マウスACEにおける移植片肝スフェロイドのin vivo蛍光イメージング

まず、ACEに移植した肝スフェロイドでマウスに麻酔をかけ、ネジで頭部を固定します。乾燥を防ぐために、人工涙液ジェルを両眼に一滴垂らし、尾静脈から蛍光プローブを静脈内注射し、すぐにイメージングに進みます。頭を傾けた後、眼窩から目をそっと押し出し、対物レンズの下に固定します。

角膜と対物レンズの間のスペースを埋めるために、人工涙液ジェルをたっぷりと塗布し、接眼レンズを通して肝臓スフェロイドに焦点を合わせます。25倍対物レンズを使用して、in vivo画像を取得します。最後に、動物を目覚めさせる前に、ワセリン眼軟膏を画像化された目に塗布します。

生着肝スフェロイドの非侵襲的な眼内in vivoイメージングは、血管、胆管ネットワーク、およびLDL取り込み能力の存在を示しました。蛍光ユビキチン細胞周期指標バイオセンサーを発現する肝スフェロイドを、単一細胞の分解能で縦断的にモニターした。