ナノ秒パルス電場(nsPEF)刺激RSC96細胞の細胞増殖と移動の検証

まず、電気刺激したRSC96細胞を取り出し、96ウェル細胞培養プレートの各ウェルに100マイクロリットルの細胞を加えます。キットから10マイクロリットルのCCK8溶液を取り出し、96ウェル細胞培養プレートに加えます。プレートを二酸化炭素インキュベーターで摂氏37度でさらに30分から4時間インキュベートします。

6ウェルプレートの各ウェルに10〜5番目の細胞を3回播種し、ウェルあたり総容量が2ミリリットルです。ピペットチップを使用して、チップを垂直に保持しながら、カルチャーウェルの底に水平線を引きます。培地を取り除いた後、細胞をPBSで2〜3回洗浄します。

各ウェルに2ミリリットルの無血清培地を加え、プレートを摂氏37度のインキュベーターに入れます。倒立顕微鏡の4倍倍で0時間時と24時間で写真を撮り、細胞移動の変化を観察します。CCK8アッセイにより、RSC96細胞は、対照群と比較して5キロボルト/センチメートルのグループで有意に速く増殖することが明らかになりました。

対照的に、パラメータが高いほど、対照群や5キロボルト/センチメートル群よりも増殖速度が不安定になりました。スクラッチアッセイにより、5キロボルト/センチメートル群のRSC96細胞の遊走速度は、対照群および10キロボルト/センチメートル群の遊走速度よりも有意に速いことが明らかになりました。