Setting Up an Acoustic Assembly System and Cell Culture Harvesting for Generating Uniform Cell Spheroids

まず、音響装置のチャンバーを75%アルコールで5分間滅菌します。その後、滅菌PBSで装置を洗浄し、UV光を1時間照射します。滅菌音響装置を顕微鏡ステージに取り付けて、チャンバー内部を上から観察します。

PZT探触子のない装置の側面にデジタルマイクロスコープを配置し、チャンバー内部を側面から観察できるようにします。直列に接続された3つのPZTトランスデューサからのワイヤを、3つのパワーアンプと関数発生器の3つの出力チャンネルに個別に接続します。各PCTトランスデューサの関数発生器の設定をプログラムし、正弦波、周波数、振幅などのパラメータを指定します。

T25細胞培養フラスコで10%FBSおよび1%ペニシリンストレプトマイシンを添加したDMEMで3CA細胞を培養します。細胞が80%コンフルエントになったら、培養液をPBSで2回洗浄します。PBSを除去した後、2ミリリットルの0.05%トリプシン-EDTAをフラスコに加え、細胞剥離のために摂氏37度でインキュベートします。

2ミリリットルの完全な細胞培養培地をフラスコに入れて、トリプシン化を停止します。細胞懸濁液を15ミリリットルのチューブに移し、200Gで5分間遠心分離します。