まず、痛みを和らげるために、手順の30分前に6〜8週齢のC57 Black 6J雄マウスにMeloxicamを皮下注射します。.マウスに麻酔をかけた後、足の指をつまんで反射がないことを確認します。一方の角膜表面に0.5%プロパラカインを1滴、もう一方の目に人工涙液を1滴ずつ塗布します。
次に、2ミリの生検パンチを使用して、ワットマン濾紙ディスクを打ち抜きます。清潔なペトリ皿に通常の水酸化ナトリウム1個を2マイクロリットル加え、ろ紙ディスクを水酸化ナトリウム滴の上に置き、15秒間浸します。鉗子を使用して、ろ紙を拾い上げ、角膜の中心にあるプロパラカイン処理された目に30秒間適用します。
注射器に20ミリリットルの滅菌生理食塩水を入れて洗い流して目を洗います。使い捨てのソフトワイプを使用して、目や周囲から余分な生理食塩水をやさしく拭き取ります。マウスを回復ケージに入れ、歩行可能になるまで温かい加熱パッドの上に置きます。
火傷後の 10 日目に、視野角 30 度、IR 強度 100% の IR OCT モードを使用して、眼の前部の OCT 画像をボリューム スキャンとしてキャプチャします。角膜血管新生は、アルカリ火傷マウスの眼では辺縁血管から角膜中心に向かって発芽しましたが、健康な眼では発芽しませんでした。.アルカリ熱傷群は、対照群と比較して血管新生および混濁のスコアが有意に高いことを示しました。
血管とリンパ管の角膜の免疫染色では、熱傷群では対照群と比較して10日後の血管とリンパ管の密度が有意に高かった。OCTを用いて画像化・定量化した角膜の厚さは、熱傷群で有意に高かった。
