光制御可逆タンパク質パターン作製のための巨大単層小胞(GUV)の調製

まず、超純水に100ミリモルのスクロースを含むポリビニルアルコールの5%溶液を準備します。400 RPMで振とうしながら、摂氏80度で一晩混ぜます。次に、目的の組成でクロロホルムの脂質溶液を調製します。

調製するために、GUVはピペットチップを使用して、調製したポリビニルアルコール溶液の40マイクロリットルの薄層をスライドガラス上に広げます。この層を摂氏50度で30分間乾燥させます。次に、針を使用して5マイクロリットルの脂質溶液をポリビニルアルコール層に広げ、摂氏30度で1時間乾燥させます。

次に、スペーサーと2枚目のスライドガラスを使用して、機能化されたスライドガラス上にチャンバーを組み立て、1ミリリットルの再水和バッファーをチャンバーに加え、室温で1時間インキュベートしてGUVを形成します。次に、チャンバーを反転させ、ガラス面を軽くたたきます。片側のスライドガラスを慎重に取り外して、構築されたチャンバーを開き、ピペットでGUVを回収します。

溶液をプラスチックチューブに入れ、GUVを2時間沈殿させます。