Triticum aestivumの葉切片をトルイジンブルーで染色した後、スライドを顕微鏡ステージに置きます。40倍の対物レンズ倍率を使用して、切片に焦点を合わせ、明るさを調整して、すべての細胞構造が見えるようにします。次に、ナビゲーター機能を使用してセクションの位置領域を設定し、セクション全体が画像化されるようにしてから、ステッチボタンをクリックします。
その後、[完了]をクリックして実行し、顕微鏡でセクション全体を画像化できるようにします。画像解析ソフトウェアと顕微鏡で撮影したタイルを開きます。整列機能を使用して、タイルが重ならないようにします。
画像を生成したら、調整タブを使用して位置、明るさ、回転を調整します。次に、TIF形式で保存する前に、画像にスケールを印刷します。ImageJソフトウェアを開き、画像をウィンドウにドラッグしてロードします。
ライン ツールを使用して、縮尺記号の上に線を引きます。[解析] を選択し、[スケールの設定] をクリックします。既知の距離を縮尺記号の長さに変更し、長さの単位を正しい単位に変更します。
予想される形質を測定するには、線ツールを選択し、関心のある領域を横切って線を引き、Mキーを押します。面積計測では、ポリゴン選択ツールを使用して、対象の組織のアウトラインを作成します。次に、Mキーを押して終了します。
測定値を表示するポップアップウィンドウが表示され、スプレッドシートにコピーしてさらにデータ分析を行うことができます。箱ひげ図は、Triticum aestivumとZMAsの間の有意な解剖学的違い、特に静脈間距離、束鞘径、束鞘細胞の割合、非写真合成材料、および予想されるC3およびC4葉の解剖学的区別を反映する静脈周波数を示しています。