まず、ひげパッドと麻酔をかけたマウスの目の間の頬毛をそっと剃ります。マウスの頭を固定固定装置フレームに固定するか、そうでない場合は頭を固定します。乾燥を避けるために両目に軟膏を塗ります。
坊主頭の部分をアルコールでこすり、次にベタジンでこすります。解剖顕微鏡下で、正中線に垂直な4ミリメートルの皮膚切開を行い、ウィスカーパッドの端と目のほぼ中間、眼窩下孔のすぐ吻側、目の中心とウィスカーパッドの中心との間の線を中心にします。眼窩下神経を露出させるには、表在性結合組織を鈍く分離し、筋肉組織の損傷を最小限に抑え、運動神経線維を避けます。
回転運動を使用して、フック状の結紮補助具の頭を眼窩下神経の下に滑り込ませます。結紮補助具の先端にある穴にクローミック腸結紮糸を通し、結紮補助具を引っ込めて、結紮糸が眼窩下神経の下に留まり、結紮の両端が神経から等距離になるようにします。結紮糸の両端からスリップノットを結び、眼窩下神経に対してスライドさせます。
結び目をさらにスライドさせて、眼窩下神経を収縮させます。次に、スリップノットの上に通常の結び目を置きます。結線の端をカットし、結び目がほどけるのを防ぐために、約1.5ミリメートルの自由端を残します。
6-0合成吸収性縫合糸を使用して皮膚切開を閉じます。マウスを加熱パッドまたは赤外線加熱ランプの下で回復させます。