<em>Ex vivo</em> Imaging of T Cells in Murine Lymph Node Slices with Widefield and Confocal Microscopes

Na&iuml;ve T cells continuously traffic to secondary lymphoid organs, including peripheral lymph nodes, to detect rare expressed antigens. The migration ...

"Phagosome Closure Assay" to Visualize Phagosome Formation in Three Dimensions Using Total Internal Reflection Fluorescent Microscopy (TIRFM)

Phagocytosis is a mechanism used by specialized cells to internalize and eliminate microorganisms or cellular debris. It relies on profound rearrangements ...

Université Paris Descartes, CNRS (UMR 8104)

U1016, Paris, France

Université Paris Descartes, Sorbonne Paris Cité

&#x5FAE;&#x7BA1;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x88AB;&#x8C03;&#x5236;&#x800C;&#x6210;&#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x5176;&#x52A0;&#x4E0A;&#x4E24;&#x7AEF; &#xFF08;+ &#x63D0;&#x793A; [&#x52A0;&#x7ED3;&#x675F;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;]&#xFF09;&#xFF0C;&#x5982;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x8FDE;&#x63A5;&#x86CB;&#x767D; 170 (&#x526A;&#x8F91;-170) &#x6216;&#x7ED3;&#x675F;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D; 1 (EB1) &#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528; + &#x63D0;&#x793A;&#x5728;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x541E;&#x566C;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5229;&#x7528; RNA &#x5E72;&#x6270;&#x6280;&#x672F;&#x548C;&#x663E;&#x6027;&#x8D1F;&#x529E;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x663E;&#x793A;&#x526A;&#x8F91; 170 &#x5177;&#x4F53;&#x800C;&#x8A00;&#xFF0C;&#x9700;&#x8981;&#x7531; alphaMbeta2 &#x6574;&#x5408;&#x7D20;/&#x8865;&#x4F53;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x89E6;&#x53D1;&#x6709;&#x6548;&#x541E;&#x566C;&#x3002;&#x6B64;&#x5C5E;&#x6027;&#x4E0D;&#x88AB;&#x5E86;&#x795D; EB1 &#x548C; EB3&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x800C;&#x5728;&#x541E;&#x566C;&#x7684;&#x7AD9;&#x70B9;&#x52A8;&#x6001;&#x4E30;&#x5BCC;&#x4E86;&#x526A;&#x8F91; 170&#xFF0C;EB1 &#x4E0D;&#x662F;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6CE8;&#x610F;&#x5230;&#x526A;&#x8F91; 170 &#x63A7;&#x5236;&#x7684; formin mDia1&#xFF0C;&#x6210;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x6838;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;&#x5728;&#x5F00;&#x59CB;&#x541E;&#x566C;&#x62DB;&#x52DF;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4ECE;&#x800C;&#x63A7;&#x5236;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x805A;&#x5408;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x6240;&#x5FC5;&#x5907;&#x7684;&#x541E;&#x566C;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x526A;&#x8F91; 170 &#x76F4;&#x63A5;&#x4EA4;&#x4E92;&#x7684; mDia1 &#x7684; formin &#x540C;&#x6E90; 2 &#x57DF;&#x3002;&#x526A;&#x8F91; 170 &#x548C; mDia1 &#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x4EA7;&#x751F;&#x8D1F;&#x9762;&#x53D7;&#x89C4;&#x7BA1;&#x5728; alphaMbeta2 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x541E;&#x566C;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x89E3;&#x5F00;&#x65B0;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;/&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x5408;&#x4F5C;&#x7275;&#x6D89;&#x5230;&#x526A;&#x8F91; 170 &#x548C; mDia1 &#x548C; alphaMbeta2 &#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x7684;&#x4E0B;&#x6E38;&#x7684;&#x8BE5;&#x51FD;&#x6570;&#x3002;

&#x526A;&#x8F91; 170 &#x5750;&#x6807; mDia1 &#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x91CD;&#x7EC4;&#x671F;&#x95F4; CR3 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x541E;&#x566C;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;

Microtubule dynamics are modulated by regulatory proteins that bind to their plus ends (+TIPs [plus end tracking proteins]), such as cytoplasmic linker protein 170 (CLIP-170) or end-binding protein 1 (EB1). We investigated the role of +TIPs during phagocytosis in macrophages. Using RNA interference and dominant-negative approaches, we show that CLIP-170 is specifically required for efficient phagocytosis triggered by alphaMbeta2 integrin/complement receptor activation. This property is not observed for EB1 and EB3. Accordingly, whereas CLIP-170 is dynamically enriched at the site of phagocytosis, EB1 is not. Furthermore, we observe that CLIP-170 controls the recruitment of the formin mDia1, an actin-nucleating protein, at the onset of phagocytosis and thereby controls actin polymerization events that are essential for phagocytosis. CLIP-170 directly interacts with the formin homology 2 domain of mDia1. The interaction between CLIP-170 and mDia1 is negatively regulated during alphaMbeta2-mediated phagocytosis. Our results unravel a new microtubule/actin cooperation that involves CLIP-170 and mDia1 and that functions downstream of alphaMbeta2 integrins.

The microtubule-binding protein CLIP-170 coordinates mDia1 and actin reorganization during CR3-mediated phagocytosis.

Dynamique des microtubules est modul&eacute;e par des prot&eacute;ines r&eacute;gulatrices qui se lient &agrave; leurs plus fins (+ conseils [plus fin suivi de prot&eacute;ines]), prot&eacute;ine cytoplasmique linker 170 (CLIP-170) ou fin-binding protein 1 (EB1). Nous avons &eacute;tudi&eacute; le r&ocirc;le des + conseils au cours de la phagocytose dans les macrophages. &Agrave; l&#39;aide de l&#39;interf&eacute;rence ARN et approches dominant n&eacute;gatif, nous montrons que CLIP-170 est formellement requis pour phagocytose efficace, d&eacute;clench&eacute;e par l&#39;activation des r&eacute;cepteurs int&eacute;grines/compl&eacute;ment alphaMbeta2. Cette propri&eacute;t&eacute; n&#39;est pas observ&eacute;e pour EB1 et EB3. En cons&eacute;quence, alors que le CLIP-170 est enrichie dynamiquement sur le site de la phagocytose, EB1 n&#39;est pas. En outre, nous constatons que les CLIP-170 contr&ocirc;le le recrutement de la mDia1 formin, une prot&eacute;ine de nucl&eacute;ation de l&#39;actine, au d&eacute;but de la phagocytose et contr&ocirc;le ainsi les &eacute;v&eacute;nements polym&eacute;risation de l&#39;actine qui sont essentiels pour la phagocytose. CLIP-170 interagit directement avec le domaine d&#39;homologie 2 formin de mDia1. L&#39;interaction CLIP-170 / mDia1 est r&eacute;gul&eacute;e n&eacute;gativement au cours de la phagocytose m&eacute;di&eacute;e par les alphaMbeta2. Nos r&eacute;sultats d&eacute;faire d&#39;une nouvelle coop&eacute;ration microtubule/actine qui consiste &agrave; CLIP-170 et mDia1 et qui fonctionne en aval des int&eacute;grines alphaMbeta2.

La prot&eacute;ine microtubulaire-CLIP-170 coordonn&eacute;es mDia1 et la r&eacute;organisation de l&#39;actine durant la phagocytose m&eacute;di&eacute;e par CR3.

Microtubule Dynamik werden durch regulatorische Proteine moduliert, die ihre plus enden (+ Tipps [plus Ende verfolgen Proteine]), z. B. zytoplasmatischen Linker Protein 170 (CLIP-170) oder Ende-verbindliches Protein 1 (ES1) zu binden. Wir untersuchten die Rolle von + Tipps w&auml;hrend der Phagozytose in Makrophagen. RNA-Interferenz und Dominant-negativen Ans&auml;tze verwenden, zeigen wir, dass die CLIP-170 speziell f&uuml;r effiziente Phagozytose, ausgel&ouml;st durch alphaMbeta2 Integrin/Komplement-Rezeptor-Aktivierung erforderlich ist. Diese Eigenschaft wird nicht f&uuml;r ES1 und EB3 beobachtet. Folglich w&auml;hrend CLIP-170 dynamisch auf dem Gel&auml;nde der Phagozytose bereichert wird, ist ES1 keine. Dar&uuml;ber hinaus beobachten wir, dass die CLIP-170 steuert die Rekrutierung von formin mDia1, eines Proteins Aktin-Nukleierungsmittel zu Beginn der Phagozytose und damit steuert Aktin-Polymerisation-Ereignisse, die f&uuml;r die Phagozytose unverzichtbar sind. CLIP-170 interagiert direkt mit der formin Homologie 2-Dom&auml;ne des mDia1. Die Interaktion zwischen CLIP-170 und mDia1 wird w&auml;hrend der alphaMbeta2-vermittelte Phagozytose negativ reguliert. Unsere Ergebnisse zu entwirren eine neue Microtubule/Aktin-Kooperation, bei der CLIP-170 und mDia1 und die Funktionen stromabw&auml;rts des alphaMbeta2 Integrine.

Die Microtubule-verbindliches Protein CLIP-170 Koordinaten mDia1 und Aktin Reorganisation w&auml;hrend CR3-vermittelte Phagozytose.

Microtubule dynamics sono modulati da proteine regolatrici che si legano ai loro plus le estremit&agrave; (+ Suggerimenti [pi&ugrave; fine rilevamento delle proteine]), come la proteina citoplasmatica del linker 170 (CLIP-170) o fine-binding protein 1 (EB. 1). Abbiamo studiato il ruolo di + consigli durante la fagocitosi in macrofagi. Utilizzando approcci dominante-negativo e interferenza del RNA, mostriamo che CLIP-170 &egrave; specificamente richiesto per efficiente fagocitosi innescata dall&#39;attivazione del recettore integrina/complemento di alphaMbeta2. Questa propriet&agrave; non &egrave; osservata per EB1 ed EB3. Di conseguenza, considerando che la CLIP-170 &egrave; arricchito in modo dinamico al sito della fagocitosi, EB1 non lo &egrave;. Inoltre, osserviamo che la CLIP-170 controlla l&#39;assunzione del mDia1 formin, una proteina actina-nucleare, all&#39;esordio della fagocitosi e quindi controlla gli eventi di polimerizzazione dell&#39;actina che sono essenziali per la fagocitosi. CLIP-170 interagisce direttamente con il dominio di omologia 2 formin di mDia1. L&#39;interazione tra CLIP-170 e mDia1 &egrave; regolato negativamente durante la fagocitosi mediata da alphaMbeta2. I nostri risultati svelare una nuova cooperazione microtubule/actina che coinvolge CLIP-170 e mDia1 e che funzioni a valle della alphaMbeta2 integrine.

La proteina microtubule-associazione CLIP-170 coordinate mDia1 e riorganizzazione dell&#39;actina durante la fagocitosi mediata da CR3.

&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x306F;&#x5F7C;&#x3089;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x7AEF; &#xFF08;+ &#x30D2;&#x30F3;&#x30C8; [&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x7D42;&#x308F;&#x308A;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x8FFD;&#x8DE1;&#x3059;&#x308B;]&#xFF09;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AB;&#x30FC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; 170 (&#x30AF;&#x30EA;&#x30C3;&#x30D7;-170) &#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x7AEF;&#x7D50;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; 1 &#xFF08;EB1) &#x306A;&#x3069;&#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;&#x8CAA;&#x98DF;&#x80FD;&#x306E;&#x4E2D;&#x306B;&#x5F79;&#x5272;&#x306E; + &#x306E;&#x30D2;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;RNA &#x5E72;&#x6E09;&#x3068;&#x30C9;&#x30DF;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C8; &#x30CD;&#x30AC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30AF;&#x30EA;&#x30C3;&#x30D7; 170 alphaMbeta2 &#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;/&#x88DC;&#x4F53;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x52B9;&#x7387;&#x3088;&#x3044;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CAA;&#x98DF;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7279;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3;&#x306F;&#x3001;EB1 &#x3068; EB3 &#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30AF;&#x30EA;&#x30C3;&#x30D7; 170 &#x306F;&#x52D5;&#x7684;&#x306B;&#x8CAA;&#x98DF;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x6FC3;&#x7E2E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3001;EB1 &#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x30AF;&#x30EA;&#x30C3;&#x30D7; 170 &#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30DF;&#x30F3; mDia1&#x3001;&#x8CAA;&#x98DF;&#x306E;&#x767A;&#x75C7;&#x3067;&#x306F;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x6838;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x52DF;&#x96C6;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x98DF;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x306A;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x91CD;&#x5408;&#x306E;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AF;&#x30EA;&#x30C3;&#x30D7; 170 &#x306F;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5; mDia1 &#x306E;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30DF;&#x30F3; &#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B8;&#x30FC; 2 &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3068;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AF;&#x30EA;&#x30C3;&#x30D7; 170 &#x3068; mDia1 &#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x3001;&#x5426;&#x5B9A;&#x7684;&#x306B; alphaMbeta2 &#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CAA;&#x98DF;&#x4E2D;&#x306B;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x30AF;&#x30EA;&#x30C3;&#x30D7; 170 &#x3068; mDia1 &#x3068;&#x4E0B;&#x6D41; alphaMbeta2 &#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3001;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;/&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x5354;&#x529B;&#x3092;&#x89E3;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30AF;&#x30EA;&#x30C3;&#x30D7; 170 &#x5EA7;&#x6A19; mDia1 &#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x7D50;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x518D;&#x7DE8;&#x6210;&#x4E2D; CR3 &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x8CAA;&#x98DF;&#x306B;&#x3002;

Microtubule &#xC5ED;&#xD559; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xB9C1;&#xCEE4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 170 (&#xD074;&#xB9BD;-170) &#xB610;&#xB294; &#xCD5C;&#xC885; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 1 (EB1) &#xB4F1;&#xC758; &#xB354;&#xD558;&#xAE30; &#xB05D; (+ &#xD301; [&#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xCD94;&#xC801; &#xB05D;]), &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD560; &#xADDC;&#xC81C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCC0;&#xC870; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9; &#xC911;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560; + &#xD301;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. RNA &#xAC04;&#xC12D; &#xD558; &#xACE0; &#xC9C0;&#xBC30; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC811;&#xADFC;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD074;&#xB9BD;-170 alphaMbeta2 integrin/&#xBCF4;&#xC644; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xAC70;&#xB418;&#xB294; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0;&#xB294; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC18D;&#xC131;&#xC740; EB1 &#xBC0F; EB3 &#xAD00;&#xCC30; &#xD558;&#xC9C0;. &#xC774; &#xB530;&#xB77C;, &#xD074;&#xB9BD;-170&#xC740; &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3D9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD48D;&#xC131; &#xD558; &#xAC8C;, &#xBC18;&#xBA74; EB1 &#xC544;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xAD00;&#xCC30; &#xD074;&#xB9BD;-170 formin mDia1, &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xBC1C;&#xBCD1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9D0;&#xB77C; nucleating &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xBAA8;&#xC9D1;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8;&#xB85C; &#xC778;&#xD558;&#xC5EC; &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xB9D0;&#xB77C; &#xD569; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD074;&#xB9BD;-170 mDia1 formin homology 2 &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xACFC; &#xC9C1;&#xC811; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD074;&#xB9BD;-170&#xACFC; mDia1 &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC740; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; alphaMbeta2 &#xC911;&#xC7AC; &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xADDC;&#xC81C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xD074;&#xB9BD;-170&#xACFC; mDia1 &#xBC0F; alphaMbeta2 integrins&#xC758; &#xD558;&#xB958; &#xADF8; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; microtubule/&#xB9D0;&#xB77C; &#xD611;&#xB825; &#xD574;&#xBA85;.

&#xD074;&#xB9BD;-170 microtubule &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; CR3 &#xC911;&#xC7AC; &#xC2DD; &#xADE0; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; mDia1 &#xBC0F; &#xB9D0;&#xB77C; &#xAC1C;&#xD3B8;&#xC744; &#xC870;&#xC815;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Din&aacute;mica de los microt&uacute;bulos es modulada por prote&iacute;nas reguladoras que se unen a sus m&aacute;s extremos (+ consejos [m&aacute;s extremo seguimiento prote&iacute;nas]), como la prote&iacute;na citopl&aacute;smica vinculador 170 (CLIP-170) o prote&iacute;na final 1 (EB1). Investigamos el papel de + consejos durante la fagocitosis de los macr&oacute;fagos. Utilizando ARN de interferencia y enfoques dominante negativo, mostramos que CLIP-170 es especialmente necesario para fagocitosis eficaz desencadenada por la activaci&oacute;n de receptores de integrina/complemento de alphaMbeta2. Esta propiedad no se observa EB1 y EB3. Por consiguiente, mientras que el CLIP-170 din&aacute;micamente se enriquece en el sitio de la fagocitosis, EB1 no es. Adem&aacute;s, observamos que CLIP-170 la contrataci&oacute;n de la mDia1 formin, una prote&iacute;na actina-nucleaci&oacute;n, en el inicio de la fagocitosis y manejar&aacute;n lo eventos de polimerizaci&oacute;n de la actina que son esenciales para la fagocitosis. CLIP-170 interact&uacute;a directamente con el dominio de homolog&iacute;a 2 formin de mDia1. La interacci&oacute;n entre CLIP-170 y mDia1 es regulada negativamente durante la fagocitosis mediada por alphaMbeta2. Nuestros resultados desenredan una nueva cooperaci&oacute;n de microt&uacute;bulos/actina que involucra CLIP-170 y mDia1 y que funciona abajo de alphaMbeta2 integrinas.

La prote&iacute;na de uni&oacute;n a microt&uacute;bulos CLIP-170 coordenadas mDia1 y reorganizaci&oacute;n de la actina durante la fagocitosis mediada por CR3.

&#x8DE8;&#x6F14;&#x793A;&#x6587;&#x7A3F;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE; (Dc)&#xFF0C;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x63D0;&#x4EA4;&#x5230; CD8(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x6E90;&#x6297;&#x539F;&#x3002;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6297;&#x539F;&#x6765;&#x6E90;&#x4E4B;&#x4E00;&#x51CB;&#x4EA1;&#x7EC6;&#x80DE;&#x901A;&#x5E38;&#x89C6;&#x4E3A;&#x6700;&#x9002;&#x5408;&#x8DE8;&#x6F14;&#x793A;&#x6587;&#x7A3F;&#x7531;&#x533A;&#x8BAE;&#x4F1A;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6297;&#x539F;&#x7684;&#x6E90;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6F5C;&#x529B;&#x90FD;&#x88AB;&#x5FFD;&#x7565;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63A2;&#x8BA8;&#x4E86; DCs &#x662F;&#x5426;&#x80FD;&#x591F;&#x6355;&#x83B7;&#x548C;&#x8DE8;&#x76EE;&#x524D;&#x6297;&#x539F;&#x4ECE;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;DCs &#x5185;&#x90E8;&#x5316;&#x6E38;&#x79BB;&#x548C;&#x819C;&#x6750;&#x6599;&#x4ECE;&#x6CE1;&#x5230;&#x65B0;&#x9648;&#x4EE3;&#x8C22;&#x6807;&#x8BB0;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x6574;&#x4E2A;&#x813E;&#x810F;&#x4E2D;&#x4F7F;&#x7528;&#x5EF6;&#x65F6;&#x5171;&#x805A;&#x7126;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#xFF0C;&#x663E;&#x793A;&#x6765;&#x81EA;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684; DCs &#x5185;&#x90E8;&#x5316;&#x7684;&#x6750;&#x6599;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x3002;&#x540E;&#x6765;&#x81EA;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5375;&#x6E05;&#x86CB;&#x767D;&#x5438;&#x6536;&#xFF0C;DCs &#x8DE8;&#x5355;&#x5F15;&#x7269;&#x5375;&#x6E05;&#x86CB;&#x767D;&#x7279;&#x5B9A;&#x5929;&#x771F; OT-&#x6211; CD8(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x4F53;&#x5916;&#x3002;&#x6CE8;&#x5165;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4EE5;&#x524D;&#x8F6C;&#x79FB;&#x4E0E;&#x5929;&#x771F; OT-&#x6211; T &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x8DE8;&#x5355;&#x5F15;&#x7269;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#xFF0C;&#x751A;&#x81F3;&#x5728;&#x6CA1;&#x6709;&#x80FD;&#x591F;&#x63D0;&#x51FA;&#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x4F4D;&#x6536;&#x4EF6;&#x4EBA;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x5185;&#x6E90;&#x6027; DCs&#x3002;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;DCs &#x8BF1;&#x5BFC;&#x5F3A;&#x81EA;&#x7136; CD8(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x548C;&#x4FDD;&#x62A4;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x514D;&#x53D7;&#x81F4;&#x547D;&#x80BF;&#x7624;&#x6311;&#x6218;&#x540E;&#x6355;&#x83B7;&#x7684;&#x4ECE;&#x9ED1;&#x8272;&#x7D20;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x6BD4;&#x6D3B;&#x9ED1;&#x8272;&#x7D20;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6297;&#x539F;&#x3002;&#x8DE8;&#x6587;&#x7A3F;&#x4ECE;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6F5C;&#x529B;&#x63ED;&#x793A;&#x4E86;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x7684;&#x8702;&#x7A9D;&#x4E92;&#x901A;&#x548C;&#x5FC5;&#x987B;&#x8003;&#x8651;&#x5230;&#x611F;&#x5E94;&#x7684;&#x5BB9;&#x5FCD;&#x6216;&#x81EA;&#x6211;&#x3001; &#x80BF;&#x7624;&#x3001; &#x79FB;&#x690D;&#x6216;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x529B;&#x3002;

&#x8DE8;&#x6587;&#x7A3F;&#x7531;&#x6765;&#x81EA;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x4FDD;&#x62A4;&#x6027;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;

Cross-presentation is an essential mechanism that allows dendritic cells (DCs) to efficiently present exogenous antigens to CD8(+) T cells. Among cellular antigen sources, apoptotic cells are commonly considered as the best for cross-presentation by DCs. However, the potential of live cells as a source of antigen has been overlooked. Here we explored whether DCs were able to capture and cross-present antigens from live cells. DCs internalized cytosolic and membrane material into vesicles from metabolically labeled live cells. Using time-lapse confocal microscopy in whole spleens, we showed that DCs internalized material from live cells in vivo. After ovalbumin uptake from live cells, DCs cross-primed ovalbumin-specific naive OT-I CD8(+) T cells in vitro. Injected into mice previously transferred with naive OT-I T cells, they also cross-primed in vivo, even in the absence of endogenous DCs able to present the epitope in the recipient mice. Interestingly, DCs induced stronger natural CD8(+) T-cell responses and protection against a lethal tumor challenge after capture of antigens from live melanoma cells than from apoptotic melanoma cells. The potential for cross-presentation from live cells uncovers a new type of cellular intercommunication and must be taken into account for induction of tolerance or immunity against self, tumors, grafts, or pathogens.

Cross-presentation by dendritic cells from live cells induces protective immune responses in vivo.

Pr&eacute;sentation crois&eacute;e est un m&eacute;canisme essentiel qui permet aux cellules dendritiques (DCs) de pr&eacute;senter efficacement les antig&egrave;nes exog&egrave;nes aux cellules T CD8. Parmi les sources d&#39;antig&egrave;ne cellulaire, cellules apoptotiques sont commun&eacute;ment consid&eacute;r&eacute;s comme le meilleur pour la pr&eacute;sentation crois&eacute;e par DCs. Toutefois, le potentiel de cellules vivantes comme source d&#39;antig&egrave;ne a &eacute;t&eacute; n&eacute;glig&eacute;. Ici, nous avons explor&eacute; si DCs ont pu capturer et croix-pr&eacute;sents antig&egrave;nes de cellules vivantes. DCs internalis&eacute; cytosolique et mat&eacute;riau de la membrane dans les v&eacute;sicules de m&eacute;taboliquement marqu&eacute;s des cellules vivantes. &Agrave; l&#39;aide de Time-Lapse microscopie confocale en rate tout, nous avons montr&eacute; ce mat&eacute;riel internalis&eacute; DCs de cellules vivantes in vivo. Apr&egrave;s l&#39;absorption de l&#39;ovalbumine de cellules vivantes, DCs Croix-amorc&eacute; na&iuml;ve de l&#39;ovalbumine sp&eacute;cifiques OT-I T CD8 cellules in vitro. Inject&eacute;es &agrave; des souris pr&eacute;alablement transf&eacute;r&eacute;s avec na&iuml;ve OT-j&#39;ai T cellules, ils &eacute;galement Croix-amorc&eacute; en vivo, m&ecirc;me en l&#39;absence de pouvoir pr&eacute;senter l&#39;&eacute;pitope chez les souris destinataires endog&egrave;nes DCs. Fait int&eacute;ressant, DCs induisirent plus fortes r&eacute;ponses naturelles de lymphocytes T CD8 et protection contre une tumeur mortelle apr&egrave;s la capture des antig&egrave;nes de cellules de m&eacute;lanome direct que de cellules de m&eacute;lanome apoptose. Le potentiel pour une pr&eacute;sentation crois&eacute;e de cellules vivantes d&eacute;voile un nouveau type d&#39;intercommunication cellulaire et doit prendre en consid&eacute;ration pour l&#39;induction de la tol&eacute;rance ou l&#39;immunit&eacute; contre soi, tumeurs, greffes ou pathog&egrave;nes.

Pr&eacute;sentation crois&eacute;e par des cellules dendritiques des cellules vivantes induit des r&eacute;ponses immunitaires protectrices in vivo.

Cross-Pr&auml;sentation ist ein wesentlicher Mechanismus, der dendritische Zellen (DCs) effizient exogene Antigene CD8(+) T-Zellen pr&auml;sentieren zu k&ouml;nnen. Unter zellul&auml;re Antigen Quellen gelten Apoptotic Zellen h&auml;ufig als das beste f&uuml;r Kreuz-Pr&auml;sentation von DCs. Das Potenzial der lebenden Zellen als eine Quelle von Antigen wurde jedoch &uuml;bersehen. Hier wir gepr&uuml;ft, ob DCs Capture und Kreuz-heute Antigene aus lebenden Zellen konnten. DCs verinnerlicht Zytosolische und Membranmaterial in Vesikeln von metabolisch beschriftet lebenden Zellen. Mit Time-Lapse confocal Mikroskopie in ganze Milzen, zeigten wir dass DCs verinnerlichte Material von lebenden Zellen in-vivo. Nach Eieralbumin Aufnahme aus lebenden Zellen, DCs Kreuz-grundiert Eieralbumin-spezifische naiv OT-ich CD8(+) T-Zellen in vitro. In M&auml;usen, die zuvor mit naiven OT &uuml;bertragen injiziert-ich T Zellen, sie auch Kreuz-grundiert in Vivo, sogar in Ermangelung einer endogenen DCs die Epitop in die Empf&auml;nger-M&auml;use zu pr&auml;sentieren. Interessanterweise induzierte DCs st&auml;rker nat&uuml;rliche CD8(+) T-Zell-Antworten und Schutz vor einem t&ouml;dlichen Tumor-Herausforderung nach Einnahme von Antigenen aus live Melanomzellen als von Apoptotic Melanomzellen. Das Potenzial f&uuml;r Kreuz-Pr&auml;sentation von lebenden Zellen entdeckt eine neue Art der zellul&auml;ren Kommunikation untereinander und muss f&uuml;r die Induktion von Toleranz oder Immunit&auml;t gegen selbst, Tumoren, Transplantate oder Krankheitserreger ber&uuml;cksichtigt werden.

Cross-Pr&auml;sentation von dendritischen Zellen aus lebenden Zellen induziert sch&uuml;tzende Immunantworten in-vivo.

Cross-presentazione &egrave; un meccanismo essenziale che permette le cellule dendritiche (DCs) per presentare in modo efficiente antigeni esogeni in cellule cellule T. Tra le fonti dell&#39;antigene cellulare, le cellule apoptotic comunemente sono considerate come i migliori per cross-presentazione da DCs. Tuttavia, il potenziale delle cellule vive come una fonte di antigene &egrave; stato trascurato. Qui abbiamo esplorato se DCs sono stati in grado di catturare e antigeni cross-presente da cellule vive. DCs interiorizzato citosolico e materiale di membrana in vescicole da metabolicamente etichettati cellule vive. Usando microscopia confocal time-lapse in tutta milze, abbiamo mostrato che DCs il materiale interiorizzato da cellule vive in vivo. Dopo assorbimento di ovoalbumina da cellule vive, DCs cross-innescato ovoalbumina specifici ingenuo OT-sono cellule T le cellule in vitro. Iniettato in topi precedentemente trasferiti con ingenuo OT-I T cellule, essi anche cross-adesca in vivo, anche in assenza di DCs endogeni in grado di presentare l&#39;epitopo in topi destinatari. &Egrave; interessante notare, DCs indotta risposte di cellule T-cellula naturale pi&ugrave; forte e protezione contro una sfida letale tumore dopo la cattura di antigeni da cellule di melanoma dal vivo pi&ugrave; da apoptotic cellule di melanoma. Il potenziale per cross-presentazione da cellule vive scopre un nuovo tipo di cellulare intercomunicazione e dovr&agrave; essere presi in considerazione per induzione di tolleranza o di immunit&agrave; contro s&eacute;, tumori, innesti o agenti patogeni.

Cross-presentazione da parte di cellule dendritiche da cellule vive induce risposta immunitaria protettiva in vivo.

&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9; &#x30D7;&#x30EC;&#x30BC;&#x30F3;&#x30C6;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x6A39;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE; (Dc) &#x3092;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306B;&#x5916;&#x56E0;&#x6027;&#x6297;&#x539F;&#x3060;&#x308D;&#x3046;&#x3053;&#x306E; T &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x63D0;&#x793A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304F;&#x5FC5;&#x9808;&#x306E;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x6297;&#x539F;&#x306E;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x9593;&#x3067;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9; &#x30D7;&#x30EC;&#x30BC;&#x30F3;&#x30C6;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x30D9;&#x30B9;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066; Dc &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8003;&#x616E;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x751F;&#x304D;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x6297;&#x539F;&#x306E;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306F;&#x898B;&#x843D;&#x3068;&#x3055;&#x306B;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;DCs &#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x751F;&#x304D;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30BB;&#x30EB; &#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30C1;&#x30E3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9; &#x30D7;&#x30EC;&#x30BC;&#x30F3;&#x30C8;&#x6297;&#x539F;&#x306B;&#x3067;&#x304D;&#x305F;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x6211;&#x3005; &#x3092;&#x63A2;&#x691C;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;DCs &#x304C;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30BE;&#x30EB;&#x5185;&#x9762;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x819C;&#x6750;&#x6599;&#x304B;&#x3089;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306B;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x6A19;&#x8B58;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x7D30;&#x80DE;&#x3002;&#x5171;&#x7126;&#x70B9;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x30E9;&#x30D7;&#x30B9;&#x3067;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x813E;&#x81D3;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;DCs &#x5185;&#x9762;&#x7D20;&#x6750;&#x306E;&#x751F;&#x304D;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30BB;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;&#x3092; in vivo &#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;DCs &#x30FB; &#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x5375;&#x767D;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D6;&#x30DF;&#x30F3;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x5F8C;&#x30FB; &#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;-&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x5375;&#x767D;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D6;&#x30DF;&#x30F3;&#x7279;&#x7570;&#x30CA;&#x30A4;&#x30FC;&#x30D6; OT-&#x79C1;&#x3060;&#x308D;&#x3046;&#x3053;&#x306E; T &#x7D30;&#x80DE;&#x306E; in vitro &#x3067;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x4E16;&#x9593;&#x77E5;&#x3089;&#x305A;&#x306E;&#x30AA;&#x30C8;&#x3067;&#x8EE2;&#x9001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x6CE8;&#x5165;-&#x79C1;&#x306F; T &#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x3082;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;-&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; in vivo&#x3001;&#x5185;&#x56E0;&#x6027; DCs &#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x53D7;&#x4FE1;&#x8005;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x63D0;&#x793A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x3067;&#x3082;&#x3002;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;DCs &#x8A98;&#x8D77;&#x81EA;&#x7136;&#x306E;&#x5F37;&#x3044;&#x306E;&#x3060;&#x308D;&#x3046;&#x3053;&#x306E; T &#x7D30;&#x80DE;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3068;&#x6297;&#x539F;&#x3088;&#x308A;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x306E;&#x30E1;&#x30E9;&#x30CE;&#x30FC;&#x30DE;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x60AA;&#x6027;&#x9ED2;&#x8272;&#x816B;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30C1;&#x30E3;&#x5F8C;&#x306B;&#x81F4;&#x547D;&#x7684;&#x306A;&#x816B;&#x760D;&#x30C1;&#x30E3;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B8;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3002;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9; &#x30D7;&#x30EC;&#x30BC;&#x30F3;&#x30C6;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306E;&#x643A;&#x5E2F;&#x96FB;&#x8A71;&#x306E;&#x4EA4;&#x4FE1;&#x306E;&#x8986;&#x3044;&#x3092;&#x53D6;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x516C;&#x5DEE;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x81EA;&#x5DF1;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x3001;&#x79FB;&#x690D;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x514D;&#x75AB;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306E;&#x8003;&#x616E;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

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&#xD06C;&#xB85C;&#xC2A4;-&#xD504;&#xB808; &#xC820; &#xD14C;&#xC774; &#xC158; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; (DCs)&#xC744; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; CD8(+) T &#xC140; exogenous &#xD56D; &#xC6D0; &#xC81C;&#xC2DC;&#xB97C; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC138;&#xD3EC; &#xD56D; &#xC6D0; &#xC18C;&#xC2A4; &#xC911; apoptotic &#xC138;&#xD3EC; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; dc &#xD06C;&#xB85C;&#xC2A4;-&#xD504;&#xB808; &#xC820; &#xD14C;&#xC774; &#xC158;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCD5C;&#xACE0;&#xC758;&#xB85C; &#xAC04;&#xC8FC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xD56D; &#xC6D0; &#xC18C;&#xC2A4;&#xB85C; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC140;&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825; &#xAC04;&#xACFC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Dc &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCEA1;&#xCC98; &#xBC0F; &#xD06C;&#xB85C;&#xC2A4;-&#xD604;&#xC7AC; &#xD56D; &#xC6D0; &#xC218; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; &#xD0D0;&#xD5D8;. Dc cytosolic &#xB0B4; &#xBA74; &#xBC0F;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC18C;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xC18C;&#xC7AC; metabolically &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC140;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD574;&#xB2F9; Dc &#xB0B4; &#xBA74;&#xB41C; &#xC790;&#xB8CC;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC804;&#xCCB4; spleens &#xC2DC;&#xAC04; &#xACBD;&#xACFC; confocal &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;. &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; ovalbumin &#xD1B5;&#xD48D; &#xAD00;, &#xD6C4; Dc &#xD06C;&#xB85C;&#xC2A4;-&#xC561; ovalbumin &#xD2B9;&#xC815; &#xC21C;&#xC9C4;&#xD55C; &#xC624;&#xD2F0;-&#xB09C; CD8(+) T &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C;. &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC21C;&#xC9C4;&#xD55C; &#xC624;&#xD2F0;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC804;&#xC1A1; &#xD558;&#xB294; &#xC950;&#xB85C; &#xC8FC;&#xC785;-&#xB098; T &#xC138;&#xD3EC;, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xB610;&#xD55C; &#xD06C;&#xB85C;&#xC2A4;-&#xC561; &#xC0DD; Dc &#xBC1B;&#xB294; &#xC0AC;&#xB78C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xB294; epitope&#xB97C; &#xC120;&#xBB3C; &#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C;. &#xD765;&#xBBF8;&#xB86D;&#xAC8C;&#xB3C4;, Dc &#xC720;&#xB3C4; &#xAC15;&#xD55C; &#xC790;&#xC5F0; CD8(+) T &#xC138;&#xD3EC; &#xBC18;&#xC751;&#xACFC; apoptotic &#xD751;&#xC0C9; &#xC885; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xD751;&#xC0C9; &#xC885; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD56D; &#xC6D0;&#xC5D0; &#xCEA1;&#xCC98; &#xD6C4; &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778; &#xC885;&#xC591;&#xB3C4; &#xC804;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCF4;&#xD638;. &#xD06C;&#xB85C;&#xC2A4;-&#xD504;&#xB808; &#xC820; &#xD14C;&#xC774; &#xC158;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0B4;&#xC544;&#xC788;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC720;&#xD615;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xB0B4;&#xBD80;&#xB97C; &#xD3ED;&#xB85C; &#xD55C;&#xB2E4; &#xACE0; &#xC131;&#xC774;&#xB098; &#xC790;&#xAE30;, &#xC885;&#xC591;, &#xC774;&#xC2DD;, &#xB610;&#xB294; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xADE0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBA74;&#xC5ED;&#xC758; &#xC720;&#xB3C4; &#xACE0;&#xB824; &#xD55C;&#xB2E4;.

&#xD06C;&#xB85C;&#xC2A4;-&#xD504;&#xB808; &#xC820; &#xD14C;&#xC774; &#xC158; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF4;&#xD638; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Presentaci&oacute;n cruzada es un mecanismo esencial que permite a las c&eacute;lulas dendr&iacute;ticas (DCs) eficientemente presentar ant&iacute;genos ex&oacute;genos a las c&eacute;lulas T CD8. Entre las fuentes de ant&iacute;genos celulares, c&eacute;lulas apopt&oacute;ticas com&uacute;nmente son consideradas como las mejores para presentaci&oacute;n cruzada por DCs. Sin embargo, el potencial de c&eacute;lulas vivas como fuente de ant&iacute;geno ha sido pasada por alto. Aqu&iacute; exploramos si DCs fueron capaces de capturar y Cruz-presente ant&iacute;genos de c&eacute;lulas vivas. DCs interiorizado citos&oacute;lica y material de la membrana en ves&iacute;culas de etiquetado metab&oacute;licamente c&eacute;lulas vivas. Usando microscopia confocal time-lapse en todo bazos, mostramos ese material interiorizado de DCs de c&eacute;lulas vivas en vivo. Despu&eacute;s de la absorci&oacute;n de la ovoalb&uacute;mina de c&eacute;lulas vivas, DCs Cruz-cebada ovoalb&uacute;mina espec&iacute;ficos ingenuo OT-I T CD8 c&eacute;lulas in vitro. Inyectado en ratones previamente transferidos con OT ingenuo-yo T las c&eacute;lulas, tambi&eacute;n Cruz-preparado en vivo, incluso en la ausencia de podemos presentar el epitopo en los ratones receptores end&oacute;genos DCs. Curiosamente, DCs inducida por las respuestas de c&eacute;lulas T CD8 naturales m&aacute;s fuertes y protecci&oacute;n contra el desaf&iacute;o de un tumor letal despu&eacute;s de captura de ant&iacute;genos de las c&eacute;lulas del melanoma vivo que de las c&eacute;lulas del melanoma apopt&oacute;tica. El potencial de presentaci&oacute;n cruzada de c&eacute;lulas vivas descubre un nuevo tipo de intercomunicaci&oacute;n celular y debe tenerse en cuenta para la inducci&oacute;n de tolerancia o inmunidad contra uno mismo, tumores, injertos o pat&oacute;genos.

Presentaci&oacute;n cruzada por c&eacute;lulas dendr&iacute;ticas de c&eacute;lulas vivas induce la respuesta inmune protectora en vivo.

&#x7EA4;&#x6BDB;&#x548C;&#x97AD;&#x6BDB;&#x662F;&#x771F;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#x53C2;&#x4E0E;&#x591A;&#x4E2A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x539F;&#x53D1;&#x6027;&#x7EA4;&#x6BDB;&#x662F;&#x4E00;&#x822C;&#x975E;&#x80FD;&#x52A8;&#x6027;&#x548C;&#x65E0;&#x6570;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E2D;&#x90FD;&#x53EF;&#x4EE5;&#x627E;&#x5230;&#x5B83;&#x5728;&#x63A7;&#x5236;&#x5173;&#x952E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x3002;&#x901A;&#x7528;&#x7684;&#x4F53;&#x7CFB;&#x7ED3;&#x6784;&#xFF0C;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x8D85;&#x5FAE;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x5728;&#x5176;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E00;&#x4E9B;&#x5DEE;&#x5F02;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x776B;&#x7684;&#x53E3;&#x888B;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6291;&#x90C1;&#x8D28;&#x819C;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x7684;&#x4F20;&#x9500;&#x7684;&#x6839;&#x6E90;&#x662F;&#x539F;&#x53D1;&#x6027;&#x7EA4;&#x6BDB;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x7ED3;&#x6784;&#x4F4E;&#x9891;&#x80BE;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (IMCD3) &#x53D1;&#x73B0;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0E;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x8272;&#x7D20;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (RPE1) &#x51E0;&#x4E4E;&#x6240;&#x6709;&#x539F;&#x53D1;&#x6027;&#x7EA4;&#x6BDB;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x900F;&#x5C04;&#x548C;&#x626B;&#x63CF;&#x7535;&#x955C;&#x3001; &#x514D;&#x75AB;&#x8367;&#x5149;&#x5206;&#x6790;&#x548C;&#x89C6;&#x9891;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x53D1;&#x73B0;&#x776B;&#x53E3;&#x888B;&#x5C01;&#x95ED;&#x8054;&#x7CFB;&#x4E0E;&#x57FA;&#x4E8E;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x548C;&#x5B83;&#x4E30;&#x5BCC;&#x6D3B;&#x8DC3;&#x548C;&#x52A8;&#x6001;&#x7F51;&#x683C;&#x86CB;&#x767D;&#x6D82;&#x5C42;&#x7684;&#x5751;&#x4E2D;&#x3002;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x8F74;&#x627F;&#x539F;&#x53D1;&#x6027;&#x7EA4;&#x6BDB; &#xFF08;&#x79EF;&#x4E91;&#xFF09;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x80FD;&#x52A8;&#x6027;&#x7EA4;&#x6BDB;&#x548C;&#x97AD;&#x6BDB; (&#x5BA4;&#x7BA1;&#x819C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x7CBE;&#x5B50;&#x7EC6;&#x80DE;) &#x8BC1;&#x5B9E;&#x776B;&#x53E3;&#x888B;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;&#x776B;&#x53E3;&#x888B;&#x4E0E;&#x97AD;&#x6BDB;&#x7684;&#x53E3;&#x888B; Trypanosomatids&#xFF0C;&#x5E95;&#x90E8;&#x7684;&#x97AD;&#x6BDB;&#x7684;&#x8D29;&#x8FD0;&#x4E13;&#x95E8;&#x819C;&#x57DF;&#x5171;&#x4EAB;&#x5F15;&#x4EBA;&#x6CE8;&#x76EE;&#x7684;&#x5F62;&#x6001;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x76F8;&#x4F3C;&#x4E4B;&#x5904;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x56E0;&#x6B64;&#x7A81;&#x51FA;&#x5B88;&#x6052;&#x8D29;&#x8FD0;&#x9644;&#x8FD1;&#x7EA4;&#x6BDB;&#x7684;&#x819C;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x776B;&#x53E3;&#x888B;&#x91CC;&#xFF1A; &#x541E;&#x819C;&#x57DF;&#x4E3B;&#x548C;&#x80FD;&#x52A8;&#x6027;&#x7684;&#x7EA4;&#x6BDB;&#x7684;&#x57FA;&#x5730;&#x3002;

Cilia and flagella are eukaryotic organelles involved in multiple cellular functions. The primary cilium is generally non motile and found in numerous vertebrate cell types where it controls key signalling pathways. Despite a common architecture, ultrastructural data suggest some differences in their organisation. Here, we report the first detailed characterisation of the ciliary pocket, a depression of the plasma membrane in which the primary cilium is rooted. This structure is found at low frequency in kidney epithelial cells (IMCD3) but is associated with virtually all primary cilia in retinal pigment epithelial cells (RPE1). Transmission and scanning electron microscopy, immunofluorescence analysis and videomicroscopy revealed that the ciliary pocket establishes closed links with the actin-based cytoskeleton and that it is enriched in active and dynamic clathrin-coated pits. The existence of the ciliary pocket was confirmed in mouse tissues bearing primary cilia (cumulus), as well as motile cilia and flagella (ependymal cells and spermatids). The ciliary pocket shares striking morphological and functional similarities with the flagellar pocket of Trypanosomatids, a trafficking-specialised membrane domain at the base of the flagellum. Our data therefore highlight the conserved role of membrane trafficking in the vicinity of cilia.

The ciliary pocket: an endocytic membrane domain at the base of primary and motile cilia.

Cils et les flagelles sont impliqu&eacute;s dans de multiples fonctions cellulaires eucaryotes organites. Le cil primaire est g&eacute;n&eacute;ralement non motile et dans nombreux types de cellules vert&eacute;br&eacute;s o&ugrave; il contr&ocirc;le les principales voies de signalisation. Malgr&eacute; une architecture commune, donn&eacute;es ultrastructurales sugg&egrave;rent des diff&eacute;rences dans leur organisation. Nous rapportons ici la premi&egrave;re caract&eacute;risation d&eacute;taill&eacute;e de la poche ciliaire, une d&eacute;pression de la membrane plasmique dans lequel s&#39;enracine le cil primaire. Cette structure se trouve &agrave; basse fr&eacute;quence dans les cellules &eacute;pith&eacute;liales r&eacute;nales (IMCD3), mais est associ&eacute;e &agrave; pratiquement tous les cils primaires de cellules &eacute;pith&eacute;liales pigmentaire r&eacute;tinien (RPE1). Transmission et &agrave; balayage, microscopie &eacute;lectronique, l&#39;analyse de l&#39;immunofluorescence et vid&eacute;omicroscopie a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que la poche ciliaire &eacute;tablit des liens ferm&eacute;s avec le cytosquelette d&#39;actine-bas&eacute;, et qu&#39;il est enrichi en actifs et dynamiques des fosses enrob&eacute;es de clathrine. L&#39;existence de la poche ciliaire a &eacute;t&eacute; confirm&eacute;e dans les tissus de souris portant des cils primaires (cumulus), ainsi que les cils mobiles et des flagelles (cellules &eacute;pendymaires et les spermatides). La poche ciliaire partage des ressemblances morphologiques et fonctionnelles avec la poche flagellaire de trypanosomatid&eacute;s, un domaine sp&eacute;cialis&eacute; trafic membranaire &agrave; la base du flagelle. Donc, nos donn&eacute;es en &eacute;vidence le r&ocirc;le conserv&eacute; de membrane trafic &agrave; proximit&eacute; des cils.

La poche ciliaire : un domaine d&#39;endocytose membrane &agrave; la base des cils primaires et motiles.

Cilien und Flagellen sind eukaryotische Organellen mehrere Zellfunktionen beteiligt. Die prim&auml;re Zilie ist prinzipiell nicht beweglich und in zahlreichen vertebrate Zelltypen gefunden wo es wichtige Signalwege steuert. Trotz einer gemeinsamen Architektur deuten ultrastrukturelle Daten einige Unterschiede in ihrer Organisation. Wir berichten hier, die erste detaillierte Charakterisierung der Zilien Tasche, eine Depression der Plasmamembran in die prim&auml;re Zilie verwurzelt ist. Diese Struktur findet sich in geringer Anzahl in Epithelzellen der Niere (IMCD3), aber praktisch alle prim&auml;ren Zilien Retinales Epithelzellen (RPE1) zugeordnet ist. &Uuml;bertragung und Rasterelektronenmikroskopie, Immunofluoreszenz-Analyse und Videomicroscopy ergab, dass die Zilien Tasche geschlossene Beziehungen auf der Grundlage von Aktin-Zytoskeletts richtet und dass es in aktiven und dynamischen Clathrin-coated-Pits angereichert ist. Die Existenz der Zilien Tasche wurde in Maus-Geweben, wobei prim&auml;re Zilien (Cumulus), sowie bewegliche Cilien und Flagellen (ependymalen Zellen und Spermatids) best&auml;tigt. Die Zilien Tasche teilt auffallende morphologische und funktionelle &Auml;hnlichkeiten mit der Flimmerband Tasche von Trypanosomatids, einer Dom&auml;ne der Drogenhandel spezialisierten Membran an der Basis der Gei&szlig;el. Unsere Daten markieren daher die konservierte Rolle der Membran des Menschenhandels in der N&auml;he von Zilien.

Die Zilien Tasche: einer endocytic Membran-Dom&auml;ne an der Basis der Prim&auml;r- und bewegliche Zilien.

Ciglia e flagelli sono organelli eucariotici coinvolti in molteplici funzioni cellulari. Il cilio primario &egrave; generalmente non motili e trovato in numerosi tipi di vertebrati cellule dove si controlla la chiave vie di segnalazione. Nonostante un&#39;architettura comune, dati ultrastrutturali suggeriscono alcune differenze nella loro organizzazione. Riportiamo la prima caratterizzazione dettagliata della tasca ciliare, una depressione della membrana del plasma in cui &egrave; radicato il cilio primario. Questa struttura si trova a bassa frequenza nelle cellule epiteliali del rene (IMCD3) ma &egrave; associata con virtualmente tutti i ciliari nelle cellule epiteliali del pigmento retinico (RPE1). Trasmissione e scanning electron microscopy, analisi di immunofluorescenza e videomicroscopy ha rivelato che la tasca ciliare stabilisce collegamenti chiusi con il citoscheletro di actina-base e che si &egrave; arricchita in pozzi rivestite di clatrina, attivi e dinamici. L&#39;esistenza della tasca ciliare &egrave; stata confermata nei tessuti del mouse tenendo ciliari (cumulo), cos&igrave; come motili cilia e flagelli (cellule ependimali e spermatidi). La tasca ciliare condivide sorprendenti somiglianze morfologiche e funzionali con la tasca flagellari di Trypanosomatids, un dominio di membrana specializzati traffico alla base del flagello. I nostri dati quindi evidenziano il ruolo conservato della membrana traffico in prossimit&agrave; di ciglia.

La tasca ciliare: un dominio endocitico membrana alla base delle ciglia primarie e motili.

&#x7E4A;&#x6BDB;&#x30FB;&#x97AD;&#x6BDB;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5C0F;&#x5668;&#x5B98;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E00;&#x6B21;&#x7E4A;&#x6BDB;&#x306F;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306B;&#x975E;&#x904B;&#x52D5;&#x6027;&#x3068;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x3067;&#x767A;&#x898B;&#x305D;&#x308C;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x5171;&#x901A;&#x306E;&#x30A2;&#x30FC;&#x30AD;&#x30C6;&#x30AF;&#x30C1;&#x30E3;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x5FAE;&#x7D30;&#x69CB;&#x9020;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x81EA;&#x5206;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x8A73;&#x7D30;&#x306A;&#x30AD;&#x30E3;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x7E4A;&#x6BDB;&#x30DD;&#x30B1;&#x30C3;&#x30C8;, &#x539F;&#x5F62;&#x8CEA;&#x819C;&#x306E;&#x3046;&#x3064;&#x75C5;&#x306E;&#x5831;&#x544A;&#x3067;&#x306F;&#x4E00;&#x6B21;&#x7E4A;&#x6BDB;&#x306B;&#x6839;&#x3056;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306F;&#x3001;&#x4F4E;&#x5468;&#x6CE2;&#x3067;&#x306F;&#x814E;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE; (IMCD3) &#x304C;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x4E8B;&#x5B9F;&#x4E0A;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x4E00;&#x6B21;&#x7E4A;&#x6BDB;&#x7DB2;&#x819C;&#x8272;&#x7D20;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE; (RPE1) &#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4F1D;&#x9001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8D70;&#x67FB;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x5206;&#x6790;&#x3068;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x7E4A;&#x6BDB;&#x306E;&#x30DD;&#x30B1;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x304C;&#x9589;&#x9396;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3068;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x52D5;&#x7684;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x88AB;&#x8986;&#x30D4;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x5BCC;&#x3080;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6BDB;&#x69D8;&#x4F53;&#x306E;&#x30DD;&#x30B1;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E00;&#x6B21;&#x7E4A;&#x6BDB; &#xFF08;&#x7A4D;&#x96F2;&#xFF09; &#x8EF8;&#x53D7;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x81D3;&#x5668;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x7E4A;&#x6BDB;&#x30FB;&#x97AD;&#x6BDB; &#xFF08;&#x4E0A;&#x8863;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF09; &#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7E4A;&#x6BDB;&#x306E;&#x30DD;&#x30B1;&#x30C3;&#x30C8;&#x3079;&#x3093;&#x6BDB;&#x306E;&#x30DD;&#x30B1;&#x30C3;&#x30C8; Trypanosomatids&#x3001;&#x4EBA;&#x8EAB;&#x58F2;&#x8CB7;&#x5C02;&#x9580;&#x819C;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x97AD;&#x6BDB;&#x306E;&#x57FA;&#x90E8;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x3084;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x5370;&#x8C61;&#x7684;&#x306A;&#x985E;&#x4F3C;&#x70B9;&#x3092;&#x5171;&#x6709;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x819C;&#x8FD1;&#x508D;&#x7E4A;&#x6BDB;&#x8F38;&#x9001;&#x306E;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6BDB;&#x69D8;&#x4F53;&#x306E;&#x30DD;&#x30B1;&#x30C3;&#x30C8;: &#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x819C;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x3068;&#x904B;&#x52D5;&#x6027;&#x7E4A;&#x6BDB;&#x57FA;&#x90E8;&#x3002;

&#xC18D;&#xB208;&#xC379; flagella &#xC9C4; &#xD575; organelles &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAE30;&#xBCF8; cilium&#xC740; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBE44; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xBC0F; &#xC218;&#xB9CE;&#xC740; &#xC885;&#xB958;&#xC758; &#xCC99;&#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xADF8;&#xAC83; &#xD0A4; &#xC2E0;&#xD638; &#xACBD;&#xB85C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xAC74;&#xCD95;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xC790;&#xC2E0;&#xC758; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xC57D;&#xAC04;&#xC758; &#xCC28;&#xC774;&#xAC00; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; ultrastructural &#xB370;&#xC774;&#xD130;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF4;&#xACE0; &#xC18D;&#xB208;&#xC379; &#xD3EC;&#xCF13; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778;&#xC758; &#xC6B0;&#xC6B8;&#xC99D;&#xC758; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC138;&#xBD80; &#xBB18;&#xC0AC;&#xAC00; &#xC8FC; cilium &#xBFCC;&#xB9AC;&#xC5D0;. &#xC774; &#xAD6C;&#xC870; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; (IMCD3)&#xC5D0;&#xC11C; &#xB0AE;&#xC740; &#xBE48;&#xB3C4;&#xB85C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xAC70;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC18D;&#xB208;&#xC379; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xC0C9;&#xC18C; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; (RPE1)&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0;. &#xC804;&#xC1A1; &#xBC0F; &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;, &#xBA74;&#xC5ED; &#xD615;&#xAD11; &#xBD84;&#xC11D; &#xBC0F; videomicroscopy &#xC2A4;&#xCE94; &#xC18D;&#xB208;&#xC379; &#xD3EC;&#xCF13; &#xB9D0;&#xB77C; &#xAE30;&#xBC18; cytoskeleton &#xB2EB;&#xD78C;&#xB41C; &#xC5F0;&#xACB0;&#xC744; &#xC124;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xC801;&#xADF9;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xC5ED;&#xB3D9;&#xC801;&#xC778; clathrin &#xCF54;&#xD305; &#xAD6C; &#xB369;&#xC774;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD48D;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8;&#xB97C; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC18D;&#xB208;&#xC379; &#xD3EC;&#xCF13;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB294; &#xC12C; &#xBAA8;&#xC758; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xBC0F; flagella (&#x8863; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; spermatids) &#xAE30;&#xBCF8; &#xC18D;&#xB208;&#xC379; (&#xC801; &#xC6B4;), &#xBCA0;&#xC5B4;&#xB9C1;&#xC758; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD655;&#xC778; &#xB410;&#xB2E4;. &#xC18D;&#xB208;&#xC379; &#xD3EC;&#xCF13; Trypanosomatids&#xB294; &#xC2E0;&#xC124;&#xC758; &#xAE30;&#xC9C0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778;&#xC2E0; &#xB9E4;&#xB9E4; &#xC804;&#xBB38; &#xB9C9; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; flagellar &#xC8FC;&#xBA38;&#xB2C8;&#xC640; &#xB208;&#xC5D0; &#xB744;&#xB294; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559; &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xC720;&#xC0AC;&#xC131;&#xC744; &#xACF5;&#xC720;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xC18D;&#xB208;&#xC379; &#xBD80;&#xADFC; &#xC778;&#xC2E0; &#xB9E4;&#xB9E4;&#xC758; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xAC15;&#xC870;.

&#xC18D;&#xB208;&#xC379; &#xC8FC;&#xBA38;&#xB2C8;: &#xAE30;&#xBCF8; &#xBA54;&#xAD6C;&#xBBF8; &#xC18D;&#xB208;&#xC379;&#xC758; &#xAE30;&#xC9C0;&#xC5D0;&#xC11C; endocytic &#xB9C9; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;.

Cilios y flagelos son organelos de eucariotas intervienen en m&uacute;ltiples funciones celulares. El cilio primario es generalmente no m&oacute;viles y se encuentran en numerosos tipos de c&eacute;lulas vertebrados donde controla las v&iacute;as de se&ntilde;alizaci&oacute;n claves. A pesar de una arquitectura com&uacute;n, datos ultraestructurales sugieren algunas diferencias en su organizaci&oacute;n. Aqu&iacute;, divulgamos la primera caracterizaci&oacute;n detallada del bolsillo ciliar, una depresi&oacute;n de la membrana plasm&aacute;tica en que radica el cilio primario. Esta estructura se encuentra en baja frecuencia en las c&eacute;lulas epiteliales del ri&ntilde;&oacute;n (IMCD3), pero se asocia con pr&aacute;cticamente todos los cilios primarios en las c&eacute;lulas epiteliales del pigmento retiniano (RPE1). Transmisi&oacute;n y an&aacute;lisis de microscop&iacute;a electr&oacute;nica, an&aacute;lisis de la inmunofluorescencia y videomicroscop&iacute;a revelaron que el bolsillo ciliar establece v&iacute;nculos cerrados con el citoesqueleto de actina-base y que se enriquece en hoyos recubiertos de clatrina activos y din&aacute;micos. Se confirm&oacute; la existencia del bolsillo ciliar en tejidos de rat&oacute;n teniendo cilios primarios (c&uacute;mulo), as&iacute; como de los cilios inm&oacute;viles y flagelos (c&eacute;lulas ependimarias y esperm&aacute;tidas). El bolsillo ciliar comparte similitudes morfol&oacute;gicas y funcionales notables con el bolsillo flagelar de trypanosom&aacute;tidos, un dominio de membrana tr&aacute;fico especializado en la base del flagelo. Nuestros datos por lo tanto, destacan el papel conservado de membrana de tr&aacute;fico en las cercan&iacute;as de cilios.

El bolsillo ciliar: un dominio endoc&iacute;ticas membrana en la base de los cilios primarios y m&oacute;viles.

&#x4EBA;&#x7C7B;&#x759F;&#x75BE;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x6076;&#x6027;&#x759F;&#x539F;&#x866B;&#x7684;&#x75C5;&#x7406;&#x5F15;&#x8D77;&#x9636;&#x6BB5;&#x9A7B;&#x7559;&#x5728;&#x6CA1;&#x6709;&#x4EFB;&#x4F55;&#x53D7;&#x89C4;&#x7BA1;&#x7684;&#x8FD0;&#x8F93;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x7EA2;&#x8272;&#x8840;&#x6DB2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x662F;&#x5B8C;&#x5168;&#x8D1F;&#x8D23;&#x8C03;&#x89E3;&#x6C34;&#x75B1;&#x8FD0;&#x8F93;&#x5185;&#x672C;&#x8EAB;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x53D7;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5E76;&#x901A;&#x8FC7;&#x5176;&#x5BB6;&#x5EAD; 11 Rab &#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x90E8;&#x5206;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x3002;&#x5047;&#x5B9A;&#x51FD;&#x6570;&#x5DF2;&#x88AB;&#x5F52;&#x4E8E;&#x759F;&#x539F;&#x866B; Rabs &#x7531;&#x4E8E;&#x5176;&#x540C;&#x6E90;&#x6027;&#x4E0E;&#x9175;&#x6BCD;&#xFF0C;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x4E0E;&#x5177;&#x6709;&#x76F8;&#x540C;&#x6570;&#x76EE;&#x7684; rab/&#x5C55;&#x7FC5;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x917F;&#x9152; Rabs &#x548C;&#x5C55;&#x7FC5;&#x51FD;&#x6570;&#x5206;&#x6790;&#x597D;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x3002;

&#x6076;&#x6027;&#x759F;&#x539F;&#x866B; Rab interactome &#x5EFA;&#x7B51;&#x6807;&#x8BC6; CK1 &#x548C; PKA &#x4E3A; Rab &#x6548;&#x5E94;&#x6FC0;&#x9176;&#x7684;&#x759F;&#x75BE;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x3002;

The pathology causing stages of the human malaria parasite Plasmodium falciparum reside within red blood cells that are devoid of any regulated transport system. The parasite, therefore, is entirely responsible for mediating vesicular transport within itself and in the infected erythrocyte cytoplasm, and it does so in part via its family of 11 Rab GTPases. Putative functions have been ascribed to Plasmodium Rabs due to their homology with Rabs of yeast, particularly with Saccharomyces that has an equivalent number of rab/ypt genes and where analyses of Ypt function is well characterized.

Construction of a Plasmodium falciparum Rab-interactome identifies CK1 and PKA as Rab-effector kinases in malaria parasites.

Les stades causant de pathologie de la paludisme humain parasite Plasmodium falciparum r&eacute;sident dans les globules rouges qui sont d&eacute;pourvues de tout syst&egrave;me de transport r&eacute;glement&eacute;. Le parasite, donc, est enti&egrave;rement responsable de la m&eacute;diation transport v&eacute;siculaire en lui-m&ecirc;me et dans le cytoplasme des &eacute;rythrocytes infect&eacute;s, et il fait donc en partie par l&#39;interm&eacute;diaire de sa famille de 11 GTPases Rab. Fonctions pr&eacute;sum&eacute;es ont &eacute;t&eacute; attribu&eacute;es &agrave; Plasmodium CCR en raison de leur homologie avec le CCR de levure, en particulier avec Saccharomyces disposant d&#39;un nombre &eacute;quivalent de rab/ypt g&egrave;nes et o&ugrave; les analyses de fonction Ypt est bien caract&eacute;ris&eacute;e.

Construction d&#39;une Plasmodium falciparum Rab-interactome identifie CK1 et PKA comme kinases Rab-effecteur de parasites du paludisme.

Die Pathologie verursacht Stufen von der menschlichen Malaria Parasit Plasmodium Falciparum befinden sich innerhalb der roten Blutk&ouml;rperchen, die frei von jedem geregelten Transportsystem sind. Der Parasit, daher ist vollst&auml;ndig verantwortlich f&uuml;r die Vermittlung der vesikul&auml;ren Transport in sich und im Zytoplasma infizierten Erythrozyten, und es tut sich also teilweise &uuml;ber seine Familie von 11 Rab-GTPasen. Vermeintliche Funktionen haben wurden zugeschrieben Plasmodium Rabs aufgrund ihrer Homologie mit Rabs Hefe, besonders mit Saccharomyces, die eine entsprechende Anzahl von Rab/Ypt Gene hat und wo Analysen der Ypt-Funktion ist gut gekennzeichnet.

Bau einer Plasmodium Falciparum Rab-Interaktom identifiziert CK1 und PKA als Rab-Effektor-Kinasen in Malaria-Parasiten.

Fasi del parassita Plasmodium falciparum malaria umana causando patologia risiedono all&#39;interno dei globuli rossi che sono privi di qualsiasi sistema di trasporto regolamentati. Il parassita, dunque, &egrave; interamente responsabile per mediare trasporto vescicolare all&#39;interno di se stesso e nel citoplasma degli eritrociti infetti, e lo fa cos&igrave; in parte tramite la sua famiglia di 11 Rab GTPases. Putative funzioni sono state attribuite a Plasmodium Rabs a causa della loro omologia con Rabs del lievito, specialmente con Saccharomyces che dispone di un numero equivalente di rab/ypt geni e dove l&#39;analisi della funzione Ypt &egrave; ben caratterizzata.

Costruzione di un Plasmodium falciparum Rab-interactome identifica CK1 e PKA come chinasi di Rab-effector in parassiti della malaria.

&#x3072;&#x3068;&#x71B1;&#x5E2F;&#x71B1;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x306E;&#x75C5;&#x7406;&#x5B66;&#x306E;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x6BB5;&#x968E;&#x4EFB;&#x610F;&#x898F;&#x5236;&#x8F38;&#x9001;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x8D64;&#x3044;&#x8840;&#x6DB2;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x81EA;&#x4F53;&#x5185;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x305F;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x5185;&#x5C0F;&#x80DE;&#x8F38;&#x9001;&#x306E;&#x8ABF;&#x505C;&#x3092;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x8CAC;&#x4EFB;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;&#x305D;&#x306E; 11 Rab Gtpase &#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x884C;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x63A8;&#x5B9A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x304C;&#x5E30;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x539F;&#x866B; Rabs &#x306B;&#x305D;&#x306E;&#x76F8;&#x540C;&#x6027;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x3001;&#x9175;&#x6BCD;&#x306E; Rabs &#x3068; rab/ypt &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6570;&#x304C;&#x76F8;&#x5F53;&#x9175;&#x6BCD;&#x7279;&#x306B;&#x539F;&#x56E0;&#x3068; Ypt &#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x89E3;&#x6790;&#x306F;&#x3088;&#x304F;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x539F;&#x866B; Rab &#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x5EFA;&#x8A2D; CK1 &#x3068; PKA &#x30DE;&#x30E9;&#x30EA;&#x30A2;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B; Rab &#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC; &#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC778;&#xAC04; &#xB9D0;&#xB77C;&#xB9AC;&#xC544; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; Plasmodium falciparum &#xC77C;&#xC73C;&#xD0A4;&#xB294; &#xBCD1; &#xB9AC; &#xB2E8;&#xACC4; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774;&#xD2B8; &#xB41C; &#xC804;&#xC1A1; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xACB0;&#xC5EC;&#xB294; &#xC801;&#xD608;&#xAD6C; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC70;&#xC8FC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;, &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC804;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAE30;&#xACF5;&#xC744; &#xC804;&#xC1A1; &#xC790;&#xCCB4; &#xB0B4; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xC801;&#xD608;&#xAD6C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC45;&#xC784;&#xC740; &#xACE0; 11 &#xB7A9; Gtpases&#xC758; &#xAC00;&#xC871;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xADF8;&#xB807;&#xAC8C; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0C1; &#xAE30;&#xB2A5; Plasmodium Rabs &#xB7A9;/ypt &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xBC88;&#xD638;&#xAC00; Saccharomyces&#xC640; &#xD2B9;&#xD788; &#xD6A8;, Rabs&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; homology &#xC778;&#xD574; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; Ypt &#xD568;&#xC218; &#xBD84;&#xC11D; &#xC798; &#xD2B9;&#xC9D5;.

Plasmodium falciparum &#xB7A9; &#xC704;&#xD558;&#xC5EC; &#xAC74;&#xC124; &#xB9D0;&#xB77C;&#xB9AC;&#xC544; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;&#xC5D0; &#xB7A9; &#xC774;&#xD399;&#xD130; kinases ck1&#xC640; PKA &#xC2DD;&#xBCC4;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Las etapas de patolog&iacute;a causante de la malaria humana par&aacute;sito Plasmodium falciparum residen dentro de los gl&oacute;bulos rojos que est&aacute;n desprovistos de cualquier sistema de transporte regulado. El par&aacute;sito, por lo tanto, es enteramente responsable de mediar transporte vesicular dentro de s&iacute; mismo y en el citoplasma de los eritrocitos infectados, y lo hace as&iacute; en parte por su familia de GTPasas de Rab 11. Supuesta funciones se han atribuido al Plasmodium Rabs debido a su homolog&iacute;a con Rab de levadura, particularmente con Saccharomyces que tiene un n&uacute;mero equivalente de genes rab/ypt y donde el an&aacute;lisis de funci&oacute;n Ypt se caracteriza bien.

Construcci&oacute;n de un Plasmodium falciparum Rab-interactoma identifica CK1 y PKA como quinasas de Rab-efectoras en par&aacute;sitos de la malaria.

Studying the immunological processes taking place during the initial steps of acute hepatitis C virus (HCV) infection has been a challenge in patients. Shin et al. have recently reported that delayed induction, not impaired recruitment of specific CD8(+) T cells, causes the late onset of acute hepatitis C in chimpanzees (Gastroenterology, 2011). However, further elucidation of the underlying mechanisms is difficult in vivo. We made observations consistent with their conclusions in human liver slices inoculated ex vivo with HCV produced in cell culture (HCVcc). Autologous immune cells were purified from blood and differentially stained prior to their incubation with the slices for 2 hours. A two-photon confocal microscopic analysis revealed that many more stained dendritic and T cells contracted interactions within two-day infected slices than non-inoculated ones (p<0.001). While in the first instance some dendritic and T cells entered into closer interactions, they never did in the latter case. These results suggest that ex vivo infection of human liver slices with HCVcc may be useful for gaining experimental insight regarding the immunological processes taking place at early steps of HCV infections.

Recruitment and interaction of human dendritic and T cells in autologous liver slices experimentally infected with HCV produced in cell culture.

The development of human cultured hepatitis C virus (HCV) replication-permissive hepatocarcinoma cell lines has provided important new virological tools to study the mechanisms of HCV infection; however, this experimental model remains distantly related to physiological and pathological conditions. Here, we report the development of a new ex vivo model using human adult liver slices culture, demonstrating, for the first time, the ability of primary isolates to undergo de novo viral replication with the production of high-titer infectious virus as well as Japanese fulminant hepatitis type 1, H77/C3, and Con1/C3. This experimental model was employed to demonstrate HCV neutralization or HCV inhibition, in a dose-dependent manner, either by cluster of differentiation 81 or envelope protein 2-specific antibodies or convalescent serum from a recovered HCV patient or by antiviral drugs.

Efficient replication of primary or culture hepatitis C virus isolates in human liver slices: a relevant ex vivo model of liver infection.

The protein Bcl10 contributes to adaptive and innate immunity through the assembly of a signaling complex that plays a key role in antigen receptor and FcR-induced NF-κB activation. Here we demonstrate that Bcl10 has an NF-κB-independent role in actin and membrane remodeling downstream of FcR in human macrophages. Depletion of Bcl10 impaired Rac1 and PI3K activation and led to an abortive phagocytic cup rich in PI(4,5)P(2), Cdc42, and F-actin, which could be rescued with low doses of F-actin depolymerizing drugs. Unexpectedly, we found Bcl10 in a complex with the clathrin adaptors AP1 and EpsinR. In particular, Bcl10 was required to locally deliver the vesicular OCRL phosphatase that regulates PI(4,5)P(2) and F-actin turnover, both crucial for the completion of phagosome closure. Thus, we identify Bcl10 as an early coordinator of NF-κB-mediated immune response with endosomal trafficking and signaling to F-actin remodeling.

The NF-κB signaling protein Bcl10 regulates actin dynamics by controlling AP1 and OCRL-bearing vesicles.

Roberts syndrome (RBS) is a rare autosomal recessive disorder mainly characterized by growth retardation, limb defects and craniofacial anomalies. Characteristic cytogenetic findings are "railroad track" appearance of chromatids and premature centromere separation in metaphase spreads. Mutations in the ESCO2 (establishment of cohesion 1 homolog 2) gene located in 8p21.1 have been found in several families. ESCO2, a member of the cohesion establishing complex, has a role in the effective cohesion between sister chromatids. In order to analyze sister chromatids topography during interphase, we performed 3D-FISH using pericentromeric heterochromatin probes of chromosomes 1, 4, 9 and 16, on preserved nuclei from a fetus with RBS carrying compound heterozygous null mutations in the ESCO2 gene.

3D-FISH analysis reveals chromatid cohesion defect during interphase in Roberts syndrome.

Human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) impairs major functions of macrophages but the molecular basis for this defect remains poorly characterized. Here, we show that macrophages infected with HIV-1 were unable to respond efficiently to phagocytic triggers and to clear bacteria. The maturation of phagosomes, defined by the presence of late endocytic markers, hydrolases, and reactive oxygen species, was perturbed in HIV-1-infected macrophages. We showed that maturation arrest occurred at the level of the EHD3/MICAL-L1 endosomal sorting machinery. Unexpectedly, we found that the regulatory viral protein (Vpr) was crucial to perturb phagosome maturation. Our data reveal that Vpr interacted with EB1, p150(Glued), and dynein heavy chain and was sufficient to critically alter the microtubule plus end localization of EB1 and p150(Glued), hence altering the centripetal movement of phagosomes and their maturation. Thus, we identify Vpr as a modulator of the microtubule-dependent endocytic trafficking in HIV-1-infected macrophages, leading to strong alterations in phagolysosome biogenesis.

Pierre Bourdoncle

Institut Cochin

Université Paris Descartes, CNRS (UMR 8104)

Ex vivo Imaging of T Cells in Murine Lymph Node Slices with Widefield and Confocal Microscopes

"Phagosome Closure Assay" to Visualize Phagosome Formation in Three Dimensions Using Total Internal Reflection Fluorescent Microscopy (TIRFM)

Pierre Bourdoncle

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Université Paris Descartes, CNRS (UMR 8104)

Ex vivo Imaging of T Cells in Murine Lymph Node Slices with Widefield and Confocal Microscopes

"Phagosome Closure Assay" to Visualize Phagosome Formation in Three Dimensions Using Total Internal Reflection Fluorescent Microscopy (TIRFM)

Institut Cochin