Method Article
ここでは、モチベーションを高めるために広範囲の訓練または剥奪を必要としない、天然に存在する動作時の桁移動を含む近位および遠位の両方前肢の機能の回復を検出することができる齧歯類の行動アッセイを説明します。
子宮頸部脊髄損傷(SCI)のいくつかの実験モデルは、脊髄のこのレベルにダメージの影響を評価するために最近開発されている(ピアースら 、2005、Gensel ら 、2006、アンダーソンら 、2009) 、人間のSCIの大半は(; www.sci - INFO - pages.comヤング、2010)ここで起こる。行動赤字は降順モーターと昇順感覚システムの両方に影響を与える白質への損傷によって前肢機能の喪失、および前肢のために感覚入力とモータ出力を処理するためのセグメント回路を含む灰白質に含まれています。また、子宮頸部SCIと人間の患者のための主要な優先順位は、手/腕の機能の回復(アンダーソン、2004)である。したがって、近位および遠位の両方前肢の機能を評価するアウトカム指標が必要である。子宮頸部SCIの実験モデル(Girgis ら 、2007、Gensel ら 、2006、Ballerman ら 、2001、メッツとWhishaw、2000年、好奇の前肢回復のさまざまな側面に敏感ないくつかの行動アッセイがありますがとミラ、1993、モントーヤら 、1991、WhishawとPellis、1990)、いくつかのテクニックは、微細運動の制御と数字の動きの回復に関する詳細な情報を提供しています。
現在の測定技術、アーバイン、ビーティーズやブレスナハン前肢の規模は(IBB)、モチベーションを高めるために広範囲の訓練または剥奪を必要としない、天然に存在する動作時の桁移動を含む近位および遠位の両方前肢の機能の回復を検出することができます。 IBB片側C6 SCI後の回復を観察することによって生成され、一貫性のある大きさの異なる2つの形の穀物を(球状とドーナツ)食べる動物のビデオ録画が含まれた。これらのビデオは、その後、関節の位置、オブジェクトのサポート、桁の移動と把持手法として前肢の使用の特徴を、評価するために使用されていました。
ホテルIBBは、他の前肢の行動のタスクと同様に、傷害の重症度に敏感な回復の一貫したパターンを示しています。さらに、IBB規模は傷害の他のタイプに影響を与える通常の前肢の機能は、次の回復を評価するために使用することができる。
齧歯類のA.トレーニング:
図1。パースペックス/プレキシガラスシリンダー(b)は、ホームケージ内で動物を撮影する中で動物を撮影する行動試験()IBBのための部屋のレイアウトを推奨。
VIDEOS OF B.評価:
動物は穀物を食べるとすぐに穀物の一部が食べれるように停止し始めると、動物の前肢の機能の評価は、できるだけ早く開始すべきである。
評価は、食べるの開始前に一貫性のある大きさや形状のものである球状とドーナツ型のシリアルで行う必要があります。試験前に壊れている穀物の部分を食べるとき、動物は、得点されるべきではない。
評価のために、それが強くビデオの速度が負傷する場合でも、少なくとも半分の元の速度に遅くすることが推奨され、ラットはすぐに食べることができると主要な動作の発生を見逃す可能性があります。これは、QuickTimeやWindows Media Playerなどのプログラムで実現することができます。最近(つまり1〜14日の後傷害)負傷、ラットは、彼らの回復の後の段階でラットよりも穀物を食べるためにかなり時間がかかります。このように、実験者は、彼らの回復の初期段階で対後の段階でラットを評価するために使用するビデオの長さの違いを心配すべきではない。
動物を観察しながら、以下の行動の機能の存在に注意するスコアシート(図2)ホテルIBB使用。前肢の機能の回復は、左からIBBスコアシートの右側に発生します。
図2。アーバイン、ビーティーズやブレスナハン前肢の規模に付随する個々のカテゴリが設定されたスコアリングシート。シートの前半は、近位前肢の機能の回復を表し、シートの後半部分は、前足の回復に焦点を当てています。
優勢な肘関節の位置:
ラットは、食べ相(図3)中に肘が想定する最も一般的な位置(時間の50%以上)のために評価される。
として採点:
図3。 。。。ラットを食べる時に肘が想定する最も一般的な位置(時間の50%以上)のために支配的な肘の位置を評価されている拡張肘を超える160 °の角度でまっすぐに保持されている場合に、 部分的に屈曲 -肘未満160 °の角度で屈曲が90 °以上され完全に屈曲 -肘が90 °未満の角度で屈曲される。
近位前肢の運動:
ラットは肩および/またはまたは穀物(図4)と前肢の接触が得られない場合があります障害前肢の肘による動きのために評価される。 [ラットは、彼らが穀物を食べる時に表示される回復の最大の範囲で採点されています。動物が食べることの間にわずかなと広範両方近前肢の動きを示している場合、それらは広範な動きを持つものとして採点されます。]
として採点:
図4。近位前肢運動。ラットは肩および/ またはまたは穀物と前肢の接触が得られない場合があります障害前肢の肘による動きのために評価される。これらの近位前肢の動きは、いずれかとして定義されている: なし -肩および/ または肘関節、けいれんとすくめる秋の半分以下の範囲での動きとして定義されている-は肩および/ または障害前肢の肘の動きわずかではありません。このカテゴリに広範なが - 。肩及び/または肘関節、早期回復の中の半分以上の範囲であるの動きとして定義され、これらの動きは多く、不安定なことができます。
非掌側に連絡して下さい:
ラットは、食べて支援する立場にそれを維持し、穀物の部分を安定させるために障害前肢の非手掌面を使用する能力のために、そうすることで評価される。支持体として作用してもよい前肢の区域は手首上の前腕、手首または数字の背面(図5)です。
*注:掌側には、古代ローマ人のために使用されるラテン語で"VOLA"から来ている"手のひらと足の裏。"
として採点:
図5。非掌側のサポートにお問い合わせください。ラットは食べ支援する立場にそれを維持し、穀物の部分を安定させるために障害前肢の非手掌面を使用する能力のために、そうすることで評価される。支持体として作用してもよい前肢の区域は手首上の前腕、手首または数字の後ろです。お問い合わせ以外の掌側のサポートはどちらかのように定義することができます: なし -食べる(時間の<5%)中に前肢によるNO以外の掌側のサポートの一部 -オブジェクトの非掌側サポートは、食べる時には発生しませんが、常にではありませんほとんど 。 常に -オブジェクトの非掌側のサポートは、食べること(時間の> 95%)中にほぼ常にまたは常に発生します。非掌側サポートは、手首、上記(i)のような分野、(ⅱ)手首または桁の(iii)のバックを含みます。
優勢な前足の位置:
ラットは、(図6)食べる時に、拡張する屈曲部から数値が想定する最も一般的な位置(時間の50%以上)、のために評価される。
として採点:
図6。優勢な前足の位置。ラットは、数字によって想定されている最も一般的な位置(時間の50%以上)のために評価される。数字は屈曲し、〜90度の関節角と拳で開催される - 。屈曲と固定、こん棒状の(i)のいずれかとして得点(ⅱ)非順応性、拡張 - 数字が°、保有目的の形状に適合していない> 160の角度で拡張されています。 (ⅲ)部分的に適応性、屈曲 - 数字は部分的に拡張され、オブジェクトの形状に適合しています。正方形内の図は上から、数字の1と3(*)を描いた、障害前足を観察している。
掌側に連絡して下さい:
ラットは、(図7)食べることを支援する立場にそれを維持し、穀物の部分を安定させるために障害前足の手掌面を使用する能力のために、そうすることで評価される。
として採点:
図7。掌側のサポートにお問い合わせください。ラットは食べ支援する立場にそれを維持し、穀物の部分を安定させるために障害前足の手掌面を使用する能力のために、そうすることで評価される。掌側のサポートに連絡していずれかとして定義できます:なし - なし掌側支持前肢で食べる時に(時間の<5%)。いくつか - オブジェクトの掌側のサポートは、食べる時に発生する可能性がありますが、常にではないではありません。ほとんど常に - オブジェクトの掌側のサポートは、食べること(時間の> 95%)中にほぼ常にまたは常に発生します。時間をかけて掌側支持の回復の例は、14日後の傷害、(ⅱ)28日後の傷害(ⅲ)42日後に傷害(i)上記の表示されます。
操作時の手首の動き:
ラットは一度足の裏のサポートが確立されている、食べる時の障害前足の手首の動きの有無を評価されている。障害前足と穀物の間の接触がない場合に発生する手首の動きは採点されていません。これらの動きは、例えば、任意の方向に発生することが、背を(頭に向かって)腹側(下胃に向かって)方向または内側(身体の正中線に向かっての)に横(離れて身体の正中線から)方向(図8)に。
として採点:
図8。手首の動き。ラットは一度足の裏のサポートが確立されている、食べる時の障害前足の手首の動きの有無を評価されている。障害前足と穀物の間の接触がない場合に発生する手首の動きは採点されていません。これらの動きは、例えば、任意の方向に発生することが、(i)の背側(頭部に向かって)腹側へ(下胃に向かって)方向または(離れて身体の正中線から外側へ(体の正中線に向かっての)(ⅱ)内側)方向。
穀物の調整(制御):
ラットは健常前肢の成功manipulatory動きに(時間的に)同期して、こと穀物の適切な操作(図9)に寄与している障害前肢による動きのために評価される。 [動物が食べる時に誇張されたと微妙な両方近前肢の動きを示している場合、それらはこれらがさらに回復して消えるように、大げさな動きを持つものとして採点されます。]
として採点:
図9。穀物の調整(コントロールが)。ラットは健常前肢の成功manipulatory動きに(時間的に)同期し、そしてそれは穀物の適切な操作に貢献している障害前肢による動きのために評価される。これらの穀物の調整は、いずれかとして定義できます:なし - 肩および/または肘および/または前足の間の接触の完全な損失を生み出す障害前肢の手首の動き - 誇張障害前肢によるNOの穀類の調整は、ありませんと穀物や微妙なは - 肩、および/または肘、および/または食事の時に前足と穀物の間の接触を失うことなく発生した障害前肢の手首が動きとして定義されています。 [動物が食べる時に誇張されたと微妙な両方近前肢の動きを示している場合、それらはこれらがさらに回復して消えるように、大げさな動きを持つものとして採点されます。]
桁運動の存在
ラットは、(図10)食べる時に個々の数字による動きの有無を評価されている。これらの動きは次のいずれかになります。
として採点:
図10。桁運動の存在。ラットは、食べる段階で個々の数字による動きの有無を評価されている。数字の動きが発生する可能性がありますが、これらの動きは、穀物と掌の接触が発生しない - 非接触:これらの動きはどちらでもかまいません。 manipulatory問い合わせ - 数字の動きは、オブジェクトと数字の掌側に接触するとそうすることで、結果の操作を行うことを起こり、穀物の操作に貢献しています。 (ⅲ)1から5までの数字の組織を示すラットの前足の手掌面を描いた概略図であり、(ⅳ)部分的に球状に形成された物体を把持適応位置を屈曲で前足の数字です。
把握方法:
ラットは、食べる段階で使用される最も一般的な(時間の50%以上)把握する手法のために評価される。いくつかの把握の方法が存在するが、最も一般的には"挟み撃ち"、"フック"と"全体"を把握(図11)です。ラットで使用されるつかむテクニックは、穀物のピースのサイズや形状に応じてステレオタイプです。以下の図は、ドーナツ状の穀物(図12)と球状穀物(図13)の消費の間に減損していないラットで使用されている技術を把握するのシーケンスを表しています。
として採点:
図11。方法を把握する。ラットを食べる段階で、この支配的な把握techinique場合に使用される最も一般的な(時間の50%以上)把握する手法のために評価が行われているとけがする前に使用される手法と整合的である。いくつかの把握の方法が存在するが、最も一般的には、(ⅱ)"フック"と(ⅲ)"全体"を把握、(i)は"精度"です。ラットで使用される把持技術は(図12、図13を参照)シリアルピースの大きさや形状に応じてステレオタイプです。食べる段階で穀物の一部をサポートし、制御する前に傷害に使用されるメソッドに把握する別の方法を一貫して使用 - ラットで使用される把握方法は、異常として定義することができます。時には、通常の - 食べる段階で穀物の一部をサポートし、制御する前に傷害に使用されて把握する手法の矛盾した使用。ほとんど常に正常 - 食べる段階で穀物の一部をサポートし、制御する前に傷害に使用されて把握する手法を一貫して使用。
図12。ドーナツ状の穀物の部分の消費時に減損していないラットで使用されている技術を把握するのステレオタイプの配列。
図13。球状穀物の部分の消費の間に減損していないラットで使用されている技術を把握するのステレオタイプの配列。
C. ASSIGNING IBB SCORE
D.トラブルシューティング
動物は食べていないときは:
時折、ALL行動タスクと同様に、いくつかの動物は、正常に動作しない可能性がある。研究から動物(s)を排除することを避けるための試みで、動物が撮影されながら、自分のホームケージで食べるようになるかどうかを確かめる。これが可能な場合は、シリンダーで食べる他の動物の能力にもかかわらず、ラットの全てが一致するように自分のホームケージで個別に評価すべきである。動物が撮影されながら、ホームケージで食事を拒否した場合、彼らは撮影中に"ケージの相棒"が存在している必要があります。このような理由から、動物はペアで飼育する必要があります。その失敗、ラットは研究から廃棄する必要があります。
なぜ私はテストのために球状とドーナツ型の穀物を使用する必要はありません。なぜ他の形や大きさ?
IBB規模の開発中に、ラットはまた、穀物のフラット、正方形のピースで試験した。負傷した後、ラットは穀物を保持し、消費一つ足を使用します。対照的に、球状とドーナツ状の穀物は食べることの間に何らかの形で障害前肢に従事するラットを余儀なくされた。それは、オブジェクトのサイズが部分的に穀物を持つすべての桁の接触の機会があったかどうかを決定することも明らかとなった。穀物のサイズの小さなや破片は、このように、これらの数字の機能を評価するからビューアを防止する、食べる時に穀物を持つすべての桁の接点を(最も重要な数字4と5)必要としなかった。
なぜ私がテスト用の球状とドーナツ型のシリアルの両方を使わなければいけないのですか?
前述したように、球状とドーナツ型の穀物の消費量は、負傷前足(図12および13)の全桁を使用することを取り組みます。しかし、これらの穀物の形状のそれぞれに通常の食事パターンの詳細な分析は、類似点と相違点の両方を明らかにした。ラットではこれら二つの異なる形の穀物を食べるように穀物の部分が小さくなるようにたとえば、数字の間にスペースが徐々に低下を起こすことがあります。インタースペースの減少は、個々の数字による動きを決定する視聴者のためにそれが難しくなります。この点に関連して、ラットは最初の球状に形成された穀物を処理する際にドーナツ状の穀物を使用して作成されたものより数字の間に大きな距離があります。これは、食べるのこの初期段階での数字の独立した動きを決定する視聴者のためのそれを容易にします。対照的に、ドーナツ状の穀物は、このように数字の動きを見る機会を増やし、球形よりも全体食べる段階の間の数字のより多くの接触と動きが必要です。
私はいつ食べフェーズ中のスコアを獲得するか?
スコアホテルIBBそれを割り当てるために動物の評価は、できるだけ早く動物が食べて始めると開始すべきである。 AssessmENTは、正しいサイズと形状のオブジェクトで行う必要があります。オブジェクトの破片を食べるとき、動物は、得点されるべきではない。さらに、食べる段階の間のスコアは、穀物の部分の消費量全体に障害前肢で行われたすべての動きを伴います。これは、ラットでは穀物をかむために一時停止時間中に行われた動作が含まれています。
"広範な"または"わずか"に近位前肢の動きをどのように決めるのですか?
広範な近位前肢の動きは、関節の範囲の3分の1以上を移動するものとして説明されている、多くの状況でこれらの動きは、数多くのと不安定です。わずかに近位前肢の動きが影響を受ける前肢がオブジェクトから推進されていることを短い距離に基づいて、広範な動きよりも明白です。これらは、関節の範囲の3分の1以下に移動する前腕の動きです。前腕の関節の運動範囲については、図14を参照してください。
図14肩、肘、手首の関節の動きの範囲。
動物は両方とも非掌と掌側のサポートに連絡している場合はどうなりますか?
動物の前足の両方非掌と掌側の領域でシリアルをサポートしている場合、その動物は、いくつかの接触、非掌と掌側のサポートを持っているとして採点してください。
一般的にはラットでは、微妙な穀物の調整がありますが、この誇張された調整の単一の発生率がある。どのように私はその動物を評価すべき?
あなたがシートの右に移動すると、ラットは、彼らが食べる段階で自分自身を提示する方法まれに関係なく、異常な行動の存在をより大きく減点される。これは、ラットは、その最高のパフォーマンスを表すスコアを与えていることを確認することです。通常の動物は、誇張された穀物の調整は発生しません。このケースでは、ラットは、誇張された穀物の調整を持っているとして採点してください。
長期延長、非順応性の足の位置は、どういう意味ですか?
前足の数字は160度以上の角度で伸ばしている、と穀物片の形状/サイズに準拠していない。
手首関節が動いているかどうかはどのように判断するのですか?
動物の手首が食べる段階で動いているかどうかを確立するとき、観察者は肘および/または肩の動きが手首の動きの外観を与えていないことを確認してください。
手首は掌側のサポートの前に移動できますか?
けがのさまざまなエクステントを後のラットの広範な分析に続いて、手首の動きは、一般的に、観察された一回手掌の接触は、穀物で作られたされた。
ラットは、"通常の"つかみ方式を使用している場合、どうやって知ることができますか?
すべての行動試験と同様に、ベースラインデータは、動物が怪我する前にオブジェクトを握っている方法を確立するために注意しなければなりません。動物は、オブジェクトの形状に応じて別の把握戦略、次の傷害を採用する可能性があるので、これが必要です。頸部損傷する前にラットの広範な分析を以下の我々は、彼らはオブジェクトの形状(図12、図13で説明したように)に応じてステレオタイプの把握の手法を使用することがわかった。例えば、球体と、ラットは一般的にこのようにこれらの把持パターンの代わりに使用するものは異常とみなされる"挟撃のグリップを"、使用することによって終了し、"全体のグリップ"で始まり、でしょう。
どうすればスコアホテルIBB割り当てる必要があります?
IBB 0から9までのスコアが回復の進行の10ポイントの順序尺度です。ラットは、各ポイントを記述またはラットが最も近い赤字のスコアを獲得された行動のすべてを満たす必要があります。
アーバイン、ビーティーズやブレスナハン前肢の規模は(IBB)前肢のリカバリ進行の10ポイントの順序尺度です。ホテルIBB近位および遠位前肢のタスクに設定が2つの整数のシリアル片の消費中に使用する、球状とドーナツ型のシリアルの両方の多くの機能を分析。穀物を食べる動物のビデオは、最も一般的な前肢の両方の形状で使用される動作(関節の位置、オブジェクトのサポート、数字の動きと把握手法を含む)し、IBB得点を表すために選択されたこれらの動作の組み合わせに基づいて割り当てられているために評価される前肢回復の最大量。評価は、一貫性のある大きさや形状のものである穀物で行う必要があります。穀物の破片を食べるときにこのように、動物は得点されるべきではない。動物は、それぞれのポイントを説明したり、動物が近い赤字のポイントを獲得された行動のすべてを満たす必要があります。
ホテルIBB実験的に誘発された子宮頸部SCI以下の前肢の回復の評価のために作成されました。私たちの研究室における初期の研究は、他の行動アッセイと同様に、回復が得点ホテルIBB用いて評価することを見出した傷害の重症度に敏感です。 IBBの使用は、子宮頸部SCIに限定されていない可能性がありますでなく、適切な前肢の機能に影響を与える中枢および末梢神経損傷の他の形態に適している。
NIHグラントNS038079(MSB&JCB)、NIHグラントAG032518(MSB&JCB)、ニューヨーク州CORE 19772(MSB&JCB)、NIH NS069537(ARF)とNIH NS053059(ARF)。
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Froot Loops | Kellogg’s | Doughnut-shaped cereal Available in: India, Australia, Canada, USA, Germany, Middle east and South America. Diameter: ~ 81 mm | |
Reese’s Pieces | Herseys Co. | Spherical-shaped cereal Available in: USA Diameter: ~ 63 mm | |
Perspex Cylinder | Tapp Plastics | N/A | Diameter: ~ 200 mm and Height: ~ 460 mm |
Digital camera with DVD playback | Sony Corporation | DCR-DVD403 NTSC | 10x optical/120 digital zoom, 1/4-1/4000 shutter speed, full range manual/auto focus |
2 large Mirrors | Any Supplier | N/A | Width: ~ 750mm and Height: ~ 500 mm |
このJoVE論文のテキスト又は図を再利用するための許可を申請します
許可を申請This article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2023 MyJoVE Corporation. All rights reserved