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Massachusetts General Hospital

Indiana University of Pennsylvania

&#x5728;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#x4E2D;&#x7684; GAL &#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7684; Gal4 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x65F6;&#xFF0C;&#x8981;&#x6C42; Gal3 &#x4E0E; Gal80&#xFF0C;Gal4 &#x6291;&#x5236;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x5DF2;&#x77E5;&#x534A;&#x4E73;&#x7CD6;&#x548C; ATP &#x6FC0;&#x6D3B; Gal3 &#x4E0E; Gal80 &#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x662F;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x65E2;&#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; Gal80 &#x7684;&#x8868;&#x9762;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x901A;&#x8FC7; GAL3C &#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x5BFC;&#x81F4;&#x534A;&#x4E73;&#x7CD6;&#x72EC;&#x7ACB; Gal3 Gal80 &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x5185;&#x6291;&#x5236;&#x6291;&#x5236;&#x89E3;&#x51B3;&#x8FD9;&#x95EE;&#x9898;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x521B;&#x5EFA;&#x4E86;&#x65B0;&#x7684;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;GAL3SOC&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E14;&#x8868;&#x660E;&#x5B83;&#x538B;&#x5236;&#x65B0;&#x7684; GAL3C &#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x4E86;&#x51E0;&#x4E2A;&#x7684;&#x65B0;&#x5B64;&#x7ACB;&#x548C;&#x73B0;&#x6709; GAL3C &#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x57FA;&#x56E0;&#x6574;&#x4E2A;&#x6620;&#x5C04;&#x5BF9; GAL3SOC &#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x9664;&#x4E86;&#x4E00;&#x4E2A; GAL3C &#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;D368V&#xFF0C;&#x90FD;&#x662F; GAL3SOC &#x7684;&#x753B;&#x9762;&#x3002;GAL3SOC &#x548C;&#x6240;&#x6709; GAL3C &#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x88AB;&#x672C;&#x5730;&#x5316; Gal3 &#x540C;&#x6E90;&#x6027;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x57FA;&#x4E8E;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x76F8;&#x5173;&#x7684; Gal1 &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x4E3A; Gal80 &#x63D0;&#x4F9B; allosterism &#x4E2D;&#x534A;&#x4E73;&#x7CD6;-&#x4E0E; ATP-&#x6FC0;&#x6D3B; Gal3 &#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;D368V &#x548C; Gal80 nonbinder &#x7A81;&#x53D8; colocalized &#x5230;&#x57DF;&#x6240;&#x5BF9;&#x5E94;&#x7684;&#x6B8B;&#x7559;&#x7269;&#xFF0C;&#x662F;&#x56E0;&#x4E3A;&#x7F3A;&#x5E2D;&#x5E76;&#x672A;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; Gal80 &#x7684;&#x540C;&#x79CD;&#x5F02;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE; D368 &#x662F; Gal80 &#x7ED1;&#x5B9A;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x4E00;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;

&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD; GAL &#x57FA;&#x56E0; Gal80 &#x4E0E; Gal3C &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x5185;&#x6291;&#x5236;&#x6291;&#x5236;&#x5207;&#x6362;&#x3002;

Gal4-mediated activation of GAL gene transcription in Saccharomyces cerevisiae requires the interaction of Gal3 with Gal80, the Gal4 inhibitor protein. While it is known that galactose and ATP activates Gal3 interaction with Gal80, neither the mechanism of activation nor the surface that binds to Gal80 is known. We addressed this through intragenic suppression of GAL3C alleles that cause galactose-independent Gal3-Gal80 interaction. We created a new allele, GAL3SOC, and showed that it suppressed a new GAL3C allele. We tested the effect of GAL3SOC on several newly isolated and existing GAL3C alleles that map throughout the gene. All except one GAL3C allele, D368V, were suppressible by GAL3SOC. GAL3SOC and all GAL3C alleles were localized on a Gal3 homology model that is based on the structure of the highly related Gal1 protein. These results provide evidence for allosterism in the galactose- and ATP-activation of Gal3 binding to Gal80. In addition, because D368V and residues corresponding to Gal80-nonbinder mutations colocalized to a domain that is absent in homologous proteins that do not bind to Gal80, we suggest that D368 is a part of the Gal80-binding surface.

Intragenic suppression of Gal3C interaction with Gal80 in the Saccharomyces cerevisiae GAL gene switch.

GAL4 m&eacute;di&eacute;e par activation de la transcription du g&egrave;ne GAL chez Saccharomyces cerevisiae requiert l&#39;interaction de Gal3 avec Gal80, la prot&eacute;ine inhibitrice de Gal4. Bien que l&#39;on sache que le galactose et ATP active Gal3 interaction avec Gal80, le m&eacute;canisme d&#39;activation ni la surface qui se lie &agrave; Gal80 est connue. Nous avons abord&eacute; cela par le biais de suppression intrag&eacute;nique d&#39;all&egrave;les GAL3C qui causent l&#39;interaction Gal3-Gal80 ind&eacute;pendant du galactose. Nous avons cr&eacute;&eacute; un nouvel all&egrave;le, GAL3SOC et a montr&eacute; qu&#39;il a supprim&eacute; un nouvel all&egrave;le GAL3C. Nous avons test&eacute; l&#39;effet du GAL3SOC sur les all&egrave;les plusieurs de GAL3C existants et nouvellement isol&eacute;s qui correspondent dans l&#39;ensemble du g&egrave;ne. Tous sauf un all&egrave;le de GAL3C, D368V, &eacute;taient suppressible par GAL3SOC. GAL3SOC et tous les GAL3C all&egrave;les ont &eacute;t&eacute; localis&eacute;s sur un mod&egrave;le d&#39;homologie de Gal3 qui repose sur la structure de la prot&eacute;ine Gal1 fortement li&eacute;e. Ces r&eacute;sultats d&eacute;montrent pour allost&eacute;rie dans la galactose - et ATP-activation de liaison Gal3 &agrave; Gal80. En outre, parce que D368V et r&eacute;sidus correspondant &agrave; des mutations de Gal80-nonbinder &eacute;pididymaire vers un domaine qui est absente dans les prot&eacute;ines homologues qui ne se lient pas &agrave; Gal80, nous sugg&eacute;rons que D368 fait partie de la surface de liaison Gal80.

Interrupteur de suppression intrag&eacute;nique d&#39;interaction Gal3C avec Gal80 dans le g&egrave;ne de Saccharomyces cerevisiae GAL.

Gal4-vermittelte Aktivierung der GAL-gen-Transkription in Saccharomyces Cerevisiae erfordert das Zusammenspiel von Gal3 mit Gal80, das Gal4 Inhibitor Protein. Es ist bekannt, dass Galaktose und ATP aktiviert Gal3 Interaktion mit Gal80, ist weder der Mechanismus der Aktivierung der Oberfl&auml;che, die an Gal80 bindet bekannt. Wir gerichtet dies durch das intragenic unterdr&uuml;cken von GAL3C Allele, die Galaktose-unabh&auml;ngige Gal3 Gal80 Interaktion f&uuml;hren. Wir haben ein neues Allel, GAL3SOC, und zeigte, dass es eine neue GAL3C-Allel unterdr&uuml;ckt. Wir testeten die Wirkung des GAL3SOC auf mehrere neu isoliert und bestehende GAL3C-Allele, die in der gesamten gen zugeordnet. Alle au&szlig;er einem GAL3C Allel, D368V, waren supprimierbaren von GAL3SOC. GAL3SOC und alle GAL3C Allele wurden auf einem Gal3 Homologie Modell lokalisiert, die auf die Struktur des Proteins sehr &auml;hnliche Gal1 basiert. Diese Ergebnisse liefern Belege f&uuml;r Allosterism in die Galaktose und ATP-Aktivierung Gal3 Bindung zu Gal80. Dar&uuml;ber hinaus da D368V und R&uuml;ckst&auml;nde, Gal80-Nonbinder-Mutationen, die zu einer Dom&auml;ne colocalized entspricht das ist abwesend in homologe Proteine, die nicht an Gal80 gebunden sind, empfehlen wir der D368 ein Teil der Gal80-Bindung Oberfl&auml;che ist.

Intragenic Unterdr&uuml;ckung von Gal3C Interaktion mit Gal80 im Saccharomyces Cerevisiae GAL-gen wechseln.

GAL4-mediata attivazione della trascrizione genica GAL in Saccharomyces cerevisiae richiede l&#39;interazione di Gal3 con Gal80, la proteina inibitore Gal4. Mentre &egrave; noto che il galattosio e ATP attiva interazione Gal3 con Gal80, &egrave; noto il meccanismo di attivazione n&eacute; la superficie che si lega al Gal80. Abbiamo affrontato questo mediante la soppressione intragenic di GAL3C alleli che causano l&#39;interazione Gal3 Gal80 galattosio-indipendente. Abbiamo creato un nuovo allele, GAL3SOC e ha mostrato che soppresse un nuovo allele GAL3C. Abbiamo testato l&#39;effetto della GAL3SOC su diversi esistenti e recentemente isolati alleli GAL3C che mappa tutto il gene. Tutti tranne un allele GAL3C, D368V, erano sopprimibile da GAL3SOC. GAL3SOC e tutti gli alleli GAL3C erano localizzati su un modello di omologia di Gal3 &egrave; basato sulla struttura della proteina Gal1 altamente correlata. Questi risultati forniscono la prova per allosterism in galattosio - e ATP-attivazione dell&#39;associazione Gal3 di Gal80. Inoltre, perch&eacute; D368V e residui corrispondenti alle mutazioni Gal80-nonbinder colocalized a un dominio che &egrave; assente in proteine omologhe che non si legano a Gal80, suggeriamo che D368 &egrave; una parte della superficie dell&#39;associazione Gal80.

Interruttore di soppressione intragenic Gal3C interazione con Gal80 del gene di Saccharomyces cerevisiae GAL.

Gal4 &#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x6D3B;&#x6027; GAL &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x8EE2;&#x5199;&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;&#x306E; Gal3 Gal80&#x3001;Gal4 &#x963B;&#x5BB3;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B9;&#x304A;&#x3088;&#x3073; ATP Gal80 &#x3068; Gal3 &#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3082; Gal80 &#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x30B5;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30A4;&#x30B9;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B9;&#x72EC;&#x7ACB; Gal3 Gal80 &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059; GAL3C &#x306E;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x5BFE;&#x51E6;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3001;GAL3SOC &#x3092;&#x4F5C;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x65B0;&#x3057;&#x3044; GAL3C &#x306E;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5168;&#x4F53;&#x30DE;&#x30C3;&#x30D7;&#x65B0;&#x3057;&#x304F;&#x5206;&#x96E2;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x65E2;&#x5B58;&#x3067;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B; GAL3C &#x306E;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059; GAL3SOC &#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; GAL3C &#x3092; D368V&#x3001;1 &#x3064;&#x3092;&#x9664;&#x304F;&#x3059;&#x3079;&#x3066; GAL3SOC &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6291;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;GAL3SOC &#x3068;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; GAL3C &#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x95A2;&#x9023;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044; Gal1 &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B; Gal3 &#x76F8;&#x540C;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x5C40;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;.&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x304B;&#x3089;&#x56DE;&#x8EE2;&#x8EF8;&#x3067;&#x3001;&#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B9;&#x3068; ATP-&#x6D3B;&#x6027;&#x5316; Gal3 &#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092; Gal80 &#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;D368V &#x3068; Gal80 nonbinder &#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x6B8B;&#x57FA;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x6B20;&#x5E2D;&#x3059;&#x308B; Gal80 &#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3067;&#x304F;&#x3060;&#x3055;&#x3044;&#x76F8;&#x540C;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x79C1;&#x305F;&#x3061; D368 Gal80 &#x7D50;&#x5408;&#x8868;&#x9762;&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B5;&#x30C3;&#x30AB;&#x30ED; &#x30DF;&#x30BB;&#x30B9;&#x9175;&#x6BCD; GAL &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; Gal80 &#x3068; Gal3C &#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x6291;&#x5236;&#x3092;&#x5207;&#x308A;&#x66FF;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

GAL Saccharomyces cerevisiae&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC804;&#xC0AC;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; Gal4 &#xC911;&#xC7AC; gal3&#xC640; Gal80, Gal4 &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xC694;&#xAD6C; &#xD55C;&#xB2E4;. Galactose&#xC640; ATP Gal3 &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; Gal80 &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC54C;&#xB824;&#xC838;, &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC815;&#xD488; &#xC778;&#xC99D; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC774; &#xC5C6;&#xC73C;&#xBA70; gal80&#xB97C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xB294; &#xD45C;&#xBA74; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; intragenic galactose &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; Gal3 Gal80 &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; GAL3C &#xB300;&#xB9BD; &#xC5B5;&#xC81C;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC774;&#xAC83;&#xC744; &#xD574;&#xACB0;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xB300;&#xB9BD; &#xC720;&#xC804;&#xC790;, GAL3SOC, &#xC0DD;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; GAL3C &#xB300;&#xB9BD; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xB9E4;&#xD551;&#xB418;&#xB294; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC0C8;&#xB85C; &#xACA9;&#xB9AC; &#xB418; &#xACE0; &#xAE30;&#xC874; GAL3C &#xB300;&#xB9BD;&#xC5D0; gal3soc&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB300;&#xB9BD; &#xC720;&#xC804;&#xC790; GAL3C 1, D368V &#xC81C;&#xC678;&#xD55C; &#xBAA8;&#xB4E0; suppressible gal3soc&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD588;&#xB2E4;. GAL3SOC &#xBC0F; &#xBAA8;&#xB4E0; GAL3C &#xB300;&#xB9BD; &#xB192;&#xAC8C; &#xAD00;&#xB828;&#xB41C; Gal1 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;&#xC5D0; &#xAE30;&#xCD08;&#xD55C; Gal3 homology &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; gal80&#xB97C; allosterism&#xC5D0;&#xB294; galactose &#xBC0F; ATP &#xD65C;&#xC131;&#xD654; Gal3 &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC758; &#xB300; &#xD55C; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5;. &#xB610;&#xD55C;, D368V &#xBC0F; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC744; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; colocalized Gal80 nonbinder &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD574;&#xB2F9; &#xD558;&#xB294; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xACB0; &#xC11D; Gal80 &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; &#xB3D9;&#xC885; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, D368 Gal80 &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD45C;&#xBA74; &#xBD80;&#xBD84; &#xC774;&#xB2E4;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Intragenic &#xC5B5;&#xC81C;&#xC758; Saccharomyces cerevisiae GAL &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; Gal80 Gal3C &#xC0C1;&#xD638; &#xC804;&#xD658;.

Gal4 mediada por la activaci&oacute;n de la transcripci&oacute;n del gen de GAL en Saccharomyces cerevisiae requiere la interacci&oacute;n del Gal3 con Gal80, la prote&iacute;na del inhibidor de Gal4. Aunque se conoce que la galactosa y ATP activa interacci&oacute;n del Gal3 con Gal80, se conoce el mecanismo de activaci&oacute;n ni la superficie que se une a Gal80. Nos dirigimos a esto a trav&eacute;s de la supresi&oacute;n intrag&eacute;nica de alelos GAL3C causantes de la interacci&oacute;n de Gal3-Gal80 independiente de la galactosa. Hemos creado un nuevo alelo, GAL3SOC y demostr&oacute; que suprimi&oacute; un nuevo alelo GAL3C. Probamos el efecto del GAL3SOC sobre varios alelos GAL3C reci&eacute;n aislados y existentes que se asignan a trav&eacute;s de los genes. Todos excepto un alelo GAL3C, D368V, eran suprimible por GAL3SOC. GAL3SOC y todos GAL3C alelos fueron localizados en un modelo de homolog&iacute;a de Gal3 que se basa en la estructura de la prote&iacute;na Gal1 altamente relacionada. Estos resultados proporcionan evidencia para allosterism en la galactosa - y ATP-activaci&oacute;n de enlace de Gal3 a Gal80. Adem&aacute;s, porque D368V y residuos correspondientes a las mutaciones de Gal80-nonbinder colocalized a un dominio que est&aacute; ausente en prote&iacute;nas hom&oacute;logas que no se unen a Gal80, le sugerimos que D368 es una parte de la superficie de Uni&oacute;n Gal80.

Interruptor de supresi&oacute;n intrag&eacute;nica de interacci&oacute;n del Gal3C con Gal80 en el gene de Saccharomyces cerevisiae GAL.

Galactose-activated transcription of the Saccharomyces cerevisiae GAL genes occurs when Gal3 binds the Gal4 inhibitor, Gal80. Noninteracting variants of Gal3 or Gal80 render the GAL genes noninducible. To identify the binding determinants for Gal3's interaction with Gal80 we carried out GAL3-GAL80 intergenic suppression analyses and selected for new GAL3 mutations that impair the Gal3-Gal80 interaction. We show that a GAL3(C)-D368V mutation can suppress the noninducibility due to a GAL80(S-1)-G323R mutation, and a GAL80-M350C mutation can suppress the noninducibility due to a gal3-D111C mutation. A reverse two-hybrid selection for GAL3 mutations that impair the Gal3-Gal80 interaction yielded 12 single-amino-acid substitutions at residues that are predicted to be surface exposed on Gal3. The majority of the affected Gal3 residues localized to a composite surface that includes D111 and a sequence motif containing D368, which has been implicated in interaction with Gal80. The striking colocalization of intergenic suppressor residues and Gal80 nonbinder residues identifies a Gal3 surface that likely interacts with Gal80.

Genetic evidence for sites of interaction between the Gal3 and Gal80 proteins of the Saccharomyces cerevisiae GAL gene switch.

&#x534A;&#x4E73;&#x7CD6;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7684;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD; GAL &#x57FA;&#x56E0;&#x65F6;&#x53D1;&#x751F; Gal3 &#x7ED1;&#x5B9A; Gal4 &#x6291;&#x5236;&#x5242;&#xFF0C;Gal80&#x3002;&#x91CC;&#x7684;&#x53D8;&#x79CD; Gal3 &#x6216; Gal80 &#x5448;&#x73B0; GAL &#x57FA;&#x56E0;&#x4E0D;&#x80FD;&#x8BF1;&#x53D1;&#x3002;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E0E; Gal80 Gal3 &#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x7EA6;&#x675F;&#x529B;&#x51B3;&#x5B9A;&#x56E0;&#x7D20;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86; GAL3 GAL80 &#x57FA;&#x56E0;&#x6291;&#x5236;&#x5206;&#x6790;&#x548C;&#x635F;&#x5BB3; Gal3 Gal80 &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x65B0; GAL3 &#x7A81;&#x53D8;&#x4E3A;&#x9009;&#x5B9A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; GAL3 (C) D368V-&#x7A81;&#x53D8;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6291;&#x5236; GAL80(S-1) G323R &#x7A81;&#x53D8;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4; noninducibility &#x548C; GAL80 M350C &#x7A81;&#x53D8;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6291;&#x5236; gal3 D111C &#x7A81;&#x53D8;&#x5BFC;&#x81F4; noninducibility&#x3002;&#x53CD;&#x5411;&#x53CC;&#x6742;&#x4EA4;&#x9009;&#x62E9;&#x635F;&#x5BB3; Gal3 Gal80 &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684; GAL3 &#x7A81;&#x53D8;&#x4EA7;&#x751F;&#x4E86; 12 &#x5355;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x66FF;&#x6362;&#x5728;&#x9884;&#x8BA1; Gal3 &#x66B4;&#x9732;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x6B8B;&#x7559;&#x7269;&#x3002;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x4E3A;&#x590D;&#x5408;&#x8868;&#x9762;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC; D111 &#x548C;&#x5E8F;&#x5217;&#x6BCD;&#x9898;&#x5305;&#x542B; D368&#xFF0C;&#x5B83;&#x4E00;&#x76F4;&#x5728;&#x53C2;&#x4E0E;&#x4E0E; Gal80 &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x53D7;&#x5F71;&#x54CD; Gal3 &#x6B8B;&#x7559;&#x91CF;&#x7684;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;&#x6291;&#x764C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6B8B;&#x7559;&#x548C; Gal80 nonbinder &#x6B8B;&#x7559;&#x7684;&#x60CA;&#x4EBA;&#x5171;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x6807;&#x8BC6; Gal3 &#x8868;&#x9762;&#x53EF;&#x80FD;&#x4E0E; Gal80 &#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;

&#x5207;&#x6362;&#x7AD9;&#x70B9;&#x7684; Gal3 &#x548C; Gal80 &#x7684;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD; GAL &#x57FA;&#x56E0;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x5B66;&#x8BC1;&#x636E;&#x3002;

Galactose-active la transcription des g&egrave;nes Saccharomyces cerevisiae GAL se produit lorsque Gal3 lie l&#39;inhibiteur Gal4, Gal80. Des variantes sans interactions de Gal3 ou Gal80 rendent la noninducible de g&egrave;nes GAL. D&#39;identifier les d&eacute;terminants de la liaison pour l&#39;interaction de Gal3 avec Gal80 nous fait GAL3-GAL80 suppression interg&eacute;nique analyses et s&eacute;lectionn&eacute; pour les nouvelles mutations GAL3 perturber l&#39;interaction Gal3-Gal80. Nous montrons qu&#39;une mutation GAL3 c-D368V pour supprimer la noninducibility due &agrave; une mutation de GAL80(S-1)-G323R, et une mutation de GAL80-M350C pour supprimer la noninducibility due &agrave; une mutation gal3-D111C. Une s&eacute;lection de deux-hybride inverse pour les mutations GAL3 perturber l&#39;interaction Gal3-Gal80 a donn&eacute; 12 acides amin&eacute;s simples substitutions aux r&eacute;sidus qui sont pr&eacute;vus pour &ecirc;tre la surface expos&eacute;e sur Gal3. La majorit&eacute; des r&eacute;sidus Gal3 touch&eacute;s localis&eacute;e &agrave; une surface composite qui comprend D111 et un motif de s&eacute;quence contenant D368, qui a &eacute;t&eacute; impliqu&eacute;e dans l&#39;interaction avec les Gal80. La co-localisation frappante des r&eacute;sidus de suppresseur interg&eacute;nique et Gal80 nonbinder r&eacute;sidus identifie une surface Gal3 probablement interagit avec Gal80.

Des preuves g&eacute;n&eacute;tiques pour les sites d&#39;interaction entre les prot&eacute;ines Gal3 et Gal80 du g&egrave;ne Saccharomyces cerevisiae GAL basculer.

Galaktose aktiviert Transkription der Saccharomyces Cerevisiae GAL Gene tritt auf, wenn Gal3 die Gal4-Inhibitor, Gal80 bindet. A Varianten von Gal3 oder Gal80 machen die GAL-gen Noninducible. Die Bindung-Determinanten f&uuml;r Gal3s Interaktion mit Gal80 identifizieren wir GAL3-GAL80 intergenetischer Unterdr&uuml;ckung Analysen durchgef&uuml;hrt und f&uuml;r neue GAL3-Mutationen, die die Gal3-Gal80-Interaktion beeintr&auml;chtigen ausgew&auml;hlt. Wir zeigen, dass eine GAL3 (C)-D368V-Mutation kann die Noninducibility durch eine GAL80(S-1)-G323R-Mutation unterdr&uuml;cken, und GAL80-M350C Mutation kann die Noninducibility durch eine Genmutation gal3-D111C unterdr&uuml;cken. Ein umgekehrter zwei-Hybrid-Angebot f&uuml;r GAL3 Mutationen, die die Gal3-Gal80-Interaktion beeintr&auml;chtigen ergab 12 Einzel-Aminos&auml;ure-Ersetzungen auf R&uuml;ckst&auml;nde, die Fl&auml;che auf Gal3 sein vorhergesagt werden. Die Mehrheit der betroffenen Gal3 R&uuml;ckst&auml;nde lokalisiert zu einer zusammengesetzten Fl&auml;che, der D111 und ein Sequenz-Motiv mit D368, die in Interaktion mit Gal80 verwickelt hat. Die markante Kolokalisation intergenetischer Tumorsuppressor-R&uuml;ckst&auml;nde und Gal80 Nonbinder R&uuml;ckst&auml;nde bezeichnet eine Gal3-Oberfl&auml;che, die wahrscheinlich mit Gal80 interagiert.

Genetischer Beweis f&uuml;r Standorte der Interaktion zwischen der Gal3 und Gal80 Proteine im Saccharomyces-Cerevisiae GAL-gen wechseln.

Galattosio-attivata la trascrizione dei geni Saccharomyces cerevisiae GAL si verifica quando Gal3 associa l&#39;inibitore Gal4, Gal80. Varianti non interagenti di Gal3 o Gal80 rendono il GAL geni noninducible. Per identificare i determinanti di associazione per l&#39;interazione di Gal3 con Gal80 abbiamo effettuate analisi soppressione intergenic GAL3-GAL80 e selezionato per la nuove GAL3 mutazioni che alterano l&#39;interazione Gal3-Gal80. Che mostriamo un GAL3 (C)-D368V mutazione pu&ograve; sopprimere il noninducibility a causa di una mutazione GAL80(S-1)-G323R, e una mutazione GAL80-M350C pu&ograve; sopprimere il noninducibility a causa di una mutazione D111C-gal3. Una selezione di due-ibrido inversa per GAL3 mutazioni che alterano l&#39;interazione Gal3 Gal80 ceduto 12 single-amminoacido sostituzioni a residui che sono previsti per essere superficie esposta su Gal3. La maggior parte dei residui Gal3 colpite localizzata ad una superficie composita che include D111 e un motivo di sequenza contenente D368, che &egrave; stato implicato nell&#39;interazione con Gal80. La sorprendente presenza di residui intergenic soppressore e residui nonbinder Gal80 identifica una superficie Gal3 che probabilmente interagisce con Gal80.

Interruttore di prova genetica per i siti di interazione tra le proteine Gal3 e Gal80 del gene Saccharomyces cerevisiae GAL.

&#x30B5;&#x30C3;&#x30AB;&#x30ED; &#x30DF;&#x30BB;&#x30B9;&#x9175;&#x6BCD; GAL &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B9;&#x304C;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306F;&#x3001;Gal4 &#x963B;&#x5BB3;&#x5264;, Gal80 Gal3 &#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Gal3 &#x307E;&#x305F;&#x306F; Gal80 &#x306E;&#x5916;&#x4E71;&#x7121;&#x5E72;&#x6E09;&#x5316;&#x4E9C;&#x7A2E; GAL &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; noninducible &#x3092;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C0;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x8981;&#x56E0; Gal80 &#x3068; Gal3 &#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B; GAL3 GAL80 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x9593;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x3092;&#x884C;&#x3063;&#x305F;&#x3057;&#x3001;Gal3 Gal80 &#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x640D;&#x306A;&#x3046;&#x65B0;&#x3057;&#x3044; GAL3 &#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x3002;GAL3 (C) &#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;-D368V &#x5909;&#x7570; GAL80(S-1) G323R &#x5909;&#x7570;&#x306B;&#x3088;&#x308B; noninducibility &#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x3001;GAL80 M350C &#x5909;&#x7570; gal3 D111C &#x5909;&#x7570;&#x306B;&#x3088;&#x308B; noninducibility &#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9006; 2 &#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C9;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x9078;&#x629E; Gal3 Gal80 &#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x640D;&#x306A;&#x3046; GAL3 &#x5909;&#x7570; 12 &#x306E;&#x5358;&#x4E00;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x7F6E;&#x63DB;&#x3055;&#x3089;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x8868;&#x9762;&#x306B; Gal3 &#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306B;&#x5C48;&#x3057;&#x305F;&#x3002;D111 &#x3068; Gal80 &#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B; D368 &#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x914D;&#x5217;&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x8907;&#x5408;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B; Gal3 &#x6B8B;&#x57FA;&#x306E;&#x5927;&#x534A;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x9593;&#x306E;&#x30B5;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x6B8B;&#x57FA;&#x3068; Gal80 nonbinder &#x6B8B;&#x57FA;&#x306E;&#x5370;&#x8C61;&#x7684;&#x306A;&#x5171;&#x5C40;&#x5728;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C; Gal80 &#x3068;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B; Gal3 &#x8868;&#x9762;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B5;&#x30C3;&#x30AB;&#x30ED; &#x30DF;&#x30BB;&#x30B9;&#x9175;&#x6BCD; GAL &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E; Gal3 &#x3068; Gal80 &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x9593;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B66;&#x7684;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x5207;&#x308A;&#x66FF;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Saccharomyces cerevisiae GAL &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC804;&#xC0AC; galactose &#xD65C;&#xC131;&#xD654; Gal3 Gal80 Gal4 &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD560; &#xB54C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Gal3 &#xB610;&#xB294; gal80&#xC758; noninteracting &#xBCC0;&#xC885;&#xC740; GAL &#xC720;&#xC804;&#xC790; noninducible &#xB80C;&#xB354;&#xB9C1;. Gal80&#xC640; gal3&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xACB0;&#xC815; &#xC694;&#xC778; &#xC2DD;&#xBCC4; GAL3 GAL80 intergenic &#xC5B5;&#xC81C; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC2E4;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; Gal3 Gal80 &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xC545;&#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC904; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; GAL3 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB300; &#xD55C; &#xC120;&#xD0DD;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; GAL3 (C)-D368V &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; noninducibility GAL80(S-1) G323R &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC744; &#xC218; GAL80 M350C &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; gal3 D111C &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC778;&#xD574; noninducibility &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC744; &#xC218; &#xD45C;&#xC2DC;. Gal3 Gal80 &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xC545;&#xC601;&#xD5A5; GAL3 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB300; &#xD55C; &#xC5ED;&#xBC29;&#xD5A5; 2 &#xD558;&#xC774;&#xBE0C;&#xB9AC;&#xB4DC; &#xC120;&#xD0DD; 12 &#xB2E8;&#xC77C; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178; &#xC0B0; &#xB300;&#xCCB4; &#xD45C;&#xBA74;&#xC744; &#xB178;&#xCD9C; Gal3 &#xC608;&#xC0C1; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xAD74;&#xBCF5;. D111&#xC640; gal80&#xC640;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4; D368 &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xD2F0;&#xBE0C;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xBCF5;&#xD569; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xB41C; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xB294; Gal3 &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;. Intergenic &#xC5B5;&#xC555; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C; &#xBC0F; Gal80 nonbinder &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC758; &#xB208;&#xC5D0; &#xB744;&#xB294; colocalization Gal80 &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; Gal3 &#xC11C;&#xD53C;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC99D;&#xAC70;&#xAC00; Saccharomyces cerevisiae GAL &#xC720;&#xC804;&#xC790; gal3&#xC640; Gal80 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC804;&#xD658;.

Galactosa-activa la transcripci&oacute;n de los genes de Saccharomyces cerevisiae GAL se produce cuando el Gal3 se une el inhibidor Gal4, Gal80. Noninteracting variantes de Gal3 o Gal80 hacen la noninducible de genes de GAL. Para identificar los factores determinantes de la Uni&oacute;n para la interacci&oacute;n de Gal3 con Gal80 se realiz&oacute; an&aacute;lisis de supresi&oacute;n interg&eacute;nica GAL3-GAL80 y seleccionado para nuevas mutaciones de GAL3 que afectan la interacci&oacute;n Gal3-Gal80. Demostramos que una mutaci&oacute;n de GAL3 c-D368V puede suprimir la noninducibility debido a una mutaci&oacute;n de GAL80(S-1)-G323R, y una mutaci&oacute;n de GAL80-M350C puede suprimir la noninducibility debido a una mutaci&oacute;n de gal3-D111C. Una selecci&oacute;n de dos h&iacute;bridos inversa para GAL3 las mutaciones que afectan la interacci&oacute;n Gal3-Gal80 rindi&oacute; 12 sustituciones de amino&aacute;cidos individuales en los residuos que se predicen que la superficie expuesta en Gal3. La mayor&iacute;a de los afectados residuos de Gal3 localizada en una superficie compuesta que incluye D111 y un motivo de secuencia que contiene D368, que se ha implicado en la interacci&oacute;n con Gal80. La llamativa colocalizaci&oacute;n de supresor interg&eacute;nico residuos y residuos de nonbinder de Gal80 identifica una superficie Gal3 que probablemente interact&uacute;a con Gal80.

Interruptor de la evidencia gen&eacute;tica para sitios de interacci&oacute;n entre las prote&iacute;nas Gal3 y Gal80 del gen de la Saccharomyces cerevisiae GAL.

&#x80BE;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x4E27;&#x5931;&#x662F;&#x8BB8;&#x591A;&#x80BE;&#x810F;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x57FA;&#x7840;&#x3002;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x53EF;&#x4EE5;&#x90E8;&#x5206;&#x5F25;&#x8865;&#x5176; nephrons &#xFF08;&#x80BE;&#x810F;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x5355;&#x4F4D;&#xFF09;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x80FD;&#x5F62;&#x6210;&#x65B0;&#x7684;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x9C7C;&#x635F;&#x4F24;&#xFF0C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x53EF;&#x80FD;&#x4EA7;&#x751F;&#x8010;&#x836F;&#x6027;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x6A21;&#x578B;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x7406;&#x89E3;&#x5982;&#x4F55;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x80BE;&#x518D;&#x751F;&#x540E;&#x6DFB;&#x52A0; nephrons &#x5728;&#x5176;&#x4F7F;&#x7528;&#x5BFF;&#x547D;&#x548C;&#x518D;&#x751F;&#x7684; nephrons de novo &#x5404;&#x5730;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C06;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x65B0; nephrons &#x5305;&#x542B;&#x80BE;&#x5355;&#x4F4D;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5C0F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x805A;&#x5408;&#x5230;&#x6210;&#x5E74;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x7684;&#x6765;&#x6E90;&#x3002;10-30 &#x5355;&#x5143;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x5355;&#x4E2A;&#x805A;&#x5408;&#x7684;&#x79FB;&#x690D;&#x662F;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x5AC1;&#x63A5;&#x6210;&#x4EBA;&#x548C;&#x751F;&#x6210;&#x591A;&#x4E2A; nephrons&#x3002;&#x4E32;&#x884C;&#x79FB;&#x690D;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x6765;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x81EA;&#x6211;&#x66F4;&#x65B0;&#x663E;&#x793A;&#x80BE;&#x5355;&#x4F4D;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BFF;&#x547D;&#x8F83;&#x957F;&#xFF0C;&#x548C;&#x62E5;&#x6709;&#x5DE8;&#x5927;&#x7684;&#x7E41;&#x6B96;&#x6F5C;&#x529B;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D3B;&#x6027;&#x76F8;&#x4E00;&#x81F4;&#x3002;&#x6DF7;&#x5408;&#x80BE;&#x5355;&#x4F4D;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x79FB;&#x690D;&#x6807;&#x8BB0;&#x4E0E;&#x4EFB;&#x4E00;&#x7EFF;&#x8272;&#x6216;&#x7EA2;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x4EA7;&#x751F;&#x4E86;&#x4E00;&#x4E9B;&#x9A6C;&#x8D5B;&#x514B; nephrons&#xFF0C;&#x6307;&#x793A;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x80BE;&#x5355;&#x4F4D;&#x591A;&#x4E2A;&#x8D21;&#x732E;&#x5355;&#x80BE;&#x5355;&#x4F4D;&#x3002;&#x4E0E;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5B9E;&#x65F6;&#x6210;&#x50CF;&#x663E;&#x793A;&#x80BE;&#x6027;&#x805A;&#x5408;&#x5F62;&#x6210;&#x7531;&#x591A;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x878D;&#x5408;&#x6027;&#x548C;&#x518D;&#x5206;&#x5316;&#x4E3A; nephrons &#x7684;&#x900F;&#x660E;&#x5E7C;&#x866B;&#x5728;&#x80BE;&#x5355;&#x4F4D;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x76F8;&#x4E00;&#x81F4;&#x3002;&#x4E24;&#x8005;&#x5408;&#x8BA1;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x80BE;&#x810F;&#x53EF;&#x80FD;&#x5305;&#x542B;&#x81EA;&#x6211;&#x66F4;&#x65B0;&#x7684;&#x80BE;&#x5355;&#x4F4D;&#x5E72;/&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8BC6;&#x522B;&#x94FA;&#x5E73;&#x4E86;&#x9053;&#x8DEF;&#x9694;&#x79BB;&#x6216;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x7B49;&#x6548;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x548C;&#x53D1;&#x5C55;&#x65B0;&#x578B;&#x80BE;&#x518D;&#x751F;&#x7597;&#x6CD5;&#x3002;

&#x6210;&#x4EBA;&#x80BE;&#x5355;&#x4F4D;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x80FD;&#x591F;&#x80BE;&#x518D;&#x751F;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x7684;&#x6807;&#x8BC6;&#x3002;

Loss of kidney function underlies many renal diseases. Mammals can partly repair their nephrons (the functional units of the kidney), but cannot form new ones. By contrast, fish add nephrons throughout their lifespan and regenerate nephrons de novo after injury, providing a model for understanding how mammalian renal regeneration may be therapeutically activated. Here we trace the source of new nephrons in the adult zebrafish to small cellular aggregates containing nephron progenitors. Transplantation of single aggregates comprising 10-30 cells is sufficient to engraft adults and generate multiple nephrons. Serial transplantation experiments to test self-renewal revealed that nephron progenitors are long-lived and possess significant replicative potential, consistent with stem-cell activity. Transplantation of mixed nephron progenitors tagged with either green or red fluorescent proteins yielded some mosaic nephrons, indicating that multiple nephron progenitors contribute to a single nephron. Consistent with this, live imaging of nephron formation in transparent larvae showed that nephrogenic aggregates form by the coalescence of multiple cells and then differentiate into nephrons. Taken together, these data demonstrate that the zebrafish kidney probably contains self-renewing nephron stem/progenitor cells. The identification of these cells paves the way to isolating or engineering the equivalent cells in mammals and developing novel renal regenerative therapies.

Identification of adult nephron progenitors capable of kidney regeneration in zebrafish.

Perte de sous-tend la fonction r&#xE9;nale de nombreuses maladies r&#xE9;nales. Les mammif&#xE8;res peuvent en partie r&#xE9;parer leurs n&#xE9;phrons (les unit&#xE9;s fonctionnelles du rein), mais ne peut pas former de nouvelles. En revanche, les poissons ajouter n&#xE9;phrons tout au long de leur dur&#xE9;e de vie et de r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rer n&#xE9;phrons de novo apr&#xE8;s une blessure, en fournissant un mod&#xE8;le pour comprendre comment les mammif&#xE8;res de r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration r&#xE9;nale peut &#xEA;tre th&#xE9;rapeutique activ&#xE9;. Ici, nous remonter &#xE0; la source de n&#xE9;phrons nouvelles dans le poisson z&#xE8;bre adulte &#xE0; petits agr&#xE9;gats cellulaires contenant des prog&#xE9;niteurs n&#xE9;phron. Transplantation d&#x26;#39;agr&#xE9;gats simples comprenant 10-30 cellules est suffisante pour les adultes et de g&#xE9;n&#xE9;rer des n&#xE9;phrons greffer de multiples. Des exp&#xE9;riences de transplantation de s&#xE9;rie pour tester l&#x26;#39;auto-renouvellement a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que les prog&#xE9;niteurs n&#xE9;phron sont &#xE0; long terme et poss&#xE8;dent un potentiel r&#xE9;plicatif importante, compatible avec les cellules souches activit&#xE9;. La transplantation de prog&#xE9;niteurs n&#xE9;phron mixtes tagg&#xE9;s avec couleur verte ou rouge prot&#xE9;ines fluorescentes a abouti &#xE0; certains n&#xE9;phrons mosa&#xEF;que, ce qui indique que les prog&#xE9;niteurs n&#xE9;phron multiples contribuer &#xE0; un n&#xE9;phron unique. Conform&#xE9;ment &#xE0; cela, vivre l&#x26;#39;imagerie de la formation du n&#xE9;phron chez les larves transparentes ont montr&#xE9; que les agr&#xE9;gats n&#xE9;phrog&#xE9;nique forment par la coalescence de plusieurs cellules et se diff&#xE9;rencient ensuite en n&#xE9;phrons. Pris ensemble, ces donn&#xE9;es d&#xE9;montrent que le rein du poisson z&#xE8;bre contient probablement auto-renouvellement tige n&#xE9;phron / cellules prog&#xE9;nitrices. L&#x26;#39;identification de ces cellules ouvre la voie &#xE0; isoler ou d&#x26;#39;ing&#xE9;nierie des cellules &#xE9;quivalentes chez les mammif&#xE8;res et le d&#xE9;veloppement de nouveaux r&#xE9;nales th&#xE9;rapies r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ratives.

Identification des prog&#xE9;niteurs n&#xE9;phron adulte capable de r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration du rein chez le poisson z&#xE8;bre

Verlust der Nierenfunktion unterliegt vielen Nierenerkrankungen. S&auml;ugetiere k&ouml;nnen teilweise reparieren ihre Nephronen (die Funktionseinheiten der Niere), aber k&ouml;nnen nicht neue zu bilden. Im Gegensatz dazu f&uuml;gen Fisch Nephronen w&auml;hrend ihrer Lebensdauer und regenerieren Nephronen de Novo nach Verletzung, vorausgesetzt ein Modell f&uuml;r das Verst&auml;ndnis wie S&auml;ugetier-renale Regenerierung therapeutisch aktiviert werden kann. Hier verfolgen wir die Quelle des neuen Nephronen in der Erwachsenen Zebrafisch kleine zellul&auml;re Aggregate mit Nephron Vorl&auml;uferzellen. Transplantation der einzelnen Aggregate, bestehend aus 10-30 Zellen reicht, Raft Erwachsene und mehrere Nephrone zu generieren. Serielle Transplantation Experimente Selbsterneuerung testen ergab, dass Nephron Vorl&auml;uferzellen langlebig sind und replicative Potenzial, mit Stammzellen-Aktivit&auml;t besitzen. Transplantation von gemischten Nephron Vorl&auml;uferzellen markiert mit entweder gr&uuml;n oder rot fluoreszierende Proteine ergab einige Mosaik Nephrone, die anzeigt, dass mehrere Nephron Vorfahre ein einzelnes Nephron beitragen. In &Uuml;bereinstimmung mit diesem, live Bildgebung Nephron-Formation in transparenten Larven, die zeigten, dass Nephrogene Aggregate durch das Zusammenwachsen mehrerer Zellen zu bilden und dann differenzieren sich in Nephronen. Zusammengenommen zeigen diese Daten, dass die Zebrafisch-Niere wahrscheinlich erneuernden Nephron Vorbau/Vorl&auml;uferzellen enth&auml;lt. Die Identifizierung dieser Zellen ebnet den Weg zu isolieren oder Ingenieurwesen die entsprechenden Zellen bei S&auml;ugetieren und Entwicklung neuartige renale regenerative Therapien.

Kennung des Erwachsenen Nephron Vorfahre der Niere Regeneration im Zebrafisch f&auml;hig.

Perdita della funzione renale &egrave; alla base di molte malattie renali. Mammiferi parzialmente in grado di riparare i nefroni (le unit&agrave; funzionali del rene), ma non possono formare quelli nuovi. Al contrario, pesce aggiungere nefroni in tutta la loro durata e rigenerare nefroni de novo dopo l&#39;infortunio, fornendo un modello per comprendere come mammiferi rigenerazione renale pu&ograve; essere attivato terapeuticamente. Qui si rintracciare la fonte del nuovi nefroni in the zebrafish adulto a piccoli aggregati cellulari contenenti progenitori del nefrone. Il trapianto dei singoli aggregati costituiti da 10-30 celle &egrave; sufficiente Raft adulti e generare pi&ugrave; nefroni. Esperimenti di trapianto seriale per test di auto-rinnovamento ha rivelato che progenitori del nefrone sono longevi e in posseggono di significative potenzialit&agrave; replicativa, coerente con l&#39;attivit&agrave; delle cellule staminali. Il trapianto di progenitori nefrone misto taggati con sia verde o rosse proteine fluorescenti ha reso alcuni nefroni mosaico, che indica che pi&ugrave; progenitori nefrone contribuiscono a un singolo nefrone. Coerente con questa, imaging live della formazione del nefrone in larve trasparenti hanno mostrato che aggregati nefrogeno formano dalla coalescenza di pi&ugrave; celle e poi differenziano in nefroni. Presi insieme, questi dati dimostrano che il rene di zebrafish contiene probabilmente autorinnovabile cellule staminali/progenitrici di nefrone. L&#39;identificazione di queste cellule spiana la strada per isolare o ingegneria le cellule equivalenti nei mammiferi e lo sviluppo di nuove terapie rigenerative renale.

Identificazione dei progenitori del nefrone adulto capace di rigenerazione del rene in zebrafish.

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&#xC2E0;&#xC7A5; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4; &#xB9CE;&#xC740; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC758; &#xAE30;&#xCD08;&#xAC00; &#xB418;. &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; nephrons (&#xC2E0;&#xC7A5; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB2E8;&#xC704;)&#xC744; &#xBCF5;&#xAD6C;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xAC83; &#xB4E4;&#xC744; &#xD615;&#xC131;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xBB3C;&#xACE0;&#xAE30; &#xBD80;&#xC0C1;, &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC744; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xBAA8;&#xB378; therapeutically &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC218;&#xBA85; &#xBC0F; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC131; nephrons &#xB4DC; &#xB178; &#xBCF4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; nephrons &#xCD94;&#xAC00;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; nephron progenitors&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC791;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xC9D1;&#xACC4; &#xC131;&#xC778; zebrafish &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; nephrons &#xC18C;&#xC2A4; &#xCD94;&#xC801;. &#xC774;&#xC2DD;&#xC758; 10-30 &#xC140;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB41C; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC9D1;&#xACC4;&#xB294; &#xC131;&#xC778; engraft &#xC5EC;&#xB7EC; nephrons &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xAE30;&#xC5D0; &#xCDA9;&#xBD84;. &#xC790;&#xAE30; &#xAC31;&#xC2E0;&#xC744; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD558;&#xB294; &#xC9C1;&#xB82C; &#xC774;&#xC2DD; &#xC2E4;&#xD5D8; nephron progenitors &#xC218;&#xBA85;&#xC774; &#xAE34; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC73C;&#xB85C; &#xC77C;&#xAD00; &#xB41C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC77C;&#xCC28; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825; &#xBCF4;&#xC720; &#xBC1D;&#xD614;&#xB2E4;. &#xD63C;&#xD569;&#xB41C; nephron progenitors &#xC774;&#xC2DD; &#xD0DC;&#xADF8;&#xB85C; &#xB179;&#xC0C9; &#xB610;&#xB294; &#xBE68;&#xAC04;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB098;&#xC654;&#xACE0; &#xC5EC;&#xB7EC; nephron progenitors &#xB2E8;&#xC77C; nephron &#xAE30;&#xC5EC;&#xD560; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xBAA8;&#xC790;&#xC774;&#xD06C; nephrons &#xC77C;&#xBD80;. &#xD22C;&#xBA85; &#xD55C; &#xC560;&#xBC8C;&#xB808; nephrogenic &#xC9D1;&#xACC4; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC811;&#xCC29;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD615;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E4;&#xC74C; nephrons&#xB85C; &#xBD84;&#xD654;&#xC5D0; nephron &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5;&#xC774;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD568;&#xAED8; &#xCC0D;&#xC740;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; zebrafish &#xC2E0;&#xC7A5; &#xC544;&#xB9C8; &#xD558;&#xB2F5;&#xB2C8;&#xB2E4; nephron &#xC904;&#xAE30;/&#xBFCC;&#xB9AC; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xAE38;&#xC744; &#xBD88;&#xBC95; &#xCCB4;&#xB958;&#xC790; &#xACA9;&#xB9AC; &#xD558;&#xAC70;&#xB098; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958;&#xC5D0; &#xD574;&#xB2F9; &#xC140;&#xC744; &#xC5D4;&#xC9C0;&#xB2C8;&#xC5B4;&#xB9C1; &#xD558; &#xACE0; &#xC18C;&#xC124; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xC694;&#xBC95;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C;.

&#xC131;&#xC778; nephron progenitors zebrafish&#xC758; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xB2A5;&#xB825;&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4;.

La p&#xE9;rdida de la funci&#xF3;n renal subyace en muchas enfermedades renales. Los mam&#xED;feros, en parte puede reparar sus nefronas (las unidades funcionales del ri&#xF1;&#xF3;n), pero no pueden formar otras nuevas. Por el contrario, el pescado agregar nefronas durante toda su vida y regenerar las nefronas de novo despu&#xE9;s de la lesi&#xF3;n, proporcionando un modelo para entender c&#xF3;mo la regeneraci&#xF3;n renal, los mam&#xED;feros pueden ser terap&#xE9;uticamente activa. Aqu&#xED; se puede rastrear la fuente de nuevas nefronas en el pez cebra adultos a los peque&#xF1;os agregados celulares que contienen c&#xE9;lulas progenitoras nefrona. El trasplante de agregados individuales que comprenden 10-30 c&#xE9;lulas es suficiente para adultos se injertan y generar nefronas m&#xFA;ltiples. Serial Experiments trasplante para poner a prueba la auto-renovaci&#xF3;n revel&#xF3; que los progenitores nefrona son de larga vida y poseen potencial de replicaci&#xF3;n significativa, en consonancia con la actividad de las c&#xE9;lulas madre. Trasplante de progenitores nefrona mixtos etiquetados, ya sea con prote&#xED;nas fluorescentes verdes o rojos producido algunos nefronas mosaico, lo que indica que varios progenitores nefrona contribuir a una sola nefrona. Consistente con esto, la imagen viva de la formaci&#xF3;n de nefronas en larvas transparentes mostraron que los agregados nefrog&#xE9;nica se forman por la fusi&#xF3;n de varias celdas y luego se diferencian en las nefronas. En conjunto, estos datos demuestran que el ri&#xF1;&#xF3;n del pez cebra contiene probablemente la auto-renovaci&#xF3;n de tallo nefrona / c&#xE9;lulas progenitoras. La identificaci&#xF3;n de estas c&#xE9;lulas allana el camino para el aislamiento o la ingenier&#xED;a de las c&#xE9;lulas equivalentes en los mam&#xED;feros y el desarrollo de nuevas terapias regenerativas renales.

Identificaci&#xF3;n de los progenitores nefrona adultos capaces de la regeneraci&#xF3;n del ri&#xF1;&#xF3;n en el pez cebra

The zebrafish has become a significant model system for studying renal organogenesis and disease, as well as for the quest for new therapeutics, because of the structural and functional simplicity of the embryonic kidney. Inroads to the nature and disease states of kidney-related ciliopathies and acute kidney injury (AKI) have been advanced by zebrafish studies. This model organism has been instrumental in the analysis of mutant gene function for human disease with respect to ciliopathies. Additionally, in the AKI field, recent work in the zebrafish has identified a bona fide adult zebrafish renal progenitor (stem) cell that is required for neo-nephrogenesis, both during the normal lifespan and in response to renal injury. Taken together, these studies solidify the zebrafish as a successful model system for studying the broad spectrum of ciliopathies and AKI that affect millions of humans worldwide, and point to a very promising future of zebrafish drug discovery. The emphasis of this review will be on the role of the zebrafish as a model for human kidney-related ciliopathies and AKI, and how our understanding of these complex pathologies is being furthered by this tiny teleost.

Zebrafish kidney development: basic science to translational research.

&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x5DF2;&#x6210;&#x4E3A;&#x4E00;&#x79CD;&#x91CD;&#x8981;&#x6A21;&#x578B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7814;&#x7A76;&#x80BE;&#x5668;&#x5B98;&#x53D1;&#x751F;&#x548C;&#x75BE;&#x75C5;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x4E3A;&#x5BFB;&#x6C42;&#x65B0;&#x7684;&#x7597;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x7531;&#x4E8E;&#x80DA;&#x80CE;&#x80BE;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x7B80;&#x5355;&#x3002;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x7814;&#x7A76;&#x63D0;&#x51FA;&#x4E86;&#x5411;&#x4E0E;&#x80BE;&#x6709;&#x5173; ciliopathies &#x548C;&#x6025;&#x6027;&#x80BE;&#x635F;&#x4F24; (AKI) &#x7684;&#x6027;&#x8D28;&#x548C;&#x75BE;&#x75C5;&#x56FD;&#x5BB6;&#x8FDB;&#x5C55;&#x3002;&#x6B64;&#x6A21;&#x5F0F;&#x751F;&#x7269; ciliopathies &#x5BF9;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x57FA;&#x56E0;&#x529F;&#x80FD;&#x5206;&#x6790;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x4E86;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x5728;&#x95F4;&#x8DDD;&#x5B57;&#x6BB5;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6700;&#x8FD1;&#x5728;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x4E2D;&#x7684;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x5584;&#x610F;&#x6210;&#x4EBA;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x80BE;&#x7956; (&#x5E72;) &#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x6B63;&#x5E38;&#x7684;&#x4F7F;&#x7528;&#x5BFF;&#x547D;&#x671F;&#x95F4;&#x548C;&#x5728;&#x80BE;&#x635F;&#x4F24;&#x53CD;&#x5E94;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x8FD1;&#x5730;&#x7269;&#x4F53;-nephrogenesis&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x91C7;&#x53D6;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6210;&#x529F;&#x7684;&#x6A21;&#x5F0F;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7814;&#x7A76;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684; ciliopathies &#x548C;&#x7A7A;&#x683C;&#x4F1A;&#x5F71;&#x54CD;&#x5230;&#x6570;&#x4EE5;&#x767E;&#x4E07;&#x8BA1;&#x7684;&#x4E16;&#x754C;&#x5404;&#x5730;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x3001; &#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x836F;&#x7269;&#x53D1;&#x73B0;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x975E;&#x5E38;&#x6709;&#x524D;&#x9014;&#x7684;&#x672A;&#x6765;&#x6307;&#x5411;&#x5DE9;&#x56FA;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x3002;&#x8FD9;&#x6B21;&#x5BA1;&#x67E5;&#x7684;&#x91CD;&#x70B9;&#x5C06;&#x662F;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x4E0E;&#x80BE;&#x6709;&#x5173; ciliopathies &#x548C;&#x7A7A;&#x683C;&#xFF0C;&#x548C;&#x8FD9;&#x5C0F;&#x5C0F;&#x7684;&#x786C;&#x9AA8;&#x9C7C;&#x7C7B;&#x5982;&#x4F55;&#x6B63;&#x5728;&#x63A8;&#x52A8;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BF9;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x590D;&#x6742;&#x75C5;&#x75C7;&#x7684;&#x7406;&#x89E3;&#x6A21;&#x5F0F;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x80BE;&#x810F;&#x53D1;&#x5C55;&#xFF1A; &#x57FA;&#x672C;&#x79D1;&#x5B66;&#x7684;&#x8F6C;&#x5316;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;

Le poisson-z&#xE8;bre est devenu un syst&#xE8;me mod&#xE8;le important pour &#xE9;tudier l&#x26;#39;organogen&#xE8;se r&#xE9;nale et les maladies, ainsi que pour la qu&#xEA;te de nouvelles th&#xE9;rapies, en raison de la simplicit&#xE9; structurelle et fonctionnelle du rein embryonnaire. Perc&#xE9;e aux &#xC9;tats de la nature et de la maladie de rein li&#xE9;es ciliopathies et des l&#xE9;sions r&#xE9;nales aigu&#xEB;s (IRA) ont &#xE9;t&#xE9; avanc&#xE9;es par des &#xE9;tudes de poisson z&#xE8;bre. Cet organisme a jou&#xE9; un r&#xF4;le de mod&#xE8;le dans l&#x26;#39;analyse de la fonction du g&#xE8;ne mutant de la maladie humaine &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;gard de ciliopathies. En outre, dans le domaine de l&#x26;#39;IRA, les travaux r&#xE9;cents dans le poisson-z&#xE8;bre a identifi&#xE9; un bonne foi poisson z&#xE8;bre adulte r&#xE9;nale prog&#xE9;nitrices (la tige) cellule qui est n&#xE9;cessaire pour le n&#xE9;o-n&#xE9;phrog&#xE9;n&#xE8;se, aussi bien pendant la dur&#xE9;e de vie normale et en r&#xE9;ponse &#xE0; une l&#xE9;sion r&#xE9;nale. Pris dans leur ensemble, ces &#xE9;tudes solidifier le poisson z&#xE8;bre comme mod&#xE8;le de r&#xE9;ussite d&#x26;#39;un syst&#xE8;me pour &#xE9;tudier le spectre de ciliopathies et Aki qui affectent des millions d&#x26;#39;&#xEA;tres humains &#xE0; travers le monde, et le point &#xE0; un avenir tr&#xE8;s prometteur de la d&#xE9;couverte de m&#xE9;dicaments poisson-z&#xE8;bre. L&#x26;#39;accent de cet examen sera mis sur le r&#xF4;le du poisson-z&#xE8;bre comme mod&#xE8;le pour l&#x26;#39;homme du rein li&#xE9;es ciliopathies et Aki, et comment notre compr&#xE9;hension de ces pathologies complexes est facilit&#xE9;e par cette t&#xE9;l&#xE9;ost&#xE9;ens minuscule.

Croissance du rein poisson z&#xE8;bre: la science fondamentale &#xE0; la recherche translationnelle

Der Zebrab&auml;rbling ist erhebliche Modellsystem f&uuml;r Studium renale Organogenese und Krankheit sowie f&uuml;r die Suche nach neuen Therapeutika, wegen der strukturellen und funktionellen Einfachheit der embryonalen Niere geworden. Eingriffe in die Natur und Krankheit Staaten von Nieren-bezogene Ziliopathien und akute Nieren Sch&auml;digung (AKI) gibt es bereits von Zebrafisch-Studien. Diese Modellorganismus hat die Analyse der mutant Genfunktion f&uuml;r menschliche Krankheit in Bezug auf Ziliopathien beigetragen. J&uuml;ngsten Arbeiten in der Zebrafisch hat dar&uuml;ber hinaus im Feld AKI eine gutgl&auml;ubiger Erwachsenen Zebrafisch renale Vorl&auml;uferzellen (Spindel) Zelle ermittelt, die f&uuml;r Neo-Nephrogenesis, w&auml;hrend der normalen Lebensdauer und als Reaktion auf die renale Sch&auml;digung ben&ouml;tigt. Zusammengenommen festigen diese Studien der Zebrafisch als erfolgreiche Modellsystem zur Untersuchung des breiten Spektrums der Ziliopathien und AKI, die Millionen von Menschen weltweit betroffen, und zeigen auf einer vielversprechenden Zukunft der Zebrafisch Drogeentdeckung. Der Schwerpunkt dieser &Uuml;berpr&uuml;fung werden &uuml;ber die Rolle der der Zebrafisch als Modell f&uuml;r menschliche Niere-bezogene Ziliopathien und AKI wie unser Verst&auml;ndnis f&uuml;r diese komplexen Pathologien von diesem winzigen Teleost gef&ouml;rdert werden wird.

Zebrab&auml;rbling Niere Entwicklung: Grundlagenforschung f&uuml;r die Translationale Forschung.

Il Danio rerio &egrave; diventato un sistema significativo modello per studiare l&#39;organogenesi renale e malattia, cos&igrave; come per la ricerca di nuove terapie, a causa della semplicit&agrave; strutturale e funzionale del rene embrionale. Incursioni negli Stati natura e malattia di rene-correlati ciliopatie e danno renale acuto (AKI) sono state avanzate dagli studi di zebrafish. Questo organismo modello &egrave; stato determinante nell&#39;analisi della funzione del gene mutante per malattia umana rispetto ciliopatie. Inoltre, nel campo AKI, recenti lavori in the zebrafish ha individuato una cellula renali progenitrici (staminali) bona fide zebrafish adulto che &egrave; richiesta per neo-nephrogenesis, durante il normale ciclo di vita e in risposta al danno renale. Presi insieme, questi studi solidificano il zebrafish come sistema di modello di successo per studiare l&#39;ampio spettro di ciliopatie e AKI che colpiscono milioni di esseri umani in tutto il mondo e puntare a un futuro molto promettente di zebrafish drug discovery. L&#39;enfasi di questa recensione sar&agrave; il ruolo di the zebrafish come modello per ciliopatie correlati a rene umano e AKI, e come la comprensione di queste patologie complesse &egrave; essere promosso da questo minuscolo teleostei.

Lo sviluppo del rene zebrafish: scienza di base alla ricerca traslazionale.

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Zebrafish&#xB294; &#xBC30;&#xC544; &#xC2E0;&#xC7A5;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;&#xC640; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB2E8;&#xC21C; &#xC2E0;&#xC7A5; organogenesis&#xC640; &#xC9C8;&#xBCD1;, &#xACF5;&#xBD80; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD0D0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBAA8;&#xB378; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xB418;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xC2E0;&#xC7A5; &#xAD00;&#xB828; ciliopathies &#xBC0F; &#xAE09;&#xC131; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xC190;&#xC0C1; (&#xC544;&#xD0A4;)&#xC758; &#xC790;&#xC5F0; &#xBC0F; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0; &#xC9C4;&#xCD9C; zebrafish &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACE0;&#xAE09; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBAA8;&#xB378; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4;&#xB294; ciliopathies &#xAD00;&#xB828; &#xD558; &#xC5EC; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C; &#xC544;&#xD0A4; &#xD544;&#xB4DC;&#xC5D0;&#xB294; zebrafish &#xCD5C;&#xADFC; &#xC791;&#xD488; &#xB124;&#xC624; nephrogenesis&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC218;&#xBA85; &#xB3D9;&#xC548;&#xC5D0; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xC0C1;&#xD574;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC740; &#xD0C0;&#xACE0; &#xB09C; &#xC131;&#xC778; zebrafish &#xC2E0;&#xC7A5; &#xC870;&#xC0C1; (&#xC904;&#xAE30;) &#xC140;&#xC744; &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD568;&#xAED8; &#xCC0D;&#xC740;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; ciliopathies&#xC640; &#xC778;&#xAC04;, &#xC804;&#xC138;&#xACC4;&#xC758; &#xC218;&#xBC31;&#xB9CC; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE60; &#xACE0; zebrafish &#xC57D;&#xBB3C; &#xBC1C;&#xACAC;&#xC758; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC720;&#xB9DD;&#xD55C; &#xBBF8;&#xB798;&#xB97C; &#xAC00;&#xB9AC;&#xD0A8; &#xC544;&#xD0A4;&#xC758; &#xB113;&#xC740; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC;&#xC744; &#xACF5;&#xBD80;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC778; &#xBAA8;&#xB378; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC73C;&#xB85C;&#xB294; zebrafish &#xACF5;&#xACE0;&#xD788;. &#xC774; &#xD3C9;&#xAC00;&#xC758; &#xC911;&#xC810;&#xC740; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xAD00;&#xB828; ciliopathies &#xBC0F; &#xC544;&#xD0A4;, &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xBCD1; &#xB9AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC774;&#xD574;&#xB97C;&#xC774; &#xC791;&#xC740; teleost&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xC804; &#xB418;&#xB294; &#xBAA8;&#xB378;&#xB85C; zebrafish&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xC788;&#xC744; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Zebrafish &#xC2E0;&#xC7A5; &#xAC1C;&#xBC1C;: &#xBCC0;&#xD658; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xAE30;&#xCD08; &#xACFC;&#xD559;.

El pez cebra se ha convertido en un sistema modelo para estudiar significativa organog&#xE9;nesis renal y la enfermedad, as&#xED; como para la b&#xFA;squeda de nuevas terapias, debido a la simplicidad estructural y funcional del ri&#xF1;&#xF3;n embrionario. Las incursiones a los estados de la naturaleza y la enfermedad de ri&#xF1;&#xF3;n relacionadas con ciliopat&#xED;as y lesi&#xF3;n renal aguda (IRA) han sido presentadas por los estudios de pez cebra. Este organismo modelo ha sido fundamental en el an&#xE1;lisis de la funci&#xF3;n del gen mutante de la enfermedad humana con respecto a ciliopat&#xED;as. Adem&#xE1;s, en el campo de la IRA, el trabajo reciente en el pez cebra se ha identificado un pez cebra de buena fe para adultos renal progenitoras (madre) de c&#xE9;lulas que se requiere para el neo-nefrog&#xE9;nesis, tanto durante el per&#xED;odo de vida normal y en respuesta a una lesi&#xF3;n renal. En conjunto, estos estudios se solidifique el pez cebra como un sistema modelo de &#xE9;xito para el estudio de la amplia gama de ciliopat&#xED;as y Aki que afectan a millones de seres humanos en todo el mundo, y apuntan a un futuro muy prometedor de descubrimiento de f&#xE1;rmacos de pez cebra. El &#xE9;nfasis de esta revisi&#xF3;n ser&#xE1; sobre el papel del pez cebra como modelo para humanos relacionados con el ri&#xF1;&#xF3;n ciliopat&#xED;as y Aki, y c&#xF3;mo nuestra comprensi&#xF3;n de estas patolog&#xED;as complejas est&#xE1; siendo promovido por este peque&#xF1;o tele&#xF3;steos.

Cuong Q. Diep

Center for Regenerative Medicine

Massachusetts General Hospital

Transplantation of Cells Directly into the Kidney of Adult Zebrafish

Zebrafish as a Model to Assess the Teratogenic Potential of Nitrite

In Situ Hybridization in Zebrafish Larvae and Juveniles during Mesonephros Development

Cuong Q. Diep

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Center for Regenerative Medicine

Massachusetts General Hospital

Transplantation of Cells Directly into the Kidney of Adult Zebrafish

Zebrafish as a Model to Assess the Teratogenic Potential of Nitrite

In Situ Hybridization in Zebrafish Larvae and Juveniles during Mesonephros Development

Center for Regenerative Medicine