まず、マイクロ流体チャネル設計用のSU8マスターシリコンウェーハをプラスチック製の14センチメートルペトリ皿の内側にテープで貼り付け、窒素ガスで洗浄します。紙コップにポリジメチルシロキサン(PDMS塩基とPDMS硬化剤)を適量ずつ秤量します。木のヘラを使って、白く濁るまで混ぜます。
PDMS混合物をシリコンウェーハを含むプラスチックシャーレに注ぎます。次に、シャーレを三方活栓を備えた真空デシケーターに入れます。活栓のバルブを回して真空をデシケーターチャンバーに接続し、混合物から気泡を取り除きます。
チャネルの特徴からすべての気泡が取り除かれたら、ペトリ皿を摂氏70度のオーブン内に4時間置きます。ペトリ皿が室温まで冷めたら、カッティングマットの上に置きます。メスを使用して、シリコンウェーハの上のPDMSの部分を切り取ります。
切り抜きたPDMSをラボラッピングフィルムの2枚のシートの間に置きます。マイクロ流路の圧痕とフィルムの間のギャップは、マイクロ流路の入口と出口の位置を特定するのに役立ちます。次に、かみそりの刃を使用して、大きなPDMSから個々のチャネルを切り取り、それぞれの生検パンチを使用して、チャネルに適切な入口と出口の穴を開けます。
穴あけされたチャネルを、チャネル側を上に向けて清潔なスライドガラスの上に置きます。薄膜酸化インジウムスズ(ITOインタージゲート電極)を含むガラス基板を、電極を上に向けて同じスライド上に置きます。次に、スライドガラスをプラズマクリーナーにそっと入れます。
ガスバルブを閉じてポンプのスイッチを入れた後、2分間待って、600〜800ミリトールのセンサー読み取り値を取得します。次に、電源スイッチをオンにして30秒待ってから、RF電源ノブを低から高に回して1分間待ちます。次に、セットをオフにするには、逆のシーケンスに従います。
プラズマクリーナのチャンバーを開けた直後に、チャネル側が下を向くようにPDMSを持ち上げて180度回転させます。ITO基板の上にチャネルを配置して、ボンディングプロセスを開始します。ピンセットを使用して、PDMSの角を約3秒間静かに押し下げます。
プライミング培地を23ゲージの針で1ミリリットルのシリンジにロードします。気泡を発生させずに媒体を放出する前に、針を入口にまっすぐに挿入してチャネルをゆっくりと慎重に濡らします。少なくとも3分間インキュベートした後、10マイクロリットルのピペットチップを使用してプライム培地を除去します。
最後に、誘電泳動培地を流路に挿入して、誘電泳動培地で流路を3回洗浄します。
