CNS障害におけるエラスターゼ誘発血管拡張を研究するためのマウスCisterna Magna(CM)注射手順

まず、麻酔をかけたマウスを新しい手術用ドレープの上に置きます。動物の眼に眼軟膏を塗布して乾燥を防ぎ、次にMetacamを注入し、続いて0.5ミリリットルの生理食塩水をマウスに皮下注射します。後頭骨の付け根でマウスの首を剃り、滅菌PBSで表面を拭きます。

マウスを腹臥位で定位固定装置フレームに移します。定位固定装置フレームのノーズバーをマウスの上に置き、安定性を確保し、上の歯が固定されていることを確認します。動物の頭を体から120度の角度で配置して、うなじを持ち上げて広げます。

次に、滅菌ガーゼを使用して、ベタジンスクラブと70%エタノールで手術部位を3回洗浄します。その後、ベタジン溶液で一度拭きます。メスを使用して、小さな1センチの切開を行います。

メスを正中線に沿って慎重に動かし、筋肉を切り裂きます。鉗子を使用して、筋肉を左右にそっと引き離します。次に、ハミルトンシリンジに2.5マイクロリットルのエラスターゼをセットし、気泡を避けます。

ベベルを上に向けてシリンジを大槽の中央にゆっくりと挿入します。穿刺後、ベベルを慎重に引き抜いて、少量の脳脊髄液またはCSFの放出を促進します。次に、ベベルを穿刺部位に再挿入し、エラスターゼまたはビヒクルを大槽にゆっくりと注入し、エラスターゼの漏れを防ぐために針を1分間そのままにします。

斜角を取り外した後、非吸収性の外科用縫合糸で切開部位を閉じ、麻酔薬をオフにします。動物を定位固定装置フレームから取り外し、マウスが回復するまで摂氏37度のヒートパッドに置きます。