齧歯動物の処理と抑制技術

ソース: ケイ ・ スチュワート、RVT、RLATG、CMAR;ヴァレリー A. シュレーダー、RVT、RLATG。ノートルダムのノートルダム大学

によるマウスおよびラットも、最小限の処理が動物にストレスの多いことが実証されています。ケージを変更するおよび他の非侵襲的手順の処理は、心拍数, 血圧, 血中コルチコステロンなどの他の生理学的パラメーターの増加を引き起こします。変動は、最大で数時間続けることができます。科学的なデータに影響を与える可能性のある原因の生理的変化となるも注射と血液引き出しに必要な拘束の法。マウスおよびラットの適正な取扱いの訓練は、動物への影響を最小限に抑えるために必要です。¹ マウスおよびラット抑制できる手動で拘束デバイスや化学薬品。手動による方法と制限装置の使用はこの原稿で覆われています。すべての拘束方法にはホーム ケージから動物を持ち上げる処理が含まれます

チューブまたは他エンリッチメント ・ ディバイス、² 周り把握を使用して首や尾のベースの襟首をつかむ鉗子を使用して、尾の動物を持ち上げて檻からマウスやラットを削除するための一般的な方法を伴う、体、または手のひらに動物をすくいします。^{3, 4}

尾でマウスやラットを持ち上げるとき尾が動物の臀部に近い基地で把握することが不可欠です。動物は尾の端から持ち上げる必要が、尾の皮膚 deglove することができ、体重のストレスによってオフにプルされます。デグロービング損傷は、切断されている尾になります。³、別または作業面に 1 つのケージから動物を移動すべき迅速かつ着実に。時間の任意の長さのための空気で動物を中断する、だけでなく、苦痛を引き起こす、原因をツイストする闘争は、末尾に害を生じる可能性が動物も。ハンドラーが動物の下で彼らの手を配置する必要があります-それがによって解除その尾それは一口で生じるセキュリティの手を把握しようとする動物の本能的な

檻から動物を削除する多くのマウス生産施設への鉗子が使われます。バイオ、これは動物から動物への交差汚染の少ないチャンスがあるといわれているようです。鉗子のヒントは、個々 の動物または動物のグループの処理の間にアルコールに保存するか。マウスを把握するために使用する鉗子のさまざまながあります。最も一般的に使用される非外科的ヒント長いドレッシング鉗子が含まれて-、ゴム、プラスチック、またはシリコーン チューブ クッションを提供するために鉗子の両端上に配置-ラバー グリップで鉗子を舌や。⁴

鉗子は首の首筋で、尾の基部にマウスを把握できます。ほとんどのマウスは、すぐにこのメソッドに慣れておよび苦労しません。しかし、忍耐と実践は動物をキャッチを得意になるためにあります。初心者は、これは、呼吸を妨げることができるようしっかりと、首筋に特に、マウスを把握する方法に関するトレーニングを受ける必要があります。けがを防ぐための尾の根元近く鉗子を配置する注意する必要があります尾で鉗子を使用する場合

、不安や常同症を展示する動物のケージにチューブを配置する可能性があります減少処理の難易度と毎日畜産に飛行/恐怖の応答を減らします。無孔材料から成ってチューブは、ウラン濃縮のため追加することができますと避難所に動物のための場所としてや、安全な避難場所を求めます。そのような管はオープンエンデッドまたは 1 つの端にキャップをすることができます。そのケージが開かれる、またはチューブに簡単に誘導できるとき、ほとんどのマウスやラットがチューブに入る喜んででしょう。動物は管の内部が、オープン エンドは新しい場所に動物を輸送するため覆われています。新鮮なケージに配置されて、チューブが優しくチップソー上向き動物それを残すことを奨励します。動物がケージを変更するこの方法を簡単に調節、チューブ、他として動物を 1 つの場所から別に移動の簡単としてこのメソッドを作ってすぐに入ります。チューブは、効果を発揮する家のケージに存在することはありませんが主筐体の管を持っていることおなじみの安全なサイトの認識を増加し同様、ケージ濃縮を提供します。²

いくつかの機関を好む動物が取扱い、特にラットの処理ルーチンの体によって解除されます。動物は、幼い頃からこの方法に慣れる必要があります。生後 2-4 週齢の幼若ラットは、まっすぐにジャンプする傾向があります。ラット上に手を置く ' s バックはそれが把握できるように、ハンドラーの手のひらにジャンプを原因となります。2 番目の手は、別のケージにそれを置く前に把握からわらわらからネズミを防ぐために必要ことがあります。ラットをそっと胸部周りを把握、解除とすぐに別のケージや、サーフェイスを配置

新生児マウスやラットとケージを変更すると、巣をそのままに保ちながらそれらを削除する必要があります。巣とケージの底から新生児をすくうに 2 つの手を使って、そのまま巣は新しいケージに移動されます。しかし、子犬が垂れないように、それぞれの手の指は密接に一緒に開催する必要があります。新しいケージに移動すると、パップスがすべて存在することを確認することが重要です。前に、それらを移動した後に子犬をカウントすることをお勧めします。プラスチックのスクープは、針の代わりに使用できます。このメソッドを使用すると、手がぴくぴく動くことまたはスクープから飛び出すから新生児を防ぐためにスクープの上に配置ください。子犬の個別処理と比較して、子犬を転送するこの方法は子犬とダムにより少なく悲惨な

技術的な手順のための拘束は、自信と企業とが、穏やかなタッチを必要とします。暫定的アプローチは、ハンドラーに刺され、結果することができます。ハンドラーには、動物の悲鳴として返ってくる、その動物はすぐに拘束を回避する方法を学習します。しかし、積極的な処理は、傷害または齧歯動物の死につながります。自己主張がまだ穏やかなアプローチのバランスは齧歯動物の処理の目標

マウスおよびラット スクラッフィングと呼ばれる、首のうなじの肌を把握することにより抑制できます。このメソッドの予防措置は、どちらもしっかりと、またはあまりにも緩く皮膚を把握など。皮膚をきつく握った場合、死につながることができる、気道を収縮になることができます。場合はあまりにも緩く握り、動物がその頭を向ける可能性のあるハンドラーをかましてできるようになります

が動揺したか非常に恐ろしい動物が噛まないように大いに本当らしい。取り扱い前に動物を落ち着かせることをお勧めします。様々 な成功と試みられてきた様々 な心を落ち着かせる方法があります。化学的拘束、最も頻繁の吸入麻酔薬のいくつかの並べ替えを使用する最も信頼性の高い方法です。イソフルランとセボフルランは、動物を檻から誘導室に転送に必要な処理のみを配信することができます短い演技吸入麻酔薬です。操作またはプロシージャの手動で拘束できる動物は麻酔後

ラットを静めるため方法厚いテリー タオル、タオルの下を非表示にすることでそれをラップすることです。ラボのコートの袖に配置彼らは肘で折り畳みで自分の頭を埋めることができる可能性がありますもに動物に安全安心感を提供します。これと同じ結果は数分の暗い領域に動物を配置することによって達成できます

1。 スクラッフィング

マウスが最もよくスクラッフィング テクニックを使用して拘束されたが、幼若ラットは、この方法でも拘束されたことができます。ラットはより多くの筋肉の首、たるんだ皮膚の減少量とこのメソッドへの嫌悪感のためこの手法で抑制するため難しく

1. 片手の拘束方法は、無胸腺のヌード、SCID, といくつかの宝石の系統など、非常に穏やかなマウス系統において最も頻繁に利用されています。ただし、この方法でかまれることの大きなリスクがあります。初心者動物ハンドラーは、片手でメソッドを実行する前に両手拘束技術と快適になります。
   1. ワイヤ バー ケージ上部など、マタイ、彼らが握ることができる表面に動物の場所
   2. は、利き手の 3 番目と 4 番目の指の間尾をホールドし、穏やかな後方牽引力を適用します。これは、表面上に保持するために動物が発生し、拡大され、細長い体の結果します
   。
   3. 手のひらが動物の体に直面しているので、手を有効にします
   。
   4. 人差し指と親指、肩に齧歯類をピンします
   。
   5. ゆっくり親指と人差し指を前方と頭蓋底にそれらを配置します。首のたるんだ皮膚を持って、動物を取り出します
   。
   6. 中指を固定して、親指の根元に対して背側皮膚背面に沿って動物を安定させるために使用します
   。
2. 両手拘束
   1. ことができますグリップ表面に動物を配置します
   。
   2. は支配的な手で (体の 1-2 cm) 内基地で尾を押し穏やかな後方牽引力を適用します。これは、表面上に保持するために動物が発生し、拡大され、細長い体の結果します
   。
   3. その他の手の親指と人差し指で肩に齧歯類をピンします
   。
   4. ゆっくり親指と人差し指を前方と頭蓋底にそれらを配置します。首のたるんだ皮膚を持って、動物を取り出します
   。
   5. 残りの指を固定して、親指の根元に対して背側皮膚背面に沿って動物を安定させるために使用します
   。
   6. 第四指と手のひらに尻尾を固定することによってまたは後肢固体表面で休むことを許可することで、後半部をセキュリティで保護します
   。

図 1: マウスの片手と両手の拘束方法

2 です。 手袋

ラットのかみ傷からの保護のために着用するためのハンドラーに使用できるさまざまな手袋があります。彼らは一般的に器用さの喪失によるマウスでの作業に適しています。多くの場合、多くのグローブ型の欠点が利点を上回るです

1. コットン キャンバスの作業用手袋はかみ傷耐性、ありませんが、少量の歯や爪からの保護を提供します。彼らは、便利で簡単にスライド、良いグリップを提供しない
2. 質の良い革手袋かみ傷耐性があります。しかし、その剛性は、器用さの減少を引き起こします。革の厚さも保護、削減触覚の視力と手の移動
。
3. チェーン メールの手袋は、動物のハンドラーの心理的な安心感を提供します。しかし、彼らは重いとほとんどのラット ' 歯のリンク間に浸透することができます。さらに、これらの手袋は手先の器用さを減少、不適切に使用される場合はより危険な動物のハンドラー
。
4. ゴム-齧歯動物の毛にセキュリティで保護されたグリップのためテクスチャの掌を提供でき、お皿を洗うための家庭で一般的に使用される絶縁手袋。伸縮性のあるラテックス表面は齧歯動物の門歯が穿刺に抵抗、薄いを感じるし、動物を制御することができるのに十分に十分な厚さです。主要な不利な点は、ラテックス アレルギーを持つ人のための関心事であるラテックスから成っていることです。さらに、これらの手袋光で悪化し、定期的に交換する必要があります
。

3。体拘束

1. 、" t. レックス グリップ " ラット用両手拘束方法です。
   1. 握ることができる表面にラットを配置します
   。
   2. 一方を持参し、人差し指と中指の分割と背中に片方の手で尾の根元を保持します
   。
   3. は、index finger 頭の片側と反対側に中指で肩に手を置きます。頭の両側に指は頭のサイド ・ ツー ・ サイド動きを制限します
   。
   4. は、第三指、第四指と親指で前足の後ろに本体を取り囲みます。胸を圧縮して、呼吸を損なうことを避けるために注意する必要があります。このグリップは手の前後の移動からネズミを防ぐことができます
   。
   5. または後部のフィートの上に保持することがなく尾の根元をつかんで尾と後半部を安定させる
   。
   6. 作品と大きいラットは、よく頭にアクセスするとこの拘束が必要です
   。
2. 前肢交差メソッドは両手拘束メソッドです。
   1. ことができますグリップ表面に動物を配置します
   。
   2. は支配的な手で (体の 1-2 cm) 内基地で尾を押し穏やかな後方牽引力を適用します。これは、表面上にグリップする動物が発生し、拡大され、細長い体の結果します
   。
   3. 背中にもう一方の手を後ろからもたらす
   。
   4. 1 つの側面の指と胸の反対側の親指で、肩の後ろに直接ラットをつかんで、手の前方、招き、前足を前方にスライドです
   。
   5. ラットの下で前足が交差 ' s あご、物理的な障壁を作成し、に向かって指その頭からラットを防止します
   。
   6. 胸を圧縮して、呼吸を損なうことを避けるために注意してください
   。

図 2: T-レックス グリップと前肢にラットを抑制するための方法が十字模様

4。拘束デバイス

図 3: ブルーム スタイル拘束デバイス

図 4: 平底齧歯動物落

1. リジッド デバイスは、さまざまな種類と簡単に消毒は無孔材料の作られて一般に。
   1. ブルーム スタイル拘束は、静脈注射の尾へのアクセスを提供するために設計されています。まず落後半部に引き出される動物を可能にするデバイスのフルの長さに沿って実行されるスロットで構築されます。代わりに動物を保持するプラスチック製のノーズピースが挿入されます。
      1. 拘束管体からネジをゆるめてレボルバを削除します
      。
      2. 、尾の基部に動物をつかんで拘束チューブを向きスリット チューブの長さを実行するが向いています。優しく動物に引っ張る拘束デバイス後半部最初
      。
      3. チューブへの配置を容易にする滑らかな表面に動物を配置すると効果的です
      。
      4. 動物が完全に管に- されている描画クローズド エンド スライドする開口部を閉塞し管にプラスチック製のノーズピース
      。
      5. ノーズピース アセンブリに置きますので、動物 ' s 鼻は、中央の開口部。レボルバを動物が呼吸できないので、しっかりと配置できません
      。
   2. 平底の齧歯動物の落は制止装置の上下からアクセスできる開口を有する半円筒。硬質プラスチックのゲートは、1 つのデバイス内の動物を保持するためにいくつかの卒業スロットに挿入されます。
      1. 滑らかな表面またはケージの上の支配的な手で尾のベースで動物を保持します
      。
      2. 他方、平底拘束チューブを押しながらそれを開放端は、動物、角度 ' テーブル/ケージ上面角度 45 ° s 頭
      。
      3. 他の消極的とチューブにそれらを操縦するためにハンドラーを必要とする間、いくつかの動物は、チューブを入力すぐにします
      。
      4. チューブに動物かぶせます ' s 頭。すぐに動物をタップ ' s 尻中をバックアップから動物を防ぐために圧力を維持して
      5. 動物が拘束デバイス、制止装置で動物を保持するために適切なスロットにプラスチック製のゲートをスライドです
      。
   3. チューブ拘束、プレキシ ガラス シリンダーの穴や空気の循環のためのスリットを含む 1 つのクローズ エンド。いくつかは、cylinderto の長、筋肉内注射、伏在大腿採血の後肢の露出に対応または皮下注射のため背側表面へのアクセス幅 slothalf で変更されます。
      1. 動物の滑らかな表面またはケージの上の支配的な手で尾の根元をつかんでいます
      。
      2. その他の手で拘束チューブを握り、それを開放端は、動物、角度 ' テーブル/ケージ上面角度 45 ° s 頭
      。
      3. いくつかの動物はすぐにチューブを入力します。他の動物は、消極的であるとチューブにそれらを操縦するためにハンドラーを必要とします
      。
      4. チューブに動物かぶせます ' s 頭。すぐに動物をタップ ' s 尻中をバックアップから動物を防ぐために圧力を維持して
      5. 首筋と手動ガイド手に負えない動物チューブ、チューブにスリットまでスライドして開催されている皮膚を可能にします
      。
      6. 動物は拘束デバイスでバックアップ中から動物を防ぐために開口部を閉塞する必要が
      7. に応じて、いくつかの指がオープニングを越え配置されます
      。
      8. は、開口部に大型のラテックス手袋を詰め込みます。手袋テクスチャです通常、プレキシ ガラス表面をグリップします
      。
      9. いくつかの拘束チューブが閉鎖スタイルまたはサイズを特定します
      。

図 5: チューブ拘束デバイス

2. 柔軟な restrainers は、使い捨ての柔軟なプラスチック コーンです。透明または不透明のプラスチックがあります。プラスチック製のため拘束デバイスから動物を削除せずに注射針によって浸透を許可するのに十分に薄いです。彼らは、マウスやラット、大人と幼に合わせてサイズの変化入って来します。
   1. 手足、尾、そして注入の他のサイトへのアクセスを許可するようにハサミでプラスチックをカットします
   。
   2. は、動物の適切なコーンのサイズを選択します。円錐であるべき動物を越える 2 3 インチを拡張するのに十分な長さ ' s 臀部
   。
   3. コーンに動物を挿入
      1. コーンを開き、上半分の周り把握します
      。
      2. 動物の滑らかな表面やケージの上にそれを置くこと、支配的な手で尾の根元をつかんでいます
      。
      3. その他の手拘束コーンを押しながらそれを開放端は、動物、角度 ' テーブル/ケージ上面角度 45 ° s 頭
      。
      4. いくつかの動物はすぐに円錐形を入力します。他の動物は、消極的であると拘束コーンにそれらを操縦するためにハンドラーを必要とします
      。
      5. コーンに動物かぶせます ' s 頭。すぐに動物をタップ ' s 尻のバックアップから動物を防ぐために圧力を維持し、。動物は、コーンの出口に好転する可能性が高く、円錐の開口部の大きい直径のため
      。
      6. 動物に入るコーンと、すぐに開放端をつかみ、最後に動物を強制的にそれを密封します
      。
      7. は、尾と 2 つ折りのプラスチックにバインダー クリップを適用する、尾や皮膚をクランプに注意しながらの 1 つの側面にプラスチックを折ることによって開口部を保護します。また、均等に、尾の周りのプラスチックを収集し、開口部を確保するためできるだけ体の近くにねじれタイを配置します
      。

図 6: 柔軟な落

5。特定の技術的な手順の拘束方法

1. 腹露出の腹腔内注射のため必要です。
   1. スクラッフィング
      1. 動物の首筋、腹部を露出するように手を回すと
      。
      2. 頭が 30 ° の角度で下方に指すように動物を傾ける
      。
      3. 4 番目の指を使用して手のひらに尻尾を固定することで後半部をセキュリティで保護します
      。
      4. 指と親指の根元の背面に沿って余分な皮膚を固定することによってまた、後半部がすることができます固定化した
      。
   2. T. レックス グリップと前肢を東奔西走拘束方法
      1. 動物 (ラットのみ) を把握上記のテクニックのいずれかを使用します
      。
      2. フリーハンド、ホック、上記両方の後ろ足を把握して尾拡張します
      。
      3. 背面に手の手のひらで動物の重量をサポートしています
      。
      4. 頭が 30 ° の角度で下方に指すように動物を傾ける
      。
      5. 2 番目の人が、インジェクションを実行する
      。
   3. 硬質落
      1. 最も厳格な制限装置は、思わず直立を維持する圧延から動物を防ぐことはできません
      。
      2. 剛体落を採用する場合に動物、その頭が下に指して、卓上に垂直です
      。
   4. 柔軟な落
      1. 動物は上や周りを有効にすることで柔軟なプラスチック製のコーンで適切に配置されて、.
      2. 後肢は腹部へのアクセスを許可するように十分に区切られているような動物を配置する注意する必要があります
      。
      3. 動物を圧縮すると、それは注入される脾臓、肝臓、腎臓、胃の穿刺を避けるために腹側の表面に十分に低く不可欠です
      。
2. 背露出が皮下組織に注射のため必要。
   1. スクラッフィング
      1. 首筋動物ができ、固体、平らな表面上に後ろ足
      。
      2. 首と肩の上の皮膚のテントを作成する首筋を持ち上げています
      。
      3. の場所上の手の重量注入するとマウス テーブル。窒息を引き起こすことができますマウスの重量を配置します
      。
      4. 、後半部が、決して胸に重みのある場所でラットを保持します
      。
      5. 物質を動物の体に指の下のスペースに挿入します
      。
   2. 硬質 restrainers
      1. 開口部皮膚の中を引くのに十分な大きさをもつチャイルドの動物を配置
      2. 鉗子を使用して肌を把握する必要があります
      。
      3. 拘束を回転させない限り、ほとんどの動物が適切な姿勢に残ります
      。
      4. 皮膚の注射が完了したら、開口部から後退を防ぐボリュームを挿入しません
      。
3. の後肢の拘束が筋肉注射に必要な大伏在静脈、大腿静脈、大腿動脈からの血液の撤退や足蹠に注入。
   1. マウスおよびラット (200 g 未満) のスクラッフィング
      1. 動物の首筋、腹部を露出するように手を回すと
      。
      2. 後肢足指の間足を配置することによってアクセスします
      。
      3. 最高足蹠注射にのみ用いられます
      。
   2. T. レックス グリップや前肢十字模様
      1. このメソッドには 2 人が必要です: 拘束体のための 1 つと 1 つの四肢の拘束と射出のパフォーマンス
      。
      2. ラットを拡張 ' 大伏在静脈、大腿静脈または動脈へのアクセス徒歩または注入のために筋肉をつかんで s 後ろ足
      。
      3. 足蹠注射用ホックのすぐ上を保持します
      。
   3. 硬質 restrainers
      1. 最初拘束管頭の動物を配置します
      。
      2. 注意深く引いてチューブから下位で尻尾と後半部を公開します
      。
      3. は、側面の皮をつかんで、膝をまっすぐにロック脚を固定します。これはマウスやラット、インジェクションの大腿四頭筋へのアクセスを提供し、拘束デバイスを終了できない動物
      。
      4. 大規模なスロットを持つ機器でサンプリングまたは足蹠注射用血管アクセス用チューブの外側の足を配置します
      。
      5. フラット エンド部分とそれらの拘束チューブ許可テーブルの残りの部分に、処理中にデバイスを安定させる管
      。
      6. 動物がこの方法で保護されているためそれは注射を行ったり、血の単一の技術者によるラットのサンプリングすることが可能です
      。
   4. 柔軟な拘束
      1. 手足の露出に合わせて開口部を切り取ることで柔軟なプラスチック製の拘束を変更できます
      。
      2. 作った開口部は、各動物のまたは具体的な手順についてカスタマイズできます
      。
      3. 動物がこの方法で保護されている、またはラットのサンプリングを血液を注射を実行する単一の技術者のため不可能だ
      。

ケージの変化と技術的なプロシージャの処理ルーチンは実験動物のストレスの原因。ストレスのこのタイプは、動物の健康に脅威ではない、研究データに悪影響を持つことができる生理学的パラメーターの変動を引き起こす可能性が。熟練労働者、適切な技術や機器の使用はいくつかのストレスを軽減できます

1. Balcombe, J.P., Barnard, N.D., and Sandusky, C. 2004. Laboratory routines cause animal stress. Contemporary Topics. 43:6. 42-51
2. Gouveia, K. and Hurst, J.L. 2013. Reducing mouse anxiety during handling: effect of experience with handling tubes.
3. AALAS Learning Library*. Animal handling and restraint in: Working with the laboratory rat. https://www.aalaslearninglibrary.org/Pages/Courses/CourseAllPages.aspx?intLessonID=27691
4. AALAS Learning Library*. Animal handling and restraint in: Working with the laboratory mouse. https://www.aalaslearninglibrary.org/Pages/Courses/course.aspx?intCourseID=2451&intPageID=94993

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