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Isolation and Culture of Individual Myofibers and their Satellite Cells from Adult Skeletal Muscle

Muscle  regeneration in the adult is performed by resident stem cells called satellite  cells. Satellite cells are defined by  their position between the ...

Ottawa Hospital Research Institute

University of Ottawa 

Tecniche mini-invasive per da reflusso gastroesofageo (GERD), come ad esempio endoscopiche iniezioni di materiali inerti, sono state introdotte negli ultimi anni. Tuttavia, i risultati sono ancora preliminari. Iniezione delle cellule &egrave; emersa come una strategia alternativa sia reflusso vescico-ureterale e incontinenza. Riportiamo, per la prima volta, l&#39;iniezione di cellule precursore del muscolo (ppm) nella giunzione gastroesophageal (GEJ).

Cellule precursori muscolare murino &egrave; sopravvissuto e integrati in una giunzione gastroesophageal cryoinjured.

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Mini-invasive techniques for gastroesophageal reflux disease (GERD), such as endoscopic injections of inert materials, have been introduced in recent years. However, results are still preliminary. Cell injection has emerged as an alternative strategy in both vesicoureteral reflux and incontinence. Here we report, for the first time, the injection of muscle precursor cells (MPCs) in the gastroesophageal junction (GEJ).

Murine muscle precursor cells survived and integrated in a cryoinjured gastroesophageal junction.

Techniques mini-invasives pour reflux gastro-&oelig;sophagien (RGO), telles que des injections endoscopiques de mat&eacute;riaux inertes, ont &eacute;t&eacute; introduites ces derni&egrave;res ann&eacute;es. Cependant, les r&eacute;sultats sont encore provisoires. Injection de cellules est devenue une strat&eacute;gie de rechange dans le reflux v&eacute;sico-ur&eacute;t&eacute;ral et l&#39;incontinence. Nous rapportons ici, pour la premi&egrave;re fois, l&#39;injection de cellules pr&eacute;curseurs de muscle (ppm) dans la jonction gastro (Semicirculaires).

Cellules pr&eacute;curseurs musculaires murins ont surv&eacute;cu et int&eacute;gr&eacute; dans une jonction de gastro cryoinjured.

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&#xBD88;&#xD65C;&#xC131; &#xC7AC;&#xB8CC;&#xC758; &#xB0B4; &#xC2DC;&#xACBD; &#xC8FC;&#xC0AC; &#xAC19;&#xC740; &#xC704; &#xC2DD;&#xB3C4; &#xC5ED;&#xB958; &#xC9C8;&#xD658; (GERD)&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBBF8;&#xB2C8;-&#xCE68;&#xB7B5; &#xC801; &#xAE30;&#xC220;&#xC740; &#xCD5C;&#xADFC; &#xBA87; &#xB144; &#xB3D9;&#xC548;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xC785; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xACB0;&#xACFC; &#xC5EC;&#xC804;&#xD788; &#xC608;&#xBE44;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xC785; vesicoureteral &#xD658;&#xB958; &#xBC0F; &#xC694; &#xC2E4; &#xAE08;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB300;&#xCCB4; &#xC804;&#xB7B5;&#xC73C;&#xB85C; &#xB5A0;&#xC624;&#xB974;&#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF4;&#xACE0;, &#xCC98;&#xC74C;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC704; &#xC2DD;&#xB3C4; &#xC811;&#xD569;&#xBD80; (GEJ)&#xC5D0;&#xC11C; &#xADFC;&#xC721; &#xC120;&#xAD6C;&#xC790; &#xC138;&#xD3EC; (MPCs)&#xC758; &#xC8FC;&#xC0AC;.

Murine &#xADFC;&#xC721; &#xC804;&#xC870; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0B4;&#xC544; &#xB098; &#xACE0; cryoinjured &#xC704; &#xC2DD;&#xB3C4; &#xC811;&#xD569;&#xBD80;&#xC5D0; &#xD1B5;&#xD569;.

T&eacute;cnicas mini-invasivas para enfermedad por reflujo gastroesof&aacute;gico (GERD), como la inyecci&oacute;n endosc&oacute;pica de materiales inertes, se han introducido en los &uacute;ltimos a&ntilde;os. Sin embargo, los resultados son todav&iacute;a preliminares. Inyecci&oacute;n de c&eacute;lulas se ha convertido en una estrategia alternativa en el reflujo vesicoureteral e incontinencia. Aqu&iacute; divulgamos, por primera vez, la inyecci&oacute;n de c&eacute;lulas precursoras de m&uacute;sculo (PSM) en la Uni&oacute;n gastroesof&aacute;gica (GEJ).

C&eacute;lulas precursoras de m&uacute;sculo murino sobrevivieron e integran en una Uni&oacute;n gastroesof&aacute;gica de cryoinjured.

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Autologous cell transplantation has been proposed as a possible therapeutic approach for Duchenne dystrophy. In this approach, patients' muscle precursor cells (mpcs) obtained from muscle biopsies would be expanded ex vivo, genetically modified to restore dystrophin expression and then reimplanted in the original donor. Such strategy would have the advantage of bypassing the immune response problem, but on the other hand, it would require a large number of cells because of the poor viability and mobility of transplanted myoblasts. Besides, extensive multiplication of mpcs is difficult and can affect their myogenic ability. Given the key role of inflammation in muscle regeneration, we set out to verify if factors secreted by inflammatory cells could be used to improve in vitro expansion of DMD-mpcs.

Macrophage-secreted factors enhance the in vitro expansion of DMD muscle precursor cells while preserving their myogenic potential.

Autogreffe de cellules a &eacute;t&eacute; propos&eacute; comme une approche th&eacute;rapeutique possible pour la dystrophie de Duchenne. Dans cette approche, cellules de pr&eacute;curseur de muscle des patients (PPMs) obtenus &agrave; partir de biopsies musculaires seraient &eacute;largis ex vivo, g&eacute;n&eacute;tiquement modifi&eacute;es pour restaurer l&#39;expression de la dystrophine et puis r&eacute;implant&eacute; chez le donneur original. Cette strat&eacute;gie aurait l&#39;avantage de contourner le probl&egrave;me de la r&eacute;ponse immunitaire, mais en revanche, il faudrait un grand nombre de cellules en raison de la faible viabilit&eacute; et de la mobilit&eacute; des myoblastes transplant&eacute;s. En outre, une multiplication des PPMs est difficile et peut influer sur leur capacit&eacute; myog&egrave;ne. &Eacute;tant donn&eacute; le r&ocirc;le cl&eacute; de l&#39;inflammation dans la r&eacute;g&eacute;n&eacute;ration des muscles, nous avons entrepris de v&eacute;rifier si les facteurs s&eacute;cr&eacute;t&eacute;s par des cellules inflammatoires pourraient servir &agrave; am&eacute;liorer l&#39;expansion in vitro de DMD-ppm.

Facteurs s&eacute;cr&eacute;t&eacute;s macrophage am&eacute;liorent l&#39;expansion in vitro de cellules pr&eacute;curseurs DMD musculaire tout en pr&eacute;servant leur potentiel myog&egrave;ne.

Trapianto di cellule autologhe &egrave; stato proposto come un possibile approccio terapeutico per la distrofia di Duchenne. In questo approccio, si sarebbero esteso delle precursore cellule muscolari pazienti (ppm) ottenute da biopsie muscolari ex vivo, geneticamente modificato per ripristinare dystrophin expression e poi reimpiantato nel donatore originale. Tale strategia avrebbe il vantaggio di bypassare il problema della risposta immunitaria, ma d&#39;altra parte, sarebbe necessario un gran numero di cellule a causa della scarsa vitalit&agrave; e mobilit&agrave; dei mioblasti trapiantato. Inoltre, vasta moltiplicazione di ppm &egrave; difficile e pu&ograve; influenzare la loro capacit&agrave; miogena. Dato il ruolo chiave dell&#39;infiammazione nella rigenerazione muscolare, ci siamo proposti di verificare se i fattori secreti dalle cellule infiammatorie potrebbero essere utilizzate per migliorare l&#39;espansione in vitro di DMD-ppm.

Fattori secreta dal macrofago migliorano l&#39;espansione in vitro di cellule precursori DMD muscolare pur mantenendo il loro potenziale miogena.

&#x81EA;&#x5BB6;&#x7D30;&#x80DE;&#x79FB;&#x690D;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x6CBB;&#x7642;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30B8;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;.&#x3053;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7B4B;&#x8089;&#x306E;&#x751F;&#x691C;&#x304B;&#x3089;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x7B4B;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE; (mpcs) ex vivo &#x306F;&#x3001;&#x30B8;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x5F0F;&#x3092;&#x5FA9;&#x5143;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7D44;&#x307F;&#x63DB;&#x3048;&#x3084;&#x5143;&#x30C9;&#x30CA;&#x30FC;&#x3092;&#x518D;&#x79FB;&#x690D;&#x307E;&#x3067;&#x62E1;&#x5F35;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x6226;&#x7565;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x554F;&#x984C;&#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30D1;&#x30B9;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x30E1;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C8;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x4E00;&#x65B9;&#x3067;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x8CA7;&#x3057;&#x3044;&#x4EBA;&#x3005; &#x751F;&#x5B58;&#x3068;&#x79FB;&#x690D;&#x7B4B;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x79FB;&#x52D5;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3002;&#x4EE5;&#x5916;&#x306B;&#x3082;&#x3001;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x4E57;&#x7B97; mpcs &#x306F;&#x96E3;&#x3057;&#x3044;&#x3057;&#x3001;&#x7B4B;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x708E;&#x75C7;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x306E;&#x7B4B;&#x8089;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x3092;&#x8003;&#x3048;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x8981;&#x56E0;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x6CCC;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x708E;&#x75C7;&#x7D30;&#x80DE; DMD mpcs &#x306E; in vitro &#x3067;&#x306E;&#x62E1;&#x5927;&#x3092;&#x6539;&#x5584;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3059;&#x308B;&#x8A2D;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x6CCC;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x8981;&#x56E0;&#x306E;&#x981A;&#x7B4B;&#x96FB;&#x4F4D;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089; DMD &#x7B4B;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E; in vitro &#x3067;&#x306E;&#x62E1;&#x5927;&#x3092;&#x5F37;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Autologous &#xC138;&#xD3EC; &#xC774;&#xC2DD; &#xB4C0; &#xCF04; &#xC528; &#xC601;&#xC591; &#xC7A5;&#xC560;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xBC29;&#xBC95;&#xC73C;&#xB85C; &#xC81C;&#xC548; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC811;&#xADFC; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xD658;&#xC790;&#xC758; &#xADFC;&#xC721; &#xC120;&#xAD6C;&#xC790; &#xC138;&#xD3EC; (mpcs) &#xADFC;&#xC721; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xC9C1; &#xAC80;&#xC0AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5BB;&#xC740; ex vivo &#xC720;&#xC804;&#xC790; dystrophin &#xC2DD; &#xBCF5;&#xC6D0; &#xD558;&#xB3C4;&#xB85D; &#xC218;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E4;&#xC74C; &#xC6D0;&#xB798; &#xAE30;&#xC99D;&#xC790;&#xC5D0; reimplanted &#xD655;&#xC7A5; &#xB420; &#xAC83; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC804;&#xB7B5; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751; &#xBB38;&#xC81C;&#xB97C; &#xC6B0;&#xD68C;&#xC758; &#xC774;&#xC810;&#xC744; &#xC788;&#xB294; &#xAC83; &#xC788;&#xC5C8;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB2E4;&#xB978; &#xD55C;&#xD3B8;&#xC73C;&#xB85C;, &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB9CE;&#xC740; &#xAC00;&#xB09C;&#xD55C; &#xC0DD;&#xC874; &#xBC0F; &#xC774;&#xC2DD;&#xB41C; myoblasts&#xC758; &#xC774;&#xB3D9;&#xC131; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0;. &#xAC8C;&#xB2E4;&#xAC00;, mpcs&#xC758; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xACF1;&#xC148; &#xC5B4;&#xB835;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC870;&#xC9C1;&#xC801; &#xB2A5;&#xB825;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE60; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADFC;&#xC721; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC5D0; &#xC5FC;&#xC99D;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xAC10;&#xC548;&#xD560; &#xB54C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBC16;&#xC73C;&#xB85C; &#xC124;&#xC815; &#xD655;&#xC778; &#xC694;&#xC778;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBD84; &#xBE44; &#xB418; &#xBA74; &#xC5FC;&#xC99D; &#xC138;&#xD3EC; DMD mpcs&#xC758; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678; &#xD655;&#xB300;&#xB97C; &#xAC1C;&#xC120; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84; &#xBE44; &#xC694;&#xC778; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC870;&#xC9C1;&#xC801; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xBA74;&#xC11C; DMD &#xADFC;&#xC721; &#xC804;&#xC870; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678; &#xD655;&#xB300; &#xAC15;&#xD654;.

Trasplante aut&oacute;logo de c&eacute;lulas se ha propuesto como un posible enfoque terap&eacute;utico para la distrofia de Duchenne. En este enfoque, se ampliar&iacute;an las precursor c&eacute;lulas musculares pacientes (PSM) obtenidas de las biopsias del m&uacute;sculo ex vivo, gen&eacute;ticamente modificado para restaurar la expresi&oacute;n de distrofina y luego reimplantados en donante original. Estrategia de este tipo tendr&iacute;a la ventaja de pasar por el problema de la respuesta inmune, pero por otra parte, requerir&iacute;a una gran cantidad de c&eacute;lulas debido a la pobre viabilidad y movilidad de mioblastos trasplantados. Adem&aacute;s, amplia multiplicaci&oacute;n de mpcs es dif&iacute;cil y puede afectar su capacidad mi&oacute;gena. Dado el papel clave de la inflamaci&oacute;n en la regeneraci&oacute;n muscular, nos propusimos comprobar si factores secretan por las c&eacute;lulas inflamatorias podr&iacute;an utilizarse para mejorar la expansi&oacute;n in vitro de DMD-PSM.

Macr&oacute;fagos secretan factores potenciar la expansi&oacute;n in vitro de c&eacute;lulas precursoras DMD m&uacute;sculo conservando su potencial mi&oacute;geno.

&#x9AA8;&#x9ABC;&#x808C;&#x518D;&#x751F;&#x4F9D;&#x8D56;&#x536B;&#x661F;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x6210;&#x808C;&#x524D;&#x4F53;&#x7684;&#x4EBA;&#x53E3;&#x3002;&#x708E;&#x75C7;&#x4E5F;&#x6709;&#x4F5C;&#x7528;&#x884C;&#x5217;&#x5F0F;&#x5728;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5982;&#x635F;&#x4F24;&#xFF0C;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x88AB;&#x635F;&#x574F;&#x7684; myofibers &#x548C;&#x6D3B;&#x5316;&#x7684;&#x536B;&#x661F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6240;&#x5438;&#x5F15;&#x5E76;&#x5145;&#x5F53;&#x52A8;&#x6001;&#x808C;&#x8089;&#x652F;&#x6301;&#x57FA;&#x8D28;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x8981;&#x7D20;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x4F17;&#x6240;&#x5468;&#x77E5;&#x662F;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x536B;&#x661F;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5229;&#x57FA;&#x7684;&#x66F4;&#x6DF1;&#x523B;&#x7684;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x4EA4;&#x4E92;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x6DB2; (mMCM) &#x7684;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E9A;&#x7FA4;&#x53EF;&#x80FD;&#x88AB;&#x9009;&#x5B9A;&#x548C;&#x6210;&#x5E74;&#x5927;&#x9F20;&#x808C;&#x8089;&#x4ECE;&#x6269;&#x5927;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5F88;&#x5C0F;&#xFF0C;&#x5706;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x5584;&#x80F6;&#x7C98;&#x5242;&#xFF0C;&#x751F;&#x957F;&#x7F13;&#x6162;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x95F4;&#x5145;&#x8D28;&#x5206;&#x5316;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x3002;&#x540C;&#x65F6;&#xFF0C;mMCM &#x663E;&#x793A;&#x6E05;&#x6670;&#x751F;&#x808C;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x5982;&#x536B;&#x661F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x673A;&#x68B0;&#x5206;&#x79BB;&#x60AC;&#x67B6;&#x7684;&#x5355;&#x4E00; myofibers &#x663E;&#x793A;&#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x56E0;&#x7D20;&#x6291;&#x5236;&#x6210;&#x8102;&#x5C31;&#x4F1A;&#x8F6C;&#x5411;&#x7684;&#x503E;&#x5411;&#x3002;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#xFF0C;&#x808C;&#x6CE8;&#x884C;&#x653F;&#x90E8;&#x95E8;&#x96C6;&#x4E2D; mMCM &#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x5916;&#x79D1;&#x6D88;&#x878D;&#x5927;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#x7684;&#x6781;&#x5927;&#x6539;&#x5584;&#x808C;&#x8089;&#x518D;&#x751F;&#x3002;&#x4E00;&#x5171;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x56E0;&#x7D20;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x5F88;&#x5927;&#x7684;&#x5E2E;&#x52A9;&#xFF0C;&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x4E0E;&#x808C;&#x6E90;&#x6027;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x65B9;&#x6848;&#x3002;

&#x9009;&#x62E9;&#x7684;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x589E;&#x5F3A;&#x7684;&#x808C;&#x8089;&#x91CD;&#x5EFA;&#x7531;&#x808C;&#x6E90;&#x6027;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x6CCC;&#x7684;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;

Skeletal muscle regeneration relies on satellite cells, a population of myogenic precursors. Inflammation also plays a determinant role in the process, as upon injury, macrophages are attracted by the damaged myofibers and the activated satellite cells and act as key elements of dynamic muscle supportive stroma. Yet, it is not known how macrophages interact with the more profound stem cells of the satellite cell niche. Here we show that in the presence of a murine macrophage conditioned medium (mMCM) a subpopulation of multipotent cells could be selected and expanded from adult rat muscle. These cells were small, round, poorly adhesive, slow-growing and showed mesenchymal differentiation plasticity. At the same time, mMCM showed clear myogenic capabilities, as experiments with satellite cells mechanically isolated from suspensions of single myofibers showed that the macrophagic factors inhibited their tendency to shift towards adipogenesis. In vivo, intramuscular administrations of concentrated mMCM in a rat model of extensive surgical ablation dramatically improved muscle regeneration. Altogether, these findings suggest that macrophagic factors could be of great help in developing therapeutic protocols with myogenic stem cells.

Selection of multipotent cells and enhanced muscle reconstruction by myogenic macrophage-secreted factors.

La r&eacute;g&eacute;n&eacute;ration du muscle squelettique d&eacute;pend de cellules satellites, une population de pr&eacute;curseurs myog&eacute;niques. L&#39;inflammation joue &eacute;galement un r&ocirc;le d&eacute;terminant dans le processus, comme sur les blessures, les macrophages sont attir&eacute;s par les fibres musculaires endommag&eacute;es et les cellules satellites activ&eacute;es et agissent comme des &eacute;l&eacute;ments cl&eacute;s du stroma soutien musculaire dynamique. Pourtant, on ne sait pas comment les macrophages interagissent avec les cellules souches les plus profondes de la niche de cellules satellites. Ici, nous montrons que, en pr&eacute;sence d&#39;un macrophage murin, milieu conditionn&eacute; (mMCM) une sous-population de cellules multipotentes pourrait &ecirc;tre s&eacute;lectionn&eacute; et &eacute;tendu des muscles de rats adultes. Ces cellules ont petites, ronde, colle mal, croissance lente et plasticit&eacute; de diff&eacute;renciation m&eacute;senchymateuses. Dans le m&ecirc;me temps, mMCM a montr&eacute; des capacit&eacute;s clair myog&egrave;nes, exp&eacute;riences avec les cellules satellites m&eacute;caniquement isolement de suspensions de fibres musculaires simples montrent que les facteurs myofasciites inhibent leur tendance &agrave; se d&eacute;placer vers l&#39;adipogen&egrave;se. Administrations in vivo, intramusculaires de mMCM concentr&eacute; dans un mod&egrave;le de rat d&#39;ablation chirurgicale &eacute;tendue a consid&eacute;rablement am&eacute;lior&eacute; la r&eacute;g&eacute;n&eacute;ration musculaire. Au total, ces r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que les facteurs myofasciites pourraient &ecirc;tre d&#39;une grande aide dans l&#39;&eacute;laboration des protocoles th&eacute;rapeutiques avec des cellules souches myog&eacute;niques.

S&eacute;lection de cellules multipotentes et reconstruction musculaire accrue par des facteurs myog&egrave;nes macrophage-s&eacute;cr&eacute;t&eacute;e.

Rigenerazione muscolare scheletrico si basa su cellule satellite, una popolazione di miogena precursori. L&#39;infiammazione svolge un ruolo determinante nel processo, come lesioni, macrofagi sono attratti dai myofibers danneggiate e le cellule satellite attivate e agiscono come elementi chiave di stroma di sostegno muscolare dinamica. Eppure, non &egrave; noto come macrofagi interagiscono con le cellule staminali pi&ugrave; profonde della nicchia delle cellule satellite. Qui vi mostriamo che in presenza di un macrofago murino medio condizionato (mMCM) una sottopopolazione di cellule multipotenti potrebbe essere selezionato e ampliato dal muscolo di ratto adulto. Queste cellule erano piccole, rotondi, poco adesivo, crescita lenta e hanno mostrato la plasticit&agrave; di differenziazione mesenchimale. Allo stesso tempo, mMCM ha mostrato capacit&agrave; di chiara miogena, come esperimenti con cellule satellite meccanicamente isolato da sospensioni di singolo myofibers mostr&ograve; che i fattori Miofasciti inibiscono la loro tendenza a spostarsi verso adipogenesi. Amministrazioni in vivo, intramuscolare di mMCM concentrato in un modello del ratto di ablazione chirurgica estesa notevolmente migliorato la rigenerazione muscolare. Complessivamente, questi risultati suggeriscono che fattori Miofascite potrebbero essere di grande aiuto nello sviluppo di protocolli terapeutici con cellule staminali miogena.

Selezione di cellule multipotenti e ricostruzione muscolare migliorata da fattori miogena secreta dal macrofago.

&#x9AA8;&#x683C;&#x7B4B;&#x518D;&#x751F;&#x7B4B;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x306E;&#x4EBA;&#x53E3;&#x885B;&#x661F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x50B7;&#x5BB3;&#x3001;&#x6642;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x640D;&#x50B7;&#x7B4B;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x3068;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x885B;&#x661F;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x4ED8;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x52D5;&#x7684;&#x7B4B;&#x652F;&#x6301;&#x9593;&#x8CEA;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8981;&#x7D20;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x884C;&#x52D5;&#x3068;&#x708E;&#x75C7;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x62C5;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x3060;&#x3001;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x304C;&#x885B;&#x661F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C1;&#x306E;&#x3088;&#x308A;&#x6DF1;&#x9060;&#x306A;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306F;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x99B4;&#x5316;&#x57F9;&#x5730; (mMCM) &#x7D30;&#x80DE;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x9078;&#x629E;&#x3057;&#x3001;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x7B4B;&#x8089;&#x304B;&#x3089;&#x62E1;&#x5927;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x9045;&#x3044;&#x4E0D;&#x5341;&#x5206;&#x306A;&#x63A5;&#x7740;&#x5264;&#x30E9;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C9;&#x3001;&#x5C0F;&#x3055;&#x304F;&#x3066;&#x3001;&#x9593;&#x8449;&#x5206;&#x5316;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x885B;&#x661F;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306F;&#x6A5F;&#x68B0;&#x7684;&#x306B;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x540C;&#x6642;&#x306B;&#x3001;mMCM &#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x7B4B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x7B4B;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x306E;&#x61F8;&#x6FC1;&#x6DB2; macrophagic &#x8981;&#x56E0;&#x8102;&#x80AA;&#x7D30;&#x80DE;&#x5F62;&#x6210;&#x3078;&#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x50BE;&#x5411;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6FC3;&#x7E2E; mMCM &#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x5916;&#x79D1;&#x7684;&#x5207;&#x9664;&#x306E;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;&#x653F;&#x6A29;&#x306E;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x3001;&#x7B4B;&#x8089;&#x306F;&#x7B4B;&#x518D;&#x751F;&#x5287;&#x7684;&#x306B;&#x6539;&#x5584;&#x3002;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x3001;&#x7B4B;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x52A9;&#x3051; macrophagic &#x306E;&#x8981;&#x56E0;&#x3068;&#x306A;&#x308A;&#x5F97;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x7B4B;&#x539F;&#x6027;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x6CCC;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x8981;&#x56E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7B4B;&#x8089;&#x5FA9;&#x8208;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x3002;

&#xACE8;&#xACA9; &#xADFC;&#xC721; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xC704;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC;, &#xC870;&#xC9C1;&#xC801; &#xC120;&#xAD6C;&#xC790;&#xC758; &#xC778;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC758;&#xC874;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5FC;&#xC99D; &#xB610;&#xD55C; &#xC5ED;&#xD560; &#xACB0;&#xC815; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD80;&#xC0C1;, &#xC2DC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC190;&#xC0C1; &#xB41C; myofibers &#xBC0F; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC704;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB9E4;&#xB8CC; &#xD558; &#xACE0; &#xB3D9;&#xC801; &#xADFC;&#xC721; &#xC9C0;&#xC9C0; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB85C; &#xB9C8;&#xC758; &#xD575;&#xC2EC; &#xC694;&#xC18C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC704;&#xC131; &#xD734;&#xB300; &#xD2C8;&#xC0C8;&#xC758; &#xB354; &#xAE4A;&#xC740; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC744; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4; murine &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC870;&#xC808;&#xB41C; &#xB9E4;&#xCCB4; (mMCM) multipotent &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBD80;&#xBD84; &#xBAA8;&#xC9D1;&#xB2E8; &#xC218; &#xC788;&#xC744; &#xC120;&#xD0DD; &#xC131;&#xC778; &#xC950; &#xADFC;&#xC721;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD655;&#xC7A5;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC791;&#xC740;, &#xB77C;&#xC6B4;&#xB4DC;, &#xC800;&#xC870;&#xD55C; &#xC811;&#xCC29;&#xC81C;, &#xB290;&#xB9AC;&#xAC8C; &#xC131;&#xC7A5; &#xD588;&#xB2E4; &#xACE0; &#xC5FD; &#xBD84;&#xD654;&#xAC00; &#xC18C;&#xC131;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xAC19;&#xC740; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC5D0; mMCM &#xBCF4;&#xC5EC; &#xBD84;&#xBA85; &#xC870;&#xC9C1;&#xC801; &#xAE30;&#xB2A5;, &#xC704;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE30;&#xACC4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xACE0;&#xB9BD;&#xC73C;&#xB85C; &#xB2E8;&#xC77C; myofibers &#xC815;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4; macrophagic &#xC694;&#xC778; adipogenesis &#xCABD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xB3D9; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xD5A5;&#xC774; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC800;&#xD574;. &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xC218;&#xC220; &#xC808;&#xC81C;&#xC758; &#xC950; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9D1;&#xC911;&#xB41C; Mmcm&#xC758; in vivo, &#xADFC;&#xC721; &#xB0B4; &#xD589;&#xC815; &#xADFC;&#xC721; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC744; &#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD5A5;&#xC0C1;. &#xC804;&#xBD80;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; macrophagic &#xC694;&#xC778; &#xC870;&#xC9C1;&#xC801; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xD070; &#xB3C4;&#xC6C0;&#xC774; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Multipotent &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84; &#xBE44; &#xC870;&#xC9C1;&#xC801; &#xC694;&#xC778;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xADFC;&#xC721; &#xC7AC;&#xAC74;&#xC758; &#xC120;&#xD0DD;.

Regeneraci&oacute;n del m&uacute;sculo esquel&eacute;tico depende de c&eacute;lulas sat&eacute;lite, una poblaci&oacute;n de precursores mi&oacute;genas. Inflamaci&oacute;n tambi&eacute;n juega un papel determinante en el proceso, como lesiones, macr&oacute;fagos son atra&iacute;dos por el myofibers da&ntilde;ado y las c&eacute;lulas sat&eacute;lite activadas y act&uacute;an como elementos claves del estroma apoyo din&aacute;mico del m&uacute;sculo. Sin embargo, no se sabe c&oacute;mo interact&uacute;an con las c&eacute;lulas m&aacute;s profundas del nicho de c&eacute;lula sat&eacute;lite los macr&oacute;fagos. Aqu&iacute; mostramos que en presencia de un macr&oacute;fago murino medio condicionado (mMCM) una subpoblaci&oacute;n de c&eacute;lulas pluripotentes podr&iacute;a ser seleccionado y ampliado del m&uacute;sculo de rata adulta. Estas c&eacute;lulas fueron peque&ntilde;as, redondos, adhesivo mal, lenta y demostraron la plasticidad de la diferenciaci&oacute;n mesenquimal. Al mismo tiempo, mMCM demostr&oacute; capacidades claro mi&oacute;genas, como experimentos con c&eacute;lulas sat&eacute;lite mec&aacute;nicamente aislaron de suspensiones de myofibers solo demostraron que los factores macrof&aacute;gica inhibici&oacute;n su tendencia a cambiar de puesto hacia la adipog&eacute;nesis. In vivo, intramusculares administraciones de mMCM concentrado en un modelo de rata de ablaci&oacute;n quir&uacute;rgica extensa mejoraron dram&aacute;ticamente la regeneraci&oacute;n muscular. En conjunto, estos resultados sugieren que factores macrof&aacute;gica podr&iacute;an ser de gran ayuda en el desarrollo de protocolos terap&eacute;uticos con c&eacute;lulas mi&oacute;genas.

Selecci&oacute;n de c&eacute;lulas pluripotentes y reconstrucci&oacute;n muscular mejorada por factores miog&eacute;nicos secretada por macr&oacute;fagos.

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&#x8F6F;&#x886C;&#x5E95;&#x9A71;&#x52A8;&#x4F18;&#x5316;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x5065;&#x5EB7;&#x548C;&#x8425;&#x517B;&#x4E0D;&#x826F;&#x808C;&#x7BA1;&#x3002;

The in vitro development of human myotubes carrying genetic diseases, such as Duchenne Muscular Dystrophy, will open new perspectives in the identification of innovative therapeutic strategies. Through the proper design of the substrate, we guided the differentiation of human healthy and dystrophic myoblasts into myotubes exhibiting marked functional differentiation and highly defined sarcomeric organization. A thin film of photo cross-linkable elastic poly-acrylamide hydrogel with physiological-like and tunable mechanical properties (elastic moduli, E: 12, 15, 18 and 21 kPa) was used as substrate. The functionalization of its surface by micro-patterning in parallel lanes (75 microm wide, 100 microm spaced) of three adhesion proteins (laminin, fibronectin and matrigel) was meant to maximize human myoblasts fusion. Myotubes formed onto the hydrogel showed a remarkable sarcomere formation, with the highest percentage (60.0% +/- 3.8) of myotubes exhibiting sarcomeric organization, of myosin heavy chain II and alpha-actinin, after 7 days of culture onto an elastic (15 kPa) hydrogel and a matrigel patterning. In addition, healthy myotubes cultured in these conditions showed a significant membrane-localized dystrophin expression. In this study, the culture substrate has been adapted to human myoblasts differentiation, through an easy and rapid methodology, and has led to the development of in vitro human functional skeletal muscle myotubes useful for clinical purposes and in vitro physiological study, where to carry out a broad range of studies on human muscle physiopathology.

Soft substrates drive optimal differentiation of human healthy and dystrophic myotubes.

Le d&eacute;veloppement in vitro des myotubes humains porteurs de maladies g&eacute;n&eacute;tiques, comme la dystrophie musculaire de Duchenne, ouvrira de nouvelles perspectives dans l&#39;identification des strat&eacute;gies th&eacute;rapeutiques innovantes. Par le biais de la conception appropri&eacute;e du substrat, nous guider la diff&eacute;renciation de l&#39;homme sain et dystrophiques myoblastes en pr&eacute;sentant des myotubes marqu&eacute; la diff&eacute;renciation fonctionnelle et bien d&eacute;finies du sarcom&egrave;re organisation. Une couche mince d&#39;hydrogel r&eacute;ticulable &eacute;lastique poly-acrylamide photo avec les propri&eacute;t&eacute;s m&eacute;caniques physiologiques semblables et accordables (&eacute;lasticit&eacute;, E: 12, 15, 18 et 21 kPa) a &eacute;t&eacute; utilis&eacute;e comme substrat. La fonctionnalisation de sa surface par micro-structuration dans les voies parall&egrave;les (75 microm large, microm 100 espac&eacute;es) d&#39;adh&eacute;rence trois prot&eacute;ines (fibronectine, laminine et matrigel) &eacute;tait destin&eacute; &agrave; maximiser la fusion des myoblastes humaine. Les myotubes form&eacute; sur l&#39;hydrogel ont montr&eacute; une formation remarquable sarcom&egrave;re, avec le pourcentage le plus &eacute;lev&eacute; (60,0 % +/-3,8) des myotubes pr&eacute;sentant une organisation du sarcom&egrave;re, de la cha&icirc;ne lourde de myosine II et alpha-actinine, apr&egrave;s 7 jours de culture sur un hydrogel (15 kPa) &eacute;lastique et une structuration de matrigel. En outre, les myotubes sains cultiv&eacute;s dans ces conditions ont montr&eacute; une expression significative de dystrophine membranaire localis&eacute;e. Dans cette &eacute;tude, le substrat de culture a &eacute;t&eacute; adapt&eacute; &agrave; la diff&eacute;renciation des myoblastes humaine, gr&acirc;ce &agrave; une m&eacute;thode simple et rapide et a conduit &agrave; l&#39;&eacute;laboration des myotubes in vitro muscle squelettique humain et fonctionnels utiles &agrave; des fins cliniques et une &eacute;tude physiologique in vitro, o&ugrave; effectuer un large &eacute;ventail d&#39;&eacute;tudes sur la physiopathologie du muscle humain.

Substrats mous conduire diff&eacute;renciation optimale des humains myotubes sains et dystrophiques.

Lo sviluppo in vitro di myotubes umani portatori di malattie genetiche, come la distrofia muscolare di Duchenne, aprir&agrave; nuove prospettive nell&#39;identificazione di strategie terapeutiche innovative. Attraverso la corretta progettazione del substrato, abbiamo guidato la differenziazione degli umani sani e distrofiche myoblasts in myotubes espositrici contrassegnato differenziazione funzionale e altamente definita sarcomero organizzazione. Un sottile film di idrogel reticolabile poliacrilammide elastico foto con propriet&agrave; meccaniche parafisiologiche e sintonizzabile (moduli elastici, e.: 12, 15, 18 e 21 kPa) &egrave; stato utilizzato come substrato. La funzionalizzazione della sua superficie da micro-patterning in corsie parallele (75 microm ampia, 100 microm distanziati) di adesione tre proteine (laminina, fibronectina e matrigel) &egrave; stata pensata per massimizzare la fusione dei mioblasti umani. Myotubes formata su idrogel ha mostrato una formazione notevole sarcomero, con la pi&ugrave; alta percentuale (60,0% + /-3.8) di myotubes espositrici sarcomero organizzazione, delle catene pesanti della miosina II e alfa-actinina, dopo 7 giorni di cultura su un idrogel elastico (15 kPa) e una serie di matrigel. Inoltre, myotubes sani coltivati in queste condizioni hanno mostrato una significativa localizzata con membrana dystrophin expression. In questo studio, il substrato di coltura &egrave; stato adattato alla differenziazione myoblasts umano, attraverso una metodologia facile e veloce e ha portato allo sviluppo del muscolo scheletrico funzionali umane in vitro myotubes utile per scopi clinici e studio fisiologico in vitro, dove effettuare una vasta gamma di studi sulla Fisiopatologia del muscolo umano.

Substrati molli auto differenziazione ottimale di myotubes umani sani e distrofiche.

&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x75BE;&#x60A3;&#x3001;&#x30C7;&#x30E5;&#x30B7;&#x30A7;&#x30F3;&#x30CC;&#x578B;&#x7B4B;&#x30B8;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x306A;&#x3069;&#x306E; in vitro &#x3067;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x9769;&#x65B0;&#x7684;&#x306A;&#x6CBB;&#x7642;&#x6226;&#x7565;&#x306E;&#x8B58;&#x5225;&#x306B;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x8996;&#x70B9;&#x304C;&#x958B;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x57FA;&#x677F;&#x306E;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x8A2D;&#x8A08;&#x3001;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x5065;&#x5EB7;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3068;&#x306B;&#x5C55;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3042;&#x308B;&#x30B8;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x7B4B;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AF;&#x3057;&#x9AD8;&#x30B5;&#x30EB;&#x30B3;&#x30E1;&#x30A2;&#x7D44;&#x7E54;&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5199;&#x771F;&#x67B6;&#x6A4B;&#x5F3E;&#x6027;&#x30DD;&#x30EA; &#x30A2;&#x30AF;&#x30EA;&#x30EB;&#x30A2;&#x30DF;&#x30C9; &#x30CF;&#x30A4;&#x30C9;&#x30ED;&#x30B2;&#x30EB;&#x751F;&#x7406;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x3068;&#x53EF;&#x5909;&#x306E;&#x6A5F;&#x68B0;&#x7684;&#x7279;&#x6027; (&#x5F3E;&#x6027;&#x4FC2;&#x6570;, e: 12&#x3001;15&#x3001;18&#x3001;21 kPa) &#x3067;&#x306E;&#x8584;&#x819C;&#x57FA;&#x677F;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x4E26;&#x5217;&#x30EC;&#x30FC;&#x30F3; &#xFF08;75 microm &#x5E45;&#x3001;&#x9593;&#x9694; 100 &#x306E; microm&#xFF09; &#x3067;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8868;&#x9762;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x5316;&#x306E; 3 &#x3064;&#x306E;&#x63A5;&#x7740;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; (&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30F3;, &#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30ED;&#x30CD;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30B2;&#x30EB;) &#x4EBA;&#x9593;&#x7B4B;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x878D;&#x5408;&#x3092;&#x6700;&#x5927;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x610F;&#x56F3;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3042;&#x308B;&#x5272;&#x5408;&#x304C;&#x6700;&#x3082;&#x9AD8;&#x3044;&#x306E; (60.0 %3.8 &#x306E; +/-) &#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x6587;&#x5316;&#x3001;&#x5F3E;&#x6027; (15 kPa) &#x30CF;&#x30A4;&#x30C9;&#x30ED;&#x30B2;&#x30EB;&#x3068;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30B2;&#x30EB; &#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E; 7 &#x65E5;&#x5F8C;&#x3001;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x91CD;&#x9396; II &#x3068; &alpha;-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x30B5;&#x30EB;&#x30B3;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x3092;&#x5C55;&#x793A;&#x3068;&#x306E;&#x9855;&#x8457;&#x306A;&#x30B5;&#x30EB;&#x30B3;&#x30E1;&#x30A2;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30B2;&#x30EB;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6761;&#x4EF6;&#x3067;&#x57F9;&#x990A;&#x3057;&#x305F;&#x5065;&#x5EB7;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x819C;&#x5C40;&#x5728;&#x30B8;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x5F0F;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;, &#x6587;&#x5316;&#x57FA;&#x677F;&#x3092;&#x7C21;&#x5358;&#x304B;&#x3064;&#x8FC5;&#x901F;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8AD6;&#x3092;&#x901A;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x7B4B;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x306B;&#x9069;&#x5FDC;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3057;&#x3001;in vitro &#x3067;&#x3072;&#x3068;&#x9AA8;&#x683C;&#x7B4B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x5F79;&#x306B;&#x7ACB;&#x3064;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x81E8;&#x5E8A;&#x4E0A;&#x306E;&#x76EE;&#x7684;&#x3068; in vitro &#x3067;&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3069;&#x3053;&#x306B;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x7B4B;&#x8089;&#x751F;&#x7406;&#x75C5;&#x7406;&#x5B66;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x7BC4;&#x56F2;&#x3092;&#x904B;&#x3076;&#x3002;

&#x30BD;&#x30D5;&#x30C8;&#x57FA;&#x677F;&#x306E;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x5065;&#x5EB7;&#x3068;&#x6804;&#x990A;&#x5931;&#x8ABF;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x6700;&#x9069;&#x306A;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x99C6;&#x52D5;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC778;&#xAC04; myotubes &#xC720;&#xC804; &#xC9C8;&#xBCD1;, &#xAC19;&#xC740; &#xB4C0; &#xCF04; &#xC528; &#xADFC;&#xC774; &#xC601;&#xC591; &#xC99D;, &#xC6B4;&#xBC18;&#xC758; &#xCCB4; &#xC678; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xD601;&#xC2E0;&#xC801;&#xC778; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC804;&#xB7B5;&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xC5D0; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC2DC;&#xAC01;&#xC744; &#xC5F4; &#xAC83; &#xC774;&#xB2E4;. &#xAE30;&#xD310;&#xC758; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xB514;&#xC790;&#xC778;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xAC74;&#xAC15; &#xD55C; &#xBD84;&#xD654; &#xC720;&#xB3C4; &#xBC0F; myotubes &#xC804;&#xC2DC;&#xC5D0; dystrophic myoblasts &#xD45C;&#xC2DC; &#xAE30;&#xB2A5; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xC640; &#xB192;&#xC740; &#xC815;&#xC758; sarcomeric &#xC870;&#xC9C1;. &#xC0AC;&#xC9C4; cross-linkable &#xD0C4;&#xC131; &#xD3F4; &#xB9AC; &#xC544;&#xD06C;&#xB9B4; &#xD558;&#xC774;&#xB4DC;&#xB85C; &#xAC94; &#xAC19;&#xC740; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xBC0F; &#xC870;&#xC815;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xAE30;&#xACC4;&#xC801; &#xC131;&#xC9C8; (&#xD0C4;&#xC131; &#xACC4;&#xC218;, e: 12, 15, 18, 21 kPa)&#xC640; &#xBC15;&#xB9C9; &#xAE30;&#xD310;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xBCD1;&#xB82C; &#xB808;&#xC778; (75 microm &#xD3ED;, &#xAC04;&#xACA9; 100 microm)&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xD328;&#xD130; &#xB2DD;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xD45C;&#xBA74;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xD654; 3 &#xC811;&#xCC29;&#xC758; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (laminin, fibronectin matrigel) &#xC778;&#xAC04;&#xC758; myoblasts &#xD4E8;&#xC804;&#xC744; &#xCD5C;&#xB300;&#xD654; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC758;&#xBBF8; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Myotubes &#xC804;&#xC2DC; &#xBB38;&#xD654;&#xC758; &#xD0C4;&#xC131; (15 kPa) &#xD558;&#xC774;&#xB4DC;&#xB85C; &#xAC94; &#xBC0F; matrigel &#xD328;&#xD130; &#xB2DD;&#xC5D0; 7 &#xC77C; &#xD6C4; myosin &#xBB34;&#xAC70;&#xC6B4; &#xC0AC;&#xC2AC; II &#xBC0F; &#xC54C;&#xD30C; actinin sarcomeric &#xC870;&#xC9C1; myotubes&#xC758; &#xAC00;&#xC7A5; &#xB192;&#xC740; &#xBE44;&#xC728; (60.0 %3.8 + /-) &#xB180;&#xB77C;&#xC6B4; sarcomere &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900; &#xD558;&#xC774;&#xB4DC;&#xB85C; &#xAC94;&#xC5D0; &#xD615;&#xC131;. &#xB610;&#xD55C;, &#xAC74;&#xAC15; &#xD55C; myotubes &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC30;&#xC591; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xB9C9; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; dystrophin &#xC2DD;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBB38;&#xD654; &#xAE30;&#xD310; &#xC27D;&#xACE0; &#xBE60;&#xB978; &#xBC29;&#xBC95;&#xB860;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; myoblasts &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xC5D0; &#xC801;&#xC751; &#xB418; &#xACE0; &#xC784;&#xC0C1; &#xBAA9;&#xC801; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xACE8;&#xACA9; &#xADFC; myotubes &#xC720;&#xC6A9;&#xD55C;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xC8FC;&#xB3C4;&#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xB2E4; &#xC5B4;&#xB514;&#xC5D0; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xADFC;&#xC721; physiopathology&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC218;&#xD589; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBD80;&#xB4DC;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xAE30;&#xD310; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xAC74;&#xAC15; &#xD558; &#xACE0; dystrophic myotubes&#xC758; &#xCD5C;&#xC801;&#xC758; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB4DC;&#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;.

El desarrollo in vitro de miotubos humana llevando enfermedades gen&eacute;ticas como la Distrofia Muscular de Duchenne, abrir&aacute; nuevas perspectivas en la identificaci&oacute;n de estrategias terap&eacute;uticas innovadoras. Mediante el dise&ntilde;o adecuado del sustrato, gui&oacute; la diferenciaci&oacute;n del ser humano sano y distr&oacute;ficos mioblastos a miotubos exhibiendo marcan diferenciaci&oacute;n funcional y altamente definici&oacute;n sarcomeric organizaci&oacute;n. Una capa delgada de foto el&aacute;stico reticulable del polivin&iacute;lico-acrilamida hidrogel con propiedades mec&aacute;nicas como fisiol&oacute;gico y armoniosas (m&oacute;dulos el&aacute;sticos, E: 12, 15, 18 y 21 kPa) se utiliz&oacute; como sustrato. La funcionalizaci&oacute;n de su superficie por micro-patrones en carriles paralelos (75 microm de ancho, 100 microm espaciadas) de adhesi&oacute;n tres prote&iacute;nas (laminina, fibronectina y matrigel) estaba destinado a maximizar la fusi&oacute;n de mioblastos humanos. Miotubos forman sobre el hidrogel demostrado la formaci&oacute;n de una sarc&oacute;mero notable, con el mayor porcentaje (60.0% +/-3.8) de miotubos que exhibe la organizaci&oacute;n sarcomeric, de la cadena pesada de la miosina II y alfa-actinina, despu&eacute;s de 7 d&iacute;as de la cultura en un hidrogel (15 kPa) el&aacute;stico y un patr&oacute;n matrigel. Adem&aacute;s, sana miotubos cultivados en estas condiciones demostraron una expresi&oacute;n significativa dystrophin localizada en la membrana. En este estudio, el substrato de la cultura ha sido adaptado a la diferenciaci&oacute;n de mioblastos humanos, a trav&eacute;s de una metodolog&iacute;a f&aacute;cil y r&aacute;pida y ha llevado al desarrollo de m&uacute;sculo esquel&eacute;tico funcional humana in vitro miotubos &uacute;tiles para prop&oacute;sitos cl&iacute;nicos y estudio fisiol&oacute;gico in vitro, donde llevar a cabo una amplia gama de estudios sobre Fisiopatolog&iacute;a del m&uacute;sculo humano.

Substratos suaves unidad &oacute;ptima diferenciaci&oacute;n de humano sano y distr&oacute;ficos miotubos.

&#x885B;&#x661F;&#x7D30;&#x80DE; &#xFF08;SCs&#xFF09; &#x306F;&#x3001;&#x7B4B;&#x8089;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3057;&#x3001;&#x7A4D;&#x6975;&#x7684;&#x306A;&#x518D;&#x751F;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x5927;&#x4EBA;&#x306E;&#x9AA8;&#x683C;&#x7B4B;&#x306B;&#x529B;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x6291;&#x5727;&#x7684;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B3;&#x30FC;&#x30E0;-&#x306A;&#x8907;&#x96D1;&#x306A; 2 &#xFF08;PRC2 &#x306E;&#xFF09;&#x3001;&#x9175;&#x7D20;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8; ezh2 &#x306F;&#x4E21;&#x65B9; Pax7 &#x3067;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x5831;&#x544A; + Myf5&#x207B; &#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x30FB; Pax7 + Myf5 + &#x30B3;&#x30DF;&#x30C3;&#x30C8;&#x7B4B;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x3068;&#x5927;&#x4EBA;&#x7528;&#x306E; SC &#x30D7;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x6052;&#x5E38;&#x6027;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6761;&#x4EF6;&#x4ED8;&#x304D;&#x306E;&#x30A2;&#x30D6;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; ezh2 &#x306F; SCs &#x3067;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x5C11;&#x306A;&#x3044;&#x7B4B;&#x8089;&#x7523;&#x5F8C; Pax7 + &#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x7B4B;&#x8CEA;&#x91CF;&#x3057;&#x3001;&#x9069;&#x5207;&#x306B;&#x518D;&#x751F;&#x6210;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x969C;&#x5BB3;&#x306E; SC &#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x975E;&#x7D30;&#x80DE;&#x7CFB;&#x8B5C;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x304C;&#x89E3;&#x9664;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;ezh2 &#x306F;&#x81EA;&#x5DF1;&#x8907;&#x88FD;&#x3068;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3057;&#x3001;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x8EE2;&#x5199;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0; SCs &#x3067;&#x7DAD;&#x6301;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DD;&#x30EA;&#x30B3;&#x30FC;&#x30E0; ezh2 &#x306F;&#x81EA;&#x5DF1;&#x8907;&#x88FD;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3057;&#x3001;&#x9AA8;&#x683C;&#x7B4B;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x306E; id &#x3092;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x536B;&#x661F;&#x7EC6;&#x80DE; (SCs) &#x7EF4;&#x6301;&#x808C;&#x8089;&#x751F;&#x957F;&#x548C;&#x589E;&#x5F3A;&#x6210;&#x4EBA;&#x9AA8;&#x9ABC;&#x808C;&#x4E0E;&#x6709;&#x529B;&#x7684;&#x518D;&#x751F;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A; EZH2 Polycomb &#x9547;&#x538B;&#x590D;&#x6742; 2 (PRC2) &#x7684;&#x9176;&#x4E9A;&#x5355;&#x4F4D;&#x8868;&#x793A;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A; Pax7 + Myf5&#x207B; &#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E; Pax7 + Myf5 + &#x72AF;&#x751F;&#x808C;&#x524D;&#x4F53;&#x548C;&#x9700;&#x8981;&#x7684;&#x6210;&#x4EBA;&#x7684; SC &#x6C60;&#x7684;&#x52A8;&#x6001;&#x5E73;&#x8861;&#x3002;&#x4E0E;&#x6761;&#x4EF6;&#x6D88;&#x878D;&#x672F;&#x5728;&#x516C;&#x52A1;&#x5458;&#x4E8B;&#x52A1;&#x5C40;&#x5C40;&#x957F; Ezh2 &#x8001;&#x9F20;&#x6709;&#x8F83;&#x5C11;&#x7684;&#x808C;&#x8089;&#x4EA7;&#x540E; Pax7 + &#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x808C;&#x8089;&#x8D28;&#x91CF;&#x548C;&#x672A;&#x80FD;&#x9002;&#x5F53;&#x5730;&#x91CD;&#x65B0;&#x751F;&#x6210;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7F3A;&#x9677;&#x662F;&#x4E0E;&#x53D7;&#x635F;&#x7684; SC &#x6269;&#x6563;&#x548C;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x5728;&#x975E;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8C31;&#x7CFB;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;EZH2 &#x63A7;&#x5236;&#x81EA;&#x6211;&#x66F4;&#x65B0;&#x548C;&#x6269;&#x6563;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4FDD;&#x6301;&#x9002;&#x5F53;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x5728;&#x516C;&#x52A1;&#x5458;&#x4E8B;&#x52A1;&#x5C40;&#x5C40;&#x957F;&#x3002;

Polycomb EZH2 &#x4FDD;&#x969C;&#x7684;&#x9AA8;&#x9ABC;&#x808C;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6807;&#x8BC6;&#x548C;&#x63A7;&#x5236;&#x81EA;&#x6211;&#x66F4;&#x65B0;&#x3002;

Satellite cells (SCs) sustain muscle growth and empower adult skeletal muscle with vigorous regenerative abilities. Here, we report that EZH2, the enzymatic subunit of the Polycomb-repressive complex 2 (PRC2), is expressed in both Pax7+/Myf5â» stem cells and Pax7+/Myf5+ committed myogenic precursors and is required for homeostasis of the adult SC pool. Mice with conditional ablation of Ezh2 in SCs have fewer muscle postnatal Pax7+ cells and reduced muscle mass and fail to appropriately regenerate. These defects are associated with impaired SC proliferation and derepression of genes expressed in nonmuscle cell lineages. Thus, EZH2 controls self-renewal and proliferation, and maintains an appropriate transcriptional program in SCs.

Polycomb EZH2 controls self-renewal and safeguards the transcriptional identity of skeletal muscle stem cells.

Cellules satellites (SCs) soutenir la croissance musculaire et l&#39;autonomisation des muscle squelettique adulte avec des capacit&eacute;s de r&eacute;g&eacute;n&eacute;ration vigoureuses. Nous rapportons ici que EZH2, la sous-unit&eacute; enzymatique de la Polycomb-r&eacute;pressif complexe 2 (PRC2), est exprim&eacute; dans les deux Pax7 + / Myf5&#x207B; cellules souches et Pax7 + / Myf5 + commis pr&eacute;curseurs myog&egrave;nes et est n&eacute;cessaire pour l&#39;hom&eacute;ostasie de la piscine de SC adulte. Souris avec ablation conditionnelle de Ezh2 dans SCs ont moins de muscle postnatals Pax7 + cellules et r&eacute;duit muscle masse et ne parviennent pas &agrave; se r&eacute;g&eacute;n&eacute;rer de fa&ccedil;on appropri&eacute;e. Ces d&eacute;fauts sont associ&eacute;s &agrave; la prolif&eacute;ration de SC avec facult&eacute;s affaiblies et d&eacute;r&eacute;pression de g&egrave;nes exprim&eacute;s dans des lign&eacute;es de cellules musculaires. Ainsi, EZH2 contr&ocirc;le l&#39;auto-renouvellement et prolif&eacute;ration et maintient un programme appropri&eacute; de transcriptional dans SCs.

Polycomb EZH2 contr&ocirc;le l&#39;auto-renouvellement et pr&eacute;serve l&#39;identit&eacute; de transcriptional des cellules souches musculaires squelettiques.

Cellule satellite (SCs) sostenere la crescita muscolare e potenziare il muscolo scheletrico adulto con vigorosa capacit&agrave; rigenerativa. Qui, segnaliamo che la EZH2, la subunit&agrave; enzimatica del Polycomb-repressivo complesso 2 (PRC2), si esprime in entrambi Pax7 + Myf5&#x207B; cellule staminali e Pax7 + Myf5 + commesso miogena precursori ed &egrave; richiesto per l&#39;omeostasi della piscina adulti SC. Topi con ablazione condizionale di Ezh2 in SCs hanno meno muscolo cellule Pax7 + postnatale e muscolo ridotto di massa e non riescono a rigenerarsi in modo appropriato. Questi difetti sono associati a ridotta proliferazione di SC e derepression di geni espressi in linee cellulari nonmuscle. Cos&igrave;, EZH2 controlli auto-rinnovamento e proliferazione e mantiene un adeguato programma transcriptional in SCs.

Polycomb EZH2 controlli auto-rinnovamento e salvaguarda l&#39;identit&agrave; trascrizionale di cellule staminali del muscolo scheletrico.

&#xC704;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC; (SCs) &#xADFC;&#xC721; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xD65C;&#xBC1C; &#xD55C; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4; &#xC131;&#xC778; &#xACE8;&#xACA9; &#xADFC;&#xC721;&#xC758; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xC8FC;&#xC18C; &#xC11C;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBAA8;&#xB450; Pax7 ezh2&#xB294; Polycomb-&#xC5B5;&#xC555; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; 2 (PRC2)&#xC758; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; &#xD45C;&#xD604; &#xB41C; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C; + Myf5&#x207B; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; Pax7 + Myf5 + &#xC870;&#xC9C1;&#xC801; &#xC120;&#xAD6C;&#xC790; &#xD22C;&#xC785; &#xBC0F; &#xC131;&#xC778; &#xC0AC;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xCE90;&#xB864;&#xB77C;&#xC774;&#xB098; &#xC218;&#xC601;&#xC7A5;&#xC758; &#xD56D;&#xC0C1; &#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Scs&#xC5D0;&#xC11C; ezh2&#xC758; &#xC870;&#xAC74;&#xBD80; &#xC808;&#xC81C;&#xC640; &#xC950;&#xAC00; &#xC801;&#xC740; &#xADFC;&#xC721; &#xCD9C;&#xC0DD; &#xD6C4; Pax7 + &#xC140; &#xBC0F; &#xAC10;&#xC18C; &#xADFC;&#xC721; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBC0F; &#xC801;&#xC808; &#xD558; &#xAC8C; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xC2E4;&#xD328; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xD568; &#xC7A5;&#xC560;&#xC778;&#xB41C; SC &#xD655;&#xC0B0; &#xBC0F; nonmuscle &#xC138;&#xD3EC; &#xACC4;&#xBCF4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; derepression&#xC640; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, EZH2 &#xC790;&#xAE30; &#xAC31;&#xC2E0; &#xBC0F; &#xD655;&#xC0B0;, &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558; &#xACE0; Scs&#xC5D0; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; transcriptional &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Polycomb EZH2 &#xC790;&#xAE30; &#xAC31;&#xC2E0;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558; &#xACE0; &#xACE8;&#xACA9; &#xADFC;&#xC721; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; transcriptional &#xC2E0;&#xC6D0; &#xBCF4;&#xD638;.

Las c&eacute;lulas sat&eacute;lite (SCs) sostener crecimiento muscular y la autonom&iacute;a de m&uacute;sculo esquel&eacute;tico adulto con vigorosa capacidad regenerativa. Aqu&iacute;, Divulgamos que EZH2, la subunidad enzim&aacute;tica de la Polycomb-represivas complejo 2 (PRC2), se expresa en ambos Pax7 + / Myf5&#x207B; c&eacute;lulas madre y Pax7 + / Myf5 + cometidos mi&oacute;genas precursores y es necesaria para la homeostasis de la piscina para adultos de SC. Ratones con ablaci&oacute;n condicional de Ezh2 en SCs tienen menos m&uacute;sculo postnatales Pax7 + c&eacute;lulas y muscular reducida masa y no regenerar adecuadamente. Estos defectos se asocian con deterioro proliferaci&oacute;n de SC y derepression de genes expresados en linajes celulares de valvas. As&iacute;, EZH2 controla auto renovaci&oacute;n y proliferaci&oacute;n y mantiene un adecuado programa transcripcional en SCs.

Polycomb EZH2 controla la auto-renovaci&oacute;n y protege la identidad transcripcional de c&eacute;lulas de m&uacute;sculo esquel&eacute;tico.

&#x536B;&#x661F;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x662F;&#x5F02;&#x6784;&#x4EBA;&#x53E3;&#x7684;&#x808C;&#x8089;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5C5E;&#x6027;&#x8D1F;&#x8D23;&#x7684;&#x6210;&#x4EBA;&#x9AA8;&#x9ABC;&#x808C;&#x518D;&#x751F;&#x3002;&#x589E;&#x52A0;&#x536B;&#x661F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x6F5C;&#x529B;&#x7684;&#x5174;&#x8DA3;&#x4E0E;&#x9700;&#x8981;&#x51C0;&#x5316;&#x5747;&#x8D28;&#x4EBA;&#x53E3;&#x7684;&#x808C;&#x8089;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x4EBA;&#x5458;&#x63D0;&#x51FA;&#x8D28;&#x7591;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x63D0;&#x4F9B;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x7684;&#x534F;&#x8BAE;&#x4E3A;&#x4F7F;&#x7528;&#x8367;&#x5149;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x9009;&#x7684;&#x536B;&#x661F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EAF;&#x4EBA;&#x53E3;&#x7684;&#x9694;&#x79BB;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7ED9;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x51C6;&#x5219;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x6539;&#x5584;&#x536B;&#x661F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x79BB;&#x534F;&#x8BAE;&#xFF0C;&#x76EE;&#x6807;&#x662F;&#x8981;&#x4F7F;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x6807;&#x51C6;&#x5316;&#x8DE8;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x7684;&#x518D;&#x73B0;&#x6027;&#x3002;&#x6B64;&#x534F;&#x8BAE;&#x6807;&#x8BC6;&#x5185;&#x6210;&#x4EBA;&#x9AA8;&#x9ABC;&#x808C;&#x536B;&#x661F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x6D53;&#x7F29;&#x4EBA;&#x53E3;&#x4E3A; &alpha;7(+)/CD34(+) &#x53CC;&#x9633;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C; CD45&#x3001; CD31&#x3001; CD11b&#x3001; &#x548C; Sca1 &#x8D1F; (Lin(-)) &#x7EC6;&#x80DE; (&#x6574;&#x5408;&#x7D20; &alpha;7(+)/CD34(+)/Lin(-))&#x3002;&#x529F;&#x80FD;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x8868;&#x660E;&#x6574;&#x5408;&#x7D20; &alpha;7(+)/CD34(+)/Lin(-) &#x536B;&#x661F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x62E5;&#x6709;&#x9AD8;&#x751F;&#x808C;&#x6F5C;&#x529B;&#x548C;&#x518D;&#x751F;&#x808C;&#x8089;&#x80FD;&#x529B;&#x8017;&#x5C3D;&#x536B;&#x661F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x79FB;&#x690D;&#x540E;&#x3002;

&#x9694;&#x79BB;&#x7684;&#x808C;&#x8089;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8367;&#x5149;&#x6D3B;&#x5316;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x9009;&#x6D41;&#x5F0F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EEA;&#x3002;

Satellite cells are a heterogeneous population of muscle progenitors with stem cell properties responsible for the regeneration of adult skeletal muscle. Increasing interest in the therapeutic potential of satellite cells has challenged researchers with the need to purify a homogenous population of muscle progenitors. Here we provide a detailed protocol for the isolation of a pure population of satellite cells using fluorescence activated cell sorting. We give specific guidelines to ameliorate the reproducibility of the satellite cell isolation protocol with the goal to standardize procedures across labs. This protocol identifies satellite cells within adult skeletal muscle as an enriched population of Integrin Î±7(+)/CD34(+) double positive cells and CD45, CD31, CD11b, and Sca1 negative (Lin(-)) cells (Integrin Î±7(+)/CD34(+)/Lin(-)). Functional assay shows that Integrin Î±7(+)/CD34(+)/Lin(-) satellite cells possess high myogenic potential and ability to regenerate muscle depleted satellite cells upon transplantation.

Isolation of muscle stem cells by fluorescence activated cell sorting cytometry.

Cellules satellites sont une population h&eacute;t&eacute;rog&egrave;ne de cellules souches musculaires avec des propri&eacute;t&eacute;s de cellules souches responsables de la r&eacute;g&eacute;n&eacute;ration du muscle squelettique adulte. Un int&eacute;r&ecirc;t croissant pour le potentiel th&eacute;rapeutique des cellules satellites a contest&eacute; les chercheurs avec la n&eacute;cessit&eacute; de purifier une population homog&egrave;ne de cellules souches musculaires. Ici, nous fournissons un protocole d&eacute;taill&eacute; pour l&#39;isolement d&#39;une population pure des cellules satellites utilisant la fluorescence activ&eacute; cellule tri. Nous donnons des directives sp&eacute;cifiques afin d&#39;am&eacute;liorer la reproductibilit&eacute; de la protocole d&#39;isolement de cellules satellites dans le but d&#39;uniformiser les proc&eacute;dures sur labs. Ce protocole identifie des cellules satellites dans le muscle squelettique adulte comme une population enrichie de l&#39;int&eacute;grine &alpha;7(+)/CD34(+) double cellules positives et n&eacute;gatives CD45, CD31 et CD11b Sca1 (cellules Lin(-)) (int&eacute;grine &alpha;7(+)/CD34(+)/Lin(-)). Test fonctionnel montre qu&#39;int&eacute;grine &alpha;7(+)/CD34(+)/Lin(-) satellite cellules poss&egrave;dent haut potentiel myog&egrave;ne et capacit&eacute; de r&eacute;g&eacute;n&eacute;ration musculaire &eacute;puis&eacute;s de cellules satellites apr&egrave;s la transplantation.

Isolement des cellules souches musculaires par fluorescence activ&eacute; cellule tri cytom&eacute;trie en flux.

Le cellule satellite sono una popolazione eterogenea di progenitori del muscolo con propriet&agrave; delle cellule staminali per la rigenerazione del muscolo scheletrico adulto responsabile. Crescente interesse per il potenziale terapeutico delle cellule satellite ha sfidato i ricercatori con la necessit&agrave; di purificare una popolazione omogenea di progenitori del muscolo. Qui forniamo un dettagliato protocollo per l&#39;isolamento di una popolazione pura di cellule satellite mediante fluorescenza attivata ordinamento delle cellule. Diamo indicazioni specifiche per migliorare la riproducibilit&agrave; del protocollo di isolamento delle cellule satellite con l&#39;obiettivo di standardizzare le procedure attraverso laboratori. Questo protocollo identifica le cellule satellite all&#39;interno del muscolo scheletrico adulto come una popolazione arricchita di integrina &alpha;7(+)/CD34(+) cellule positive double e CD45, CD31, CD11b e Sca1 negativo (Lin(-)) cellule (integrina &alpha;7(+)/CD34(+)/Lin(-)). Analisi funzionale dimostra che integrina &alpha;7(+)/CD34(+)/Lin(-) satellite cellule possiedono elevato potenziale miogena e capacit&agrave; di rigenerare il muscolo impoverito cellule satellite al trapianto.

Isolamento delle cellule staminali muscolari di fluorescenza attivata cella Ordinamento cytometry.

&#x885B;&#x661F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7570;&#x7A2E;&#x96C6;&#x56E3;&#x306E;&#x7B4B;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x7279;&#x6027;&#x5927;&#x4EBA;&#x306E;&#x9AA8;&#x683C;&#x7B4B;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8CAC;&#x4EFB;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x306E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x885B;&#x661F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x9AD8;&#x307E;&#x3063;&#x3066;&#x7B4B;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5747;&#x8CEA;&#x306A;&#x4EBA;&#x53E3;&#x3092;&#x6D44;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x7814;&#x7A76;&#x8005;&#x304C;&#x6311;&#x6226;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x885B;&#x661F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x6027;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4F5C;&#x52D5;&#x306E;&#x4E26;&#x3079;&#x66FF;&#x3048;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x7D14;&#x7C8B;&#x306A;&#x4EBA;&#x53E3;&#x306E;&#x5206;&#x96E2;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8A73;&#x3057;&#x3044;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x30E9;&#x30DC;&#x3067;&#x624B;&#x9806;&#x3092;&#x6A19;&#x6E96;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x76EE;&#x6A19;&#x3068;&#x885B;&#x661F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9694;&#x96E2;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x306E;&#x518D;&#x73FE;&#x6027;&#x3092;&#x6539;&#x5584;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30AC;&#x30A4;&#x30C9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x306F;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x8C4A;&#x304B;&#x306A;&#x4EBA;&#x53E3;&#x5927;&#x4EBA;&#x306E;&#x9AA8;&#x683C;&#x7B4B;&#x5185;&#x306E;&#x885B;&#x661F;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B; &alpha;7(+)/CD34(+) &#x30C0;&#x30D6;&#x30EB;&#x967D;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068; Sca1 CD11b&#x3001;CD31 CD45 &#x9670;&#x6027; (Lin(-)) &#x30BB;&#x30EB; (&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3; &alpha;7(+)/CD34(+)/Lin(-))&#x3002;&#x6A5F;&#x80FD;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4; &#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3; &alpha;7(+)/CD34(+)/Lin(-) &#x885B;&#x661F;&#x7D30;&#x80DE;&#x7B4B;&#x539F;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x30DD;&#x30C6;&#x30F3;&#x30B7;&#x30E3;&#x30EB;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x885B;&#x661F;&#x7D30;&#x80DE;&#x79FB;&#x690D;&#x6642;&#x306E;&#x7B4B;&#x3092;&#x518D;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x306E;&#x67AF;&#x6E07;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x86CD;&#x5149;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7B4B;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x96E2;&#x306F;&#x3001;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x3092;&#x4E26;&#x3079;&#x66FF;&#x3048;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3002;

&#xC704;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xD2B9;&#xC131; &#xC131;&#xC778; &#xACE8;&#xACA9; &#xADFC;&#xC721;&#xC758; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC45;&#xC784;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4; &#xADFC;&#xC721; &#xCC3D;&#xC2DC;&#xC790;&#xC758; &#xC720;&#xD615;&#xC774; &#xB2E4;&#xB978; &#xC778;&#xAD6C;. &#xC704;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAD00;&#xC2EC; &#xC99D;&#xAC00; &#xD544;&#xC694; &#xADFC;&#xC721; &#xCC3D;&#xC2DC;&#xC790;&#xC758; &#xADE0;&#xC9C8; &#xC131; &#xC778;&#xAD6C; &#xC815;&#xD654; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xC804; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC21C;&#xC218;&#xD55C; &#xC778;&#xAD6C;&#xC758; &#xC704;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD615;&#xAD11; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xB958;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xACA9;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C1;&#xC138;&#xD55C; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC2E4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC808;&#xCC28;&#xB97C; &#xD45C;&#xC900;&#xD654;&#xB97C; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB85C; &#xC704;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC; &#xACA9;&#xB9AC; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C;&#xC758; &#xC7AC;&#xD604;&#xC131;&#xC744; ameliorate &#xD2B9;&#xC815; &#xC9C0;&#xCE68;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xC131;&#xC778; &#xACE8;&#xACA9; &#xADFC; &#xB0B4;&#xC758; &#xC704;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC; Integrin&#xC758; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xC778;&#xAD6C; &alpha;7(+)/CD34(+) &#xB354;&#xBE14; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; CD45, CD31, CD11b, &#xBC0F; Sca1 &#xBD80;&#xC815; (Lin(-)) &#xC138;&#xD3EC; (Integrin &alpha;7(+)/CD34(+)/Lin(-)). &#xAE30;&#xB2A5; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; Integrin &alpha;7(+)/CD34(+)/Lin(-) &#xC704;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC; &#xB192;&#xC740; &#xC870;&#xC9C1;&#xC801; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744; &#xBCF4;&#xC720; &#xD558; &#xACE0; &#xADFC;&#xC721;&#xC744; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5; &#xACE0;&#xAC08; &#xC774;&#xC2DD; &#xC2DC; &#xC704;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD615;&#xAD11;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADFC;&#xC721; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBD84;&#xB9AC; cytometry &#xC815;&#xB82C; &#xC138;&#xD3EC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;.

Las c&eacute;lulas sat&eacute;lite son una poblaci&oacute;n heterog&eacute;nea de progenitores de m&uacute;sculo con propiedades de c&eacute;lulas madre para la regeneraci&oacute;n del m&uacute;sculo esquel&eacute;tico adulto responsables. Creciente inter&eacute;s en el potencial terap&eacute;utico de las c&eacute;lulas sat&eacute;lite ha desafiado a los investigadores con la necesidad de purificar una poblaci&oacute;n homog&eacute;nea de progenitores de m&uacute;sculo. Aqu&iacute; le ofrecemos un protocolo detallado para el aislamiento de una poblaci&oacute;n pura de c&eacute;lulas sat&eacute;lite mediante fluorescencia activada separaci&oacute;n celular. Le podemos ofrecer directrices espec&iacute;ficas para mejorar la reproducibilidad del Protocolo de aislamiento de c&eacute;lulas sat&eacute;lite con el objetivo de estandarizar los procedimientos en laboratorios. Este protocolo identifica las c&eacute;lulas sat&eacute;lite en m&uacute;sculo esquel&eacute;tico adulto como una poblaci&oacute;n enriquecida de integrina &alpha;7(+)/CD34(+) doble positivo c&eacute;lulas y CD45, CD31, CD11b y Sca1 negativo (c&eacute;lulas Lin(-)) (integrina &alpha;7(+)/CD34(+)/Lin(-)). An&aacute;lisis funcional demuestra que la integrina &alpha;7(+)/CD34(+)/Lin(-) sat&eacute;lite c&eacute;lulas poseen alto potencial mi&oacute;geno y capacidad de regenerar el m&uacute;sculo agota las c&eacute;lulas sat&eacute;lite al trasplante.

Aislamiento de c&eacute;lulas madre de m&uacute;sculo por fluorescencia hab&iacute;a activada citometr&iacute;a de clasificaci&oacute;n de la c&eacute;lula.

&#xB300;&#xCCB4; polyadenylation &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC740; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xB85C; &#xB098;&#xC624;&#xACE0;. &#xC140; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758;&#xC774; &#xBB38;&#xC81C;&#xC5D0; Boutet &#xADF8; &#xC678; &#xC5EC;&#xB7EC;&#xBD84; (2012) &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;&#xB294; &#xB300;&#xCCB4; 3&#39; Utr Pax3 &#xB300; &#xBCF8;&#xC758; &#xCD95; &#xC704;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; isoforms &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xC911;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; &#xBBF8;&#xB974;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574;&#xC758; &#xC2DD;&#xC744; &#xC81C;&#xD55C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC989;, &#xAE38;&#xACE0; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C;: &#xC704;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; pax3&#xC758; polyA &#xC774;&#xC57C;&#xAE30;.

El uso de sitios de poliadenilaci&oacute;n alternativa surge como un importante regulador de la expresi&oacute;n g&eacute;nica. En esta edici&oacute;n de la c&eacute;lula de v&aacute;stago de la c&eacute;lula, Boutet et al (2012) Informe alternativa 3&#39; NC de la transcripci&oacute;n Pax3 restringir su expresi&oacute;n axial c&eacute;lulas sat&eacute;lite a trav&eacute;s de miR-mediada dirigidos contra una de las isoformas.

Largo, corto y el micro: un cuento de polyA de Pax3 en c&eacute;lulas de sat&eacute;lite.

&#x4F7F;&#x7528;&#x66FF;&#x4EE3; polyadenylation &#x5DE5;&#x5730;&#x6B63;&#x5728;&#x6210;&#x4E3A;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x8C03;&#x8282;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E00;&#x95EE;&#x9898;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5E03;&#x6CF0; et (2012) &#x62A5;&#x544A;&#xFF0C;&#x66FF;&#x4EE3; 3&#39; &#x5F02;&#x5E38; Pax3 &#x8C08;&#x8BDD;&#x5185;&#x5BB9;&#x9650;&#x5236;&#x8F74;&#x5411;&#x536B;&#x661F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x901A;&#x8FC7;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x548C;&#x5E73;&#x53F7;&#x7A7A;&#x95F4;&#x7AD9;&#x7684;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x4E4B;&#x4E00;&#x7684;&#x9776;&#x5411;&#x5176;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

&#x957F;&#x3001; &#x77ED;&#x671F;&#x7684;&#x548C;&#x5FAE;&#xFF1A; &#x6CE2;&#x5229;&#x4E9A;&#x6545;&#x4E8B;&#x7684; Pax3 &#x536B;&#x661F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x3002;

The use of alternative polyadenylation sites is emerging as an important regulator of gene expression. In this issue of Cell Stem Cell, Boutet et al. (2012) report that alternative 3'UTRs of the Pax3 transcript restrict its expression to axial satellite cells through miR-mediated targeting of one of the isoforms.

The long, the short, and the micro: a polyA tale of Pax3 in satellite cells.

L&#39;utilisation de sites de polyad&eacute;nylation alternative s&#39;impose comme un r&eacute;gulateur important de l&#39;expression g&eacute;nique. Dans ce num&eacute;ro de Cell Stem Cell, Boutet et coll. rapportent (2012) cette alternative 3&#39; UTR de la transcription Pax3 restreindre l&#39;expression de cellules axiales de satellite par le biais v&eacute;hicul&eacute;e par miR ciblage de l&#39;une des isoformes.

Long, court et le micro : un conte de polyA de Pax3 en cellules satellites.

L&#39;uso di siti di poliadenilazione alternativa sta emergendo come un importante regolatore dell&#39;espressione genica. In questo numero di Cell Stem Cell, Boutet et al (2012) relazione che alternativa 3&#39;UTRs della trascrizione Pax3 limitare la sua espressione a assiale cellule satellite attraverso miR-mediated targeting di uno delle isoforme.

Il lungo, il corto e il micro: un racconto di polyA di Pax3 nelle cellule satellite.

&#x4EE3;&#x66FF;&#x8D77;&#x3053;&#x308B;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x306F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6D6E;&#x4E0A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x554F;&#x984C;&#x306E;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x3001;Boutet &#x3089; (2012) &#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x305D;&#x306E;&#x4EE3;&#x66FF; 3&#39; &#x30EA;&#x30DC;&#x30BE;&#x30FC;&#x30E0; Pax3 &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3; &#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x306E;&#x5236;&#x9650;&#x304C;&#x5F0F;&#x8EF8;&#x885B;&#x661F;&#x30DF;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E; 1 &#x3064;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3002;

&#x9577;&#x3044;&#x3001;&#x77ED;&#x3044;&#x3068;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;: &#x885B;&#x661F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E; polyA &#x7269;&#x8A9E; Pax3 &#x306E;&#x3002;

&#x68D5;&#x8272;&#x8102;&#x80AA;&#x7EC4;&#x7EC7; (&#x8759;&#x8760;) &#x662F;&#x80FD;&#x6E90;&#x914D;&#x836F;&#x7684;&#x4EA7;&#x70ED;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5E73;&#x8861;&#x80FD;&#x91CF;&#x4EE3;&#x8C22;&#x3002;&#x6CBF;&#x88AD;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E;&#x68D5;&#x8272;&#x8102;&#x80AA;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53D6;&#x81EA;&#x751F;&#x808C;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x80B2;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x6210;&#x4EBA;&#x9AA8;&#x9ABC;&#x808C;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; &#xFF08;&#x536B;&#x661F;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF09; &#x65E9;&#x5DF2;&#x88AB;&#x5747;&#x5300;&#x5730;&#x575A;&#x5B9A;&#x5F80;&#x751F;&#x808C;&#x6CBF;&#x88AD;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x6210;&#x4EBA;&#x536B;&#x661F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5F15;&#x8D77;&#x68D5;&#x8272;&#x8102;&#x80AA;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x90A3; microRNA 133 &#x8C03;&#x63A7;&#x751F;&#x808C;&#x548C;&#x68D5;&#x8272;&#x8102;&#x80AA;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x9776;&#x5411; 3&#39;UTR &#x7684; Prdm16.&#x7684;&#x62EE;&#x6297;&#x4F5C;&#x7528; microRNA 133 &#x671F;&#x95F4;&#x808C;&#x8089;&#x518D;&#x751F;&#x589E;&#x52A0;&#x88AB;&#x62C6;&#x547C;&#x5438;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5438;&#x6536;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#xFF0C;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x9009;&#x62E9;&#x548C;&#x5728;&#x5F53;&#x5730;&#x7684;&#x4EA7;&#x70ED;&#x6CBB;&#x7597;&#x808C;&#x8089;&#x548C;&#x589E;&#x5F3A;&#x6574;&#x4E2A;&#x8EAB;&#x4F53;&#x7684;&#x80FD;&#x91CF;&#x6D88;&#x8017;&#x3001; &#x6539;&#x5584;&#x7CD6;&#x8010;&#x91CF;&#xFF0C;&#x548C;&#x963B;&#x788D;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x996E;&#x98DF;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x80A5;&#x80D6;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#x548C;&#x5E73;&#x53F7;&#x7A7A;&#x95F4;&#x7AD9;-133 &#x6C34;&#x5E73;&#x662F;&#x5C0F;&#x9F20;&#x66B4;&#x9732;&#x4E8E;&#x5BD2;&#x51B7;&#xFF0C;&#x7F16;&#x7801;&#x5728; de novo &#x4EE3;&#x536B;&#x661F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6E90;&#x6027;&#x7684;&#x68D5;&#x8272;&#x8102;&#x80AA;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x4EA7;&#x751F;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;microRNA 133 &#x8868;&#x793A;&#x91CD;&#x8981;&#x9776;&#x70B9;&#x6CBB;&#x7597;&#x80A5;&#x80D6;&#x75C7;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x3002;

MicroRNA 133 &#x63A7;&#x5236;&#x901A;&#x8FC7;&#x9488;&#x5BF9; Prdm16 &#x68D5;&#x8272;&#x8102;&#x80AA;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x9AA8;&#x9ABC;&#x808C;&#x536B;&#x661F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x3002;

Brown adipose tissue (BAT) is an energy-dispensing thermogenic tissue that plays an important role in balancing energy metabolism. Lineage-tracing experiments indicate that brown adipocytes are derived from myogenic progenitors during embryonic development. However, adult skeletal muscle stem cells (satellite cells) have long been considered uniformly determined toward the myogenic lineage. Here, we report that adult satellite cells give rise to brown adipocytes and that microRNA-133 regulates the choice between myogenic and brown adipose determination by targeting the 3'UTR of Prdm16. Antagonism of microRNA-133 during muscle regeneration increases uncoupled respiration, glucose uptake, and thermogenesis in local treated muscle and augments whole-body energy expenditure, improves glucose tolerance, and impedes the development of diet-induced obesity. Finally, we demonstrate that miR-133 levels are downregulated in mice exposed to cold, resulting in de novo generation of satellite cell-derived brown adipocytes. Therefore, microRNA-133 represents an important therapeutic target for the treatment of obesity.

MicroRNA-133 controls brown adipose determination in skeletal muscle satellite cells by targeting Prdm16.

Tissu adipeux brun (TAB) est un tissu thermog&egrave;ne distribution &eacute;nergie qui joue un r&ocirc;le important dans le m&eacute;tabolisme de l&#39;&eacute;nergie d&#39;&eacute;quilibrage. Lineage-tra&ccedil;age exp&eacute;riences indiquent que les adipocytes bruns sont d&eacute;riv&eacute;s de prog&eacute;niteurs myog&eacute;niques durant le d&eacute;veloppement embryonnaire. Cependant, le muscle squelettique adulte des cellules souches (cellules satellites) ont longtemps &eacute;t&eacute; consid&eacute;r&eacute;es uniform&eacute;ment d&eacute;termin&eacute;es vers la lign&eacute;e myog&egrave;ne. Ici, nous rapportons que des cellules adultes de satellite donnent lieu aux adipocytes bruns et que micro-ARN-133 r&eacute;git le choix entre la d&eacute;termination adipeuse myog&egrave;ne et brun en ciblant la r&eacute;gion 3&#39;UTR de Prdm16. antagonisme des micro-ARN-133 lors de muscle r&eacute;g&eacute;n&eacute;ration augmentations d&eacute;telle la respiration, captation du glucose, et thermogen&egrave;se dans les locaux trait&eacute;s musculaire et augmente la d&eacute;pense &eacute;nerg&eacute;tique de l&#39;ensemble du corps, am&eacute;liore la tol&eacute;rance au glucose et entrave le d&eacute;veloppement de l&#39;ob&eacute;sit&eacute; induite par l&#39;alimentation. Finalement, nous d&eacute;montrons que le niveau de miR-133 est diminu&eacute;e chez les souris expos&eacute;es au froid, de novo g&eacute;n&eacute;ration de culture cellulaire par satellite des adipocytes bruns. Micro-ARN-133 repr&eacute;sente donc une cible th&eacute;rapeutique importante pour le traitement de l&#39;ob&eacute;sit&eacute;.

Micro-ARN-133 contr&ocirc;le d&eacute;termination de tissu adipeuse brune dans les cellules satellites des muscles squelettiques en ciblant Prdm16.

Tessuto adiposo bruno (BAT) &egrave; un tessuto termogenico erogazione energia che svolge un ruolo importante nel metabolismo energetico di bilanciamento. Lineage-tracciatura esperimenti indicano che marrone adipociti derivano da progenitori miogena durante lo sviluppo embrionale. Tuttavia, muscolo scheletrico adulto cellule staminali (cellule satellite) lungamente sono state considerate uniformemente determinate verso il lignaggio miogena. Qui, segnaliamo che cellule satellite adulte danno luogo a marrone adipociti e quello 133 microRNA regola la scelta tra determinazione adiposo miogena e marrone designando il 3&#39;UTR di Prdm16. antagonismo di microRNA-133 durante la rigenerazione muscolare aumenta respirazione disgiunti, assorbimento del glucosio, e termogenesi nei locali trattati muscolare e potenziati dispendio energetico di tutto il corpo, migliora la tolleranza al glucosio e ostacola lo sviluppo dell&#39;obesit&agrave; indotta da dieta. Infine, dimostriamo che i livelli di miR-133 sono downregolata nei topi esposti al freddo, con conseguente de novo generazione degli adipociti marrone satellite cellule derivate. MicroRNA-133 rappresenta pertanto un importante obiettivo terapeutico per il trattamento dell&#39;obesit&agrave;.

MicroRNA-133 controlla determinazione adiposo marrone in cellule del muscolo scheletrico satellite designando Prdm16.

&#x8910;&#x8272;&#x8102;&#x80AA;&#x7D44;&#x7E54; (BAT) &#x5206;&#x6563;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x5206;&#x914D;&#x306E;&#x767A;&#x71B1;&#x7D44;&#x7E54;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30EA;&#x30CD;&#x30FC;&#x30B8;&#x30E5; &#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B9;&#x5B9F;&#x9A13;&#x8910;&#x8272;&#x8102;&#x80AA;&#x7D30;&#x80DE;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x80DA;&#x767A;&#x751F;&#x4E2D;&#x306B;&#x7531;&#x6765;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x5927;&#x4EBA;&#x306E;&#x9AA8;&#x683C;&#x7B4B;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE; &#xFF08;&#x885B;&#x661F;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF09; &#x9577;&#x3044;&#x7B4B;&#x7CFB;&#x306B;&#x5747;&#x4E00;&#x306B;&#x65AD;&#x56FA;&#x3068;&#x3057;&#x305F;&#x306A;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x8910;&#x8272;&#x8102;&#x80AA;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x751F;&#x3058;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x30B5;&#x30C6;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C8;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; Rna 133&#x3001;3&#39;UTR Prdm16&#x3002; &#x7B4B;&#x518D;&#x751F;&#x5897;&#x52A0;&#x5171;&#x5F79;&#x547C;&#x5438;&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x4E2D;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; Rna 133 &#x306E;&#x62EE;&#x6297;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7B4B;&#x3068;&#x8336;&#x8272;&#x306E;&#x8102;&#x80AA;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x3066;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB;&#x7523;&#x7B4B;&#x8089;&#x3084;&#x8FFD;&#x52A0;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x5168;&#x8EAB;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x306E;&#x6D88;&#x8CBB;&#x91CF;&#x3092;&#x51E6;&#x7406;&#x3001;&#x8010;&#x7CD6;&#x80FD;&#x3092;&#x6539;&#x5584;&#x3057;&#x3001;&#x98DF;&#x4E8B;&#x304C;&#x8A98;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x80A5;&#x6E80;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x59A8;&#x3052;&#x308B;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x30DF;&#x30FC;&#x30EB; 133 &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x9999;&#x5473;&#x5BD2;&#x3055;&#x306B;&#x3055;&#x3089;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x885B;&#x661F;&#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x8910;&#x8272;&#x8102;&#x80AA;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E; de novo &#x4E16;&#x4EE3;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; Rna 133 &#x80A5;&#x6E80;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; Rna 133 &#x8910;&#x8272;&#x8102;&#x80AA;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x9AA8;&#x683C;&#x7B4B;&#x885B;&#x661F;&#x7D30;&#x80DE; Prdm16 &#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x5236;&#x5FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xAC08;&#xC0C9; &#xC9C0;&#xBC29; &#xC870;&#xC9C1; (&#xBC15;&#xC950;)&#xB294; &#xBD84;&#xC0B0; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xB300;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xB2F4;&#xB2F9; &#xD558;&#xB294; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xBD84;&#xBC30; thermogenic &#xC870;&#xC9C1;. &#xD608;&#xD1B5; &#xCD94;&#xC801; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xBC30;&#xC544; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC911; &#xAC08;&#xC0C9; adipocytes &#xC870;&#xC9C1;&#xC801; &#xCC3D;&#xC2DC;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC131;&#xC778; &#xACE8;&#xACA9; &#xADFC;&#xC721; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; (&#xC704;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC;) &#xAE34; &#xAC04;&#xC8FC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xADE0;&#xC77C; &#xD558; &#xAC8C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC801; &#xD608;&#xD1B5;&#xC73C;&#xB85C; &#xACB0;&#xC815;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC131;&#xC778; &#xC704;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC; &#xAC08;&#xC0C9; adipocytes &#xC77C;&#xC73C;&#xD0A4; &#xACE0; &#xADF8; &#xC608;&#xCE21;&#xC5D0; &#xAD00;&#xD55C; 133 &#xADDC;&#xC81C;&#xB294; 3&#39;UTR Prdm16. &#xADFC;&#xC721; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xC99D;&#xAC00; uncoupled &#xD638;&#xD761;, &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xD1B5;&#xD48D; &#xAD00;, &#xC911; &#xC608;&#xCE21;&#xC5D0; &#xAD00;&#xD55C; 133&#xC758; &#xC801;&#xAC1C;&#xC2EC;&#xC758; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xAC08;&#xC0C9; &#xC9C0;&#xBC29;&#xC774; &#xB9CE;&#xC740; &#xACB0;&#xC815; &#xC0AC;&#xC774; &#xC120;&#xD0DD; &#xBC0F; &#xBCF4;&#xACE0; &#xD604;&#xC9C0;&#xC5D0;&#xC11C; thermogenesis &#xADFC;&#xC721; &#xBC0F; &#xBCF4;&#xC644; &#xC804;&#xC2E0; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xBE44;&#xC6A9; &#xCC98;&#xB9AC;, &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xB0B4;&#xC131;&#xC744; &#xAC1C;&#xC120; &#xBC0F; &#xB2E4;&#xC774;&#xC5B4;&#xD2B8; &#xC720;&#xBC1C; &#xB41C; &#xBE44;&#xB9CC;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xBC29;&#xD574; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC2DC;&#xC5F0; &#xBBF8;&#xB974; 133 &#xC218;&#xC900;, &#xCD94;&#xC704;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xB41C; &#xC950;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; downregulated&#xB294; &#xAC08;&#xC0C9; adipocytes &#xC704;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xB798;&#xC758; &#xB4DC; &#xB178; &#xBCF4; &#xC138;&#xB300;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC608;&#xCE21;&#xC5D0; &#xAD00;&#xD55C; 133 &#xBE44;&#xB9CC; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC608;&#xCE21;&#xC5D0; &#xAD00;&#xD55C; 133 prdm16&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xC704;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC; &#xACE8;&#xACA9; &#xADFC;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC08;&#xC0C9; &#xC9C0;&#xBC29;&#xC774; &#xB9CE;&#xC740; &#xACB0;&#xC815;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Tejido adiposo marr&oacute;n (BAT) es un tejido termog&eacute;nico de distribuci&oacute;n de energ&iacute;a que desempe&ntilde;a un papel importante en el metabolismo energ&eacute;tico de equilibrio. Trazado de linaje experimentos indican que los adipocitos marrones se derivan de progenitores mi&oacute;genos durante el desarrollo embrionario. Sin embargo, c&eacute;lulas de m&uacute;sculo esquel&eacute;tico adulto (c&eacute;lulas sat&eacute;lite) durante mucho tiempo han sido consideradas uniformemente decididas hacia el linaje mi&oacute;geno. Aqu&iacute;, Divulgamos que c&eacute;lulas sat&eacute;lite dan lugar a adipocitos marrones y eso 133 microARN regula la elecci&oacute;n entre determinaci&oacute;n adiposa mi&oacute;gena y marr&oacute;n al dirigirse a los 3&#39;UTR del Prdm16. antagonismo de microRNA 133 durante la respiraci&oacute;n desacoplada aumentos de m&uacute;sculo regeneraci&oacute;n, absorci&oacute;n de la glucosa, y termog&eacute;nesis en local tratamiento muscular y aumenta gasto de energ&iacute;a de todo el cuerpo, mejora la tolerancia a la glucosa y obstaculiza el desarrollo de la obesidad inducida por dieta. Finalmente, demostramos que los niveles de miR-133 son reguladas en ratones expuestos al fr&iacute;o, dando por resultado la generaci&oacute;n de novo de adipocitos marrones derivadas de c&eacute;lulas sat&eacute;lite. Por lo tanto, microARN-133 representa un importante objetivo terap&eacute;utico para el tratamiento de la obesidad.

133 MicroRNA controla determinaci&oacute;n adiposo marr&oacute;n en c&eacute;lulas del m&uacute;sculo esquel&eacute;tico sat&eacute;lite dirigi&eacute;ndose a Prdm16.

Alessandra Pasut

Sprott Center for Stem Cell Research

Ottawa Hospital Research Institute

Isolation and Culture of Individual Myofibers and their Satellite Cells from Adult Skeletal Muscle

Alessandra Pasut

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Ottawa Hospital Research Institute

Isolation and Culture of Individual Myofibers and their Satellite Cells from Adult Skeletal Muscle

Sprott Center for Stem Cell Research