エレクトロポレーションされたL.reuteri細胞を含むMRS寒天プレートから任意のコロニーを選び、ウェルあたりフィルター滅菌されたMRSブロスと適切な選択抗生物質を含む96ウェルマイクロプレートに接種します。振とうせずに摂氏37度で24時間好気的にインキュベートします。翌日、L.ロイテリは固定相で培地から沈殿します。
ピペッティングにより培養液を再懸濁する。200マイクロリットルの培養液を、平らで透明な底面96ウェルプレートに加えます。プレートをプレートリーダーに移し、M cherry twoおよびその他の関連するレポーターの光学濃度と蛍光を測定します。
コロニーの形態は酸素の存在下で著しく変化する。低酸素条件下では、コロニーは白く、不透明で、滑らかで丸く見えます。部分的または漏れやすい条件下では、コロニーはうねり、そしてウンバネットのように見える。
一方、大気中の酸素レベルでは、コロニーは常に餌が少なく、丸く乾燥しているように見えます。野生型L.rueteriでは、増殖とレポータータンパク質の発現がコロニー間で異なるため、正確な推論が困難になります。プラスミドの硬化、および再形質転換は、より安定した発現をもたらすことができるが、それは、より安定な変異表現型に依存する、まれでユニークな発生であり、自然発生する。
