ライトシート顕微鏡用のげっ歯類の心臓サンプルの調製

まず、アグロス埋め込みミラーリングハートと20%メタノールの溶液を1時間置きます。心臓をメタノールの濃度を上げるために心臓を順次移して脱水します。脱水中に心臓の入った溶液を60ヘルツのミキサーに置き、脱水した心臓を新鮮な100%メタノール溶液に移します。

溶液を新鮮な100%メタノールと交換した後、心臓を摂氏4度に10分間置きます。次に、ソリューションを吸引します。次に、メタノールに200ミリリットルの5%過酸化水素を加えて心臓を漂白します。

心臓を溶液中で摂氏4度で一晩インキュベートします。翌日、インキュベーション後にサンプルを100%メタノールに移し、66%ジクロロメタンと33%メタノールを含む溶液に移します。心臓はバイアルの底に沈むはずです。

サンプルをミキサーに3時間置き、心臓が完全に老朽化するようにします。最後に、屈折率マッチングのためにサンプルをジベンジルエーテルでインキュベートします。P1マウスの心臓の組織は4日間で透明になり、8週齢のマウスは7日間で透明になりました。