まず、約4平方ミリメートルの領域をカバーする指間接続電極を含む96ウェルプレートを取ります。プレートをウェルステーションに置き、セットアップボタンをクリックします。ウェルが正しく接続されている場合、緑色の測定値が表示されます。
接続されていないウェルは赤で識別されます。使用する各ウェルに200マイクロリットルの媒体を追加し、プレートを電気セル基板インピーダンスセンシングまたはECISステーションに配置します。ウェルを安定化させて実験用に準備するには、[セットアップ]、[チェック]、[安定化]の順にクリックします。
40分後、ステーションからプレートを取り外し、各ウェルから培地を取り出します。B2B細胞を1ミリリットルあたり40, 000細胞の密度で細胞を含むウェルに播種し、プレートをインキュベーター内のECISステーションに置きます。次に、チェックをクリックして、すべての電極がステーションのセンサーによって読み取られていることを確認します。
複数の周波数時間を選択して、7つの異なる周波数で各電極を測定します。開始をクリックして24時間実行し、セルがコンフルエントな単層を形成できるようにします。すべての井戸の読み取り値は異なる色で表示されます。
約24時間後、細胞を含むウェルは、電極への細胞の付着を示すモニター上で増加した抵抗を示すであろう。データ収集を中断するには、[一時停止] を押します。たとえば、培地の変更、試薬のエディションなどです。
ZIF8ナノ粒子をブランクウェルとウェルあたり100マイクロリットルの容量のセルウェルにさらし、プレートをステーションに置き、もう一度チェックをクリックして、センサーがすべての電極を読み取っていることを確認します。[再開] をクリックして、選択した一時停止後に実験を再開します。データ収集が完了したら、[完了] をクリックしてデータをスプレッドシート ファイルとして保存します。
アルファパラメータを取得するには、モデルをクリックし、ポップアップ画面でメディアのみのウェルをクリックしてから、メディアのみのウェルを選択します。[データ評価用の参照の設定] をクリックし、コントロール実験に関連する参照を選択します。検索をクリックして、参照継ぎ手を開始します。
セットを選択し、T範囲をフィットして、選択した参照を基準にしてデータを処理します。セルの添付ファイルを評価するには、[アルファ] を選択します。最後に、システムが分析を終了したら、「RBA の保存」をクリックし、パラメーターをスプレッドシート・ファイルとして保存します。
ZIF8 MOFへの曝露時の細胞挙動の分析は、電気セル基板インピーダンスセンシングを通じて実施されました。画像は細胞基質相互作用の変化を示しており、その変化は曝露時間と使用されている線量に依存します。
