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Packaging HIV- or FIV-based Lentivector Expression Constructs &amp; Transduction of VSV-G Pseudotyped Viral Particles

As with standard plasmid vectors, it is possible to transfect lentivectors in plasmid form into cells with low-to-medium efficiency to obtain transient ...

System Biosciences

&#x56E0;&#x4E3A;&#x4ED6;&#x4EEC; chin &#x5982;&#x3001; rRNAs&#xFF0C;&#x548C;&#x5206;&#x6CCC;&#x8F6C;&#x5F55; mtdna &#x57FA;&#x56E0;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53; RNA &#x805A;&#x5408;&#x9176; (mtRNAPs) &#x662F;&#x5FC5;&#x8981;&#x7684;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x751F;&#x7269;&#x53D1;&#x751F;&#x548C;&#x9002;&#x5F53;&#x7684;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;RNA &#x7F16;&#x8F91;&#x591A;&#x5934;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x4E2D;&#x53D1;&#x73B0;&#x7684;&#x552F;&#x4E00;&#x7684;&#x7C7B;&#x578B;&#x88AB;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x662F;&#x4E0E;&#x8F6C;&#x5F55;&#xFF0C;&#x5BC6;&#x5207;&#x76F8;&#x5173;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;RNA &#x7F16;&#x8F91;&#x6D3B;&#x52A8;&#x9884;&#x8BA1;&#x5C06;&#x4F1A;&#x4E0E; mtRNAP &#x5BC6;&#x5207;&#x76F8;&#x5173;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x66F4;&#x597D;&#x5730;&#x63CF;&#x8FF0; mtRNAPs &#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x751F;&#x7269;&#x53D1;&#x751F;&#x5B66;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C;&#x786E;&#x5B9A;&#x89C1;&#x4E8E; mtRNAP RNA &#x7F16;&#x8F91;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x89C1;&#x4E8E; mtRNAP &#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x88AB;&#x786E;&#x5B9A;&#x4F7F;&#x7528; PCR &#x548C;&#x7B80;&#x5E76;&#x5F15;&#x7269;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x4ECE; mtRNAPs &#x4E2D;&#x7684;&#x4FDD;&#x5B88;&#x56FE;&#x6848;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x653E;&#x5927;&#x4EA7;&#x54C1;&#x88AB;&#x7528;&#x4E8E;&#x5C4F;&#x5E55;&#x5BF9;&#x5E94;&#x89C1;&#x4E8E; mtRNAP &#x7684; cdna &#x5E8F;&#x5217;&#x7684; cDNA &#x6587;&#x5E93;&#x3002;&#x5BF9;&#x5E94;&#x4E8E;&#x5305;&#x542B; 997 &#x5BC6;&#x7801;&#x5B50;&#x5F00;&#x653E;&#x9605;&#x8BFB;&#x6846;&#x67B6; 3.2 kb &#x6210;&#x7EE9;&#x5355; cDNA &#x88AB;&#x786E;&#x5B9A;&#x3002;&#x4ECE;&#x5F00;&#x653E;&#x8BFB;&#x6846;&#x4E2D;&#x63A8;&#x65AD;&#x51FA;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x5E8F;&#x5217;&#x4E2D;&#x4E0D;&#x5305;&#x542B;&#x7279;&#x6027;&#x7684; mtRNAPs &#x7684;&#x56FE;&#x6848;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x786E;&#x8BA4;&#x4E3A; RNA &#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x88AB;&#x5B64;&#x7ACB;&#xFF0C;cDNA &#x5728;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x4E2D;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x8868;&#x793A; N &#x7EC8;&#x7AEF;&#x9EA6;&#x82BD;&#x7CD6;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D; (MBP) &#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x7EAF;&#x5316;&#x7684;&#x4EB2;&#x548C;&#x5C42;&#x6790;&#xFF0C;&#x6240;&#x793A;&#xFF0C;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9; DNA RNA &#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x6B64;&#x529F;&#x80FD;&#x7684; mtRNAP &#x5C06;&#x6709;&#x7528;&#x7684;&#x4F53;&#x5916;&#x7814;&#x7A76;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x8F6C;&#x5F55;&#x548C; RNA &#x7F16;&#x8F91;&#x3002;

&#x5047;&#x5B9A;&#x4ECE;&#x591A;&#x5934;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53; RNA &#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x8BC6;&#x522B;&#xFF1A; &#x8868;&#x5F81;&#x3001; &#x8868;&#x8FBE;&#x3001; &#x7EAF;&#x5316;&#x53CA;&#x4F53;&#x5916;&#x8F6C;&#x5F55;&#x3002;

Mitochondrial RNA polymerases (mtRNAPs) are necessary for the biogenesis of mitochondria and for proper mitochondrial function since they transcribe genes on mtDNA for tRNAs, rRNAs, and mRNAs. The unique type of RNA editing identified in mitochondria of Physarum polycephalum is thought to be closely associated with transcription, and as such, RNA editing activity would be expected to be closely associated with the mtRNAP. In order to better characterize the role of mtRNAPs in mitochondrial biogenesis and to determine the role of the Physarum mtRNAP in RNA editing, the cDNA of the Physarum mtRNAP was identified using PCR and degenerate primers designed from conserved motifs in mtRNAPs. This amplification product was used to screen a cDNA library for the cDNA corresponding to the Physarum mtRNAP. A cDNA corresponding to a 3.2 kb transcript containing a 997 codon open reading frame was identified. The amino acid sequence inferred from the open reading frame contains motifs characteristic of mtRNAPs. To confirm that a cDNA for an RNA polymerase had been isolated, the cDNA was expressed in E. coli as an N-terminal maltose binding protein (MBP) fusion protein. The fusion protein was purified by affinity chromatography and shown to have DNA-directed RNA polymerase activity. This functional mtRNAP will be useful for in vitro studies of mitochondrial transcription and RNA editing.

Identification of a putative mitochondrial RNA polymerase from Physarum polycephalum: characterization, expression, purification, and transcription in vitro.

Mitochondriales ARN polym&eacute;rases (mtRNAPs) sont n&eacute;cessaires pour la biogen&egrave;se des mitochondries et fonctionnement mitochondrial puisqu&#39;ils transcrivent les g&egrave;nes sur l&#39;ADN mitochondrial des ARNt, ARNr et ARNm. Le type unique de RNA &eacute;dition identifi&eacute;e dans les mitochondries de Physarum polycephalum est pens&eacute; pour &ecirc;tre &eacute;troitement associ&eacute; &agrave; la transcription, et &agrave; ce titre, activit&eacute; &eacute;dition d&#39;ARN devraient &ecirc;tre &eacute;troitement associ&eacute;s &agrave; la mtRNAP. Afin de mieux caract&eacute;riser le r&ocirc;le de mtRNAPs dans la biogen&egrave;se mitochondriale et de d&eacute;terminer le r&ocirc;le de la mtRNAP Physarum dans l&#39;ARN d&#39;&eacute;dition, l&#39;ADNc de la mtRNAP Physarum a &eacute;t&eacute; identifi&eacute; &agrave; l&#39;aide de la PCR et les amorces d&eacute;g&eacute;n&eacute;r&eacute;es de motifs conserv&eacute;s dans mtRNAPs. Ce produit d&#39;amplification a &eacute;t&eacute; utilis&eacute; pour cribler une banque d&#39;ADNc pour l&#39;ADNc correspondant &agrave; le mtRNAP de Physarum. Un ADNc correspondant &agrave; une transcription de 3,2 Ko contenant une trame de lecture ouverte du 997 codon a &eacute;t&eacute; identifi&eacute;. La s&eacute;quence d&#39;acides amin&eacute;s d&eacute;duite du cadre de lecture ouvert contient des motifs caract&eacute;ristiques de mtRNAPs. Pour confirmer qu&#39;un cDNA pour une ARN polym&eacute;rase a &eacute;t&eacute; isol&eacute;, l&#39;ADNc a &eacute;t&eacute; exprim&eacute; chez e. coli comme une prot&eacute;ine de fusion N-terminal maltose liaison prot&eacute;ique (MBP). La prot&eacute;ine de fusion a &eacute;t&eacute; purifi&eacute;e par chromatographie d&#39;affinit&eacute; et montr&eacute;e une activit&eacute; ax&eacute;e sur l&#39;ADN de l&#39;ARN polym&eacute;rase. Cette mtRNAP fonctionnelle sera utile pour les &eacute;tudes in vitro de transcription mitochondriale et le montage de la RNA.

Identification d&#39;une ARN polym&eacute;rase mitochondriale putative de Physarum polycephalum : transcription in vitro, l&#39;expression, purification et caract&eacute;risation.

Mitochondriale RNA-Polymerasen (MtRNAPs) sind notwendig f&uuml;r die Biogenese der Mitochondrien und mitochondriale Funktion, da sie Gene auf MtDNA f&uuml;r tRNAs und rRNAs mRNAs zu transkribieren. Die einzigartige Art der RNA Bearbeitung gekennzeichnet in den Mitochondrien von Physarum Polycephalum ist vermutlich eng mit Transkription und als solches RNA Bearbeitung Aktivit&auml;t w&uuml;rde erwartet eng mit der MtRNAP verbunden werden. Um die Rolle der MtRNAPs in mitochondrialen Biogenese besser zu charakterisieren und die Rolle der Physarum MtRNAP in RNA, die Bearbeitung zu bestimmen, wurde das cDNA von Physarum-MtRNAP identifiziert mit PCR und degenerierte Primer von konservierte Motive in MtRNAPs ausgelegt. Diese Verst&auml;rkung-Produkt wurde verwendet, um eine cDNA-Bibliothek f&uuml;r die cDNA entspricht der Physarum MtRNAP Bildschirm. Eine DNA entspricht eine 3.2 kb-Abschrift, enth&auml;lt eine offene Leseraster 997 Codon wurde identifiziert. Die Aminos&auml;uresequenz abgeleitet aus der offenen Leseraster enth&auml;lt Motive charakteristisch f&uuml;r MtRNAPs. Um zu best&auml;tigen, dass eine DNA f&uuml;r eine RNA-Polymerase isoliert gewesen war, wurde das cDNA in E. Coli als eine N-terminale Maltose verbindliches Protein (MBP) Schmelzverfahren Protein ausgedr&uuml;ckt. Das Schmelzverfahren Protein wurde durch Affinit&auml;tschromatographie gereinigt und unter der Regie von DNA-RNA-Polymerase-Aktivit&auml;t haben. Diese funktionale MtRNAP wird f&uuml;r in-vitro-Studien der mitochondrialen Transkription und RNA Bearbeitung n&uuml;tzlich sein.

Identifizierung einer vermeintlichen mitochondriale RNA-Polymerase aus Physarum Polycephalum: Charakterisierung, Ausdruck, Reinigung und in-vitro-Transkription.

Polimerasi del RNA mitocondriale (mtRNAPs) sono necessarie per la biogenesi dei mitocondri e per il corretto funzionamento mitocondriale poich&eacute; essi trascrivere geni sul DNA mitocondriale per i rRNAs tRNA e mRNA. L&#39;unico tipo di RNA editing identificati nei mitocondri di Physarum polycephalum &egrave; pensato per essere strettamente associato con la trascrizione, e come tale, modifica attivit&agrave; RNA dovrebbe essere strettamente associato con il mtRNAP. Al fine di caratterizzare meglio il ruolo di mtRNAPs nella biogenesi mitocondriale e di determinare il ruolo del Physarum mtRNAP in RNA editing, il cDNA del Physarum mtRNAP &egrave; stato identificato usando PCR e primer degenerato progettato da motivi conservati in mtRNAPs. Questo prodotto di amplificazione &egrave; stato utilizzato per lo screening di una libreria di cDNA per il cDNA corrispondente il Physarum mtRNAP. &Egrave; stato identificato un cDNA corrispondente a una trascrizione di 3,2 kb contenente un open reading frame 997 codone. La sequenza aminoacidica dedotta da open reading frame contiene motivi caratteristici del mtRNAPs. Per confermare che un cDNA che codifica per una RNA polimerasi era stato isolato, il cDNA &egrave; stato espresso in Escherichia coli come una proteina di fusione N-terminale maltosio binding protein (MBP). La proteina di fusione &egrave; stata purificata mediante cromatografia di affinit&agrave; e dimostrata di avere attivit&agrave; RNA polimerasi DNA-diretto. Questo mtRNAP funzionale sar&agrave; utile per gli studi in vitro della trascrizione mitocondriale e RNA editing.

Identificazione di una polimerasi del RNA mitocondriale putativa da Physarum polycephalum: caratterizzazione, espressione, purificazione e trascrizione in vitro.

Trna&#x3001;Rrna&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; Mrna &#x306E; mtDNA &#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x8EE2;&#x5199;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2; RNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; &#xFF08;mtRNAPs&#xFF09; &#x306F;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x7C98;&#x83CC;&#x5909;&#x5F62;&#x4F53;&#x306E;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x3067;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x308B; RNA &#x7DE8;&#x96C6;&#x306E;&#x4E00;&#x610F;&#x306E;&#x578B;&#x8EE2;&#x5199;, &#x5BC6;&#x63A5;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x3057;&#x3001;RNA &#x7DE8;&#x96C6;&#x6D3B;&#x52D5; mtRNAP &#x3068;&#x5BC6;&#x63A5;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x4E88;&#x60F3;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x306A;&#x3069;&#x3002;&#x826F;&#x3044;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; mtRNAPs &#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3068;&#x7C98;&#x83CC; mtRNAP RNA &#x7DE8;&#x96C6;&#x3067;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x7C98;&#x83CC; mtRNAP &#x306E; cDNA PCR &#x3068; mtRNAPs &#x3067;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x304B;&#x3089;&#x8A2D;&#x8A08;&#x3057;&#x305F;&#x7E2E;&#x9000;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5897;&#x5E45;&#x7523;&#x7269;&#x7C98;&#x83CC;&#x5909;&#x5F62;&#x4F53; mtRNAP &#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B; cDNA &#x304C; cDNA &#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x30FC;&#x3092;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;997 &#x30B3;&#x30C9;&#x30F3;&#x306E;&#x958B;&#x3044;&#x305F;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; &#x30FB; &#x30D5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x542B;&#x3080; 3.2 kb &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3; &#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B; cDNA &#x304C;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x958B;&#x3044;&#x305F;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; &#x30FB; &#x30D5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30E0;&#x304B;&#x3089;&#x63A8;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x914D;&#x5217;&#x306B;&#x306F;&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5; mtRNAPs &#x7279;&#x6027;&#x306B;&#x306F;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;RNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E; cDNA &#x304C;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;cDNA &#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x3067;&#x306F; N &#x672B;&#x7AEF;&#x30DE;&#x30EB;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B9;&#x7D50;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; (MBP) &#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;.&#x878D;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30A2;&#x30D5;&#x30A3;&#x30CB;&#x30C6;&#x30A3;&#x30FC;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x76E3;&#x7763;&#x306E; DNA &#x306E; RNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD; mtRNAP &#x306F;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x3084; RNA &#x7DE8;&#x96C6;&#x306E; in vitro &#x8A66;&#x9A13;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5F79;&#x306B;&#x7ACB;&#x3064;&#x3067;&#x3057;&#x3087;&#x3046;&#x3002;

&#x63A8;&#x5B9A;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2; RNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x304B;&#x3089;&#x7C98;&#x83CC;&#x5909;&#x5F62;&#x4F53;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;: &#x30AD;&#x30E3;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3001;&#x5F0F;&#x3001;&#x6D44;&#x5316;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; in vitro &#x8EE2;&#x5199;&#x3002;

&#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC; &#xB9AC;&#xC544; RNA &#xD3F4; (mtRNAPs) &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; tRNAs, rRNAs, &#xBC0F; mRNAs Mtdna&#xC5D0; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xB179;&#xC74C; &#xC18D;&#xC758; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xBC0F; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC; &#xB9AC;&#xC544; &#xAE30;&#xB2A5; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;. &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xC720;&#xD615;&#xC758; RNA &#xD3B8;&#xC9D1; Physarum polycephalum&#xC758; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD655;&#xC778; &#xB41C; &#xC804;&#xC0AC;&#xC640; &#xBC00;&#xC811; &#xD558; &#xAC8C; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC0DD;&#xAC01; &#xD558; &#xACE0;&#xB294; Mtrnap&#xC640; &#xBC00;&#xC811; &#xD558; &#xAC8C; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; RNA &#xD3B8;&#xC9D1; &#xD65C;&#xB3D9; &#xAC83; &#xC774;&#xB77C;&#xACE0; &#xC608;&#xC0C1; &#xD558;&#xB294; &#xB4F1;. &#xB354; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xC18D;&#xC5D0; Mtrnaps&#xC758; &#xC5ED;&#xD560; &#xC131;&#xACA9;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xAE30; &#xC704;&#xD558;&#xC5EC; &#xACE0; RNA &#xD3B8;&#xC9D1; Physarum Mtrnap&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD655;&#xC778; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; Physarum Mtrnap&#xC758; cDNA PCR &#xBC0F; mtRNAPs &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xBAA8;&#xD2F0;&#xBE0C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC124;&#xACC4; &#xB41C; &#xB514; &#xC81C;&#xB108; &#xB808;&#xC774;&#xD2B8; &#xD504;&#xB77C;&#xC774; &#xBA38;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC99D;&#xD3ED; &#xC81C;&#xD488; Physarum Mtrnap&#xC5D0; &#xD574;&#xB2F9; &#xD558;&#xB294; Cdna&#xC758; cDNA &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC; &#xD654;&#xBA74; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. 997 Codon &#xC5F4;&#xB824;&#xC788;&#xB294; &#xB3C5;&#xC11C; &#xD504;&#xB808;&#xC784; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; 3.2 kb &#xB300; &#xBCF8;&#xC5D0; &#xD574;&#xB2F9; &#xD558;&#xB294; cDNA &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC5F4;&#xB824;&#xC788;&#xB294; &#xB3C5;&#xC11C; &#xD504;&#xB808;&#xC784;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xCD94; &#xB41C; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xD2F0;&#xBE0C; Mtrnaps&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. RNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; cDNA &#xACE0;&#xB9BD; &#xB41C; &#xC788; &#xC5C8; &#xD655;&#xC778; &#xD558;&#xB294; cDNA N &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#x82BD; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (MBP) &#xD4E8;&#xC804; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC73C;&#xB85C; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD4E8;&#xC804; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xCE5C;&#xD654;&#xC131; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC815;&#xD654; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; DNA &#xAC10;&#xB3C5; RNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC654;&#xB2E4;. &#xC774; &#xAE30;&#xB2A5; mtRNAP &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC; &#xB9AC;&#xC544; &#xC804;&#xC0AC; &#xBC0F; RNA &#xD3B8;&#xC9D1;&#xC758; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB3C4;&#xC6C0;&#xC774; &#xB420; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Physarum polycephalum&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C1; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC; &#xB9AC;&#xC544; RNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4;: &#xD2B9;&#xC131;&#xD654;, &#xD45C;&#xD604;, &#xC815;&#xD654;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xCCB4; &#xC678;&#xC758; &#xC804;&#xC0AC;.

Polimerasas del RNA mitocondriales (mtRNAPs) son necesarios para la biog&eacute;nesis de la mitocondria y la funci&oacute;n mitocondrial adecuada ya que transcriben genes en el mtDNA de tRNAs rRNAs y mRNAs. Es probablemente el &uacute;nico tipo de RNA edici&oacute;n identificados en las mitocondrias de Physarum polycephalum estrechamente asociados con la transcripci&oacute;n, y como tal, se espera actividad edici&oacute;n de RNA a asociarse estrechamente con la mtRNAP. Con el fin de caracterizar mejor el papel de mtRNAPs en la biog&eacute;nesis mitocondrial y determinar el papel de la mtRNAP Physarum en edici&oacute;n de ARN, el cDNA de la mtRNAP Physarum fue identificado usando PCR y cebadores degenerados dise&ntilde;ados de motivos conservados en mtRNAPs. Este producto de amplificaci&oacute;n fue utilizado para una biblioteca de cDNA para el cDNA correspondiente a la mtRNAP Physarum. Se identific&oacute; un cDNA correspondiente a una transcripci&oacute;n de 3,2 kb que contiene un marco de lectura abierto de 997 cod&oacute;n. La secuencia de amino&aacute;cidos deducida del marco de lectura abierto contiene motivos caracter&iacute;sticos de mtRNAPs. Para confirmar que se hab&iacute;a aislado un cDNA para un ARN polimerasa, el cDNA fue expresado en e. coli como una prote&iacute;na de la fusi&oacute;n de la maltosa vinculante N-terminal prote&iacute;na (MBP). La prote&iacute;na de fusi&oacute;n fue purificada mediante cromatograf&iacute;a de afinidad y demostrada para tener actividad dirigida por la ADN polimerasa del RNA. Este mtRNAP funcional ser&aacute; &uacute;til para estudios in vitro de transcripci&oacute;n mitocondrial y edici&oacute;n de RNA.

Identificaci&oacute;n de una supuesta polimerasa del RNA mitocondrial de Physarum polycephalum: caracterizaci&oacute;n, expresi&oacute;n y purificaci&oacute;n de transcripci&oacute;n in vitro.

MicroRNA &#xC2DD; &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC2E0;&#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC885;&#xC591;&#xC744; &#xBD84;&#xB958;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; microRNA &#xC11C;&#xBA85;&#xC758; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xD328;&#xB110; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC7A5;&#xCC29; microRNAs &#xD544;&#xC218; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC120;&#xC218;&#xB294; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC2DD; &#xD328;&#xD134; &#xC554; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC9C4;&#xB2E8; &#xC0DD;&#xCCB4;&#xB85C; &#xAC80;&#xC0C9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD074;&#xB9AC;&#xC5B4; &#xC140; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xC554; microRNA &#xD328;&#xB110;&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4;.

Para identificar un robusto panel de firmas microARN que puede clasificar el tumor de ri&ntilde;&oacute;n normal utilizando niveles de expresi&oacute;n de microRNA. Creciente evidencia sugiere que los microRNAs son actores clave en los procesos celulares esenciales y que su patr&oacute;n de expresi&oacute;n puede servir como biomarcadores diagn&oacute;sticos para los tejidos cancerosos.

Identificaci&oacute;n de un panel de microARN para c&aacute;ncer de ri&ntilde;&oacute;n de c&eacute;lulas claras.

Pour identifier un panneau robuste des signatures de micro-ARN qui peut classer la tumeur du rein normal en utilisant les niveaux d&#39;expression des micro-ARN. Montage des &eacute;l&eacute;ments de preuve donne &agrave; penser que les microARN sont des acteurs cl&eacute;s dans les processus cellulaires essentielles et que leur mode d&#39;expression peut servir de biomarqueurs diagnostiques pour les tissus canc&eacute;reux.

Identification d&#39;un panel de micro-ARN pour cancer du rein clear-cellule.

Ein robustes Panel MicroRNA-Signaturen identifizieren, der Tumor aus normalen Niere mit MicroRNA Stufen einordnen k&ouml;nnen. Mehrenden Beweise darauf hin, dass MicroRNAs Hauptakteure in wichtige zellul&auml;re Prozesse sind und ihr Ausdrucksmuster als diagnostischer Biomarker f&uuml;r Krebsgewebe dienen kann.

Kennung eines MicroRNA-Panels f&uuml;r klar-Zelle Nierenkrebs.

Per identificare un robusto pannello di microRNA firme che possono classificare il tumore dal rene normale utilizzando livelli di espressione di microRNA. Prove di montaggio suggerisce che i microRNA &egrave; attori chiave nei processi cellulari essenziali e che il loro pattern di espressione pu&ograve; servire come biomarkers diagnostici per tessuti cancerosi.

Identificazione di un pannello di microRNA per il carcinoma renale a cellule chiare.

&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; Rna &#x767A;&#x73FE;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x6B63;&#x5E38;&#x306A;&#x814E;&#x81D3;&#x304B;&#x3089;&#x816B;&#x760D;&#x3092;&#x5206;&#x985E;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; Rna &#x7F72;&#x540D;&#x306E;&#x5805;&#x7262;&#x306A;&#x30D1;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8A3C;&#x62E0;&#x306F;&#x53D6;&#x4ED8;&#x3051;&#x3066; microRNAs &#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x30AD;&#x30FC;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30E4;&#x30FC;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x304C;&#x3093;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x8A3A;&#x65AD;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F7F;&#x7528;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; Rna &#x30D1;&#x30CD;&#x30EB;&#x814E;&#x660E;&#x7D30;&#x80DE;&#x764C;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E; id&#x3002;

&#x82E5;&#x8981;&#x6807;&#x8BC6;&#x7684;&#x5206;&#x7C7B;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4ECE;&#x4F7F;&#x7528; microRNA &#x8868;&#x8FBE;&#x6C34;&#x5E73;&#x6B63;&#x5E38;&#x80BE;&#x80BF;&#x7624;&#x7684; microRNA &#x7B7E;&#x540D;&#x7684;&#x9C81;&#x68D2;&#x9762;&#x677F;&#x3002;&#x8D8A;&#x6765;&#x8D8A;&#x591A;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x8868;&#x660E; Microrna &#x5728;&#x57FA;&#x672C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x89D2;&#x8272;&#x5E76;&#x4E14;&#x5176;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x6A21;&#x5F0F;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x8BCA;&#x65AD;&#x6807;&#x5FD7;&#x7269;&#x7684;&#x6D3B;&#x4F53;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x3002;

&#x80BE;&#x900F;&#x660E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x764C;&#x7684; microRNA &#x9762;&#x677F;&#x7684;&#x6807;&#x8BC6;&#x3002;

To identify a robust panel of microRNA signatures that can classify tumor from normal kidney using microRNA expression levels. Mounting evidence suggests that microRNAs are key players in essential cellular processes and that their expression pattern can serve as diagnostic biomarkers for cancerous tissues.

Travis Antes

System Biosciences

Packaging HIV- or FIV-based Lentivector Expression Constructs & Transduction of VSV-G Pseudotyped Viral Particles