初代マウス気道上皮細胞の増殖培養と継代

マウスの気管上皮細胞が丸石のような外観の無傷の単層を形成したら、3ミリリットルの予熱PBSで細胞を穏やかにすすいでください。3ミリリットルの動物性成分を含まない酵素解離溶液を皿に加え、摂氏37度で5分間インキュベートします。ピペットで静かに細胞を取り出し、懸濁液を3ミリリットルの動物成分を含まない酵素阻害溶液に移します。

細胞懸濁液を400Gで摂氏4度で5分間遠心分離し、ペレットを1ミリリットルの膨張培地に再懸濁します。トリパンブルーと血球計算盤を使用して生存細胞を数えます。ラットテールコラーゲンでプレコートした100mmディッシュにP1細胞懸濁液をプレート化します。

細胞を摂氏37度で5%の二酸化炭素で培養します。