画像研究のためのマウス眼の前房への肝スフェロイドの移植

まず、必要なリソースをすべて集め、ハミルトンのシリンジ、チューブ、カニューレを70%エタノールで洗浄し、続いて生理食塩水で洗浄します。生理食塩水で満たした後、ハミルトンの注射器をベンチに水平にテープで固定します。次に、麻酔イソフルランユニットを準備し、加熱パッドを摂氏37度に温めます。

固体ユニバーサルジョイントに取り付けられた鉗子の先端をポリエチレンチューブで覆い、ループを形成します。200マイクロリットルのピペットとチップを使用して、肝臓スフェロイドを96ウェルプレートからメンテナンス培地を含む35ミリメートル細胞懸濁皿に移します。マウスに麻酔をかけた後、マウスを加熱パッドに移し、ネジで頭を固定します。

次に、眼球をソケットからそっと取り出し、鉗子で固定します。乾燥を防ぐために、両目に生理食塩水を一滴垂らします。ハミルトン注射器を使用して、ステレオスコープ下で肝臓スフェロイドを吸引します。

カニューレを清潔な面に水平に置きます。23ゲージの針を使用して、角膜を慎重に穿刺し、針を横にスライドさせて切開を広げます。浸透した房水をティッシュで乾かし、生理食塩水滴を目に加えて湿らせます。

カニューレを垂直に配置して、肝臓のスフェロイドが先端に引き寄せられるようにしてから、カニューレを穴にそっと挿入します。ハミルトン注射器を使用して、肝臓ステロイドをゆっくりとACEに排出します。.カニューレの先端を使用して、角膜を外側からそっと突き刺して、瞳孔の周りに肝臓スフェロイドを配置します。

5〜10分後、鉗子から目を解放します。角膜を滑らかにして治癒するには、手術した目にワセリン眼軟膏を塗布します。マウスを目覚めさせる前に、術後の不快感を避けるために鎮痛剤を皮下投与する。