まず、質量光度計の電源を入れ、1時間動作させてから測定を開始します。電源を入れ、アイソレーションボタンを押して防振テーブルをアクティブにします。次に、エアコンプレッサーをオンにして、MicrofluidXボックスをアクティブにします。
次に、データ収集ソフトウェアを起動し、続いてMicrofluidX制御ソフトウェアを起動します。サンプルとカルビラントをロードするには、MicrofluidXボックス内のスロット番号4にカルビラント遠心チューブを、スロット番号5にサンプル遠心チューブを配置します。洗浄液CS1、CS2、CS3をそれぞれMicrofluidXボックスの1、2、3の位置に置きます。
pH 7.4の200ミリリットルの緩衝液ボトルに緩衝ラインを接続するキャップを取り付けます。次に、MicrofluidXチップをプレパレーションプレートにセットします。Sフローユニットセンサーのもう一方のチューブ端をMicrofluidXチップの最初のチャネルのサンプルインレットに接続しますampサンプルラインを完成させます。
Lフローユニットセンサーのもう一方の端をMicrofluidXチップの最初のチャネルのバッファインレットに挿入し、バッファラインを完成させます。流出収集の場合は、MicrofluidXチップの最初のチャネルの出口にチューブを取り付け、もう一方の端を廃棄物レセプタクル、フラスコ、またはビーカーに配置します。質量光度計の対物レンズに少量の顕微鏡浸漬油を塗布します。
MicrofluidXチップを質量光度計のホルダーに配置し、サンプル入口が上を向いていることを確認し、ステージクランプを使用して固定します。データ収集ソフトウェアを使用してステージを調整し、チャンネル1の観察領域を光度計の対物レンズに合わせます。次に、質量光度計の蓋を閉め、データ収集ソフトウェアの液滴希釈検出フォーカス機能をアクティブにします。
ソフトウェアインターフェースの左下隅にある白いフォーカスリングを点検します。液浸油中に気泡を示す隙間がある場合は、ステージ速度を最大まで上げ、ステージを左右にゆっくりとずらして気泡をなくします。録音ボタンを押すと、測定中に不純物が存在しないことを確認するために1分間の測定が開始されます。
pH 7.4の200ミリリットルの緩衝液ボトルからキャップを取り外し、pH 5.0の200ミリリットルの緩衝液ボトルに取り付けます。前に示したように、MicrofluidXチップを調製プレートに置き、流出収集のために最初のチャネルではなくMicrofluidXチップの2番目のチャネルを使用します。MicrofluidX制御ソフトウェアで、Mスイッチを位置5に変更します。
サンプルラインの流量を毎分8マイクロリットルに設定し、サンプルラインの圧力が350ミリバール未満に保たれるようにします。流量を計算するときは、低速度の差を目的のサンプル希釈係数に一致させます。実験終了後は、クリーニングプロトコルに従ってラインの清浄度を維持してください。
