まず、酸化グラフェン/銅ナノ複合材料を調製します。1日目に、寒天プレートからの細菌の1コロニーをループを使用して10ミリリットルのブロスに接種します。200 RPMに設定された振とうインキュベーターを使用して、ブロスを摂氏37度でインキュベートします。
2日目に、DPBSを使用してナノコンポジット混合物を希釈し、3つの異なる濃度を取得し、実験用のコントロール溶液を調製します。次に、100マイクロリットルのナノコンポジット懸濁液および制御溶液を96ウェルプレートに分注します。CFUに基づいて、細菌懸濁液をトリプチン大豆ブロスで1ミリリットルあたり6CFUの累乗に10の1倍に希釈します。
希釈した細菌懸濁液100マイクロリットルを96ウェルプレートのサンプルウェルに接種し、200RPMに設定された振とうインキュベーターでプレートを摂氏37度で24時間インキュベートします。3日目に、200マイクロリットルのマイクロピペットでサンプルと細菌懸濁液を激しく混合してから、サンプル細菌混合物を滅菌蒸留水で10倍に連続希釈します。次に、希釈した細菌懸濁液100マイクロリットルをスプレッダー付きの寒天プレートに広げ、プレートを摂氏37度で24時間インキュベートします。
4日目に、細菌のコロニーをカウントし、CFU値を決定して、式を使用してナノコンポジットの抗菌活性を確認します。ナノコンポジットは、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌と緑膿菌に対して有意な抗菌効果を示し、500マイクログラム/ミリリットルの濃度でこれらの細菌の99.8%と84.7%を根絶しました。
