まず、細いハサミを使用して、麻酔をかけられたマウスの腹部の皮膚を、剣状突起から膀胱まで切開します。一対の非外傷性鉗子を使用して、皮膚切開の途中で腹膜をつまみ、切開部とその上にある腸の間に十分な隙間を確保します。次に、無血管線に沿って腹膜を縦方向に開きます。
次に、濡れた綿の先端を使用して、腸を慎重に引き出します。次に、200〜300マイクロリットルの生理食塩水を腸に滴下し、尿管下大静脈(IVC)、大動脈、および腎静脈の経路を探ります。左腎静脈と下大静脈下静脈の合流点から遠位の両側枝を焼灼します。
尿管と血管系ににじみがないか確認してください。脊髄虚血や跛行の潜在的な合併症を防ぐために、腰椎の枝はそのままにしておきます。両側の子宮角や下腹部血管などの側枝を確認します。
次に、閉じた先端の非外傷性鉗子を使用して、6ゼロポリプロピレン縫合糸を無血管面に2〜3回静かに通します。コットンチップタンポナーデで軽く圧力をかけて、にじみを抑えます。最後に、5ゼロのポリプロピレン縫合糸を頭蓋に優しく通し、頭蓋を広げます。
十分なスペースを確保するために、縫合糸の上に血管クランプを配置します。異種移植実験群の血栓重量は、対照マウスと比較して1.5倍の増加を示しました。免疫蛍光アッセイでは、対照群のIVCは無傷のCD31とフィブリンが血管内腔を部分的に占めていることが示されました。
CD31の発現は実験群では無傷ではなく、壁にはフィブリン染色が見られました。対照群は、実験群と比較してフィブリン発現が有意に低かった。マウスの超音波グラフィック解析により、対照群マウスの結紮された腎下大静脈に部分的な血栓があることが示されました。
しかし、実験グループでは、大きな血栓が大静脈内大静脈をほぼ塞いでいました。