ラテラルフローイムノアッセイストリップの調製、アッセイ操作、およびその定量的評価

まず、テストラインを準備し、制御ラインコーティング液を準備します。C反応性タンパク質捕捉抗体とヤギ抗ウサギ免疫グロブリンGをリン酸緩衝液で希釈します。次に、ポリ塩化ビニルボードを適切に配置し、ボードの端から25mmの位置にある保護紙をはがします。

ニトロセルロースメンブレンを残りの保護紙の下端に沿ってポリ塩化ビニルボードに整列させ、接着します。テストラインを分注し、制御ラインコーティング溶液をニトロセルロースメンブレンに塗布し、上端から20mm離してテストラインを形成するようにします。乾燥するには、ニトロセルロースメンブレンを湿度30%未満、温度範囲が摂氏18〜26度の条件に置きます。

コンジュゲートパッドを調製するには、コンジュゲートパッドをコンジュゲートパッド処理溶液に浸し、浸したコンジュゲートパッドを乾燥オーブンに入れて一晩乾燥処理します。調製したQD nano bead抗体コンジュゲート溶液を保存液で希釈し、コンジュゲートパッドに分注します。サンプルパッド調製用。

サンプルパッドをサンプルパッド処理溶液に浸します。次に、浸したサンプルパッドを摂氏45度に設定された乾燥オーブンに入れ、24時間乾燥させます。続いて、吸収紙、コンジュゲートパッド、サンプルパッドをニトロセルロース膜のあるポリ塩化ビニルボードの上に置きます。

10マイクロリットルの血漿サンプルまたはキャリブレータ溶液を、0.1%tween 20を含む1ミリリットルのA PBSバッファーにピペットで移します。次に、調製した希釈サンプル100マイクロリットルをテストストリップのサンプルパッドに移します。15分間の運転後、紫外線にさらされたテストラインとコントロールラインの蛍光シグナルを観察し、定性的な結果を得ます。

ストリップカードを蛍光ラテラルフローアッセイリーダーに挿入して、定量分析のための蛍光強度を取得します。