ヒスチジン輸送の実験設定とPauly反応を用いたヒスチジンの推定

まず、塩化ナトリウムの濃度が異なる350ミリリットルのチューブを2セット組み立てます。準備した腸嚢を指定されたチューブに30分間、各セットで60分間浸します。指定された時間が経過したら、別の1.5ミリリットルの微量遠心チューブ内の嚢内の溶液を空にし、容量を決定します。

2ミリリットルの注射器を使用して、嚢内の液体を吸引します。ヒスチジンの標準曲線を作成するには、ヒスチジンストック溶液と水を使用して、さまざまなヒスチジン濃度の溶液を調製します。次に、スルファニル酸と硝酸ナトリウムを各チューブに加えます。

チューブを室温で5分間インキュベートした後、各チューブに1ミリリットルの炭酸ナトリウムとエタノールを加えます。最後に、490ナノメートルの波長で吸光度を測定します。ポーリーの反応を用いたヒスチジン推定は、ランバート・ビアの法則に従って、ヒスチジンの300マイクロモルまで行った。

空腸細胞におけるヒスチジンの取り込みとナトリウム濃度との間に相関関係が観察されました。