067;&#x5931;&#x308F;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;E.histolytica&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x3068;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x73FE;&#x8C61;&#x306B;KRiP1&#x3068;Lgl1&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;GS&#x306E;&#x4E88;&#x60F3;&#x5916;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

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&#xB2E8; &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; Entamoeba histolytica &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xB77C;&#xC774;&#xD504; &#xC0AC;&#xC774;&#xD074; &#xB2E8;&#xACC4; &#xB3D9;&#xC548; &#xC601;&#xC591;&#xC18C; &#xBD80;&#xC871; &#xB4F1; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xBD88;&#xB9AC; &#xD55C; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD604;&#xC7AC;&#xC758;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5F0;&#xAD6C;, &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xB3C5;&#xC131; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xAE30;&#xC544; (GS)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xB294;&#xC9C0; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD558;&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC;. &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xBC0F; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC8FD; &#xC77C; lyse &#xC801;&#xD608;&#xAD6C;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC758; &#xCCA0;&#xC0C8; &#xD589;&#xB3D9; GS&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xAC8C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB3C5;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC99D;&#xD3ED; &#xD558;&#xB294; GS&#xB97C; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xC5BB;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC591;&#xC801; proteomic &#xBD84;&#xC11D; &#xD558; &#xC5EC; &#xC81C;&#xC5B4; &#xBC0F; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xAD76; &#xC5B4; trophozoites &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC2DD; &#xB808;&#xBCA8;&#xC758; &#xCC28;&#xC774; &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC5C5;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xADDC;&#xC81C; &#xC694;&#xC18C; 3 &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (BP URE3), E.histolytica &#xB3C5;&#xC131;&#xC744; &#xBCC0;&#xC870; &#xD558;&#xB294; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790;&#xC640; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD658;&#xACBD; &#xAC04; &#xB18D; &#xC591; &#xC720;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB77C;&#xC774; &#xC2E0;&#xC774; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 1 (KRiP1) GS&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; upregulated&#xB97C; &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C; E. histolytica &#xB9C9; &#xBD84;&#xC218;&#xB97C; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558; &#xACE0;&#xB294; &#xC5EC;&#xC790;/GalNAc lectin &#xBE5B; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; LgL1 GS&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC5C5; &#xADDC;&#xC81C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, amoebapore (Ap A)&#xACFC; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD14C;&#xC778; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; A5 (CP-a 5), &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; E. histolytica &#xB3C5;&#xC131; &#xC694;&#xC778; &#xAC15;&#xD558;&#xAC8C; &#xB2E4;&#xC6B4; GS&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C; &#xD588;&#xB2E4;. E. histolytica &#xB3C5;&#xC131;&#xC5D0; GS&#xC758; &#xC99D;&#xD3ED; &#xD6A8;&#xACFC; &#xBCC0;&#xC885;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC785; &#xB9C9; &#xC74C;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xC874; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; Ap-A CP-a 5, LgL1 &#xBC0F; KRiP1 &#xC544;&#xB798;&#xB85C; &#xBCC0;&#xC885; &#xC190;&#xC2E4; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; E.histolytica &#xB3C5;&#xC131;&#xC758; &#xBCC0;&#xC870;&#xC640;&#xC774; &#xD604;&#xC0C1;&#xC5D0; Krip1&#xC640; lgl1&#xC758; &#xCC38;&#xC5EC;&#xC5D0; GS&#xC758; &#xC608;&#xC0C1;&#xCE58; &#xBABB;&#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xAC15;&#xC870;.

&#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xAE30;&#xC544; Entamoeba histolytica &#xB3C5;&#xC131;&#xC744; &#xBC00;&#xC5B4; &#xC900;&#xB2E4;.

El par&#xE1;sito unicelular, Entamoeba histolytica, est&#xE1; expuesta a numerosas condiciones adversas, tales como la privaci&#xF3;n de nutrientes, en sus etapas del ciclo vital en el hu&#xE9;sped humano. En el presente estudio, se examin&#xF3; si la virulencia parasitaria que podr&#xED;a estar influenciado por el hambre de glucosa (GS). El comportamiento migratorio del par&#xE1;sito y su capacidad para matar las c&#xE9;lulas de mam&#xED;feros y la lisis de los eritrocitos es fuertemente reforzada despu&#xE9;s de la SG. Con el fin de obtener informaci&#xF3;n sobre el mecanismo subyacente a la SG efectos estimulantes sobre la virulencia, se analizaron las diferencias en los niveles de expresi&#xF3;n de prote&#xED;nas en el control y trofozo&#xED;tos hambrientos de glucosa, con un an&#xE1;lisis prote&#xF3;mico cuantitativo. Se observ&#xF3; que el elemento regulador aguas arriba 3-prote&#xED;na de uni&#xF3;n (URE3-BP), un factor de transcripci&#xF3;n que modula la virulencia E.histolytica, y la prote&#xED;na rica en lisina-1 (KRiP1), que se induce durante el desarrollo del absceso hep&#xE1;tico, se regul&#xF3; por la SG. Se analizaron tambi&#xE9;n las fracciones de membrana de E. histolytica y se dio cuenta de que el Gal / GalNAc subunidad ligera lectina LgL1 est&#xE1; regulado por la SG. Sorprendentemente, amoebapore A (AP-A) y la ciste&#xED;na proteinasa A5 (A5-CP), dos importantes factores de virulencia de E. histolytica, fueron fuertemente las reguladas por la SG. Mientras que el efecto potenciador de la SG en E. histolytica virulencia de las cepas se conserva en silenciadas para AP-A y PP-A5, que se perdi&#xF3; en LgL1 y en KRiP1 regulados a la baja las cepas. Estos datos destacan el papel inesperado de GS en la modulaci&#xF3;n de la virulencia E.histolytica y la participaci&#xF3;n de KRiP1 y Lgl1 en este fen&#xF3;meno.

El hambre de glucosa aumenta Entamoeba histolytica virulencia

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&#x963F;&#x7C73;&#x5DF4;&#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x7EBF;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D; EhMLBP &#x63D0;&#x4F9B;&#x4FDD;&#x62A4;&#x4EE5;&#x9632;&#x6B62;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x3002;

Adaptation to environmental stress is a key process that allows the unicellular parasite Entamoeba histolytica to survive in its human host. We previously characterized EhMLBP as an essential protein for the growth and the virulence of the parasite. EhMLBP binds to methylated repetitive DNA, and is one of the core proteins of the parasite's epigenetic machinery. Here, we show that EhMLBP and heat shock proteins have common properties. EhMLBP is induced by heat shock and its expression is regulated by a heat shock element binding site that is located in its 5' non-coding region. Following heat shock, the perinuclear localization of EhMLBP in control trophozoites is replaced by an even distribution within the nucleus alongside with an enhanced recruitment of EhMLBP to the reverse transcriptase of a long interspersed nucleotide element (LINE) DNA. Constitutive overexpression of EhMLBP protects trophozoites against heat shock and reduces protein aggregation. This protective function is lost in trophozoites that overexpress a mutated form of EhMLBP which is devoid of its heat shock domain. To the best of our knowledge, this is the first report of a methyl DNA-binding protein that plays a protective role against heat shock.

The Entamoeba histolytica methylated LINE-binding protein EhMLBP provides protection against heat shock.

L&#x26;#39;adaptation au stress environnemental est un processus cl&#xE9; qui permet &#xE0; l&#x26;#39;unicellulaire parasite Entamoeba histolytica de survivre chez son h&#xF4;te humain. Nous avons d&#xE9;j&#xE0; caract&#xE9;ris&#xE9; EhMLBP comme une prot&#xE9;ine essentielle pour la croissance et la virulence du parasite. EhMLBP lie &#xE0; l&#x26;#39;ADN m&#xE9;thyl&#xE9; r&#xE9;p&#xE9;titif, et est l&#x26;#39;une des prot&#xE9;ines essentielles de machines &#xE9;pig&#xE9;n&#xE9;tique du parasite. Ici, nous montrons que les prot&#xE9;ines de choc thermique et EhMLBP ont des propri&#xE9;t&#xE9;s communes. EhMLBP est induite par le choc thermique et son expression est r&#xE9;gul&#xE9;e par un site de liaison &#xE9;l&#xE9;ment de choc thermique qui se trouve dans sa non codante 5 &#x26;#39;. &#xC0; la suite de choc thermique, la localisation de p&#xE9;rinucl&#xE9;aire dans EhMLBP trophozo&#xEF;tes contr&#xF4;le est remplac&#xE9; par une r&#xE9;partition uniforme dans le noyau &#xE0; c&#xF4;t&#xE9; d&#x26;#39;un recrutement am&#xE9;lior&#xE9; de EhMLBP &#xE0; la transcriptase inverse d&#x26;#39;un &#xE9;l&#xE9;ment long intercal&#xE9;s (LIGNE) nucl&#xE9;otidique d&#x26;#39;ADN. Surexpression constitutive de EhMLBP prot&#xE8;ge contre les chocs trophozo&#xEF;tes de chaleur et r&#xE9;duit l&#x26;#39;agr&#xE9;gation des prot&#xE9;ines. Cette fonction de protection est perdue dans trophozo&#xEF;tes qui surexpriment une forme mut&#xE9;e de EhMLBP qui est d&#xE9;pourvue de son domaine de choc thermique. Pour le meilleur de notre connaissance, ce rapport est le premier d&#x26;#39;une liaison &#xE0; l&#x26;#39;ADN m&#xE9;thyle prot&#xE9;ine qui joue un r&#xF4;le protecteur contre le choc thermique.

Le Entamoeba histolytica EhMLBP m&#xE9;thyl&#xE9; prot&#xE9;ines LINE contraignant Assure la protection contre Heat Shock

Anpassung an Umweltstress ist ein Schl&uuml;sselprozess, mit dem die einzelligen Parasit Entamoeba Histolytica in seiner menschlichen Wirtes &uuml;berleben kann. Wir zuvor charakterisiert EhMLBP als eine wesentliche Protein f&uuml;r das Wachstum und der Virulenz des Parasiten. EhMLBP bindet an methylierte repetitive DNA, und ist eines der Kern-Proteine von der Parasit epigenetische Maschinen. Hier zeigen wir, dass EhMLBP und Hitze-Schock-Proteine gemeinsame Eigenschaften haben. EhMLBP wird induziert durch Hitzeschock und seinen Ausdruck wird durch eine Hitze-Schock Element die Bindungsstelle, die sich in 5 befindet &#39; nicht-kodierenden Region. Nach Hitzeschock ist die Lokalisierung perinukle&auml;re EhMLBP im Steuerelement Trophozoiten ersetzt durch eine gleichm&auml;&szlig;ige Verteilung im Atomkern neben mit einer verst&auml;rkten Rekrutierung von EhMLBP bis das R&uuml;cktranscriptase eine lange eingestreuten Nukleotid-Element (Linie)-DNA. Konstitutive &Uuml;berexpression des EhMLBP sch&uuml;tzt Trophozoiten gegen W&auml;rmeschock und reduziert Proteinanh&auml;ufung. Diese Schutzfunktion ist in Trophozoiten verloren, die eine mutierte Form des EhMLBP &uuml;berexprimiert, die frei von seiner Hitze-Schock-Dom&auml;ne ist. Nach bestem Wissen ist dies der erste Bericht von einer DNA-bindenden Protein, das eine sch&uuml;tzende Rolle gegen Hitzeschock spielt-Methyl.

Die Entamoeba Histolytica methyliert LINE-verbindliches Protein, die EhMLBP Schutz gegen W&auml;rmeschock bietet.

Adattamento allo stress ambientale &egrave; un processo chiave che permette il parassita unicellulare Entamoeba histolytica sopravvivere nel suo ospite umano. Abbiamo precedentemente caratterizzato EhMLBP come una proteina essenziale per la crescita e la virulenza del parassita. EhMLBP si lega al DNA metilato ripetitivo ed &egrave; uno delle proteine core di macchinari epigenetico del parassita. Qui, ci mostrano che le proteine di scossa di calore ed EhMLBP hanno propriet&agrave; comuni. EhMLBP &egrave; indotta dalla scossa di calore e la sua espressione &egrave; regolata da un sito calore di legame elemento di shock che si trova nel suo 5&#39; regione non codificante. A seguito di scossa di calore, la localizzazione perinucleare di EhMLBP in trofozoiti di controllo &egrave; sostituita da una distribuzione omogenea all&#39;interno del nucleo al fianco con una maggiore assunzione di EhMLBP per la trascrittasi inversa di un nucleotide long interspersed element (linea) DNA. Costitutiva sovraespressione di EhMLBP protegge i trofozoiti contro scossa di calore e riduce l&#39;aggregazione proteica. Questa funzione protettiva &egrave; perso in trofozoiti che iperesprimono una forma mutata di EhMLBP che &egrave; privo di suo dominio di scossa di calore. Il meglio della nostra conoscenza, questo &egrave; il primo rapporto di un metile DNA-binding protein che svolge un ruolo protettivo contro scossa di calore.

L&#39;Entamoeba histolytica metilato linea-binding protein che ehmlbp fornisce una protezione contro la scossa di calore.

&#x74B0;&#x5883;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x3078;&#x306E;&#x9069;&#x5FDC;&#x306F;&#x3001;&#x5358;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x8D64;&#x75E2;&#x30A2;&#x30E1;&#x30FC;&#x30D0;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30D2;&#x30C8;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x751F;&#x304D;&#x6B8B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x3068;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x306A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x3057;&#x3066;EhMLBP&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x3002; EhMLBP&#x306F;&#x3001;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x53CD;&#x5FA9;DNA&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x3001;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x306E;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x6A5F;&#x68B0;&#x306E;&#x30B3;&#x30A2;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x4E00;&#x3064;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;EhMLBP&#x3068;&#x71B1;&#x30B7;&#x30E7;&#x30C3;&#x30AF;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x304C;&#x5171;&#x901A;&#x306E;&#x6027;&#x8CEA;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; EhMLBP&#x306F;&#x71B1;&#x30B7;&#x30E7;&#x30C3;&#x30AF;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;5 &#x26;#39;&#x975E;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x914D;&#x7F6E;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x71B1;&#x30B7;&#x30E7;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A8;&#x30EC;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x7D50;&#x5408;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x71B1;&#x30B7;&#x30E7;&#x30C3;&#x30AF;&#x306B;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x5236;&#x5FA1;&#x6804;&#x990A;&#x578B;&#x3067;EhMLBP&#x306E;&#x6838;&#x5468;&#x56F2;&#x306E;&#x5C40;&#x5728;&#x306F;&#x3001;&#x9577;&#x3044;&#x9593;&#x306B;&#x6563;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x5869;&#x57FA;&#x8981;&#x7D20;&#xFF08;LINE&#xFF09;DNA&#x306E;&#x9006;&#x8EE2;&#x5199;&#x9175;&#x7D20;&#x306B;EhMLBP&#x306E;&#x5F37;&#x5316;&#x52DF;&#x96C6;&#x3068;&#x4E26;&#x3093;&#x3067;&#x6838;&#x5185;&#x306B;&#x3082;&#x5206;&#x5E03;&#x306B;&#x7F6E;&#x304D;&#x63DB;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002; EhMLBP&#x306E;&#x69CB;&#x6210;&#x7684;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x71B1;&#x30B7;&#x30E7;&#x30C3;&#x30AF;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x6804;&#x990A;&#x4F53;&#x3092;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3057;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x51DD;&#x96C6;&#x3092;&#x4F4E;&#x6E1B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x4FDD;&#x8B77;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x71B1;&#x30B7;&#x30E7;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;EhMLBP&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x5F62;&#x3092;&#x6804;&#x990A;&#x578B;&#x3067;&#x5931;&#x308F;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x77E5;&#x308B;&#x9650;&#x308A;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x71B1;&#x30B7;&#x30E7;&#x30C3;&#x30AF;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x4FDD;&#x8B77;&#x7684;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;DNA&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x5831;&#x544A;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;

&#x8D64;&#x75E2;&#x30A2;&#x30E1;&#x30FC;&#x30D0;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;LINE-&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;EhMLBP&#x306F;&#x3001;&#x71B1;&#x30B7;&#x30E7;&#x30C3;&#x30AF;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xD658;&#xACBD; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC801;&#xC751;&#xC740; &#xB2E8; &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; Entamoeba histolytica &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0B4;&#xC544;&#xB0A8;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xD575;&#xC2EC; &#xACFC;&#xC815;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC131;&#xC7A5;&#xACFC; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;&#xC758; &#xB3C5;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC73C;&#xB85C; Ehmlbp&#xB97C; &#xD2B9;&#xC9D5;. EhMLBP methylated &#xBC18;&#xBCF5;&#xC801;&#xC778; DNA&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xACE0; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;&#xC758; epigenetic &#xAE30;&#xACC4;&#xC758; &#xD575;&#xC2EC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; EhMLBP &#xBC0F; &#xC5F4; &#xCDA9;&#xACA9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xC18D;&#xC131;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. EhMLBP &#xC5F4; &#xCDA9;&#xACA9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C;&#xC640; &#xADF8; &#xC2DD; &#xC5F4; &#xCDA9;&#xACA9; &#xC694;&#xC18C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; 5&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C; &#39; &#xBE44; &#xCF54;&#xB529; &#xC601;&#xC5ED;. &#xC5F4; &#xCDA9;&#xACA9;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC81C;&#xC5B4; trophozoites&#xC5D0;&#xC11C; Ehmlbp&#xC758; perinuclear &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xAE34; interspersed &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; &#xC694;&#xC18C; (&#xC120;) DNA &#xC5ED;&#xC804;&#xC0AC; &#xD558; Ehmlbp&#xC758; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xCC44;&#xC6A9;&#xACFC; &#xD568;&#xAED8; &#xD575; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE0;&#xB974;&#xAC8C; &#xBD84;&#xD3EC; &#xD558; &#xC5EC; &#xBC14;&#xB01D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC81C;&#xC815; overexpression Ehmlbp&#xC758; &#xC5F4; &#xCDA9;&#xACA9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; trophozoites&#xB97C; &#xBCF4;&#xD638; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC9D1;&#xACC4;&#xB97C; &#xAC10;&#xC18C; &#xC2DC;&#xD0A8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBCF4;&#xD638; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC740; &#xC5C6;&#xB294; &#xC5F4; &#xCDA9;&#xACA9; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC740; Ehmlbp&#xC758; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD615;&#xD0DC; overexpress trophozoites&#xC5D0;&#xC11C; &#xC190;&#xC2E4; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC9C0;&#xC2DD;&#xC774; &#xCD5C;&#xACE0;&#xC758; &#xBA54; &#xD2F8; &#xC5F4; &#xCDA9;&#xACA9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCF4;&#xD638; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD558;&#xB294; DNA &#xC758;&#xBB34;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Entamoeba histolytica &#xAC20; &#xB77C;&#xC778; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; EhMLBP &#xC5F4; &#xCDA9;&#xACA9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCF4;&#xD638;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La adaptaci&#xF3;n al estr&#xE9;s ambiental es un proceso clave que permite que el par&#xE1;sito Entamoeba histolytica unicelulares para sobrevivir en el hu&#xE9;sped humano. Hemos caracterizado previamente EhMLBP como una prote&#xED;na esencial para el crecimiento y la virulencia del par&#xE1;sito. EhMLBP se une al ADN repetitivo metilado, y es una de las prote&#xED;nas del core de la maquinaria epigen&#xE9;tica del par&#xE1;sito. En este sentido, muestran que las prote&#xED;nas de choque t&#xE9;rmico y EhMLBP tienen propiedades comunes. EhMLBP es inducida por choque t&#xE9;rmico y su expresi&#xF3;n es regulada por un sitio de calor elemento de choque de uni&#xF3;n que est&#xE1; localizado en la regi&#xF3;n no codificante su extremo 5 &#x26;#39;. Despu&#xE9;s de choque t&#xE9;rmico, la localizaci&#xF3;n perinuclear de EhMLBP en trofozo&#xED;tos de control se sustituye por una distribuci&#xF3;n uniforme dentro del n&#xFA;cleo, junto con una contrataci&#xF3;n mejorada de EhMLBP a la transcriptasa inversa de un largo intercaladas elemento de nucle&#xF3;tidos (LINE) del ADN. Sobreexpresi&#xF3;n constitutiva de EhMLBP protege contra trofozo&#xED;tos de choque t&#xE9;rmico y reduce la agregaci&#xF3;n de prote&#xED;nas. Esta funci&#xF3;n protectora se pierde en trofozo&#xED;tos que sobreexpresan una forma mutada de EhMLBP que est&#xE1; desprovisto de su dominio de choque t&#xE9;rmico. A lo mejor de nuestro conocimiento, este es el primer informe de un grupo metilo de ADN-prote&#xED;na de uni&#xF3;n que juega un papel protector contra el choque t&#xE9;rmico.

Ayala Tovy

Faculty of Medicine,
Rappaport Institute,
Faculty of Medicine, Rappaport Institute

Technion - Israel Institute of Technology

In vitro tRNA Methylation Assay with the Entamoeba histolytica DNA and tRNA Methyltransferase Dnmt2 (Ehmeth) Enzyme

Ayala Tovy

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Faculty of Medicine,Rappaport Institute,Faculty of Medicine, Rappaport Institute

Technion - Israel Institute of Technology

In vitro tRNA Methylation Assay with the Entamoeba histolytica DNA and tRNA Methyltransferase Dnmt2 (Ehmeth) Enzyme

Faculty of Medicine,
Rappaport Institute,
Faculty of Medicine, Rappaport Institute