著者らは、イラストの貢献のために博士アンドリューキング、博士号とカトリーナキングを認識したい。 NIHの助成金：R00HL087927。

1。前に外科手術を開始 注：前にあなたの機関/組織を介して適切な許可を取得していることを保証するあらゆる動物の手順を開始する。すべての生存の手術と同様に、手術は無菌条件下で行われ、必要に応じて適切な鎮痛薬と抗生物質がある成果のために使用されていることを確認します。 <ol><li>前にカテーテルの手順を開始する彼らは特許であることを確認するために滅菌生理食塩水でそれらをフラッシュすることによりカテーテルを評価する。 </li><li>ラットを麻酔。 </li><li>外科手術のためにラットを準備します。 <ol class="lalpha"><li>首の後ろ（肩甲骨の間）と内側下腿部を含む外科の領域、から毛皮を剃る。 </li><li>それぞれBetadineと70％エタノールのスクラブを使用して、センターで開始し、円形のスイープの外側を作る剃ら外科領域をスクラブ。繰り返します各地域のこの3回、70％エタノールで最終的な洗浄と仕上げ。 </li><li>外科の分野にわたって無菌面と場所滅菌ドレープで動物を置きます。 （プレスの- n -シールの使用は、調査員が手順を通して動物を監視することが理想的な手術の立体裁断です。） </li></ol></li><li>外科手術のためのすべての手術器具が滅菌されていることを確認します。 </li></ol> 2。カテーテル留置のための外科領域の準備<ol><li> （その胃上）が発生しやすく敷設ラットで、ハサミやメスで肩甲骨のレベルでの首の後ろに約½インチ（12 mm）、横切開し、最後の皮下&quot;ポケット&quot;を解剖鈍らせるバック約4分の1の大きさ。これは、すなわちそのカテーテルがオンに引っ張らので、それが場所だった動脈から削除されていないこと、動物の成長および/または動きを補償するチューブの少量を配置する領域として使用されます。Dインチ（あるいはこのステップは、前にカテーテルをトンネリングするために直ちに実行することができます。） </li><li>そのバック（仰臥位）にラットを置き、後肢の自然な角度に沿って鼠径部[おおよその½インチ（12 mm）切開の切開を行います。 </li><li> （通常は45度の角度であなたの鈍先端がはさみ及び/または綿棒を保持することによってこれを簡単にローカライズを保証する（鈍チップはさみ、止血、綿棒などを使用することができます）、結合組織（図1）を分離するために解剖鈍らせるの大腿動脈と静脈までの関心領域）が公開されています。 <ol class="lalpha"><li>静脈は暗赤色で、動脈がより明確と静脈より明るいです。動脈に沿って実行される神経は、口調で白っぽいです。 </li></ol></li><li> catheteの小さなセクションを配置するための脚の内側に沿って皮膚の下にある小さなオープン領域（すなわちポケット、四半期の約サイズ）を作るために下腿部に解剖鈍らせるrは（再びアカウントの動物の動きを考慮し、慢性的な配置であれば、動物の成長に）。 </li><li>あなたが完全に動脈と静脈を表示できるように、切開領域に開創器を置きます。 </li><li>ファインチップを使用すると、静かに動脈と静脈から大腿動脈に沿って神経を（色で白っぽい）を分離鉗子。 （図2）神経を切断または損傷しないように注意してください。 </li><li>動脈/静脈の約¼インチ（5-7 mm）の長さのセクションを公開しようと、1つのユニットとして動脈と静脈を区切ります。 </li><li>動脈から静脈を分離するプロセスを繰り返します。容器にあなたの外科用器具（すなわち細かい先端の鉗子）垂直を維持し、並行して血管を分離する。これは、血管を刺したり、損傷、断裂回避に役立ちます。下から動脈と静脈の間に静かに先端の細い鉗子を置き、徐々に鉗子を開き、これを繰り返すことで、あなたは徐々に血管を分離します。注：いくつかの涙や観察しなければ出血が停止するまで滅菌綿棒および/または2 × 2ガーゼや地域での場所の圧力を使用して出血すると、その後手術を続行。 </li></ol> 3。カテーテルをトンネリング<ol><li>場所滅菌生理食塩水は、切開を介して2 × 2ガーゼを浸し、その胃に動物を入れてください。 </li><li>以前に作られたと腰のレベルに戻ってダウン皮下鉗子を導く[止血のヒントを確保した背面の切開にロチェスターペアン鉗子を（長いストレートピンセット）に置かないで背骨に向かって（、アップ指摘されている）脊髄を負傷しないように]。約で股関節部には下腿部に作られた切開に向かって止血鉗子の先端を回して、準備脚切開から止血の先端を押してください。 </li><li>静かにピンセットでカテーテル（ ではない動脈/静脈に挿入される端）の端を持ち、ゆっくりと作られた空洞を介してカテーテルを引き抜きますそして最終的に首の切開から。 </li><li>ヘパリン/食塩水で（に気泡がないことを確認する）それぞれのカテーテルの先端に20 U / mlのヘパリン/食塩水を充填し、カテーテルを埋める適切な平滑化 - 先端の針の注射器を置きます。もう一度カテーテルは特許であり、損傷がカテーテルに来ていないことを確認してください。空気がカテーテルラインに入ると、再びそのバックにラットをオンにすることができるどうかを確認するため、カテーテルの行の末尾に添付された注射器にしておきます。 </li></ol> 4。大腿静脈と動脈にカテーテルを挿入すると（図3） <ol><li>大腿静脈の下で無菌の4.0シルク/スレッドの折り返し部分を配置し、折り返し端にシルクをカット。今静脈下の絹の2つが存在します。または代わりに、個々に静脈の下に4.0絹の2個を置きます。 </li><li>あなたが静脈の下に置か絹、片方の足に向かってピース（遠位端）と身体に向かって他のを区切ります。 Tその後、小さな止血を使用して、身体に最も近い側に緩やかな合字、すなわち、絹をつかんで教えプルが結び目をきつく締めることはありません。脚部（遠位端）に向かって可能な限り絹の他の部分を引っ張るとトリプルノットにこれを結ぶ、小さな止血とシルクをつかんで教え引き出します。このメソッドは、簡単にカテーテルを（ステップ4）を挿入するために必要な切開をすること、静脈が血液でいっぱいにできるようになります。 </li><li>静脈にリドカインの1〜2滴を置きます。 </li><li>ヴァンナミクロ解剖ハサミを使用して、約¼を通じて、45度の角度で静脈に小さな切開を行います。 </li><li>切開と鉗子の別のペアを使用してに先の細いピンセット（45鉗子を）置き、慎重に静脈カテーテルにフィード。これは、研究者が優しく鉗子の下や静脈に静脈カテーテルを置くことを可能にするように優しく、静脈内に配置される鉗子を開きます。 </li><li>カテーテルが完全に挿入されている場合（適切X. 6-7センチ）（カテーテルマークはカテーテルが完全に挿入されたときに識別するのに外科医を支援するためにカテーテル上に配置されを行うとき）（この場所腹部大静脈の静脈カテーテル）は、静脈の周囲に前方合字を締めますトリプル結び目を結ぶとカテーテル、（それが静脈を閉塞されていないことを確認）。再びカテーテル（トリプルノット）を確保し、配置を確保するための足の近くに絹の縫合糸（後部合字）を使用してください。縫合糸の結び目がきつすぎるとカテーテルが機能していることではないことを保証するために役立つカテーテル、内の目に見える少し血があるまでゆっくりと注射器を引く。血液がカテーテルに表示されなくなるまでチェックをした後、プランジャーを押し下げる。 注：必要に応じて大腿静脈に2カテーテルを挿入することが可能です。 </li><li>次の例外を除いて大腿動脈カテーテルを配置する手順9-13を繰り返します。 <ol class="lalpha"><li>トリプル結び目と足（後方）に最も近いシルクのネクタイとタウを引くカテーテル留置のための切開を行う前に、ボディ（前部）の近くに緩い結紮を結ぶ前にGHT。これは、動脈は、血液はそれが簡単カットすることでいっぱいにできるようになります。近位縫合が動脈を切断する前に動脈を閉塞するために教えて引っ張られていることを確認します。これは、カットが行われている血液の損失を避けることができます。 </li><li>動脈カテーテルを挿入する大腿動脈から約5cm（これは腹部大動脈にカテーテルを配置）。 </li><li>縫合糸でカテーテルを固定する場合、縫合がきつすぎるとカテーテルを閉塞していないことを確認してください。 </li></ol></li></ol> 5。ラップアップ外科<ol><li>足の内側にカテーテル及び場所（ループが鈍いが、以前の解剖した領域に収まるようにしてください）​​の四半期サイズのループにダイムを行います。両方のカテーテルを配置した後、筋層に5.0手術用縫合糸の1〜2糸で固定します。 </li><li>非連続suturで4.0 Ethilonで切開を閉じてES。 </li><li>その胃の上にラットを回し、バックで解剖ポケットの四半期と場所の大きさ約カテーテルの別のループを作る。縫合糸で切開を閉じます。 </li><li> vetbondのドロップを使用して、バックにカテーテルを固定します。 </li><li>パッド入りの止血と背面切開の近くにカテーテルをクランプし、末端からシリンジを取り外します。 </li><li>テザータイプのジャケットとラットを合わせ、カテーテルを（ヘパリンロックを維持するために）キャップ、パッド入りの止血を取り外します。 </li></ol> - 長期的なメンテナンスは20 U / mlのヘパリン/食塩水でカテーテル生理食塩水を交換してください。 6。カテーテルの維持管理（滅菌手袋が手続き中に着用してください） <ol><li>パッド入りのピンセットでカテーテルをクランプする。 </li><li>カテーテルのプラグを取り外します。 </li><li>カテーテル上にロック溶液と鈍先端が注射器を置きます。 </li><li>鉗子をアンクランプ。 </li><li>ロック溶液でカテーテルを埋める（ボリュームはプリdeteですrmined - 通常0.3 ml）を。 </li><li>カテーテルの先端に血の任意の逆流を防止し、シリンジを削除するには、フラッシュ中にカテーテルをクランプする。 </li><li>カテーテルのプラグを交換してください。 </li><li>鉗子をアンクランプし、優しくも血液がカテーテルの先端にあることを確認するため、若干のプラグを押し込みます。 </li></ol> 7。採血（滅菌手袋が手続き中に着用してください） パッド入りのピンセットでカテーテルをクランプする。 <ol><li>カテーテルのプラグを取り外します。 </li><li>徐々に鈍い先端が注射器と廃棄を使用してロックのソリューションを撤回。 </li><li>カテーテルにサンプリングシリンジを取り付け、ゆっくりとサンプルを撤回する。 </li><li>パッド入りのピンセットでカテーテルをクランプし、ロック溶液で注射器を置いてカテーテル上およびロック溶液でカテーテルを再入力してください。 </li><li>溶液をカテーテルを再充填しながらカテーテルをクランプする。 </li><li>カテーテルのプラグを再挿入。 </li><li>パッド入りの鉗子を外し、ゆっくりとtを押す<html>彼は少しさらに差し込みます。 </li></ol> 8。薬剤注入<ol><li>パッド入りのピンセットでカテーテルをクランプする。 </li><li>カテーテルのプラグを取り外します。 </li><li>徐々に鈍い先端が注射器と廃棄を使用してロックのソリューションを撤回。 </li><li>カテーテルへの薬剤充填したシリンジを接続し、動物に物質を注入する。 <ul><li>複数の注射が必要な場合は、1つは、このように動物に少ない流体注入を必要とする、3方活栓だけでなく、中間を使用することができます。 </li><li>一つは、連続注入用の滅菌フィルターで持続注入シリンジポンプを接続することができます。 </li></ul></li><li>パッド入りの鉗子でクランプし、ロック溶液で注射器を置いてカテーテル上およびロック溶液でカテーテルを再入力してください。 </li><li>溶液をカテーテルを再充填しながらカテーテルをクランプする。 </li><li>カテーテルのプラグを再挿入。 </li><li>パッド入りの鉗子を外し、ゆっくりと少しさらに、プラグインを押してください。 </li></ol>E&quot;&gt; 9。血圧および心拍数のサンプリング<ol><li>パッド入りの鉗子で動脈カテーテルをクランプし、カテーテルのプラグを取り外します。 </li><li>圧力変換器に動脈ラインを取り付けます。 </li><li>血圧のコレクションのためにソフトウェアを使用するための製造の指示に従ってください。 </li><li>血圧の監視期間の終了時に、パディングされた鉗子を使用すると、カテーテルをクランプし、トランスデューサーから切り離します。 </li><li>ロック溶液でカテーテルをフラッシュし、上記のようなカテーテルのプラグを交換してください。 </li></ol> 10。代表的な結果代表的な血圧の測定は、意識を自由に移動する動物から採取し、図4に示す。同時に大腿動脈ラインからの血圧を測定しながら、フェニレフリン（3 UG / kgの静脈内）、α1アドレナリン受容体アゴニストは、血圧を高めるために大腿静脈ラインに投与した。フェントラミン（4 mg / kgを、iv）は、非選択的α-アドレナリン受容体拮抗薬は、その後、血圧を下げるために投与した。 <img alt="図1" src="/files/ftp_upload/3496/3496fig1.jpg" /> 図1組織の鈍的切開。背中にはラットを使用すると、後肢の角度が約½インチ（12 mm）切開を行い、鈍ハサミや止血を使用するには、大腿動脈と静脈を露出するために結合組織を解剖鈍らされることになります。 <img alt="図2" src="/files/ftp_upload/3496/3496fig2.jpg" /> 図2。大腿動脈と結合組織から静脈の分離。 <img alt="図3" src="/files/ftp_upload/3496/3496fig3.jpg" /> 図3。カテーテルの配置。ヴァンナを用いた微小解剖ハサミは45度の角度（上）で血管を介しての方法の¼約小さな切開を置き、目に先の細いピンセットを置くeの切開や鉗子の別のペアを使用しては、容器（真ん中）にカテーテルを養う。最後に、カテーテルの配置の完了時に場所（底部）にカテーテルを縫合。 <img alt="図4" src="/files/ftp_upload/3496/3496fig4.jpg" /> 図4に配慮した自由に動く動物から採取した代表的な血圧測定。

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動脈と静脈カテーテル法は、歴史的に、両方の急性および慢性的に血圧、サンプルの血液を監視し、実験的ラットの動物モデル1-4に物質を提供するために使用されている。これらの外科的インストルメンテーションの主な利点は、採血、薬物投与と血圧の監視などの監視の手順は、、最小限の障害および/ ​​または動物の1〜ストレスで実施できることです。多数の研究者らは、プロトコルを記述し、それらの研究室では手術5-8を実行する特定の方法論を持っている。映像やイラストでは当研究室は、大腿動脈および静脈カテーテル法の手続きに関してで成功するために発見したものを示しています。 ラットは一般的にハンドリングのサイズが小さいと利便性のための科学的研究の多数のために実験室で使用されています。慢性的ないくつかの場所があります。カテーテルは、少数を示すために、頸静脈、腹部大動脈、頸動脈および大腿動脈を含む、動物内に配置することができます。ラット大腿カテーテルの開存性の増大、長さが慢性的カテーテル検査結果の場所とは、他のカテーテルの位置9に比べて術前の動物の体重の最速回復していた。 多数の研究者らは、急性ならびに慢性血液採取1-5,11-13用留置カテーテル使用している。多くの研究では複数の血液は動物の必須および外部カニュレーション/カテーテルが原因の非外傷性の性質に有利である1つの方法ですされている描画、動物が意識がある間、またそれがこのように麻酔薬の影響によって制限されていない、行うことができます。とにも動物が自由に1,10を移動することができます。血液サンプルを入手し、げっ歯類でのストレスホルモンを測定することによって最善の方法は、長い6,13を議論されてきた。薬物動態学的トゥディに関して付き慢性的に注入されたカテーテルのシステムを使用する場合は、ES、研究動物のカテーテルは、最小限の拘束を繰り返し採血を許可します。さらに、研究では、自由に（30秒）処理された動物及びまたは拘束（5分）14に比べてラット（頸静脈カテーテルを）移動するの血漿中アドレナリン、ノルアドレナリンやドーパミンの減少基礎濃度を示している。ストレスの増加を識別するために使用される、追加の方法は、血漿コルチコステロン濃度を測定することによってです。以前には、さらに血漿コルチコステロンのレベルが慢性的カニューレ挿入ラットの15に上昇していたことが手術の回復時間の3〜4日続くことが示唆された。しかし、方法論の最近の改善はuncannulatedラット16に比べて頸静脈カニューレ挿入ラットにおけるベースラインの血漿コルチコステロンのレベルには差がないことを決定した。さらに、コルチコステロン分析用HPLCの方法論は、明らかにそのcorticoster1レベルは、拘束ストレスによって上昇されていますが、安定した頸静脈カテーテル挿入16の後に。 慢性的なカテーテルの追加使用は、げっ歯類における血圧と心拍数の測定です。ラットにおける血圧および心拍数を測定するために利用される複数の方法がありますが、これらは、非侵襲的なテールカフの方法論、radiotelemetryの手順と直接留置カテーテルなどがあります。各メソッドは、他の出版物で詳細に説明されている、その長所と短所があります。液体で満たされたカテーテルを留置することは、ラットの中で複数の動脈に移植することができる。大腿動脈はこの測定に使用することができますが、1つの動脈です。血圧/心拍数の対策については、カテーテルの遠位端は、校正された圧力変換器に接続されています。カテーテルは、動物の自由な移動を可能にするスイベルに接続されている保護の春に収納、またはボタンsurgiに取り付けることができます。自動的動物に移植した。留置カテーテルは、動物17,18に長期的なストレスを最小限に抑えるという利点があります。さらに、材料が安価な圧力の措置と継続的長期的な対策は、多くの週19に対して相対的に低いストレスの条件下で得られるため、キャリブレーションは簡単です。我々は含めて、この手法には欠点があることを言及していない場合我々は怠慢になる、それは外科的侵襲的手法である、カテーテルの維持管理は開存性、カテーテルの注入に起因する動脈の損傷と維持するのに必要です少数を示すため感染の可能性。 慢性的に注入した動脈カテーテルから血圧ダイレクト録音の慢性的な対策については、より技術的に困難ですが、より正確であると動物を乱すことなく継続的に行うことができます。テールカフの測定は、精度が低いですが、彼らは手術を必要とせず、また繰り返すことができます。ED。テールカフ手法はパルス20の検出を容易にするために尾の血管を拡張するために動物の加熱と同様に処理する必要はありません。取扱いおよび追加熱ストレスは、このように、本当に正確な手段を提供していない、血圧の測定値に影響を与える可能性があります。また、非ダイレクトテール - カフ法は簡単に同時採血や薬物投与が許可されていません。 直接的な指標を達成することができることによって、追加の方法は、遠隔測定手法を使用しています。テレメトリーは自由に拘束や麻酔薬18なしで動物を移動させる意識で長時間連続して血圧（およびその他の措置）の高品位な録音を可能にします。しかし、テレメトリデバイスは理想的ながら、非常に高価です。テレメトリと比較すると、カテーテルの利点は、次のとおり減少&quot;セットアップ&quot;と、運用コスト、容易に薬物を投与し、簡単に意識を自由に移動する動物に血液サンプルを取る能力を。 administrat最低限こうして動物にストレスを最小限に抑え、より正確な測定を可能にする、動物の邪魔をしながら薬や化学物質、および研究の動物から得た血液サンプルのイオンを行うことができます。

<html><table border="1"><tbody><tr><td> の名前 </td><td> タイプ </td><td> 会社 </td><td> カタログ番号 </td></tr><tr><td>動脈カテーテル</td><td>消耗品</td><td> SAI注入</td><td> RFA - 01 </td></tr><tr><td>静脈内カテーテル</td><td>消耗品</td><td>科学的なコモディティ株式会社</td><td> BB518 - 20＆BB31785 - V / 2 </td></tr><tr><td> 27グラム1 / 2&quot;ブラントニードル</td><td>機器の</td><td>統合された調剤ソリューションズ、（株） </td><td> 9991113 </td></tr><tr><td> 23グラム1 / 2&quot;ブラントニードル</td><td>機器の</td><td>統合された調剤ソリューションズ、（株） </td><td> 9991109 </td></tr><tr><td> <a href="http://www.adinstruments.com/products/hardware/research/product/PL3508/" target="_blank">PowerLab/8SP</a> </td><td>機器の</td><td> <a href="http://www.adinstruments.com/" target="_blank">ADInstruments</a> </td><td>w.adinstruments.com/products/hardware/research/product/PL3508 /&quot;ターゲット=&quot;_blank&quot;&gt; ML765 </td></tr><tr><td> <a href="http://www.adinstruments.com/products/hardware/research/product/FE224/" target="_blank">クワッド橋</a> </td><td>機器の</td><td> <a href="http://www.adinstruments.com/" target="_blank">ADInstruments</a> </td><td> <a href="http://www.adinstruments.com/products/hardware/research/product/FE224/" target="_blank">ML118</a> </td></tr><tr><td> <a href="http://www.adinstruments.com/products/software/research/LabChart-Software/" target="_blank">LabChart 7.2</a> </td><td>ソフトウェア</td><td> <a href="http://www.adinstruments.com/" target="_blank">ADInstruments</a> </td><td></td></tr><tr><td> <a href="http://www.adinstruments.com/products/hardware/research/product/MLT844/" target="_blank">コック＆ケーブルとBPのトランスデューサ</a> </td><td>機器の</td><td> <a href="http://www.adinstruments.com/" target="_blank">ADInstruments</a></td><td> <a href="http://www.adinstruments.com/products/hardware/research/product/MLT844/" target="_blank">MLT844</a> </td></tr><tr><td>シングルチャネルスイベル</td><td>機器の</td><td>ニコンインステック</td><td> 375/22PS </td></tr><tr><td>単軸、カウンタバランススイベルマウント</td><td>機器の</td><td>ニコンインステック</td><td> CM375BP </td></tr><tr><td> Covanceの輸液ハーネス</td><td>機器の</td><td>ニコンインステック</td><td> CIH105 </td></tr><tr><td>テーブルトップイソフルラン麻酔ユニット</td><td>機器の</td><td>プロテックインターナショナル、（株） </td><td> 61020 </td></tr><tr><td>げっ歯類の麻酔マスク</td><td>機器の</td><td>プロテックインターナショナル、（株） </td><td> RAM - 02 </td></tr><tr><td>げっ歯類の誘導商工会議所</td><td>機器の</td><td>プロテックインターナショナル、（株） </td><td> RIC - 01 </td></tr><tr><td>麻酔ガスフィルターキャニスター</td><td>機器の</td><td>プロテックインターナショナルら、（株） </td><td> 80120 </td></tr><tr><td>卓上層流フード</td><td>機器の</td><td>歩哨エアーシステムズ株式会社</td><td> SS - 200 - WSL </td></tr><tr><td>オスターゴールデンA5 </td><td>機器の</td><td>オスタープロフェッショナルプロダクツ</td><td> 78005-140 </td></tr><tr><td>デュアルグースネックガイド付き光ファイバーライト</td><td>機器の</td><td> LWサイエンティフィック株式会社</td><td> ILL - 1502 - DGG1 </td></tr><tr><td> Deltaphase等温パッド</td><td>機器の</td><td>ブレーントリーサイエンティフィック</td><td> 39DP </td></tr><tr><td>綿棒アプリケーター</td><td>消耗品</td><td>ソロンの製造会社</td><td> 36200 </td></tr><tr><td>ガーゼのスポンジ2&quot;× 2&quot; </td><td>消耗品</td><td>ケンドールのCurity </td><td> 2146 </td></tr><tr><td> 5から0ナイロン縫合糸</td><td>消耗品</td><td>エチコン</td><td> 661G </td></tr><tr><td> 4から0絹縫合糸</td><td>消耗品</td><td> DEKnatel </td><td> 8 - S、136075から0208 </td></tr><tr><td>組織接着剤</td><td>消耗品</td><td> 3M </td><td> 1469SB </td></tr><tr><td>スプリンター＆固定鉗子</td><td>機器の</td><td>ジョージティーマンアンドカンパニー</td><td> 160から55 </td></tr><tr><td>学生の組織鉗子</td><td>機器の</td><td>ファイン科学ツール、（株） </td><td> 91121〜12 </td></tr><tr><td>マイクロ鉗子/ブラッケン鉗子</td><td>機器の</td><td>ジョージティーマンアンドカンパニー</td><td> 10から1942 </td></tr><tr><td>エクストラファイングレーフェ鉗子</td><td>機器の</td><td>ファイン科学ツール、（株） </td><td> 11152〜10 </td></tr><tr><td>オルセン-ヘーガルニードルホルダー</td><td>機器の</td><td>ファイン科学ツール、（株） </td><td> 12002〜12 </td></tr><tr><td>学生ホールステッド - モスキート止血鉗子</td><td>機器の</td><td>ファイン科学ツール、（株） </td><td> 91308〜12 </td></tr><tr><td>ロチェスターペアンフォースP </td><td>機器の</td><td>生物医学研究インスツルメンツ株式会社</td><td> 31から1640 </td></tr><tr><td>学生外科はさみ</td><td>機器の</td><td>ファイン科学ツール、（株） </td><td> 91402〜12 </td></tr><tr><td>デュモン鉗子</td><td>機器の</td><td>ファイン科学ツール、（株） </td><td> 11251〜35 </td></tr><tr><td>ミクロ解剖はさみ</td><td>機器の</td><td>ジョージティーマンアンドカンパニー</td><td> 160から210 </td></tr><tr><td>斜視のはさみ</td><td>機器の</td><td>ファイン科学ツール、（株） </td><td> 14075〜11 </td></tr><tr><td>ハートマンの止血剤</td><td>機器の</td><td>ファイン科学ツール、（株） </td><td> 13003〜10 </td></tr><tr><td>組織のはさみ</td><td>機器の</td><td>ジョージティーマンアンドカンパニー</td><td> 160から150 </td></tr><tr><td>リトラクター</td><td>機器の</td><td>カスタムメイド</td><td></td></tr></tbody></table>

femoral arterial and venous catheterization for blood sampling, drug administration and conscious blood pressure and heart rate measurements

研究の複数のフィールドでは、実験室での研究の循環システムへのアクセスが必要です。慢性的に注入されたカテーテルを用いてラットの薬理学的研究は、研究者が効果的にすることを許可し、人道的に、物質を​​管理する繰り返し採血を行い、血圧と心拍数を意識して直接測定するのに役立ちます。カテーテルが注入されると長期的なサンプリングが可能です。開存性およびカテーテルの寿命は、レジメンとカテーテルの材料をフラッシュ、使用されるロック溶液を含む複数の要因に依存します。このビデオでは、大腿動脈とラットの静脈カテーテル法の方法論を紹介します。さらに、ビデオでは、採血のための大腿静脈および動脈カテーテルの使用、意識自由行動ラットの血圧と心拍数の測定を行うに動脈カテーテルの薬剤投与と使いかたを説明します。旋回システムに接続されたテザーとハーネスに動物がHOになることを許可するでしょう。動物の中断を最小限に抑えて研究者によって使用され、サンプルが取られている。カテーテルの開存性を維持するために、カテーテルを慎重に日常のメンテナンスは、潜在的な汚染を最小限に抑えるためにロック溶液（100 U / mlのヘパリン添加生理食塩水）、機械接地鈍チップの​​シリンジの針とシリンジフィルターの使用を使用して必要です。慎重な無菌手術手技、適切なカテーテルの材料と慎重なカテーテルのメンテナンス技術と、それは時間の長い期間（数週間）のために特許のカテーテルと、健康な動物を維持することが可能です。

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Femoral Arterial and Venous Catheterization for Blood Sampling, Drug Administration and Conscious Blood Pressure and Heart Rate Measurements

ラットの血管の慢性的なカテーテル検査は、しばしば時間の期間にわたってまたは直接意識血圧測定用の血液サンプルを得るため、物質の投与が必要です。意識的な動物の血圧のラットと対応する測定値の大腿動脈カテーテル法が実証される。

血液サンプリング、医薬品の管理と意識血圧および心拍数測定のための大腿動脈および静脈カテーテル

In multiple fields of study, access to the circulatory system in laboratory studies is necessary. Pharmacological studies in rats using chronically ...

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Research

JoVE Journal

Medicine

123.9K ビュー.  Michigan State University. ラットの血管の慢性的なカテーテル検査は、しばしば時間の期間にわたってまたは直接意識血圧測定用の血液サンプルを得るため、物質の投与が必要です。意識的な動物の血圧のラットと対応する測定値の大腿動脈カテーテル法が実証される。

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Catheterization of the Carotid Artery and Jugular Vein to Perform Hemodynamic Measures, Infusions and Blood Sampling in a Conscious Rat Model

The success of a small animal model to study critical illness is, in part, dependent on the ability of the model to simulate the human condition. Intra-tracheal inoculation of a known amount of bacteria has been successfully used to reproduce the pathogenesis of pneumonia which then develops into sepsis. Monitoring hemodynamic parameters and providing standard clinical treatment including infusion of antibiotics, fluids and drugs to maintain blood pressure is critical to simulate routine supportive care in this model but to do so requires both arterial and venous vascular access. The video details the surgical technique for implanting carotid artery and common jugular vein catheters in an anesthetized rat. Following a 72 hr recovery period, the animals will be re-anesthetized and connected to a tether and swivel setup attached to the rodent housing which connects the implanted catheters to the hemodynamic monitoring system. This setup allows free movement of the rat during the study while continuously monitoring pressures, infusing fluids and drugs (antibiotics, vasopressors) and performing blood sampling.

Vascular accesses to measure hemodynamics, provide fluids and perform blood sampling are important to any small animal model study. We present a technique for implanting catheters into the carotid artery and the common jugular vein in an anesthetized rat for connecting to a system to perform monitoring, infusions and sampling.

配慮ラットモデルにおける血行動態の措置、煎茶や血液サンプリングを実行するために頸動脈と頸静脈のカテーテル

The success of a small animal model to study critical illness is, in part, dependent on the ability of the model to simulate the human condition. ...

医学

Quantification of the Immunosuppressant Tacrolimus on Dried Blood Spots Using LC-MS/MS

The calcineurin inhibitor tacrolimus is the cornerstone of most immunosuppressive treatment protocols after solid organ transplantation in the United States. Tacrolimus is a narrow therapeutic index drug and as such requires therapeutic drug monitoring and dose adjustment based on its whole blood trough concentrations. To facilitate home therapeutic drug and adherence monitoring, the collection of dried blood spots is an attractive concept. After a finger stick, the patient collects a blood drop on filter paper at home. After the blood is dried, it is mailed to the analytical laboratory where tacrolimus is quantified using high-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (HPLC-MS/MS) in combination with a simple manual protein precipitation step and online column extraction.
For tacrolimus analysis, a 6-mm disc is punched from the saturated center of the blood spot. The blood spot is homogenized using a bullet blender and then proteins are precipitated with methanol/0.2 M ZnSO4 containing the internal standard D2,13C-tacrolimus. After vortexing and centrifugation, 100 &#181;l of supernatant is injected into an online extraction column and washed with 5 ml/min of 0.1 formic acid/acetonitrile (7:3, v:v) for 1 min. Hereafter, the switching valve is activated and the analytes are back-flushed onto the analytical column (and separated using a 0.1% formic acid/acetonitrile gradient). Tacrolimus is quantified in the positive multi reaction mode (MRM) using a tandem mass spectrometer.
The assay is linear from 1 to 50 ng/ml. Inter-assay variability (3.6%-6.1%) and accuracy (91.7%-101.6%) as assessed over 20 days meet acceptance criteria. Average extraction recovery is 95.5%. There are no relevant carry-over, matrix interferences and matrix effects. Tacrolimus is stable in dried blood spots at RT and at +4 &#176;C for 1 week. Extracted samples in the autosampler are stable at +4 &#176;C for at least 72 hr.

Here we describe a high-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (HPLC-MS/MS) assay to quantify the immunosuppressant tacrolimus in dried blood spots using a simple manual protein precipitation step and online column extraction.

LC-MS / MSを用いて乾燥血液スポット上で免疫抑制タクロリムスの定量化

The calcineurin inhibitor tacrolimus is the cornerstone of most immunosuppressive treatment protocols after solid organ transplantation in the United ...

Apical Resection Mouse Model to Study Early Mammalian Heart Regeneration

Cardiovascular disease plagues the whole world due to intensive lifestyle changes. Heart regeneration holds great promise for repairing and restoring cardiomyocytes lost due to injury and disease. In contrast to the robust cardiac regeneration of certain lower vertebrates, adult mammalian hearts typically show minimal capacity for heart regeneration and repair. However, recent studies have sparked considerable scientific interest with the finding that, between postnatal day 1 to 7 (P1 to P7), the neonatal mouse heart retains significant regenerative potential after apical resection (i.e., surgical amputation and exposure of left ventricular apex). One major controversy over this finding might be due to the diverse surgery-related procedures used in efforts to replicate or expand upon this important finding. These instructions dynamically present the materials and methodology for apical resection in a mouse model. The salient steps of this rodent survival surgery involve hypothermia anesthesia, thoracotomy, surgical amputation of heart ventricular apex, and suture and recovery of mice. The approach described could expand the application of the apical resection mouse model for cardiovascular research.

A step-by-step video protocol of apical resection is demonstrated in this study. Apical resection is a recently highlighted surgical approach in mammalian heart regeneration research. This study may promote the application of apical resection as a standard methodology in research into the mechanism underlying heart regeneration.

アピカル切除マウスモデルは、初期の哺乳類の心臓の再生を研究するために

Cardiovascular disease plagues the whole world due to intensive lifestyle changes. Heart regeneration holds great promise for repairing and restoring ...

Novel Approach for Simultaneous Recording of Renal Sympathetic Nerve Activity and Blood Pressure with Intravenous Infusion in Conscious, Unrestrained Mice.

Renal sympathetic nerves contribute significantly to both physiological and pathophysiological phenomena. Evaluating renal sympathetic nerve activity (RSNA) is of great interest in many areas of research such as chronic kidney disease, hypertension, heart failure, diabetes and obesity. Unequivocal assessment of the role of the sympathetic nervous system is thus imperative for proper interpretation of experimental results and understanding of disease processes. RSNA has been traditionally measured in anesthetized rodents, including mice. However, mice usually exhibit very low systemic blood pressure and hemodynamic instability for several hours during anesthesia and surgery. Meaningful interpretation of RSNA is confounded by this non-physiological state, given the intimate relationship between sympathetic nervous tone and cardiovascular status. To address this limitation of traditional approaches, we developed a new method for measuring RSNA in conscious, freely-moving mice. Mice were chronically instrumented with radio-telemeters for continuous monitoring of blood pressure as well as a jugular venous infusion catheter and custom-designed bipolar electrode for direct recording of RSNA. Following a 48-72 hour recovery period, survival rate was 100% and all mice behaved normally. At this time-point, RSNA was successfully recorded in 80% of mice, with viable signals acquired up to 4 and 5 days post-surgery in 70% and 50% of mice, respectively. Physiological blood pressures were recorded in all mice (116&plusmn;2 mmHg; n=10). Recorded RSNA increased with eating and grooming, as well-established in the literature. Furthermore, RSNA was validated by ganglionic blockade and modulation of blood pressure with pharmacological agents. Herein, an effective and manageable method for clear recording of RSNA in conscious, freely-moving mice is described.

Anesthetized mice exhibit non-physiological systemic blood pressure, which precludes meaningful assessment of autonomic tone given the intimate relationship between blood pressure and the autonomic nervous system. Thus, a novel method to simultaneously record renal sympathetic nerve activity and blood pressure with intravenous infusion in conscious mice is outlined.

腎交感神経活動と意識、持続静脈内投与による血圧の同時記録への新しいアプローチ気ままなマウス。

Renal sympathetic nerves contribute significantly to both physiological and pathophysiological phenomena. Evaluating renal sympathetic nerve activity ...

Shunt Surgery, Right Heart Catheterization, and Vascular Morphometry in a Rat Model for Flow-induced Pulmonary Arterial Hypertension

In this protocol, PAH is induced by combining a 60 mg/kg monocrotalin (MCT) injection with increased pulmonary blood flow through an aorto-caval shunt (MCT+Flow). The shunt is created by inserting an 18-G needle from the abdominal aorta into the adjacent caval vein. Increased pulmonary flow has been demonstrated as an essential trigger for a severe form of PAH with distinct phases of disease progression, characterized by early medial hypertrophy followed by neointimal lesions and the progressive occlusion of the small pulmonary vessels. To measure the right heart and pulmonary hemodynamics in this model, right heart catheterization is performed by inserting a rigid cannula containing a flexible ball-tip catheter via the right jugular vein into the right ventricle. The catheter is then advanced into the main and the more distal pulmonary arteries. The histopathology of the pulmonary vasculature is assessed qualitatively, by scoring the pre- and intra-acinar vessels on the degree of muscularization and the presence of a neointima, and quantitatively, by measuring the wall thickness, the wall-lumen ratios, and the occlusion score.

This protocol describes a surgical procedure to create a model for flow-induced pulmonary arterial hypertension (PAH) in rats and the procedures to analyze the principle hemodynamic and histological end-points in this model.

流れ誘導性の肺動脈性肺高血圧症のためのラットモデルにおけるシャント手術、右心カテーテル、および血管形態計測

In this protocol, PAH is induced by combining a 60 mg/kg monocrotalin (MCT) injection with increased pulmonary blood flow through an aorto-caval shunt ...

A Chronic Cardiac Ischemia Model in Swine Using an Ameroid Constrictor

Cardiovascular disease remains the number one cause of mortality in the United States. There are numerous approaches to treating these diseases, but regardless of the approach, an in vivo model is needed to test each treatment. The pig is one of the most used large animal models for cardiovascular disease. Its heart is very similar in anatomy and function to that of a human. The ameroid placement technique creates an ischemic area of the heart, which has many useful applications in studying myocardial infarction. This model has been used for surgical research, pharmaceutical studies, imaging techniques, and cell therapies.
There are several ways of inducing an ischemic area in the heart. Each has its advantages and disadvantages, but the placement of an ameroid constrictor remains the most widely used technique. The main advantages to using the ameroid are its prevalence in existing research, its availability in various sizes to accommodate the anatomy and size of the vessel to be constricted, the surgery is a relatively simple procedure, and the post-operative monitoring is minimal, since there are no external devices to maintain. This paper provides a detailed overview of the proper technique for the placement of the ameroid constrictor.

The purpose of this protocol is to demonstrate the placement of a delayed constricting device (an ameroid constrictor) around a coronary artery in a swine model. This device creates an ischemic area of the heart that is useful for studying new diagnostic imaging techniques and new methods of treatment.

アメロイド収縮を使用して豚の慢性心筋虚血モデル

Cardiovascular disease remains the number one cause of mortality in the United States. There are numerous approaches to treating these diseases, but ...

Routine Screening Method for Microparticles in Platelet Transfusions

Platelet inventory management based on screening microparticle content in platelet concentrates is a new quality improvement initiative for hospital blood banks. Cells fragment off microparticles (MP) when they are stressed. Blood and blood components may contain cellular fragments from a variety of cells, most notably from activated platelets. When performing their roles as innate immune cells and major players in coagulation and hemostasis, platelets change shape and generate microparticles. With dynamic light scattering (DLS)-based microparticle detection, it is possible to differentiate activated (high microparticle) from non-activated (low microparticle) platelets in transfusions, and optimize the use of this scarce blood product. Previous research suggests that providing non-activated platelets for prophylactic use in hematology-oncology patients could reduce their risk of becoming refractory and improve patient care. The goal of this screening method is to routinely differentiate activated from non-activated platelets. The method described here outlines the steps to be performed for routine platelet inventory management in a hospital blood bank: obtaining a sample from a platelet transfusion, loading the sample into the capillary for DLS measurement, performing the DLS test to identify microparticles, and using the reported microparticle content to identify activated platelets.

Platelet inventory management based on screening microparticle content in platelet concentrates is a new quality improvement initiative in hospital blood banks. The goal is to differentiate activated from non-activated platelets to optimize the use of platelets. Providing non-activated platelets to hematology-oncology patients might reduce their high risk to become refractory.

血小板輸血で微粒子のスクリーニング法のルーチン

Platelet inventory management based on screening microparticle content in platelet concentrates is a new quality improvement initiative for hospital blood ...

Absorbent Microbiopsy Sampling and RNA Extraction for Minimally Invasive, Simultaneous Blood and Skin Analysis

Conventional skin biopsy limits the clinical research that involves cosmetically sensitive areas or pediatric applications due to its invasiveness. Here, we describe the protocol for using&#160;an absorbent microneedle-based device, absorbent microbiopsy, for minimally invasive sampling of skin and blood mixture. Our goal is to help facilitate rapid progress in clinical research, the establishment of biomarkers for skin disease and reducing the risk for clinical research participants. In contrast to conventional skin biopsy techniques, the absorbent microbiopsy can be performed within seconds and does not require intensive training due to its simple design. In this report, we describe the use of absorbent microbiopsy, including loading and application, on a&#160;volunteer. Then, we show how to isolate RNA from the absorbed sample. Finally, we demonstrate the use of quantitative reverse transcription PCR (RT-qPCR) to quantify mRNA expression levels of both blood (CD3E and CD19) and skin (KRT14 and TYR). The methods that we describe utilize off the shelf kits and reagents. This protocol offers a minimally invasive approach for simultaneous sampling of skin and blood within the same absorbent microbiopsy matrix. We have found human ethics committees, clinicians and volunteers to be supportive of this approach to dermatological research.

In this article, we demonstrate how the absorbent microbiopsy technique is performed and how the sample can be used for RNA extraction for simple and simultaneous sampling of skin and blood in a minimally invasive manner.

吸水性 Microbiopsy サンプリングと低侵襲、同時血と肌分析のための RNA の抽出

Conventional skin biopsy limits the clinical research that involves cosmetically sensitive areas or pediatric applications due to its invasiveness. Here, ...

Simultaneous Electrocardiography Recording and Invasive Blood Pressure Measurement in Rats

For studies related to cardiovascular physiology or pathophysiology, blood pressure (BP) and electrocardiography are basic observational parameters. Research focusing on cardiovascular disease models, potential cardiovascular therapeutic targets or pharmaceutical agents requires assessment of systemic arterial pressure and heart rhythm changes. In situations where radio telemetry systems are not available or affordable, the technique of femoral artery cannulation is an alternative way to obtain intra-arterial pressure waveform recordings and systemic BP measurements. This technique is economical and can be performed with standard equipment in animal facilities. However, invasive arterial pressure recording requires cannulation of small arteries, which can be a challenging surgical skill. Here, we present step-by-step protocols for femoral artery cannulation procedures. Key procedures include the calibration of the data acquisition system, tissue dissection and femoral artery cannulation, and setup of the arterial cannulation system for pressure recording. Surface electrocardiography recording procedures are also included. We also present examples of BP recordings from normotensive and hypertensive rats. This protocol allows reliable direct recordings of systemic BP with simultaneous electrocardiography.

Here, we describe a setup for simultaneous recording of electrocardiography and intra-arterial blood pressure (BP) in experimental rats, which can be done with standard equipment in animal facilities and can be applied to physiological or pharmacological studies to investigate pathogenic or therapeutic mechanisms in cardiovascular medicine.

心電図の同時記録と侵襲的血圧ラットにおける測定

For studies related to cardiovascular physiology or pathophysiology, blood pressure (BP) and electrocardiography are basic observational parameters. ...

A Rabbit Venous Interposition Model Mimicking Revascularization Surgery using Vein Grafts to Assess Intimal Hyperplasia under Arterial Blood Pressure

Although vein grafts have been commonly used as autologous grafts in revascularization surgeries for ischemic diseases, the long-term patency remains poor because of the acceleration of intimal hyperplasia due to the exposure to arterial blood pressure. The present protocol is designed for the establishment of experimental venous intimal hyperplasia by interposing rabbit jugular veins to the ipsilateral carotid arteries. The protocol does not require surgical procedures deep in the body trunk and the extent of the incision is limited, which is less invasive for the animals, allowing long-term observation after implantation. This simple procedure enables researchers to investigate strategies to attenuate the progression of intimal hyperplasia of the implanted vein grafts. Using this protocol, we reported the effects transduction of microRNA-145 (miR-145), which is known to control the phenotype of vascular smooth muscle cells (VSMCs) from the proliferative to the contractile state, into harvested vein grafts. We confirmed the attenuation of intimal hyperplasia of vein grafts by transducing miR-145 before implantation surgery through the phenotype change of the VSMCs. Here we report a less invasive experimental platform to investigate the strategies that can be used to attenuate intimal hyperplasia of vein grafts in revascularization surgeries.

The present protocol aims to experimentally create venous intimal hyperplasia by subjecting veins to arterial blood pressure for developing strategies to attenuate venous intimal hyperplasia following revascularization surgery using vein grafts.

静脈移植を用いた血管形成術を模したウサギ静脈間位置モデルによる動脈血圧下の内膜過形成の評価

Although vein grafts have been commonly used as autologous grafts in revascularization surgeries for ischemic diseases, the long-term patency remains poor ...