組織学的分析のための全ウサギ眼郭清および眼組織調製

ウサギの眼の経結膜核出術後、直ちに50ミリリットルの4%パラホルムアルデヒドとPBSを氷上に置く。15分後、眼を100ミリメートル解剖皿に移し、眼が乾燥するのを防ぐために、皿にPBSを充填します。解剖顕微鏡下で、外科用ブレードを使用して、虹彩面と平行に保ちながら、輪部の1ミリメートル前方に切開を開始します。

湾曲したハサミを最初の切開部に挿入し、リンバスから1ミリメートルの距離を維持しながら、円周方向に切断を続けます。次に、鉗子で角膜を取り外し、実験室のワイプでPBSをそっと拭き取ります。角膜を室温の30%スクロース溶液に入れて凍結保護します。.

虹彩を通して湾曲したハサミで最初のカットを行います。次に、角膜の除去と同様に、目の周りを円周方向に切断して、虹彩を組織の他の部分から分離します。鉗子で虹彩を取り外し、実験室用ワイプで余分なPBSをやさしく拭き取ります。

アイリスを室温の30%スクロース溶液に入れて凍結保護します。角膜と虹彩を取り除いた後、目を50ミリリットルの4%パラホルムアルデヒドに入れ、シェーカーに乗せて穏やかに攪拌します。4%パラホルムアルデヒドに摂氏4度で一晩放置します。

翌日、眼球を解剖皿に入れ、PBSを皿に入れます。解剖顕微鏡下で、鉗子を使用して前水晶体嚢を慎重につかみます。次に、はさみを後房に慎重に挿入し、ブレードをレンズに沿って後方に向けます。

湾曲したハサミで水晶体小帯に最初のカットを入れます。水晶体小帯を通して円周方向のパターンで小さなカットを続けます。レンズの取り外しを確認するには、鉗子で前レンズカプセルをそっとつかみ、持ち上げてみてください。.

分離後、レンズを室温の30%スクロース溶液に入れて凍結保護します。凍結保護のために、50ミリリットルの30%スクロースとPBSを摂氏4度で24〜48時間置きます。凍結保護を迅速に行うには、8〜12時間後に最初のショ糖溶液を新しいものと交換します。