まず、適切な個人用保護具を着用してください。手順の前に、ラットの体重を測定して、体重ベースの薬と人工呼吸器の設定に適した用量を決定します。ラットに麻酔をかけた後、ラットを腹臥位に置きます。.
麻酔の深さを確認するには、鉗子を使用して後肢のフットパッドをそっと押し、離脱反応がないことを確認します。次に、乾燥を防ぐために、獣医師が承認した石油ベースの軟膏をラットの目に塗ります。呼吸数を観察し、前に示したように離脱反応を評価します。
次に、バリカンを使用して、ラットの後肢を剃ります。粘着テープを使用して、足首を背屈90度に固定し、膝を伸展させ、股関節を外転させた状態で手足を配置します。その後、坐骨神経を刺激するための一対の絶縁された28ゲージモノポーラ針を挿入し、陰極を近位後肢の領域に配置し、陽極を皮下組織内でより近位に配置し、仙骨を覆います。
次に、使い捨ての接地電極を反対側の後肢または尾に配置します。単繊維筋電図用に特別に設計された27ゲージ、25ミリメートルのオートクレーブ針電極を右腓腹筋に慎重に挿入します。腓腹筋線維と平行に単線維筋電図針電極を挿入して、単線維活動電位を捕捉します。
0.3〜10ミリアンペアの強度範囲と0.1ミリ秒のパルス持続時間を使用して、10ヘルツの周波数で右の坐骨神経に定電流刺激を加えます。ゲインを200マイクロボルト/分割から1000マイクロボルトに調整して、電位の視覚化を強化します。スイープ速度を 500 マイクロ秒/分割に構成します。
応答を SFAP として分類するには、立ち上がり時間が 500 マイクロ秒未満で、最小振幅が 200 マイクロボルトで、動作が 1 つないかまったくないかを示す必要があります。指定された式を使用して、少なくとも 50 回の刺激後の連続放電間の SFAP 遅延のジッターまたは変動を計算します。ブロッキングを評価し、定量化します。
各動物から10個のシナプスを評価した後、ジッターを計算し、動物ごとの平均値を決定します。断続的なブロッキングを示す電位を記録する場合は、刺激強度を上げて、SFAPの失敗が最大以下の刺激によるものではないことを確認します。ロクロニウム投与中、シングルファイバー筋電図は、健康な個人と比較して、伝達と神経筋接合部の遮断の変動性の増加を示しました。
