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Rearing and Injection of <em>Manduca sexta</em> Larvae to Assess Bacterial Virulence

Manduca sexta, commonly known as the tobacco hornworm, is considered a significant agricultural pest, feeding on solanaceous plants including tobacco and ...

University of Wisconsin-Madison

&#x8D39;&#x6C0F;&#x5F27;&#x83CC;&#x662F;&#x5C45;&#x4F4F;&#x5728; Euprymna scolopes &#x9C7F;&#x9C7C;&#x53D1;&#x5149;&#x5668;&#x5B98;&#x7684;&#x4E13;&#x5C5E;&#x5171;&#x751F;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x4E86;&#x89E3;&#x6B64;&#x534F;&#x4F1A;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x8981;&#x6C42;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x641C;&#x7D22;&#x8BC9;&#x8D39;&#x6C0F;&#x8F6C;&#x5EA7;&#x5B50;&#x63D2;&#x5165;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x4E3A;&#x90A3;&#x4E9B;&#x672A;&#x80FD;&#x6B96;&#x6C11;&#x5316; E.scolopes &#x7684;&#x5E93;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x5C55;&#x51FA;&#x5728;&#x5F00;&#x59CB;&#x6B96;&#x6C11;&#x5316;&#x4E25;&#x91CD;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684;&#x56DB;&#x4E2A;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x3002;&#x5E8F;&#x5217;&#x5206;&#x6790;&#x663E;&#x793A;&#x8FD9;&#x682A;&#x6240;&#x63D2;&#x5165;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7C07;&#xFF0C;21 &#x9762;&#x5411;&#x540C;&#x4E00;&#x65B9;&#x5411;&#x7684;&#x56DB;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x6210;&#x5458;&#x4E2D;&#x3002;&#x6709;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x80F6;&#x56CA;&#x3001; &#x80DE;&#x5916;&#x591A;&#x7CD6;&#x6216;&#x8102;&#x591A;&#x7CD6;&#x751F;&#x7269;&#x5408;&#x6210;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x516D;&#x79CD;&#x63A8;&#x5B9A;&#x7CD6;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;&#x76F8;&#x5173;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x9884;&#x6D4B;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x4EA7;&#x54C1;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x9020;&#x4E94;&#x4E2A;&#x989D;&#x5916;&#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x548C;&#x53D1;&#x73B0;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x4E5F;&#x662F;&#x9700;&#x8981;&#x7684;&#x5171;&#x751F;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x79F0;&#x4E4B;&#x4E3A;&#x672C;&#x5730;&#x533A;&#x9752;&#x5C11;&#x5E74;&#x6691;&#x671F;&#x6D3B;&#x52A8;&#x5171;&#x751F;&#x591A;&#x7CD6;&#x3002;&#x540C;&#x6E90;&#x96C6;&#x7FA4;&#x8FD8;&#x5B58;&#x5728;&#x526F;&#x6EB6;&#x8840;&#x6027;&#x5F27;&#x83CC;&#x53CA;&#x521B;&#x4F24;&#x5F27;&#x83CC;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x57FA;&#x56E0;&#x53EF;&#x80FD;&#x4EE3;&#x8868;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5171;&#x540C;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x7EC6;&#x83CC;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528; lacZ &#x8BB0;&#x8005;&#x878D;&#x5408;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#xFF0C;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x6CA1;&#x6709;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x6807;&#x51C6;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x4F46;&#x53EF;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x9AD8;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684; sypG&#xFF0C;&#x5B83;&#x5C06;&#x7F16;&#x7801;&#x4E0E;&#x9884;&#x6D4B;&#x7684; sigma54 &#x4EA4;&#x4E92;&#x57DF;&#x54CD;&#x5E94;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#x7684;&#x6691;&#x671F;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x611F;&#x5E94;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E; sigma54&#xFF0C;rpoN &#x53D6;&#x6D88;&#x6691;&#x671F;&#x8F6C;&#x5F55;&#x4E00;&#x79CD;&#x7A81;&#x53D8;&#x3002;&#x5F15;&#x7269;&#x5EF6;&#x4F38;&#x5206;&#x6790;&#x652F;&#x6301;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x5047;&#x5B9A;&#x7684; sigma54 &#x7ED3;&#x5408;&#x4F4D;&#x70B9;&#x4E0A;&#x6E38;&#x7684; sypA&#x3001; sypI &#x548C; sypM &#x4F5C;&#x4E3A;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x8005;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; sypG &#x7684;&#x9AD8;&#x8868;&#x8FBE;&#x5BFC;&#x81F4;&#x9C81;&#x68D2;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x56E0;&#x6B64;&#x63ED;&#x793A;&#x4E86;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7FA4;&#xFF0C;&#x8D39;&#x6C0F;&#x8BC9; sigma54 &#x4F9D;&#x8D56;&#x54CD;&#x5E94;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#x901A;&#x8FC7;&#x63A7;&#x5236;&#x548C;&#x4F7F;&#x7528;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x5171;&#x751F;&#x7684;&#x6B96;&#x6C11;&#x5316;&#x3002;

&#x4E00;&#x90E8;&#x5C0F;&#x8BF4;&#xFF0C;&#x4FDD;&#x5B88;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7C07;&#xFF0C;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x5171;&#x751F;&#x7684;&#x6B96;&#x6C11;&#x5316;&#x548C;&#x897F;&#x683C;&#x739B;&#x4F9D;&#x8D56;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x8D39;&#x6C0F;&#x5F27;&#x83CC;&#x3002;

Vibrio fischeri is the exclusive symbiont residing in the light organ of the squid Euprymna scolopes. To understand the genetic requirements for this association, we searched a library of V. fischeri transposon insertion mutants for those that failed to colonize E. scolopes. We identified four mutants that exhibited severe defects in initiating colonization. Sequence analysis revealed that the strains contained insertions in four different members of a cluster of 21 genes oriented in the same direction. The predicted gene products are similar to proteins involved in capsule, exopolysaccharide or lipopolysaccharide biosynthesis, including six putative glycosyltransferases. We constructed mutations in five additional genes and found that they also were required for symbiosis. Therefore, we have termed this region syp, for symbiosis polysaccharide. Homologous clusters also exist in Vibrio parahaemolyticus and Vibrio vulnificus, and thus these genes may represent a common mechanism for promoting bacteria-host interactions. Using lacZ reporter fusions, we observed that transcription of the syp genes did not occur under standard laboratory conditions, but could be induced by multicopy expression of sypG, which encodes a response regulator with a predicted sigma54 interaction domain. This induction depended on sigma54, as a mutation in rpoN abolished syp transcription. Primer extension analysis supported the use of putative sigma54 binding sites upstream of sypA, sypI and sypM as promoters. Finally, we found that multicopy expression of sypG resulted in robust biofilm formation. This work thus reveals a novel group of genes that V. fischeri controls through a sigma54-dependent response regulator and uses to promote symbiotic colonization.

A novel, conserved cluster of genes promotes symbiotic colonization and sigma-dependent biofilm formation by Vibrio fischeri.

Vibrio fischeri est le symbiote exclusif r&eacute;sidant dans l&#39;orgue lumineux de la seiche Euprymna scolopes. Pour comprendre les g&eacute;n&eacute;tiques requis par cette association, nous avons recherch&eacute; une biblioth&egrave;que de V. fischeri mutants d&#39;insertion de transposon pour ceux qui ont &eacute;chou&eacute; &agrave; coloniser scolopes E.. Nous avons identifi&eacute; quatre mutants qui pr&eacute;sentaient de graves d&eacute;fauts dans le d&eacute;clenchement de la colonisation. Le s&eacute;quen&ccedil;age a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que les souches contenaient des insertions dans quatre diff&eacute;rents membres d&#39;un groupe de 21 g&egrave;nes orient&eacute;s dans la m&ecirc;me direction. Les produits des g&egrave;nes pr&eacute;dits sont similaires &agrave; des prot&eacute;ines impliqu&eacute;es dans la biosynth&egrave;se de capsule, exopolysaccharide ou lipopolysaccharide, y compris six glycosyltransf&eacute;rases putatifs. Nous avons construit des mutations dans les g&egrave;nes suppl&eacute;mentaires cinq et trouv&eacute; qu&#39;ils &eacute;taient &eacute;galement requis pour la symbiose. Par cons&eacute;quent, nous avons appel&eacute; cette r&eacute;gion syp, de polysaccharide de symbiose. Il existe &eacute;galement des groupes homologues dans Vibrio parahaemolyticus et Vibrio vulnificus, et donc ces g&egrave;nes peuvent repr&eacute;senter un m&eacute;canisme commun pour la promotion des interactions h&ocirc;te-bact&eacute;rie. &Agrave; l&#39;aide de fusions de journaliste lacZ, nous avons observ&eacute; que la transcription de la syp g&egrave;nes ne boug&egrave;rent pas dans des conditions standard de laboratoire, mais pourraient &ecirc;tre induites par multi-copies expression de sypG, qui encode un r&eacute;gulateur de r&eacute;ponse avec un domaine d&#39;interaction sigma54 pr&eacute;dite. Cette induction d&eacute;pendait de sigma54, une mutation dans la transcription de syp rpoN aboli. Analyse par extension amorce ont appuy&eacute; l&#39;utilisation de sigma54 putatif sites en amont de sypA, sypI et sypM en tant que promoteurs de liaison. Enfin, nous avons constat&eacute; qu&#39;expression Multicopie de sypG a entra&icirc;n&eacute; la formation de biofilm robuste. Ce travail r&eacute;v&egrave;le ainsi un nouveau groupe de g&egrave;nes qui, V. fischeri, contr&ocirc;le gr&acirc;ce &agrave; un r&eacute;gulateur de r&eacute;ponse sigma54-d&eacute;pendante et l&#39;utilise pour favoriser la colonisation symbiotique.

Un roman, conserv&eacute;e cluster de g&egrave;nes favorise la colonisation symbiotique et la formation de biofilm de sigma-d&eacute;pendante par Vibrio fischeri.

Vibrio Fischeri ist die exklusive Symbiont in die Lichtorgel Tintenfisch Euprymna Scolopes wohnten. Um die genetischen Voraussetzungen f&uuml;r diese Zuordnung zu verstehen, suchten wir eine Bibliothek von V. Fischeri Transposon Einf&uuml;gung Mutanten f&uuml;r diejenigen, die nicht E. Scolopes zu kolonisieren. Wir identifiziert vier Mutanten, die schwere M&auml;ngel bei der Einleitung der Kolonisation ausgestellt. Sequenzanalyse ergab, dass die St&auml;mme Einf&uuml;gungen in vier verschiedenen Mitglieder eines Clusters 21 Gene, die in die gleiche Richtung orientiert enthalten. Die vorhergesagte Genprodukte sind vergleichbar mit Kapsel, Exopolysaccharide oder Lipopolysaccharid-Biosynthese, einschlie&szlig;lich sechs vermeintliche Glykosyltransferasen-Proteine. Wir f&uuml;nf zus&auml;tzliche Gene Mutationen gebaut und festgestellt, dass sie auch f&uuml;r Symbiose erforderlich waren. Daher haben wir diese Region Syp, f&uuml;r Symbiose Polysaccharid bezeichnet. Homologe Cluster existieren auch in Vibrio Parahaemolyticus und Vibrio Vulnificus und somit k&ouml;nnen diese Gene einen gemeinsamen Mechanismus f&uuml;r die F&ouml;rderung von Bakterien-Host Interaktionen vertreten. Mit LacZ Reporter Fusionen, beobachteten wir, dass Transkription der Syp Gene nicht unter Laborbedingungen Norm auftreten, aber konnte durch multicopy Ausdruck des SypG, das eine Antwort-Regler mit einer prognostizierten sigma54 Interaktion Dom&auml;ne codiert induziert werden. Diese Induktion hing von sigma54, als eine Mutation in RpoN abgeschafft Syp Transkription. Grundierung Erweiterung Analyse unterst&uuml;tzt die Verwendung von vermeintlichen sigma54 Sites stromaufw&auml;rts von SypA, SypI und SypM als Veranstalter verbindlich. Schlie&szlig;lich fanden wir, dass eine robuste Biofilm-Bildung multicopy Ausdruck des SypG f&uuml;hrte. Diese Arbeit zeigt somit eine neuartige Gruppe von Genen, die V. Fischeri durch ein sigma54-abh&auml;ngigen Reaktion-Regler steuert und zur F&ouml;rderung der symbiotischen Kolonisation verwendet.

Roman, f&ouml;rdert die konservierten Cluster von Genen symbiotische Kolonisation und Sigma-abh&auml;ngige Biofilm-Bildung durch Vibrio Fischeri.

Vibrio fischeri &egrave; il simbionte esclusivo che risiedono nell&#39;organo leggero di calamari Euprymna scolopes. Per comprendere i requisiti genetici per questa associazione, abbiamo cercato una libreria di V. fischeri mutanti di inserimento trasposone per coloro che non &egrave; riuscito a colonizzare E. scolopes. Abbiamo individuato quattro mutanti che esposte gravi difetti in avvio di colonizzazione. Analisi di sequenza ha rivelato che i ceppi contenevano inserimenti in quattro diversi membri di un cluster di 21 geni orientato nella stessa direzione. I prodotti del gene predetto sono simili alle proteine coinvolte nella biosintesi di capsula, esopolisaccaridi o lipopolisaccaride, tra cui sei glycosyltransferases putativo. Abbiamo costruito le mutazioni nei geni di altri cinque e trovato che anche essi erano necessari per simbiosi. Pertanto, noi abbiamo definito questa regione syp, per polisaccaride simbiosi. Cluster omologhe esiste anche in Vibrio parahaemolyticus e Vibrio vulnificus, e cos&igrave; questi geni possono rappresentare un meccanismo comune per promuovere interazioni ospite-batteri. Mediante fusioni reporter lacZ, abbiamo osservato che trascrizione di syp geni non si &egrave; verificato in condizioni standard di laboratorio, ma potrebbero essere indotta da modo espressione di sypG, che codifica per un regolatore di risposta con un dominio di interazione sigma54 predetto. Questa induzione dipendeva da sigma54, come una mutazione nella trascrizione syp del rpoN abolito. Analisi di estensione dell&#39;iniettore supportato l&#39;uso di sigma54 putativi siti a monte del sypA, sypI e sypM come promotori di legame. Infine, abbiamo trovato che gestisce espressione di sypG ha portato a formazione di biofilm robusto. Questo lavoro rivela cos&igrave; un romanzo gruppo di geni che V. fischeri controlla attraverso un regolatore di risposta sigma54-dipendente e viene utilizzato per promuovere la colonizzazione simbiotica.

Un romanzo, conservata cluster di geni promuove simbiotica colonizzazione e la formazione di biofilm sigma-dipendente da Vibrio fischeri.

&#x30D3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30AA; &#x30FB; &#x30D5;&#x30A3;&#x30B7;&#x30E3;&#x30EA; &#x30A4;&#x30AB; Euprymna scolopes &#x306E;&#x5149;&#x306E;&#x81D3;&#x5668;&#x306B;&#x5C45;&#x4F4F;&#x3059;&#x308B;&#x6392;&#x4ED6;&#x7684;&#x306A;&#x5171;&#x751F;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30A2;&#x30BD;&#x30B7;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x8981;&#x4EF6;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA; V. E. scolopes &#x690D;&#x6C11;&#x5730;&#x5316;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x30D5;&#x30A3;&#x30B7;&#x30E3;&#x30EA; &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30BE;&#x30F3;&#x633F;&#x5165;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3092;&#x691C;&#x7D22;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x690D;&#x6C11;&#x5730;&#x5316;&#x3092;&#x958B;&#x59CB;&#x3059;&#x308B;&#x6DF1;&#x523B;&#x306A;&#x6B20;&#x9665;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F; 4 &#x3064;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x5206;&#x6790;&#x3001;&#x7CFB;&#x7D71;&#x633F;&#x5165;&#x540C;&#x3058;&#x65B9;&#x5411;&#x306B; 21 &#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E; 4 &#x3064;&#x306E;&#x5225;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306B;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x88FD;&#x54C1;&#x306F;&#x3001;&#x516D;&#x3064;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D7;&#x30F3;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3001;&#x30AB;&#x30D7;&#x30BB;&#x30EB;&#x3001;&#x7CD6;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30EA;&#x30DD;&#x591A;&#x7CD6;&#x306E;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F; 5 &#x3064;&#x306E;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3057;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x3082;&#x5171;&#x751F;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5206;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x5171;&#x751F;&#x591A;&#x7CD6;&#x985E;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x5730;&#x57DF; syp &#x3092;&#x540D;&#x3065;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x76F8;&#x540C;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x3082;&#x30D3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30AA;&#x3068;&#x30D3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30AA; &#x30FB; &#x30D0;&#x30EB;&#x30CB;&#x30D5;&#x30A3;&#x30AB;&#x30B9;&#x3067;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3001;&#x5F93;&#x3063;&#x3066;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7D30;&#x83CC;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5171;&#x901A;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x5834;&#x5408;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;LacZ &#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x6A19;&#x6E96;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x5BA4;&#x306E;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067;&#x306F;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x30EC;&#x30B9;&#x30DD;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x4E88;&#x6E2C; sigma54 &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3068;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059; sypG &#x306E;&#x30DE;&#x30EB;&#x30C1;&#x30B3;&#x30D4;&#x30FC;&#x5F0F;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059; syp &#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306F;&#x5EC3;&#x6B62; rpoN syp &#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x3068;&#x3057;&#x3066; sigma54 &#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x62E1;&#x5F35;&#x89E3;&#x6790;&#x4E0A;&#x6D41; sypA&#x3001;sypI&#x3001;sypM &#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x7D50;&#x5408;&#x90E8;&#x4F4D;&#x63A8;&#x5B9A; sigma54 &#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x306F;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;sypG &#x306E;&#x30DE;&#x30EB;&#x30C1;&#x30B3;&#x30D4;&#x30FC;&#x8868;&#x73FE;&#x5805;&#x7262;&#x306A;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA; &#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x4F5C;&#x696D;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30D5;&#x30A3;&#x30B7;&#x30E3;&#x30EA; V. sigma54 &#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x5FDC;&#x7B54;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x901A;&#x904E;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3057;&#x3001;&#x5171;&#x751F;&#x306E;&#x690D;&#x6C11;&#x5730;&#x5316;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x65B0;&#x898F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7FA4;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5C0F;&#x8AAC;&#x3001;&#x7BC0;&#x7D04;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30D3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30AA; &#x30FB; &#x30D5;&#x30A3;&#x30B7;&#x30E3;&#x30EA;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30B7;&#x30B0;&#x30DE;&#x4F9D;&#x5B58;&#x578B;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA; &#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x5171;&#x751F;&#x5B9A;&#x7740;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Sistemas de transducci&oacute;n de se&ntilde;al de dos componentes son utilizados por las c&eacute;lulas procariotas y eucariotas sentido y responden a los est&iacute;mulos ambientales, tanto para mantener la homeostasis y adaptarse r&aacute;pidamente a las condiciones cambiantes. Estudios han comenzado a surgir que utilizan un enfoque de mutag&eacute;nesis a gran escala para el an&aacute;lisis de estos sistemas en organismos procari&oacute;ticos. Debido a la reciente disponibilidad de su secuencia de genoma, un enfoque ahora es posible para la Marina bioluminiscente bacteria Vibrio fischeri, que existe en un estado de vida libre o como un simbionte mutualista dentro de un organismo hu&eacute;sped tales como la especie de calamar hawaiano Euprymna scolopes. En este trabajo, se identificaron 40 reguladores de la supuesta respuesta de dos componentes codificados en el genoma V. fischeri. Basado en el tipo de dominio efector presente, seis como tipo NarL, 13 como tipo de OmpR, clasificamos y seis como NtrC tipo; los 15 restantes carec&iacute;an de un dominio de uni&oacute;n al ADN previsto. Posteriormente se mut&oacute; 35 de estos genes mediante un enfoque de integraci&oacute;n del vector y analizaron a los mutantes resultantes para papeles en bioluminiscencia, motilidad y colonizaci&oacute;n competitiva de calamar. A trav&eacute;s de estos ensayos, se identificaron tres nuevos reguladores de V. fischeri luminiscencia y siete reguladores que alteraci&oacute;n la motilidad. Adem&aacute;s, se encontraron 11 reguladores con un efecto de Sines en colonizaci&oacute;n competitiva del calamar anfitri&oacute;n. Curiosamente, cinco de los reguladores recientemente caracterizados cada afectados dos o m&aacute;s de los fenotipos examinados, sugiriendo fuertemente la interconectividad entre sistemas. Este trabajo representa la primera mutag&eacute;nesis a gran escala de una clase de genes en V. fischeri utilizando un enfoque gen&oacute;mico y subraya la importancia de la transducci&oacute;n de la se&ntilde;al de dos componentes en las interacciones de la bacteria hu&eacute;sped.

Los reguladores de la respuesta de dos componentes de Vibrio fischeri: identificaci&oacute;n, caracterizaci&oacute;n y mutag&eacute;nesis.

&#x53CC;&#x7EC4;&#x5206;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4F20;&#x5BFC;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5229;&#x7528;&#x539F;&#x6838;&#x548C;&#x771F;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5411;&#x611F;&#x548C;&#x5BF9;&#x73AF;&#x5883;&#x7684;&#x523A;&#x6FC0;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x4FDD;&#x6301;&#x52A8;&#x6001;&#x5E73;&#x8861;&#xFF0C;&#x5E76;&#x8FC5;&#x901F;&#x9002;&#x5E94;&#x4E0D;&#x65AD;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x73AF;&#x5883;&#x4F5C;&#x51FA;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x7814;&#x7A76;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x5F00;&#x59CB;&#x51FA;&#x73B0;&#xFF0C;&#x5229;&#x7528;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5728;&#x539F;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x5206;&#x6790;&#x5927;&#x578B;&#x8BF1;&#x53D8;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x7531;&#x4E8E;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x5176;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5E8F;&#x5217;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5168;&#x7403;&#x7684;&#x505A;&#x6CD5;&#x662F;&#x73B0;&#x5728;&#x53EF;&#x80FD;&#x5B58;&#x5728;&#x81EA;&#x7531;&#x751F;&#x6D3B;&#x7684;&#x72B6;&#x6001;&#x6216;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5185;&#x4E3B;&#x673A;&#x751F;&#x7269;&#x5982;&#x590F;&#x5A01;&#x5937;&#x9C7F;&#x9C7C;&#x7269;&#x79CD; Euprymna scolopes &#x4E92;&#x60E0;&#x5171;&#x751F;&#x7684;&#x8D39;&#x6C0F;&#x6D77;&#x6D0B;&#x53D1;&#x5149;&#x7EC6;&#x83CC;&#x5F27;&#x83CC;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x5DE5;&#x4F5C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86; 40 &#x5185;&#x4E94;&#x3001; &#x8D39;&#x6C0F;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7F16;&#x7801;&#x7684;&#x5047;&#x5B9A;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x54CD;&#x5E94;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x57FA;&#x4E8E;&#x672C;&#x6548;&#x5E94;&#x57DF;&#x7684;&#x7C7B;&#x578B;&#xFF0C;&#x5206;&#x7C7B;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5EFA;&#x7814;&#x7C7B;&#x578B;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A; OmpR &#x7C7B;&#x578B; 13 6 &#x4E2A;&#x548C; 6 &#x4E2A;&#xFF0C;NtrC &#x7C7B;&#x578B; &#xFF1B;&#x5176;&#x4F59; 15 &#x7F3A;&#x4E4F;&#x9884;&#x6D4B;&#x7684; DNA &#x7ED3;&#x5408;&#x57DF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x968F;&#x540E; 35 &#x5411;&#x91CF;&#x96C6;&#x6210;&#x65B9;&#x6CD5;&#x901A;&#x8FC7;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#xFF0C;&#x5E76;&#x8FDB;&#x884C;&#x89D2;&#x8272;&#x4EA7;&#x751F;&#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x5206;&#x6790;&#x751F;&#x7269;&#x53D1;&#x5149;&#x3001; &#x52A8;&#x529B;&#x3001; &#x548C;&#x7ADE;&#x4E89;&#x6027;&#x4FB5;&#x67D3;&#x7684;&#x9C7F;&#x9C7C;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5206;&#x6790;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E09;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#x7684;&#x8D39;&#x6C0F;&#x53D1;&#x5149;&#x8BC9;&#x53CA;&#x6539;&#x53D8;&#x52A8;&#x529B;&#x7684;&#x4E03;&#x4E2A;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; 11 &#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#x5BF9;&#x7ADE;&#x4E89;&#x6B96;&#x6C11;&#x5316;&#x4E3B;&#x673A;&#x9C7F;&#x9C7C;&#x4EE5;&#x524D;&#x53D8;&#x79CD;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x4E94;&#x4E2A;&#x65B0;&#x7279;&#x70B9;&#x76D1;&#x7BA1;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x53D7;&#x5F71;&#x54CD;&#x4E24;&#x4E2A;&#x6216;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x5BA1;&#x67E5;&#xFF0C;&#x5F3A;&#x70C8;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x8054;&#x7CFB;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x8868;&#x793A;&#x4E00;&#x7C7B;&#x8BC9;&#x8D39;&#x6C0F;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x4E2D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x5927;&#x89C4;&#x6A21;&#x8BF1;&#x53D8;&#x548C;&#x5F3A;&#x8C03;&#x53CC;&#x7EC4;&#x5206;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x7684;&#x7EC6;&#x83CC;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3002;

&#x8D39;&#x6C0F;&#x5F27;&#x83CC;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x54CD;&#x5E94;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#xFF1A; &#x9274;&#x5B9A;&#x3001; &#x7A81;&#x53D8;&#x3001; &#x548C;&#x8868;&#x5F81;&#x3002;

Two-component signal transduction systems are utilized by prokaryotic and eukaryotic cells to sense and respond to environmental stimuli, both to maintain homeostasis and to rapidly adapt to changing conditions. Studies have begun to emerge that utilize a large-scale mutagenesis approach to analyzing these systems in prokaryotic organisms. Due to the recent availability of its genome sequence, such a global approach is now possible for the marine bioluminescent bacterium Vibrio fischeri, which exists either in a free-living state or as a mutualistic symbiont within a host organism such as the Hawaiian squid species Euprymna scolopes. In this work, we identified 40 putative two-component response regulators encoded within the V. fischeri genome. Based on the type of effector domain present, we classified six as NarL type, 13 as OmpR type, and six as NtrC type; the remaining 15 lacked a predicted DNA-binding domain. We subsequently mutated 35 of these genes via a vector integration approach and analyzed the resulting mutants for roles in bioluminescence, motility, and competitive colonization of squid. Through these assays, we identified three novel regulators of V. fischeri luminescence and seven regulators that altered motility. Furthermore, we found 11 regulators with a previously undescribed effect on competitive colonization of the host squid. Interestingly, five of the newly characterized regulators each affected two or more of the phenotypes examined, strongly suggesting interconnectivity among systems. This work represents the first large-scale mutagenesis of a class of genes in V. fischeri using a genomic approach and emphasizes the importance of two-component signal transduction in bacterium-host interactions.

Two-component response regulators of Vibrio fischeri: identification, mutagenesis, and characterization.

Syst&egrave;mes de transduction de signal de deux composants sont utilis&eacute;s par les cellules procaryotes et eucaryotes &agrave; sens et r&eacute;pondent &agrave; des stimuli environnementaux, tant pour maintenir l&#39;hom&eacute;ostasie et s&#39;adapter rapidement aux conditions changeantes. Des &eacute;tudes ont commenc&eacute; &agrave; &eacute;merger qui utilisent une approche de mutagen&egrave;se &agrave; grande &eacute;chelle &agrave; l&#39;analyse de ces syst&egrave;mes dans les organismes procaryotes. En raison de la disponibilit&eacute; r&eacute;cente de sa s&eacute;quence du g&eacute;nome, une telle approche globale est maintenant possible pour le marins de bact&eacute;rie bioluminescente Vibrio fischeri, qui existe dans un &Eacute;tat libre ou comme un symbiote mutualiste au sein d&#39;un organisme h&ocirc;te comme le calmar hawa&iuml;en Euprymna scolopes. Dans ce travail, nous avons identifi&eacute; 40 r&eacute;gulateurs putatifs bi-composants r&eacute;ponse cod&eacute;es dans le g&eacute;nome de V. fischeri. Selon le type de domaine effecteur pr&eacute;sent, nous avons class&eacute; six comme type de NarL, 13 en tant que type OmpR, et six comme NtrC tapez ; les 15 restants ne disposait pas d&#39;un domaine de liaison &agrave; l&#39;ADN pr&eacute;dit. Par la suite, nous mut&eacute; 35 de ces g&egrave;nes, gr&acirc;ce &agrave; une approche d&#39;int&eacute;gration de vecteur et analys&eacute; les mutants qui en r&eacute;sulte pour les r&ocirc;les en bioluminescence, motilit&eacute; et colonisation concurrentielle du calmar. Par le biais de ces tests, nous avons identifi&eacute; trois nouveaux r&eacute;gulateurs de V. fischeri luminescence et sept organismes de r&eacute;glementation qui a alt&eacute;r&eacute; la motilit&eacute;. En outre, nous avons trouv&eacute; 11 organismes de r&eacute;glementation ayant un effet non pr&eacute;c&eacute;demment d&eacute;crit sur la colonisation concurrentiel du calmar h&ocirc;te. Fait int&eacute;ressant, cinq des r&eacute;gulateurs nouvellement caract&eacute;ris&eacute;es chaque touch&eacute; deux ou plus des ph&eacute;notypes examin&eacute;s, ce qui sugg&egrave;re fortement l&#39;interconnectivit&eacute; entre les syst&egrave;mes. Ce travail repr&eacute;sente la premier mutagen&egrave;se &agrave; grande &eacute;chelle d&#39;une classe de g&egrave;nes chez V. fischeri en utilisant une approche g&eacute;nomique et met l&#39;accent sur l&#39;importance de la transduction du signal de deux composantes en interaction h&ocirc;te-bact&eacute;rie.

R&eacute;gulateurs de r&eacute;ponse de deux composants de Vibrio fischeri : identification, mutagen&egrave;se et caract&eacute;risation.

Zwei-Komponenten-Signal-Transduktion-Systeme sind durch prokaryotischen und eukaryotischen Zellen Sinn verwendet und reagieren auf Umwelt Reize, Hom&ouml;ostase aufrechtzuerhalten und sich schnell an ver&auml;nderte Bedingungen anzupassen. Studien haben begonnen, entstehen zu lassen, die einen gro&szlig; angelegten Mutagenese-Ansatz zur Analyse dieser Systeme in prokaryotischen Organismen nutzen. Aufgrund der j&uuml;ngsten Verf&uuml;gbarkeit seiner Genom-Sequenz kann solch ein globales Konzept jetzt f&uuml;r die marine biolumineszierende Bakterium Vibrio Fischeri, die entweder in einem freilebenden Zustand oder als ein mutualistischen Symbiont in einen Wirtsorganismus, z. B. die hawaiische Tintenfisch Arten Euprymna Scolopes vorhanden ist. In dieser Arbeit wurden 40 vermeintliche Zweikomponenten-Antwort-Regulierungsbeh&ouml;rden innerhalb der V. Fischeri Genom kodiert. Basierend auf dem Typ der Effektor-Dom&auml;ne vorhanden, wir sechs als NarL Typ 13 als OmpR-Typ klassifiziert, und sechs als NFRK geben; die verbleibenden 15 fehlte eine vorhergesagte DNA-bindenden Dom&auml;ne. Wir sp&auml;ter mutiert 35 dieser Gene &uuml;ber einen Vektor-Integration-Ansatz auf und analysiert die resultierenden Mutanten f&uuml;r Rollen Biolumineszenz, Motilit&auml;t und wettbewerbsf&auml;hige Kolonisation von Squid. Durch diese Proben wurden drei neuartige Regler der V. Fischeri Lumineszenz und sieben Regulatoren, die Motilit&auml;t ver&auml;ndert. Dar&uuml;ber hinaus fanden wir 11 Atemregler mit eine bisher unbeschriebene Wirkung auf wettbewerbsf&auml;hige Kolonisierung der Host-Tintenfisch. F&uuml;nf der neu gekennzeichnete Regulierungsstellen betroffen Interessanterweise zwei oder mehr der Ph&auml;notypen gepr&uuml;ft, stark vorschlagen Interkonnektivit&auml;t zwischen den Systemen. Dieses Werk stellt die erste gro&szlig; angelegte Mutagenese einer Klasse von Genen in V. Fischeri genomischer Ansatz und unterstreicht die Bedeutung der zwei-Komponenten-Signaltransduktion in Bakterium-Host-Interaktionen.

Zweikomponenten-Reaktion die Regler der Vibrio Fischeri: Identifikation, Mutagenese und Charakterisierung.

Sistemi di trasduzione del segnale del due-componente sono utilizzati dalle cellule procariote ed eucariote a senso e rispondono a stimoli ambientali, sia per mantenere l&#39;omeostasi e di adattarsi rapidamente alle mutevoli condizioni. Gli studi hanno cominciato ad emergere che utilizzano un approccio di mutagenesi su larga scala all&#39;analisi di questi sistemi negli organismi eucarioti. Grazie alla recente disponibilit&agrave; della sua sequenza del genoma, un tale approccio globale &egrave; ora possibile per il batterio bioluminescente marino Vibrio fischeri, che esiste in uno stato libero-vivente o come un simbionti mutualistici all&#39;interno di un organismo ospite come le specie di calamaro hawaiano Euprymna scolopes. In questo lavoro, abbiamo individuato 40 regolatori putativo due-componente risposta codificati all&#39;interno del genoma di V. fischeri. In base al tipo di dominio effector presente, abbiamo classificato sei come tipo di NarL, 13 come tipo di OmpR, e sei come NtrC tipo; il restante 15 mancava un dominio DNA-binding predetto. Successivamente abbiamo mutato 35 di questi geni tramite un approccio di integrazione vettoriale e analizzato i mutanti risultanti per i ruoli in bioluminescenza, motilit&agrave; e colonizzazione competitivo di calamari. Attraverso queste analisi, abbiamo identificato tre regolatori romanzo di V. fischeri luminescenza e sette regolatori che alterata motilit&agrave;. Inoltre, abbiamo trovato 11 regolatori con un effetto precedentemente nuovo sulla colonizzazione competitiva del calamaro host. &Egrave; interessante notare, cinque dei regolatori recentemente caratterizzati ogni colpiti due o pi&ugrave; dei fenotipi esaminati, fortemente suggerendo l&#39;interconnettivit&agrave; tra sistemi. Questo lavoro rappresenta il prima mutagenesi su larga scala di una classe di geni in V. fischeri utilizzando un approccio genomico e sottolinea l&#39;importanza della trasduzione del segnale del due-componente nelle interazioni batterio-host.

Regolatori del due-componente risposta di Vibrio fischeri: identificazione, mutagenesi e caratterizzazione.

2 &#x6210;&#x5206;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7CFB;&#x611F;&#x899A;&#x306B;&#x539F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x3068;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5229;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x6052;&#x5E38;&#x6027;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3057;&#x3066;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x5909;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x72B6;&#x6CC1;&#x306B;&#x9069;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x74B0;&#x5883;&#x306E;&#x523A;&#x6FC0;&#x306B;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7814;&#x7A76;&#x539F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x3067;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3059;&#x308B;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x8A98;&#x767A;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x51FA;&#x73FE;&#x3057;&#x59CB;&#x3081;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0; &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x53EF;&#x7528;&#x6027;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x30B0;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D0;&#x30EB;&#x306A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306F;&#x4ECA;&#x751F;&#x72B6;&#x614B;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x76F8;&#x5229;&#x5171;&#x751F;&#x5171;&#x751F;&#x30CF;&#x30EF;&#x30A4;&#x30A2;&#x30F3; &#x30A4;&#x30AB;&#x7A2E; Euprymna scolopes &#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x4F53;&#x5185;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x6D77;&#x6D0B;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x767A;&#x5149;&#x83CC;&#x30D3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30AA; &#x30D5;&#x30A3;&#x30B7;&#x30E3;&#x30EA;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x4F5C;&#x696D;&#x3067;&#x306F;&#x3001;V. &#x30D5;&#x30A3;&#x30B7;&#x30E3;&#x30EA; &#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x5185;&#x3067;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F; 40 &#x306E;&#x63A8;&#x5B9A; 2 &#x6210;&#x5206;&#x53CD;&#x5FDC;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC; &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x5B58;&#x5728;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005; 6 13 &#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x30DD;&#x30B8;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; OmpR &#x578B;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x30CA;&#x30FC;&#x30EB;&#x578B;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x5206;&#x985E;&#x3057;&#x3001;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; 6 &#x30CA;&#x30CE;&#x30C6;&#x30AF;&#x7814;&#x3068;&#x3057;&#x3066;;&#x6B8B;&#x308A;&#x306E; 15 &#x4E88;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x305F; DNA &#x7D50;&#x5408;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C; 35 &#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x7D71;&#x5408;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x3057;&#x3001;&#x751F;&#x7269;&#x767A;&#x5149;&#x3001;&#x904B;&#x52D5;&#x3001;&#x30A4;&#x30AB;&#x306E;&#x7AF6;&#x4E89;&#x529B;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x690D;&#x6C11;&#x5730;&#x5316;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8A66;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x30D5;&#x30A3;&#x30B7;&#x30E3;&#x30EA;&#x767A;&#x5149; V. &#x306E; 3 &#x3064;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3068;&#x904B;&#x52D5;&#x3092;&#x5909;&#x66F4; 7 &#x3064;&#x306E;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;11 &#x306E;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF; &#x30DB;&#x30B9;&#x30C8; &#x30A4;&#x30AB;&#x306E;&#x7AF6;&#x4E89;&#x529B;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x690D;&#x6C11;&#x5730;&#x5316;&#x306B;&#x4EE5;&#x524D;&#x672A;&#x8A18;&#x8F09;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;5 &#x3064;&#x65B0;&#x3057;&#x304F;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x5F53;&#x5C40;&#x306E; 2 &#x3064;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x9593;&#x3067;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x63A5;&#x7D9A;&#x6027;&#x3092;&#x5F37;&#x304F;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x8ABF;&#x3079;&#x3001;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x4F5C;&#x54C1;&#x306F;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x5909;&#x7570;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30D5;&#x30A3;&#x30B7;&#x30E3;&#x30EA; V. &#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x3001;2 &#x6210;&#x5206;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x83CC;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30AA; &#x30FB; &#x30D5;&#x30A3;&#x30B7;&#x30E3;&#x30EA;&#x306E; 2 &#x6210;&#x5206;&#x53CD;&#x5FDC;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;: &#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x3068;&#x89E3;&#x6790;&#x3002;

2 &#xCEF4;&#xD3EC;&#xB10C;&#xD2B8; &#xC2E0;&#xD638; &#xBCC0;&#xD658; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xBC0F; &#xAC10;&#xAC01; prokaryotic &#xBC0F; &#xC9C4; &#xD575; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD658;&#xACBD; &#xC790;&#xADF9;, &#xD56D;&#xC0C1;&#xC131; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xBE60;&#xB974;&#xAC8C; &#xBCC0;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xC0C1;&#xD669;&#xC5D0; &#xB9DE;&#xAC8C; &#xB300;&#xC751;. &#xC5F0;&#xAD6C; prokaryotic &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558;&#xB294; &#xB300;&#xADDC;&#xBAA8; mutagenesis &#xC811;&#xADFC; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC744; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xB4F1;&#xC7A5; &#xD558;&#xAE30; &#xC2DC;&#xC791; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC8C;&#xB188; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC758; &#xCD5C;&#xADFC; &#xAC00;&#xC6A9;&#xC131;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xD574; &#xAE00;&#xB85C;&#xBC8C; &#xC811;&#xADFC; &#xAC00;&#xB2A5;&#xAC00; &#xC0C1;&#xD0DC; &#xB610;&#xB294; &#xD558;&#xC640;&#xC774; &#xC624;&#xC9D5;&#xC5B4; &#xC885; Euprymna scolopes &#xAC19;&#xC740; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; mutualistic symbiont&#xC73C;&#xB85C; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; &#xD574;&#xC591; &#xBC1C;&#xAD11; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544; &#xBE44; &#xBE0C;&#xB9AC; &#xC624; fischeri &#xC9C0;&#xAE08;&#xC740;. &#xC774; &#xC791;&#xD488;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; 40 &#xC0C1; 2-&#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xC751;&#xB2F5; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130; V. fischeri &#xAC8C;&#xB188; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xD655;&#xC778;. &#xC6B0;&#xB9AC; NarL &#xC720;&#xD615; OmpR &#xC720;&#xD615;&#xC73C;&#xB85C; 13&#xC73C;&#xB85C; 6 &#xBD84;&#xB958; &#xC774;&#xD399;&#xD130; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC874;&#xC7AC;&#xC758; &#xC885;&#xB958;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; 6 Ntrc&#xB85C; &#xC785;&#xB825;; &#xB098;&#xBA38;&#xC9C0; 15 &#xC608;&#xCE21;&#xB41C; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC744; &#xBD80;&#xC871; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xD6C4; 35 &#xBCA1;&#xD130; &#xD1B5;&#xD569; &#xC811;&#xADFC; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574;&#xC774; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xACE0; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xBC1C;&#xAD11;, &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xACBD;&#xC7C1;&#xB825; &#xC788;&#xB294; &#xC2DD;&#xBBFC; &#xC624;&#xC9D5;&#xC5B4;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBD84;&#xC11D;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; fischeri &#xBC1C;&#xAD11; &#xB300;&#xC758; &#xC138; &#xAC1C;&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130; &#xBC0F; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xBCC0;&#xACBD; 7 &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC624;&#xC9D5;&#xC5B4;&#xC758; &#xACBD;&#xC7C1;&#xB825; &#xC788;&#xB294; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; undescribed &#xD6A8;&#xACFC; 11 &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xB97C; &#xCC3E;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD765;&#xBBF8;&#xB86D;&#xAC8C;&#xB3C4;, &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xAC8C; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xAC04;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xAC80;&#xC0AC;, &#xACE0;&#xAE30;, &#xB450; &#xAC1C; &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; 5 &#xC0C8;&#xB85C; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC774; &#xADDC;&#xC81C;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC791;&#xD488; fischeri &#xAC8C;&#xB188; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB300;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4;&#xC758; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xB300;&#xADDC;&#xBAA8; mutagenesis &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xACE0; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;-&#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xB450; &#xCEF4;&#xD3EC;&#xB10C;&#xD2B8; &#xC2E0;&#xD638; &#xC804;&#xB2EC;&#xC758; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xAC15;&#xC870; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBE0C;&#xB9AC; fischeri&#xC758; &#xB450; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xC751;&#xB2F5; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;: &#xC2E0;&#xBD84;&#xC99D;&#xACFC; mutagenesis, &#xD2B9;&#xC131;&#xD654;.

&#x4F20;&#x611F;&#x5668;&#x6FC0;&#x9176; (SK) &#x548C;&#x54CD;&#x5E94;&#x8C03;&#x8282;&#x5668; (RR) &#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x53CC;&#x7EC4;&#x5206;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5141;&#x8BB8;&#x7EC6;&#x83CC;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x9002;&#x5E94;&#x73AF;&#x5883;&#x7684;&#x5149;&#x901A;&#x91CF;&#x6216;&#x4E3B;&#x673A;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x533A;&#x57DF;&#x652F;&#x52A9;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x662F;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x8D39;&#x6C0F;&#x5F27;&#x83CC; SK &#x7740;&#x624B;&#x5171;&#x751F;&#x4F19;&#x4F34;&#x5173;&#x7CFB;&#x4E0E;&#x590F;&#x5A01;&#x5937;&#x9C7F;&#x9C7C; Euprymna scolopes&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x56E0;&#x4E3A;&#x5176;&#x5728;&#x63A7;&#x5236;&#x5171;&#x751F;&#x591A;&#x7CD6; (&#x6691;&#x671F;) &#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x5F62;&#x6210;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x786E;&#x5B9A;&#x54EA;&#x4E9B; RR(s) &#x804C;&#x80FD;&#x4E0B;&#x6E38;&#x533A;&#x57DF;&#x652F;&#x52A9;&#x4E2D;&#x5FC3;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6267;&#x884C; 35 RR &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x5E93;&#x7684;&#x4E0A;&#x4F4D;&#x6027;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x51E0;&#x4E2A; Rr &#x8D21;&#x732E;&#x8BC9;&#x8D39;&#x6C0F;&#x533A;&#x57DF;&#x652F;&#x52A9;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x9752;&#x5C11;&#x5E74;&#x6691;&#x671F;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7F16;&#x7801;&#x5171;&#x751F;&#x8C03;&#x8282;&#x5668; SypG &#x53EA;&#x662F;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x8868;&#x578B;&#x548C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x533A;&#x57DF;&#x652F;&#x52A9;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x6691;&#x671F;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6240;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x652F;&#x6301;&#x5047;&#x8BBE;&#x8BE5;&#x533A;&#x57DF;&#x652F;&#x52A9;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x804C;&#x80FD;&#x4E0A;&#x6E38; SypG &#x8BF1;&#x4F7F;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x9879;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x8FD8;&#x663E;&#x793A;&#x6691;&#x671F;&#x7F16;&#x7801; RR SypE &#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x5F62;&#x6210;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5C31;&#x6211;&#x4EEC;&#x6240;&#x77E5;&#xFF0C;&#x6CA1;&#x6709;&#x5176;&#x4ED6;&#x7814;&#x7A76;&#x5DF2;&#x7528;&#x5927;&#x578B;&#x4E0A;&#x4F4D;&#x6027;&#x529E;&#x6CD5;&#x6765;&#x6F84;&#x6E05;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8DEF;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x9879;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x65E2;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x6211;&#x4EEC;&#x7406;&#x89E3;&#x7684;&#x8C03;&#x63A7;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x5171;&#x751F;&#x6B96;&#x6C11;&#x8005;&#x7684;&#x8D39;&#x6C0F;&#x8BC9;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x5728;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5B66;&#x65F6;&#x4EE3;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x8303;&#x5F0F;&#x3002;

&#x533A;&#x57DF;&#x652F;&#x52A9;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x804C;&#x80FD;&#x4E0A;&#x6E38;&#x7684; SypG &#x6765;&#x63A7;&#x5236;&#x9752;&#x5C11;&#x5E74;&#x6691;&#x671F;&#x6D3B;&#x52A8;&#x8F68;&#x8FF9;&#x4E0E;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x8D39;&#x6C0F;&#x5F27;&#x83CC;&#x3002;

Two-component signal transduction systems, composed of sensor kinase (SK) and response regulator (RR) proteins, allow bacterial cells to adapt to changes such as environmental flux or the presence of a host. RscS is an SK required for Vibrio fischeri to initiate a symbiotic partnership with the Hawaiian squid Euprymna scolopes, likely due to its role in controlling the symbiosis polysaccharide (syp) genes and thus biofilm formation. To determine which RR(s) functions downstream of RscS, we performed epistasis experiments with a library of 35 RR mutants. We found that several RRs contributed to RscS-mediated biofilm formation in V. fischeri. However, only the syp-encoded symbiosis regulator SypG was required for both biofilm phenotypes and syp transcription induced by RscS. These data support the hypothesis that RscS functions upstream of SypG to induce biofilm formation. In addition, this work also revealed a role for the syp-encoded RR SypE in biofilm formation. To our knowledge, no other study has used a large-scale epistasis approach to elucidate two-component signaling pathways. Therefore, this work both contributes to our understanding of regulatory pathways important for symbiotic colonization by V. fischeri and establishes a paradigm for evaluating two-component pathways in the genomics era.

RscS functions upstream of SypG to control the syp locus and biofilm formation in Vibrio fischeri.

Syst&egrave;mes de transduction de signal bi-composants, compos&eacute;s de kinase de capteur (SK) et de prot&eacute;ines de r&eacute;ponse de r&eacute;gulateur (RR), permettent &agrave; des cellules bact&eacute;riennes &agrave; s&#39;adapter aux changements tels que les flux environnementaux ou la pr&eacute;sence d&#39;un h&ocirc;te. RscS est un SK requis pour Vibrio fischeri, lan&ccedil;ant un partenariat symbiotique avec le calmar hawa&iuml;en Euprymna scolopes, probablement en raison de son r&ocirc;le dans la r&eacute;gulation des g&egrave;nes de polysaccharide (syp) de symbiose et donc la formation de biofilm. Pour d&eacute;terminer quelles fonctions RR(s) en aval de la CTF, nous avons effectu&eacute; des exp&eacute;riences d&#39;&eacute;pistasie avec une biblioth&egrave;que de 35 mutants RR. Nous avons constat&eacute; que plusieurs enregistrements de ressources a contribu&eacute; &agrave; la formation de biofilm de m&eacute;diation RscS dans V. fischeri. Cependant, il fallait seulement le r&eacute;gulateur de la symbiose cod&eacute; syp SypG pour les ph&eacute;notypes de biofilm et transcription syp induite par la CTF. Ces donn&eacute;es supportent l&#39;hypoth&egrave;se que les fonctions RscS en amont de SypG pour induire la formation de biofilm. En outre, ce travail a &eacute;galement r&eacute;v&eacute;l&eacute; un r&ocirc;le pour le codage syp RR SypE dans la formation de biofilm. &Agrave; notre connaissance, aucune autre &eacute;tude n&#39;a utilis&eacute; une approche &agrave; grande &eacute;chelle d&#39;&eacute;pistasie pour &eacute;lucider les voies de signalisation bi-composants. Par cons&eacute;quent, ce travail contribue &agrave; notre compr&eacute;hension des voies r&eacute;glementaires importantes pour la colonisation symbiotique par V. fischeri et &eacute;tablit un mod&egrave;le pour l&#39;&eacute;valuation des voies bi-composants &agrave; l&#39;&egrave;re de la g&eacute;nomique.

RscS fonctions en amont de SypG pour contr&ocirc;ler la formation de locus et biofilm syp &agrave; Vibrio fischeri.

Zweikomponenten-Signal-Transduktion-Systeme, bestehend aus Sensor-Kinase (SK) und Antwort Regler (RR) Proteine, k&ouml;nnen bakterielle Zellen zur Anpassung an &Auml;nderungen wie &ouml;kologischen Wandel oder das Vorhandensein eines Hosts. RscS ist ein SK f&uuml;r Vibrio Fischeri erforderlich, eine symbiotische Partnerschaft mit der hawaiischen Tintenfisch Euprymna Scolopes, wahrscheinlich wegen seiner Rolle bei der Kontrolle der Symbiose Polysaccharid (Syp) Gene und somit Biofilm-Bildung zu initiieren. Um festzustellen, welche RR(s) Funktionen stromabw&auml;rts des RscS, f&uuml;hrten wir Epistase Experimente mit einer Bibliothek von 35 RR-Mutanten. Wir fanden, dass mehrere RRs RscS-vermittelte Biofilm Formation in V. Fischeri beigetragen. Allerdings war nur der Syp-codierte Symbiose-Regler SypG f&uuml;r Biofilm Ph&auml;notypen und Syp Transkription induziert durch RscS erforderlich. Diese Daten unterst&uuml;tzen der Hypothese, RscS Funktionen oberhalb des SypG Biofilm-Bildung zu veranlassen. Diese Arbeit zeigte dar&uuml;ber hinaus auch eine Rolle f&uuml;r die Syp-codierte RR-Skype im Biofilm-Bildung. Unseres Wissens hat keine andere Studie einen gro&szlig; angelegte Epistase-Ansatz verwendet, um zwei-Komponenten-Signalwege zu erhellen. Daher diese Arbeit sowohl tr&auml;gt zu unserem Verst&auml;ndnis der Regulationsmechanismen wichtig f&uuml;r symbiotische Kolonisierung durch V. Fischeri und gr&uuml;ndet ein Paradigma f&uuml;r die Bewertung von Zweikomponenten-Wege in der Genomik-&Auml;ra.

RscS Funktionen oberhalb des SypG, kontrollieren der Syp-Locus und Biofilm Formation Vibrio Fischeri.

Sistemi di trasduzione di segnale del due-componente, composti da sensore chinasi (SK) e proteine di risposta regolatore (RR), consentono le cellule batteriche di adattarsi a cambiamenti come flusso ambientale o la presenza di un host. RscS &egrave; un SK necessaria per Vibrio fischeri di avviare una collaborazione simbiotica con il calamaro hawaiano Euprymna scolopes, probabilmente a causa del suo ruolo nel controllo della simbiosi polisaccaride (syp) geni e quindi formazione di biofilm. Per determinare quali funzioni RR(s) a valle di RscS, abbiamo eseguito esperimenti di epistasi con una libreria di 35 mutanti RR. Abbiamo trovato che parecchi RRs ha contribuito alla formazione di biofilm RscS-mediata in V. fischeri. Tuttavia, solo il regolatore di simbiosi con codifica syp SypG &egrave; stato richiesto per biofilm fenotipi e la trascrizione di syp indotta da RscS. Questi dati supportano l&#39;ipotesi che funzioni RscS a Monte di SypG per indurre la formazione di biofilm. Inoltre, questo lavoro ha rivelato anche un ruolo per il SypE RR syp-codificato nella formazione di biofilm. A nostra conoscenza, nessun altro studio ha utilizzato un approccio su larga scala epistasi delucidare signaling pathways due-componente. Questo lavoro, pertanto, contribuisce alla nostra comprensione delle vie regolarici importanti per la colonizzazione simbiotica di V. fischeri e stabilisce un paradigma per la valutazione delle vie del due-componente dell&#39;era genomica.

RscS funzioni a Monte di SypG per controllare la formazione di locus e biofilm syp in Vibrio fischeri.

2 &#x6210;&#x5206;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3001;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC; &#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; (SK) &#x3068;&#x5FDC;&#x7B54;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF; (RR) &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x74B0;&#x5883;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3084;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306B;&#x9069;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x3092;&#x8A31;&#x53EF;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Rsc &#x30CF;&#x30EF;&#x30A4;&#x30A2;&#x30F3; &#x30A4;&#x30AB;&#x5171;&#x751F;&#x591A;&#x7CD6;&#x985E; (syp) &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x3053;&#x3046;&#x3057;&#x3066;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA; &#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C; Euprymna scolopes &#x3068;&#x306E;&#x5171;&#x751F;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30CA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30C3;&#x30D7;&#x3092;&#x958B;&#x59CB;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x306F;&#x3001;SK &#x30D3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30AA; &#x30FB; &#x30D5;&#x30A3;&#x30B7;&#x30E3;&#x30EA;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3069;&#x306E;&#x4E0B;&#x6D41; Rsc &#x306E; rr (s) &#x95A2;&#x6570;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;35 &#x306E; RR &#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x3068;&#x306E;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B9;&#x30BF;&#x30B7;&#x30B9;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3092;&#x884C;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E; Rr &#x30D5;&#x30A3;&#x30B7;&#x30E3;&#x30EA; V. Rsc &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA; &#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x5BC4;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x306E;&#x307F; syp &#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x5171;&#x751F;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF; SypG &#x306F;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA; &#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3068; Rsc &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x8D77;&#x3055;&#x308C;&#x308B; syp &#x8EE2;&#x5199;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E; Rsc &#x95A2;&#x6570;&#x3092;&#x4E0A;&#x6D41;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA; &#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B; SypG &#x306E;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x4F5C;&#x696D; syp &#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F; RR SypE &#x30D0;&#x30A4;&#x30AA; &#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3082;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x77E5;&#x8B58;&#x306B;&#x4ED6;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x5927;&#x578B;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B9;&#x30BF;&#x30B7;&#x30B9; &#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1; 2 &#x6210;&#x5206;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x89E3;&#x660E;&#x3092;&#x4F7F;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x4ED5;&#x4E8B;&#x4E21;&#x65B9;&#x898F;&#x5236;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x30D5;&#x30A3;&#x30B7;&#x30E3;&#x30EA; V. &#x5171;&#x751F;&#x690D;&#x6C11;&#x5730;&#x5316;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306E;&#x79C1;&#x9054;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3057;&#x3066; 2 &#x6210;&#x5206;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x30B2;&#x30CE;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x6642;&#x4EE3;&#x8A55;&#x4FA1;&#x30D1;&#x30E9;&#x30C0;&#x30A4;&#x30E0;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30AA; &#x30FB; &#x30D5;&#x30A3;&#x30B7;&#x30E3;&#x30EA;&#x306E; syp &#x8ECC;&#x8DE1;&#x3068;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA; &#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B; SypG &#x306E; Rsc &#x95A2;&#x6570;&#x4E0A;&#x6D41;&#x3002;

2 &#xCEF4;&#xD3EC;&#xB10C;&#xD2B8; &#xC2E0;&#xD638; &#xBCC0;&#xD658; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;, &#xC13C;&#xC11C; &#xD0A4; (SK) &#xACE0; &#xC751;&#xB2F5; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130; (RR) &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC838; &#xD658;&#xACBD; &#xD50C;&#xB7ED;&#xC2A4; &#xB4F1; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0; &#xC801;&#xC751; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC138;&#xADE0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. RscS &#xBE0C;&#xB9AC; fischeri&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xACF5;&#xC0DD; &#xD611;&#xB825; &#xD558;&#xC640;&#xC774; &#xC624;&#xC9D5;&#xC5B4; Euprymna scolopes, &#xACF5;&#xC0DD; &#xB2E4; &#xB2F9; &#xB958; (syp) &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC640; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; biofilm &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xC5ED;&#xD560; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xC744; &#xC2DC;&#xC791; &#xD558;&#xB294; SK&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. Rscs&#xC758; &#xD558;&#xB958;&#xB294; RR(s) &#xD568;&#xC218;&#xB97C; &#xD655;&#xC778; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; 35 RR &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC;&#xC640; epistasis &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xC218;&#xD589;. &#xC5EC;&#xB7EC; Rr fischeri &#xB300;&#xC5D0;&#xC11C; RscS &#xC911;&#xC7AC; biofilm &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;&#xB97C; &#xCC3E;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, SypG syp &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xACF5;&#xC0DD; &#xADE4;&#xB9CC; biofilm &#xACE0;&#xAE30; &#xBC0F; Rscs&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; syp &#xC804;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; &#xAC00;&#xC124; biofilm&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xC720;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; Sypg&#xC758; &#xC0C1;&#xB958; RscS &#xAE30;&#xB2A5; &#xD558; &#xC9C0;&#xC6D0;. &#xB610;&#xD55C;,&#xC774; &#xC791;&#xD488;&#xC5D0;&#xB294; syp &#xC778;&#xCF54;&#xB529; RR SypE biofilm &#xD615;&#xC131;&#xC5D0;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xB610;&#xD55C; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC9C0;&#xC2DD;, &#xB2E4;&#xB978; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xB300;&#xADDC;&#xBAA8; epistasis &#xC811;&#xADFC; 2 &#xCEF4;&#xD3EC;&#xB10C;&#xD2B8; &#xC2E0;&#xD638; &#xACBD;&#xB85C; &#xBA85;&#xB8CC; &#xD558; &#xAC8C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;,&#xC774; &#xC791;&#xD488; &#xBAA8;&#xB450; &#xADDC;&#xC815; &#xACBD;&#xB85C; fischeri &#xB300; &#xC5EC; &#xACF5;&#xC0DD; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC774;&#xD574;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD558; &#xACE0; &#xAC8C;&#xB188; &#xC2DC;&#xB300;&#xC5D0; &#xB450; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xACBD;&#xB85C; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xD328;&#xB7EC;&#xB2E4;&#xC784;&#xC744; &#xC124;&#xC815;.

&#xBE0C;&#xB9AC; fischeri syp &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4;&#xC640; biofilm &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; Sypg&#xC758; &#xC0C1;&#xB958; &#xD568;&#xC218;&#xAC00; RscS

Sistemas de transducci&oacute;n de la se&ntilde;al de dos componentes, compuestos de sensor cinasa (SK) y prote&iacute;nas del regulador (RR) de respuesta, permiten a las c&eacute;lulas bacterianas para adaptarse a los cambios tales como flujo ambiental o la presencia de un host. RSC es un SK para Vibrio fischeri para iniciar una asociaci&oacute;n simbi&oacute;tica con el calamar hawaiano Euprymna scolopes, probablemente debido a su papel en el control de los genes de polisac&aacute;rido (syp) de simbiosis y as&iacute; la formaci&oacute;n de biopel&iacute;culas. Para determinar qu&eacute; funciones de RR(s) aguas abajo de la RSC, realizamos experimentos de epistasis con una biblioteca de 35 mutantes de RR. Encontramos que varios RRs contribuyeron a la formaci&oacute;n de biofilm mediada por RSC en V. fischeri. Sin embargo, s&oacute;lo el regulador de la simbiosis codificada syp SypG fue requerido para biofilm fenotipos y transcripci&oacute;n de syp inducida por RSC. Estos datos apoyan la hip&oacute;tesis que funciona de RSC aguas arriba de SypG para inducir la formaci&oacute;n de biopel&iacute;culas. Adem&aacute;s, esta obra tambi&eacute;n revel&oacute; un papel para la 2.Soma de RR syp-codificado en la formaci&oacute;n de biopel&iacute;culas. A nuestro conocimiento, ning&uacute;n otro estudio ha utilizado un enfoque de epistasis a gran escala para dilucidar v&iacute;as de se&ntilde;alizaci&oacute;n de dos componentes. Por lo tanto, este trabajo contribuye a nuestra comprensi&oacute;n de reglamentaci&oacute;n caminos importantes para la colonizaci&oacute;n simbi&oacute;tica por V. fischeri y establece un paradigma para la evaluaci&oacute;n de v&iacute;as de dos componentes en la era de la gen&oacute;mica.

RSC funciones aguas arriba de SypG para controlar la formaci&oacute;n de locus y biofilm syp en Vibrio fischeri.

&#x590F;&#x5A01;&#x5937;&#x9C7F;&#x9C7C;&#x7684;&#x6D77;&#x6D0B;&#x7EC6;&#x83CC;&#x5F27;&#x83CC;&#x8D39;&#x6C0F; Euprymna scolopes &#x7684;&#x6B96;&#x6C11;&#x5316;&#x9700;&#x8981;&#x5171;&#x751F;&#x591A;&#x7CD6; (&#x6691;&#x671F;) &#x57FA;&#x56E0;&#x7C07;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x5171;&#x751F;&#x5F00;&#x59CB;&#x901A;&#x8FC7;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x5171;&#x751F;&#x7684;&#x5668;&#x5B98;&#x8868;&#x9762;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x524D;&#x9762;&#x6240;&#x8FF0; SypG &#x6691;&#x671F;&#x7F16;&#x7801;&#x54CD;&#x5E94;&#x76D1;&#x7BA1;&#x8005;&#x548C;&#x672A;&#x94FE;&#x63A5;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801;&#x4F20;&#x611F;&#x5668;&#x6FC0;&#x9176;&#x5728;&#x63A7;&#x5236;&#x9752;&#x5C11;&#x5E74;&#x6691;&#x671F;&#x6D3B;&#x52A8;&#x8F6C;&#x5F55;&#x548C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x9752;&#x5C11;&#x5E74;&#x6691;&#x671F;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7EC6;&#x80DE;&#x805A;&#x5408;&#x8868;&#x578B;&#x533A;&#x57DF;&#x652F;&#x52A9;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x989D;&#x5916;&#x6691;&#x671F;&#x7F16;&#x7801;&#x8C03;&#x8282;&#x5668;&#xFF0C;&#x5047;&#x5B9A;&#x4F20;&#x611F;&#x5668;&#x6FC0;&#x9176; SypF&#xFF0C;&#x7684;&#x53C2;&#x4E0E;&#x5728;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x5206;&#x79BB;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x589E;&#x52A0;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;sypF1&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A; SypF &#x53EF;&#x4EE5;&#x51FD;&#x6570;&#x6765;&#x8BF1;&#x4F7F;&#x9752;&#x5C11;&#x5E74;&#x6691;&#x671F;&#x6D3B;&#x52A8;&#x8F6C;&#x5F55;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x8868;&#x578B;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x76B1;&#x7EB9;&#x7684;&#x96C6;&#x843D;&#x5F62;&#x6210;&#x3001; &#x73BB;&#x7483;&#x3001; &#x9075;&#x5B88;&#x548C;&#x8584;&#x819C;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;SypF1 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7684;&#x9752;&#x5C11;&#x5E74;&#x6691;&#x671F;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7FA4;&#x96C6;&#x662F;&#x5B8C;&#x5168;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E; SypG&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x51CF;&#x5C11;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x8868;&#x578B;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x6D88;&#x9664;&#xFF0C;sypG &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x3002;&#x5220;&#x9664; sypE&#xFF0C;&#x53E6;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6691;&#x671F;&#x7F16;&#x7801;&#x54CD;&#x5E94;&#x8C03;&#x8282;&#x5668;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#xFF0C;&#x4E5F;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E86;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8868;&#x578B;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;SypF1 &#x4ECD;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x6697;&#x793A; SypF1 &#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x53E6;&#x4E00;&#x4E2A; regulator(s) sypG sypE &#x53CC;&#x7A81;&#x53D8;&#x8868;&#x578B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4EE5;&#x540E;&#x7684;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x663E;&#x793A;&#x5269;&#x4F59; SypF1 &#x8BF1;&#x5BFC;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x5F62;&#x6210;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E; VpsR&#x3001; &#x6307;&#x8BA4;&#x54CD;&#x5E94;&#x8C03;&#x8282;&#x5668;&#x548C;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7D20;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x5408;&#x6210;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x652F;&#x6301;&#x4F7F;&#x81F3;&#x5C11;&#x4E24;&#x79CD;&#x591A;&#x7CD6;&#x8F68;&#x8FF9;&#x548C;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#x7684;&#x7F51;&#x7EDC;&#x8D21;&#x732E;&#x8BC9;&#x8D39;&#x6C0F;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;

&#x5047;&#x5B9A;&#x6742;&#x4EA4;&#x4F20;&#x611F;&#x5668;&#x6FC0;&#x9176; SypF &#x901A;&#x8FC7;&#x4E0A;&#x6E38;&#x4EE3;&#x7406;&#x534F;&#x8C03;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x8D39;&#x6C0F;&#x5F27;&#x83CC;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x54CD;&#x5E94;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#xFF0C;SypG &#x548C; VpsR&#x3002;

Colonization of the Hawaiian squid Euprymna scolopes by the marine bacterium Vibrio fischeri requires the symbiosis polysaccharide (syp) gene cluster, which contributes to symbiotic initiation by promoting biofilm formation on the surface of the symbiotic organ. We previously described roles for the syp-encoded response regulator SypG and an unlinked gene encoding the sensor kinase RscS in controlling syp transcription and inducing syp-dependent cell-cell aggregation phenotypes. Here, we report the involvement of an additional syp-encoded regulator, the putative sensor kinase SypF, in promoting biofilm formation. Through the isolation of an increased activity allele, sypF1, we determined that SypF can function to induce syp transcription as well as a variety of biofilm phenotypes, including wrinkled colony formation, adherence to glass, and pellicle formation. SypF1-mediated transcription of the syp cluster was entirely dependent on SypG. However, the biofilm phenotypes were reduced, not eliminated, in the sypG mutant. These phenotypes were also reduced in a mutant deleted for sypE, another syp-encoded response regulator. However, SypF1 still induced phenotypes in a sypG sypE double mutant, suggesting that SypF1 might activate another regulator(s). Our subsequent work revealed that the residual SypF1-induced biofilm formation depended on VpsR, a putative response regulator, and cellulose biosynthesis. These data support a model in which a network of regulators and at least two polysaccharide loci contribute to biofilm formation in V. fischeri.

The putative hybrid sensor kinase SypF coordinates biofilm formation in Vibrio fischeri by acting upstream of two response regulators, SypG and VpsR.

Colonisation du calmar hawa&iuml;en Euprymna scolopes par la bact&eacute;rie marine Vibrio fischeri exige que le groupe de g&egrave;nes de polysaccharide (syp) symbiose, qui contribue &agrave; l&#39;initiation symbiotique en favorisant la formation de biofilm sur la surface de l&#39;organe symbiotique. Nous avons d&eacute;crit pr&eacute;c&eacute;demment r&ocirc;les pour le r&eacute;gulateur de la r&eacute;ponse cod&eacute;e syp SypG et un d&eacute;li&eacute; g&egrave;ne codant pour la kinase capteur RscS en contr&ocirc;lant la transcription syp et induisant des ph&eacute;notypes agr&eacute;gation cellules syp-d&eacute;pendante. Nous rapportons ici l&#39;implication d&#39;un r&eacute;gulateur de syp cod&eacute;es suppl&eacute;mentaire, la kinase putative capteur SypF, dans la promotion de la formation de biofilm. Par le biais de l&#39;isolement d&#39;un all&egrave;le de l&#39;augmentation de l&#39;activit&eacute;, sypF1, nous avons d&eacute;termin&eacute; que les SypF peuvent fonctionner pour induire la transcription de syp ainsi que divers ph&eacute;notypes de biofilm, y compris la formation de colonies rid&eacute;e, adh&eacute;rence au verre et la formation de la pellicule. SypF1-mediated transcription du cluster syp d&eacute;pendait enti&egrave;rement de SypG. Toutefois, les ph&eacute;notypes de biofilm ont &eacute;t&eacute; r&eacute;duites, ne pas &eacute;limin&eacute;, chez le mutant sypG. Ces ph&eacute;notypes ont &eacute;galement &eacute;t&eacute; r&eacute;duits &agrave; un mutant supprim&eacute; pour sypE, un autre r&eacute;gulateur de r&eacute;ponse cod&eacute;e syp. Cependant, SypF1 induit toujours des ph&eacute;notypes dans un mutant sypG sypE double, ce qui sugg&egrave;re que le SypF1 pourrait activer un autre (s). Nos travaux ult&eacute;rieurs ont r&eacute;v&eacute;l&eacute; que la formation de biofilm d&#39;induite par le SypF1 r&eacute;siduelle d&eacute;pend de la VpsR, un r&eacute;gulateur de r&eacute;ponse putatif et biosynth&egrave;se de cellulose. Ces donn&eacute;es supportent un mod&egrave;le dans lequel un r&eacute;seau d&#39;organismes de r&eacute;glementation et au moins deux loci de polysaccharide contribue &agrave; la formation de biofilm dans V. fischeri.

La kinase de capteur hybride putatif SypF coordonne la formation de biofilm dans Vibrio fischeri en agissant en amont des deux r&eacute;gulateurs de r&eacute;ponse, SypG et VpsR.

Kolonisierung der hawaiischen Tintenfisch Euprymna Scolopes durch die marine Bakterium Vibrio Fischeri erfordert den Symbiose Polysaccharid (Syp) Gen-Cluster, die symbiotische Einleitung durch die F&ouml;rderung von Biofilm-Bildung auf der Oberfl&auml;che der symbiotischen Orgel beitr&auml;gt. Wir zuvor beschriebenen Rollen f&uuml;r den Syp-codierte Antwort Regler SypG und eine unverkn&uuml;pfte gen, die f&uuml;r das Sensor-Kinase RscS im controlling Syp Transkription und induzierende Syp-abh&auml;ngige Zell-Zell-Aggregation-Ph&auml;notypen. Hier berichten wir die Einbeziehung einer zus&auml;tzlichen Syp-codierte Spannungsregler, die vermeintliche Sensor-Kinase SypF, bei der F&ouml;rderung der Bildung von Biofilm. Durch die Isolation von einer erh&ouml;hten Aktivit&auml;t-Allel, sypF1, haben wir festgestellt, dass SypF, Syp Transkription sowie eine Vielzahl von Biofilm-Ph&auml;notypen, faltige Kolonie Bildung Festhalten an Glas und Kahmhaut Bildung genau funktionieren kann. SypF1-vermittelte Transkription des Clusters Syp wurde vollst&auml;ndig von der SypG abh&auml;ngig. Jedoch wurden die Biofilm-Ph&auml;notypen reduziert, nicht beseitigt, in den SypG-Mutanten. Eine Mutante f&uuml;r Skype, eine andere Beh&ouml;rde in Syp-codierte Antwort gel&ouml;scht wurden auch diese Ph&auml;notypen reduziert. SypF1 induziert jedoch noch Ph&auml;notypen in SypG Skype Doppel Mutanten, darauf hindeutet, dass die SypF1 eine andere Druckregler aktivieren k&ouml;nnte. Unsere nachfolgenden Arbeit ergab, dass die verbleibende SypF1 induziert Biofilm-Bildung von VpsR, eine vermeintliche Antwort Regler und Zellulose-Biosynthese abhing. Diese Daten unterst&uuml;tzen ein Modell, in dem ein Netz von Regulierungsbeh&ouml;rden und mindestens zwei Polysaccharid-Loci Biofilm-Bildung in V. Fischeri beitragen.

Das vermeintliche Hybrid-Sensor-Kinase SypF Koordinaten Biofilm Formation Vibrio Fischeri stromaufw&auml;rts handeln von zwei Antwort Regulierungsbeh&ouml;rden, SypG und VpsR.

Colonizzazione del calamaro hawaiano Euprymna scolopes dal batterio marino Vibrio fischeri richiede il cluster simbiosi polisaccaride (syp) gene, che contribuisce all&#39;iniziazione simbiotica promuovendo la formazione di biofilm sulla superficie dell&#39;organo simbiotica. Abbiamo descritto in precedenza ruoli per il regolatore di risposta codificata syp SypG e un disgiunto gene che codifica per la chinasi sensore RscS nel controllo syp trascrizione e indurre fenotipi aggregazione syp-dependent cell-cell. Qui, segnaliamo la partecipazione di un ulteriore regolatore syp-codificati, la chinasi putativa sensore SypF, nel promuovere la formazione di biofilm. Attraverso l&#39;isolamento di un allele di maggiore attivit&agrave;, sypF1, abbiamo determinato che SypF pu&ograve; funzionare per indurre la trascrizione di syp, nonch&eacute; una variet&agrave; di fenotipi di biofilm, compreso formazione di Colonia rugosa, aderenza al vetro e la formazione di pellicola. SypF1-mediata trascrizione del cluster syp dipendeva interamente SypG. Tuttavia, sono stati ridotti i fenotipi di biofilm, non eliminato, il mutante sypG. Questi fenotipi sono stati ridotti anche in un mutante cancellato per sypE, un altro regolatore di risposta codificata syp. Tuttavia, SypF1 ancora indotta da fenotipi in un sypG sypE doppio mutante, suggerendo che SypF1 potrebbe attivare un altro regolatore. Il nostro lavoro successivo ha rivelato che la formazione di biofilm residuo SypF1-induced dipendeva VpsR, un regolatore di risposta putativo e biosintesi di cellulosa. Questi dati supportano un modello in cui una rete di autorit&agrave; di regolamentazione e almeno due loci polisaccaride contribuiscono alla formazione di biofilm in V. fischeri.

La chinasi sensore putativo ibrido SypF coordina la formazione di biofilm in Vibrio fischeri agendo a Monte di due regolatori di risposta, SypG e VpsR.

&#x30CF;&#x30EF;&#x30A4;&#x30A2;&#x30F3; &#x30A4;&#x30AB; Euprymna scolopes &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6D77;&#x6D0B;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x8178;&#x708E;&#x30D3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30AA; &#x30D5;&#x30A3;&#x30B7;&#x30E3;&#x30EA;&#x306E;&#x690D;&#x6C11;&#x5730;&#x5316;&#x5171;&#x751F;&#x5165;&#x9580;&#x5171;&#x751F;&#x5668;&#x5B98;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA; &#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x5171;&#x751F;&#x306E;&#x591A;&#x7CD6;&#x985E; (syp) &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;Syp &#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x5FDC;&#x7B54;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF; SypG &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC; &#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; syp &#x8EE2;&#x5199;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x3001;syp &#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x51DD;&#x96C6;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3059;&#x308B; Rsc &#x306F;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x524D;&#x8FF0;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA; &#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x4E0A;&#x3067;&#x3001;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306E; syp &#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9; &#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x3001;&#x30DA;&#x30A4;&#x30B8;&#x30A2;&#x30F3; &#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; SypF &#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306E;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3001;sypF1 &#x306E;&#x5206;&#x96E2;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066; syp &#x8EE2;&#x5199;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x3057;&#x308F;&#x306E;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x5F62;&#x6210;&#x3001;&#x30AC;&#x30E9;&#x30B9;&#x306B;&#x4ED8;&#x7740;&#x3001;&#x30DA;&#x30EA;&#x30AF;&#x30EB;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306A;&#x3069;&#x3001;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA; &#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3059;&#x308B; SypF &#x304C;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;SypF1 &#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199; syp &#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E; SypG &#x306B;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;sypG &#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3067;&#x306F;&#x6392;&#x9664;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA; &#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x304C;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306F; sypE &#x7528;&#x3001;&#x5225; syp &#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x5FDC;&#x7B54;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x524A;&#x9664;&#x5909;&#x7570;&#x682A;&#x3082;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;SypF1 &#x306F;&#x307E;&#x3060;&#x5225;&#x306E;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF; SypF1 &#x3092;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3059;&#x308B; sypG sypE &#x4E8C;&#x91CD;&#x5909;&#x7570;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;&#x4ED5;&#x4E8B; SypF1 &#x8A98;&#x8D77;&#x6B8B;&#x7559;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA; &#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x5F62;&#x6210;&#x624B;&#x6CD5;&#x3001;&#x63A8;&#x5B9A;&#x5FDC;&#x7B54;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30BB;&#x30EB;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B9;&#x5408;&#x6210;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3067;&#x306F;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x3068;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082; 2 &#x3064;&#x306E;&#x591A;&#x7CD6;&#x985E;&#x306E;&#x8ECC;&#x8DE1;&#x30D5;&#x30A3;&#x30B7;&#x30E3;&#x30EA; V. &#x30D0;&#x30A4;&#x30AA; &#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x96D1;&#x7A2E;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC; &#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; SypF &#x30D3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30AA; &#x30FB; &#x30D5;&#x30A3;&#x30B7;&#x30E3;&#x30EA;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA; &#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x4E0A;&#x6D41;&#x6F14;&#x6280;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5EA7;&#x6A19;&#x306E; SypG &#x3068;&#x624B;&#x6CD5;&#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x3002;

&#xD558;&#xC640;&#xC774; &#xC624;&#xC9D5;&#xC5B4; &#xD574;&#xC591; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544; &#xBE44; &#xBE0C;&#xB9AC; &#xC624; fischeri &#xC5EC; Euprymna scolopes&#xC758; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0; &#xACF5;&#xC0DD; &#xB2E4; &#xB2F9; &#xB958; (syp) &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; &#xACF5;&#xC0DD; &#xC7A5;&#xAE30;&#xC758; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; biofilm &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558; &#xC5EC; &#xACF5;&#xC0DD; &#xAC1C;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; syp &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB41C; &#xC751;&#xB2F5; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130; SypG &#xBC0F; &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xC13C;&#xC11C; &#xB2C8; RscS syp &#xC804;&#xC0AC; &#xC81C;&#xC5B4; &#xBC0F; &#xC720;&#xB3C4; syp &#xC885;&#xC18D; &#xC140; &#xC9D1;&#xACC4; &#xACE0;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; biofilm &#xD615;&#xC131; &#xCD94;&#xC9C4;&#xC5D0; &#xCD94;&#xAC00; syp &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xC870;&#xC808;&#xAE30;, &#xC0C1; &#xC13C;&#xC11C; &#xB2C8; SypF, &#xCC38;&#xC5EC;&#xB97C; &#xBCF4;&#xACE0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD65C;&#xB3D9; &#xC99D;&#xAC00; &#xB300;&#xB9BD; &#xC720;&#xC804;&#xC790;, sypF1, &#xACA9;&#xB9AC;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; SypF syp &#xC804;&#xC0AC;&#xB85C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; biofilm &#xACE0;&#xAE30;, &#xC8FC;&#xB984;&#xC774; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0; &#xD615;&#xC131;, &#xBC15;&#xB9C9; &#xD615;&#xC131;, &#xC720;&#xB9AC;, &#xC900;&#xC218; &#xB4F1;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC791;&#xB3D9;&#xD560; &#xC218; &#xACB0;&#xC815;. Syp &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130;&#xC758; SypF1 &#xC911;&#xC7AC; &#xC804;&#xC0AC;&#xB294; Sypg&#xC5D0; &#xC804;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC758;&#xC874; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC81C;&#xAC70; &#xB418;&#xC9C0; sypG &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC5D0; biofilm &#xACE0;&#xAE30; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xACE0;&#xAE30; &#xB610;&#xD55C; sypE, &#xB2E4;&#xB978; syp &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB41C; &#xC751;&#xB2F5; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0AD;&#xC81C; &#xB41C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, Sypf1&#xB294; &#xC5EC;&#xC804;&#xD788; sypG sypE &#xC774;&#xC911; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;, SypF1 &#xB2E4;&#xB978; regulator(s)&#xC744; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC218;&#xB3C4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548;&#xC5D0; &#xACE0;&#xAE30; &#xC720;&#xBC1C;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xD6C4;&#xC18D; &#xC791;&#xC5C5; &#xACF5;&#xAC1C; &#xC794;&#xC5EC; Sypf1&#xC744; &#xC774;&#xC6A9;&#xD55C; biofilm &#xD615;&#xC131; VpsR, &#xC0C1; &#xC751;&#xB2F5; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130; &#xBC0F; cellulose &#xC0DD; &#xD569;&#xC131;&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xC758; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; &#xBC0F; &#xB450; &#xAC1C; &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; &#xB2E4; &#xB2F9; &#xB958; loci fischeri &#xB300;&#xC5D0; biofilm &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC0C1; &#xD558;&#xC774;&#xBE0C;&#xB9AC;&#xB4DC; &#xC13C;&#xC11C; &#xB2C8; SypF &#xC88C;&#xD45C; &#xBE0C;&#xB9AC; fischeri&#xC5D0; biofilm &#xD615;&#xC131; &#xC0C1;&#xB958; &#xD558; &#xC5EC; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xC751;&#xB2F5; &#xADDC;&#xC81C;, SypG &#xBC0F; Vpsr&#xC758;.

Colonizaci&oacute;n del calamar hawaiano scolopes Euprymna por la Marina de la bacteria Vibrio fischeri requiere el racimo del gene de polisac&aacute;rido (syp) de simbiosis, que contribuye a la iniciaci&oacute;n simbi&oacute;tica por promover la formaci&oacute;n de biofilm en la superficie del &oacute;rgano simbi&oacute;tica. Describimos previamente papeles para el regulador de la respuesta codificada syp SypG y un disociados gen que codifica la quinasa de sensor RSC para controlar syp transcripci&oacute;n y la inducci&oacute;n de fenotipos de agregaci&oacute;n syp-dependiente c&eacute;lula-c&eacute;lula. Aqu&iacute;, divulgamos la implicaci&oacute;n de un regulador syp codificaci&oacute;n adicional, la cinasa de la supuesta sensor SypF, en la promoci&oacute;n de la formaci&oacute;n de biopel&iacute;culas. Mediante el aislamiento de un alelo de aumento de la actividad, sypF1, determinamos que SypF puede funcionar para inducir la transcripci&oacute;n syp, as&iacute; como una variedad de fenotipos de biofilm, incluyendo la formaci&oacute;n de Colonia arrugada, adherencia al vidrio y formaci&oacute;n de pel&iacute;cula. SypF1 mediada por transcripci&oacute;n del cluster syp depend&iacute;a enteramente de SypG. Sin embargo, se redujeron los fenotipos de biofilm, no eliminado, en el mutante sypG. Estos fenotipos tambi&eacute;n se redujeron en un mutante eliminado para 2.Soma, otro regulador de respuesta codificada syp. Sin embargo, SypF1 todav&iacute;a hab&iacute;a inducida fenotipos en una sypG 2.Soma doble mutante, lo que sugiere que el SypF1 puede activar otro regulador. Nuestro trabajo posterior revel&oacute; que la formaci&oacute;n de biopel&iacute;culas inducida por el SypF1 residual depend&iacute;a de VpsR, un regulador de la supuesta respuesta y la bios&iacute;ntesis de celulosa. Estos datos apoyan un modelo en el que una red de reguladores y por lo menos dos loci de polisac&aacute;rido contribuyan a la formaci&oacute;n de biofilm en V. fischeri.

La quinasa de sensor h&iacute;brido putativo SypF coordina la formaci&oacute;n de biofilm en Vibrio fischeri actuando contra la corriente de dos reguladores de la respuesta, SypG y VpsR.

Elizabeth Hussa

Department of Bacteriology

University of Wisconsin-Madison

Rearing and Injection of Manduca sexta Larvae to Assess Bacterial Virulence

Elizabeth Hussa

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University of Wisconsin-Madison

Rearing and Injection of Manduca sexta Larvae to Assess Bacterial Virulence

Department of Bacteriology