金カーボンドット複合ナノ粒子を作製した後、滅菌サファイアチップを24ウェルプレートに入れ、1ミリリットルの培地を1つのウェルに含むシードセルを入れます。湿度の高い環境でプレートをインキュベートして、70〜80%のコンフルエンスを実現します。金カーボンドット複合ナノ粒子を単一のウェルに加え、4〜6時間インキュベートします。
インキュベーションの終わりに、サファイアチップから培地を取り除きます。チップをPBSでそっとすすぎ、サファイアチップをPBSに浸してSERSを検出します。SERS実験を行うには、コンピューター、ラマン分光計、および785ナノメートルレーザーの電源を入れます。
次に、付属のソフトウェアを起動し、シリコンウェーハを使用してキャリブレーションを実行します。新しい測定をクリックしてからスペクトル取得をクリックし、スペクトル範囲を調整します。次に、取得タブに移動し、露光時間とレーザー出力を調整し、[OK]をクリックして新しいスペクトル取得を開始します。
鮮明なセルラー画像を得るには、20倍の対物レンズを使用してください。次に、50倍レンズに切り替えます。測定するセル上の点を選択したら、[実行]をクリックしてプロセスを開始し、スペクトルを保存します。
A549細胞のSERSイメージングを取得するには、新しい合理化画像取得をクリックし、撮影する範囲を選択して[OK]をクリックします。エッジストリームラインを785ナノメートルの中心から1、200センチメートルの逆数に設定し、露光時間を5秒に、レーザー出力を50%に設定します。ライブイメージングの新規をクリックし、ベースラインへの信号を選択し、最初の制限を725に設定し、2番目の制限を1, 700に設定します。次に、エリア設定に移動し、適切な手順を設定して、[OK]をクリックします。最後に、[実行]をクリックしてSERSイメージングの実行を開始します。
SERSスペクトルから、メチレンブルーの濃度が10〜マイナス9モルと低い場合でも、金カーボンドット複合ナノ粒子は金ナノ粒子と比較して優れたSERS性能を示すことが明らかになりました。20点で得られたSERSスペクトルは高い類似性を示した。金カーボンドット複合ナノ粒子を摂氏4度で配置してから1か月後、950、1、185および1,620センチメートル逆での平均SERS活性は、それぞれ約5.43%11.44%および13.94%の減衰度を示した。
金カーボンドット複合ナノ粒子は、A549細胞に対してかろうじて細胞毒性を示した。A549細胞の平均スペクトルが提示される。金カーボンドット複合ナノ粒子凝集体は、A549細胞のSERSマッピングにおいてバックグラウンドのノイズのない明らかなSERSシグナルを示す。
異なる細胞点からのスペクトルは、様々な細胞質領域における成分の不均一性を示した。
