MRIにおける視神経断面領域の定量化:フィジーソフトウェアを用いた新規プロトコル

要約

MRIを用いた視神経評価と定量の標準化された方法、広く利用可能な撮像シーケンスを利用した、画像解析用のオープンアクセスソフトウェアの詳細なプロトコルを提供しました。この標準化されたプロトコルに従うと、異なる患者と異なる研究間の比較のための有意義なデータを提供するであろう。

要約

視神経評価は緑内障診断とフォローアップの重要な側面です。このプロジェクトでは、画像取得のための3 T MRIと画像処理定量のためのImageJのフィジーソフトウェアを使用した視神経断面評価と定量の統一方法論のためのプロトコルを記述します。画像取得は、3 T MRIを用いて行い、画像化中に患者が直進固定を確保するための適切な指示を与えた。T2加重脂肪抑制配列を用いた。地球の後ろに3mmを取り、視神経軸に垂直に取られたコロナカットは、ソフトウェアにアップロードする必要があります。閾値機能を用いて、視神経の白質領域が選択され、定量され、よって、個々の測定バイアスを排除する。我々はまた、以前に発表された文献に基づいて、年齢に応じて視神経断面積の正常限界を説明した。我々は、記載されたプロトコルを使用して、疑わしい緑内障患者の視神経を評価した。視神経断面積は正常限界内であることが判明し、視神経の光コヘレンス断層撮影を介してさらに確認された知見である。

概要

緑内障は、不可逆的失明の最も一般的な原因であると考えられている視神経障害である¹.それにもかかわらず、診断を確立するための単一の標準基準を持たない病態生理学および診断の点ではまだ十分に理解されていない^2.国立健康・ケア・エクセレンス研究所(NICE)によると、原発性開放角緑内障(POAG)の診断には、眼管試験または光コヘレンス断層撮影(OCT)イメージング、視野場評価、眼圧測定³に関する光学ディスク評価を含む複数のドメインの評価が必要です。緑内障の診断の背後にある考え方は、10月⁴日に定量的に行うことができる進行する視神経障害の存在を確立することです。この点に関して、MRIは視神経評価および白質領域⁵の定量にも使用することができるが、臨床的に意味を持つためには、視神経白質定量に用いられるプロトコルを標準化する必要がある。さらに、プロトコルは、異なる疾患の精度に影響を与える可能性のある要因である個人間変動にも対応する必要があります^。

緑内障における視神経評価は、視神経の最も前部(例えば、視神経板)が評価されるOCTを含む眼科画像を介して最適に評価される。一方、視神経評価のためのMRIの使用は、通常、地球から様々な距離で視神経のレトロブルバー部分を評価する。いくつかの研究は、OCTとMRI^7、8を使用して、視ディスク評価の間に強い相関関係を発見^しました。しかし、MRIに対する視神経評価と定量化のための統一されたプロトコルはまだありません。MRIの視神経境界の概説は、その断面領域⁵を定量化するために使用されてきた。ただし、この方法は、経験豊富な評価者が行う必要があり、アウトラインにかなりの時間を要するため、評価者間の変動性がかなりあります。現在のプロジェクトの目的は、画像取得のための3 T MRIとImageJのフィジーソフトウェアを使用した視神経断面評価と定量のための統一された方法論のためのプロトコルを提供することでした。

プロトコル

以下の研究は、ヨルダン大学病院の研究委員会および機関審査委員会によって承認されました。以下のプロトコルは、MRI画像の取得に使用される画像技術を説明し、その後、フィジーのソフトウェアを使用した画像処理および視神経定量を行う。

1. MRI画像取得

注:MR画像の取得は、マルチプラナーT2加重脂肪抑制シーケンスを実行するために3テスラ(3 T)MRIを使用して行われました(材料表)。

1. 患者に検査を十分に説明する。以下は患者に言及する必要がある指示および説明を含んでいる。
   1. 彼らは着替えとイメージングのための特別なガウンを着用する必要があることを患者に説明します。
   2. 酸化チタン顔料の電気伝導性のためにアーティファクト(特に3T)を生成できるため、着用したアイライナーを取り除いさせます。
   3. 患者がMRIのイメージ投射を行う禁忌を持たないことを確認^{しなさい 9:}
      1. フェイスマスク、ピアス、人工手足、磁気歯科インプラント、大脳動脈動脈瘤クリップを含む可能性のある金属材料について患者に尋ねます。
      2. 金属眼内異物について患者に尋ねる。このために、彼らは適切な保護具なしで溶接しているかどうかを患者に尋ねます。
      3. ペースメーカーやインスリンポンプ、鎮痛薬、化学療法ポンプなど、埋め込み型デバイスがMRIと互換性がない可能性があることについて患者に尋ねます。これに加えて、人工内耳/耳インプラント、埋め込み可能な神経刺激システム、埋め込み可能な神経刺激システム、金属成分を有するカテーテルは、すべて禁忌である。
      4. 患者に体の中に残された金属異物について尋ねる。これには、弾丸、散弾銃のペレット、金属シュラプネルが含まれます。
      5. 外科用クリップまたはワイヤー縫合、関節置換または補間、下の大静脈(IVC)フィルター、眼用プロテーゼ、ステント、または子宮内装置について患者に尋ねる。
      6. 患者に、過去6週間にタトゥーを入れたかどうか尋ねてください。
      7. 過去8週間に大腸内視鏡検査を受けたかどうかを患者に尋ねる。
      8. MRIマシンの限られたスペースのために、閉所恐怖症があるかどうかを患者に尋ねる。
         注:高い体格指数(BMI)を有する患者に困難が見られる可能性があります。
   4. 患者に対して、患者がじっとしている必要がある15分かかることが予想されることを患者に説明する。
2. 指示を完了し、患者が試験を完全に理解していることを確認した後、署名された同意を得る。
3. MRI画像取得中に、患者の仰向けをMRIマシンに置き、頭部の動きを一切起させずにイメージング中にストレートターゲットに固定します。視力が悪い患者の場合は、健全な刺激を使用して固定を最適化します。固定のためのより包括的な方法は、片目を閉じる、色を変更する液晶画面の形で一元的に固定ターゲットの使用、および眼用潤滑剤の使用を含む。
4. MRIマシンに入っている間に何か必要な場合に押すことができるスクイーズボタンがあることを患者が認識していることを確認してください。ヘッドコイルを使用できる一方で、眼球用コイルと軌道コイルは、眼科画像に適している場合があります。
5. 画像取得のための次のパラメータを入力します: T2加重脂肪抑制シーケンス (TR = 3000 ミリ秒;TE = 90 ミリ秒。TE = 100;視野 = 16 cm×16 cm;行列 = 296*384;スライスの厚み = 3 mm;スライスギャップ = 0.3 mm)。最終的に解析された画像は、地球の3mm後ろの斜めのコロナ画像でした。T2加重脂肪抑制配列は一般的に視神経イメージングに使用されますが、T2高速スピンエコーイメージングを含む他の配列を使用できることに注意することが重要です。
6. 視神経直交(すなわち、垂直)のコロナカットを、地球に3mm後方の神経に取り付ける。横断および斜めの矢状面のスカウト画像を使用して、最適な視神経方向および視神経地球性接合位置を確保する。
7. 視神経の周りのCSF分布によって視線固定の質を評価し、すべての側面でほぼ等しい厚さで視神経の周りに均一に分布する必要があります。
8. 反対側の視神経を画像化するプロセスを繰り返します。

2. 画像解析

1. フィジー画像処理パッケージを (https://imagej.net/Fiji) からダウンロードします。
2. 視神経のコロナ画像を ImageJ フィジーソフトウェアにアップロードして、メニューバーの [ファイル] をクリックし、[ 開く ] ボタンをクリックして分析します。処理するコロナ画像を選択します。画像品質の低下は信頼性の低い画像解析結果につながるため、転送中に画像品質を失うことなくフィジーのソフトウェアに画像を転送します。
3. マップ縮尺に直線を描画して、長さの単位あたりのピクセル数を指定して縮尺を標準化します。次に、[分析] メニュー バーから[スケールの設定] を選択します。適切な長さの結合(すなわち、ほとんどmm)で地図スケールに表示される線の長さを指定します。
4. イメージメニューを使用して画像をグレースケールに変換し、[種類] と[8 ビット]を選択します。
5. 白い物質のピクセルの強度の範囲を定量化します。
   1. なげなわ選択ツール (プラグイン|の使用セグメンテーション|[なげなわツール]を選択すると、選択時にグレーの物質領域が含まれないように、十分な白色物質の領域を選択できます。1000ピクセル程度の白い物質の領域を選択した場合、十分であることがわかりました。 [解析 と 計測] ツールを使用して、選択した領域を定量化します。
6. [分析] メニューからヒストグラムツールを表示すると、選択したホワイト マター領域のピクセルの強度の分布が表示されます。[ライブ] ボックスをクリックして、ヒストグラムで選択した領域が評価されていることを確認します。ヒストグラム上のグラフは、強度の正規分布を示している必要があります。
7. 次のように白色物質の強度範囲を計算します。
   下限 = 平均強度 - (3* 標準偏差)
   上限 = 平均強度 + (3* 標準偏差)
8. [イメージ] メニューから[しきい値] ツールを開き、続けて調整機能を使用します。前のステップから計算された範囲を指定します。暗い背景関数のみをチェックし、ドロップダウンリストから黒と白の注釈B&Wを指定し、[適用]をクリックします。光学ディスク内に存在する白質のマスクが表示されます。
9. なげなわ選択ツール (プラグイン|の使用セグメンテーション|[なげなわツール]をクリックし、光学ディスクを表す黒色の領域を選択します。
10. [分析] メニュー バーの[測定]関数を使用すると、しきい値関数でマークされた領域が mm 単位で計算されます。

結果

検診の眼科試験のために提示する30歳の男性患者のカップ対ディスク比は0.8(図1A)であり、これは疑わしく、緑内障を示唆している可能性がある。神経線維層の厚さについて光コヘレンス断層撮影を行ったところ、神経の厚さは年齢の通常の限界内にあることがわかった(図1B)。患者は、視神経評価のためのコロナカットが注文され、上記のプロトコ...

ディスカッション

緑内障患者評価に使用される視神経白白質を評価し、定量化するためのプロトコルについて説明した。このプロトコルは、画像取得に広く利用可能なイメージングシーケンスを使用し、画像解析にオープンソースのフィジーソフトウェアを使用します。視神経画像取得において、患者にまっすぐ前方固定を求め、T2を脂肪抑制シーケンスで使用し、地球の3mm後ろの断面積を捉えるなど、これ?...

資料

Name	Company	Catalog Number	Comments
Magnetic resonance imaging (MRI) machine	Siemens Magnetom Verio	N/A	3T MRI scanner