解剖学的差異に基づく光合成効率の理解のための半薄葉切片の作製

ガラス板の上のTriticum aestivumの葉の中肋骨に沿って肋間領域から切片を切り取ることから始めます。カットセクションの長さが葉の木目に沿っていることを確認してください。次に、植物材料を1ミリリットルの固定緩衝液を入れた注射器に入れます。

シリンジを垂直に持ちます。空気を抜いてシリンジをポンピングし、先端に指を当てて真空にします。完全な浸透プロトコルを実行した後、樹脂メーカーの指示に従って、平らな埋め込み金型のキャビティを100%樹脂で覆い、キャビティの一方の端にサンプルを置きます。

各サンプルに鉛筆で書かれた紙のラベルを準備し、キャビティのもう一方の端に置きます。サンプルとラベルが動いた場合は、まっすぐにします。型を埋め込みフィルムで覆い、アクリル樹脂製品のガイドラインに従ってオーブンで重合します。

次に、重合ブロックをサンプルと一緒にウルトラミクロトーム試料ホルダーにセットします。粗いガラスのナイフを使用して、ティッシュが見え、余分な樹脂がなくなるまでブロックを切り取ります。次に、ガラスナイフまたはダイヤモンドナイフを使用して、半薄切片を横方向に切断します。

金属製の接種ループを使用して、水面から切片を回収し、スライドガラスの上に置きます。スライドをホットプレートで乾かし、切片をガラスに固定します。固定切片をトルイジンブルーで5秒間染色します。

Triticum aestivumとZea maysの半薄断面は、すべての葉の組織が目に見え、測定可能であることを示しました。Zea maysは、静脈の周りの葉肉細胞と葉緑体で満たされた束鞘を備えたクレーンの解剖学的構造を示し、迅速な代謝産物交換を促進しました。