摂氏40度で攪拌しながら、0.15グラムのポリソルベート80を28.2ミリリットルのPBSに溶解することにより、収時調製を開始します。油相製剤を調製するには、ソルビタントリオレイン酸85DOTAPとレチノイン酸をスクワレンに溶解し、摂氏40度で攪拌します。次に、1400 RPMで攪拌する油相に、1分間に1ミリリットルの黙認相を加えて、一次油および水エマルジョンを調製します。
高せん断乳化剤を使用して、30, 000 RPMで6分間混合物を予め乳化します。一次油および水エマルジョンを高圧ホモジナイザーで900バールで12サイクル処理して、均質なナノエマルジョンを得る。エマルジョンを50ミリリットルのフラスコに集め、0.2ミクロンのPESフィルターを備えたシリンジでろ過滅菌します。
フラスコをカテーテルを介してシュリンクラインに接続し、三方活栓を回転させてシステムを真空管に接続します。真空ポンプをオンにして、フラスコに真空を作ります。次に、三方活栓を回転させてシステムをアルゴン管に接続し、アルゴンで満たします。
フラスコのコルクを交換し、パラフィンフィルムで密封します。フラスコをアルミホイルで包み、摂氏40度で保管します。動的光散乱装置の電源を入れ、レーザー光源が安定するまで30分間待ちます。
ナノエマルジョンを超純水で50倍に希釈し、対応するサンプルセルに1ミリリットルのサンプルを加えます。機器で、温度を摂氏25度に設定します。分散媒体として水を選択し、測定セルとして使い捨てプラスチック皿を選択します。
サンプルをロードし、粒子サイズを測定します。各サンプルについて、3回の繰り返し測定の平均値を結果として報告します。